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四角蛤蜊醇沉上清液对CCl4致小鼠急性肝损伤保护作用研究

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四角蛤蜊醇沉上清液对CCl4致小鼠急性肝损伤保护作用研究陆杰霖，柴尧，贾梦蛟，刘睿，王令充，王欣之，吴皓* （南京中医药大学江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室，江苏南京210023）摘要：目的：研究四角蛤蜊醇沉上清液对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用。

方法：四氯化碳造成急性肝损伤模型，，测定小鼠血清谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST），还原性谷胱甘肽（GSH）活性；测定肝匀浆中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活力，对肝组织进行病理学检查。

结果：醇沉上清液（MS）高、中、低剂量组具有明显的剂量依赖性降低CCl4致小鼠肝损伤血清ALT，AST，GSH（P<0.01），高、中剂量组降低肝均浆中MDA的含量（P<0.05），增强SOD的活性（P<0.01）。

通过病理学切片观察，M S各剂量组能显著改善肝组织的病理变化。

结论：MS对CCl4造成的小鼠急性肝损伤具有显著的保护作用。

关键词：四角蛤蜊醇沉上清液；CCl4；保肝作用ABSTRACT: Objective: We studied effects of ethanol subsiding method from Mactra veneriformis (MS) on carbon tetrachloride (CCl4)-induced liver injury in mice. Methods: Blood tissue samples were collection. Evaluations were made for lipid peroxidation, enzyme activities and biochemical parameters. Pathological histology was also performed.Results:MS pretreatment reduced the serum aspartate aminotransferase (ALT), alanine aminotransferase (AST), and reduced glutathione activities. By contrast, MS pretreatment reduced liver MDA content and increased liver tissue SOD. The CCl4-induced histopathological changes were also reduced by the MS pretreatment. Conclusion: Our results show that MS can be proposed to protect the liver damage induced by CCl4.Key words: ethanol subsiding method from Mactra veneriformis; CCl4; Hepatoproteaction四角蛤蜊(Mactra venerformis)为软体动物门(Mollusca)，隶属于瓣鳃纲(Lamellibranchia)异齿亚纲(Helterodonta)帘蛤目(Veneroida)蛤蜊科(Mactride)的动物，是一种广泛分布于我国南北各海区的较大型的经济贝类[1]。

宋代《嘉祐本草》中记载蛤蜊肉“ 润五脏，止消渴，开胃，解酒毒。

主老癖能为寒热者，及妇人血块，宜煮食之。

”现代研究表明，四角蛤蜊具有较好的抗氧化活性，其活性较强部位在四角蛤蜊的水提醇沉上清液中[2]。

本文以腹腔注射四氯化碳的方法建立小鼠急性肝损伤模型，评价四角蛤蜊水提醇沉上清液的保肝活性。

进一步揭示了海洋软体复杂多样的药理活性。

1 材料1.1 实验原料四角蛤蜊（江苏省海洋水产研究所提供，批号：20100706，经江苏省海洋水产研究所万夕和研究员鉴定为蛤蜊科动物四角蛤蜊（Mactra veneriformis Reeve）的新鲜软体部分）1.2 样品制备取新鲜四角蛤蜊软体15kg，洗净泥沙，沥干后绞碎，放入多功能提取罐，加3倍量水，每次煮沸40min，煎煮3次，出去滤渣，合并滤液，得到四角蛤蜊总提液。

将滤液浓缩至适量，14000rmp离心，取上清液，加入95%乙醇，使乙醇质量分数达到65%，搅匀，静置24h，抽滤，得沉淀和上清液。

沉淀去除加适量水复溶后加95%乙醇，使乙醇质量分数达75%，搅匀，静置24h，合并两次上清，加压回收乙醇，得褐色的上清液浸膏，即得四角蛤蜊醇沉上清液。

1.3 试剂与试药联苯双脂（北京协和药厂，产品批号：12060105）；四氯化碳（成都市科龙化工试剂厂，批号：20120220），时用使用花生油配制成0.1%的花生油溶液；氯化钠注射液（南京小营药业集团有限公司，批号：12012110606）；BCA蛋白测试盒、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）试剂盒均有南京建成生物工程研究所提供。

1.4 动物ICR小鼠，18~22g海安亭科学仪器厂制造）；酶标仪（美国雷杜RT-6000）；HH-4数显恒温水浴锅（国华电器有限公司）及常规仪器和器械。

2 方法2.1 动物分组和造模方法取60只小鼠，随机分成6组，每组10只，分别为正常对照组，四氯化碳损伤模型组，MS的高、中、低剂量组（1000，500 ,250mg/kg）和联苯双酯组（150mg/kg）。

正常对照组和四氯化碳模型组给予同量的生理盐水，给药组连续灌胃7d，于末次给药1h后，除正常组腹腔注射花生油20mL·kg外，其余各组均腹腔注射0.1%CCl4花生油溶液20mL·kg。

染毒16h后，所有小鼠采用眼眶放学法取血，分离血清，测定血清中ALT及AST的活性。

取血后每只小鼠立即剖腹，取一小块肝组织，用10%左右的福尔马林溶液固定，进行石蜡包埋切片。

同时另取相同部位的一块肝组织用生理盐水制备成10%的肝匀浆，硫代巴比妥酸法测定每克肝组织中MDA含量，黄嘌呤氧化酶法测定SOD活力。

2.2 生化指标检测赖氏法测定血清ALT，AST活性，硫代巴比妥酸法测定肝匀浆中MDA 含量，采用二喹啉甲酸(Bicinchoninic acid, BCA)法测定肝匀浆液中的蛋白含量，黄嘌呤氧化酶法测定SOD活力。

2.3 病理学检查用10%左右的福尔马林溶液固定肝组织，常规石蜡包埋切片（片厚4μm），HE染色，光学显微镜下观察肝组织病理学变化，检查下列指标：（1）有无肝细胞脂变、水肿；（2）有无肝细胞坏死；（3）肝小叶内有无炎细胞浸润；（4）门管区有无炎症或纤维组织增生。

2.4 统计学分析各项数据采取±s表示，组间比较采用t检验，所有数据的统计分析均用SPSS16.0软件包完成。

3 结果3.1 MS对急性肝损伤小鼠血清生化指标的影响模型组血清中ALT，AST的含量较正常对照组明显升高（P<0.01），见表1，说明本次实验模型造模成功。

MS能剂量依赖性显著降低小鼠血清ALT，AST水平，其保肝活性与阳性对照药联苯双酯相当。

其中，MS的高、中、低剂量组与联苯双脂组血清ALT，AST与模型组比较具有显著性差异（P<0.01）。

，雄性，清洁级，由南京医科大学实验动物中心提供，动物生成许可证SCXK（苏）2008-00041.5 仪器电子天平（上海光正医疗仪器有限公司YP6002）；台式高速冷冻离心机（sigma 3-16PK）；高速分散器（内切式匀浆机，宁波新芝生物科技股份有限公司XHF-P）；80-2B 型台式离心机（上表1 MS对急性肝损伤小鼠血清ALT和AST 的影响（±s，n=8）Table 1 Effects of MS on ALT,AST by liver damaged （±s，n=8）组别剂量/mg·kg-1ALT/U·L-1AST/U·L-1GSH/μmol·gprot-1正常对照－34.87±10.38**28.76±5.84**67.83±22.81**模型组－151.72±20.35 59.10±4.44 98.48±18.36 联苯双脂150 51.61±23.50**27.60±3.96**67.17±8.41** MS 1000 85.36±29.97**32.91±4.07**69.35±11.25** 500 71.54±26.58**28.58±4,47**64.78±14.81**250 54.79±22.67**27.10±3.52**61.96±11.08**注：与模型组相比，*P<0.05，**P<0.01（表2,3同）3.2 MS对急性肝损伤小鼠肝均浆MDA含量、SOD活性和肝脏指数的影响CCl4肝损伤模型组小鼠肝脏MDA活性显著升高（P<0.01），SOD活性显著降低（P<0.01），见表2，说明本次实验的小鼠急性肝损伤模型造模成功。

而MS对这些变化有较强的抑制作用。

其中，MS的高、中剂量组与联苯双脂组肝均浆中的MDA含量及SOD活性与模型组比较具有显著性差异（P<0.05）。

表2 MS对急性肝损伤小鼠肝均浆MDA，SOD 的影响（±s，n=8）Table2 Effects of MS on MDA,SOD and liver index by liver damaged（±s，n=8）组别剂量/mg·kg-1MDA/nmol·mg prot-1SOD/U·mg prot-1正常对照－ 2.79±0.58**29.67±2.50**模型组－ 4.17±1.16 26.24±2.61联苯双脂150 2.91±0.60*29.91±2.58*MS 1000 3.90±1.05 41.72±2.87**500 2.83±0.59*44.37±3.40**250 2.69±0.60*52.00±3.70**3.3 MS对急性肝损伤小鼠肝组织病理学的影响病理切片结果表明，正常对照组小鼠肝脏肝小叶略呈六边形，结构清晰，肝细胞无变形、坏死，门管区无炎症或纤维组织增生，小叶间动脉、小叶间静脉和小叶间胆管无病变。

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白花败酱草醇提物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用

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白花败酱草醇提物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用黄素华;陈彤;林芳;洪雅军;洪燕女;邱龙新【摘要】[目的]研究白花败酱草醇提物对四氯化碳(CCl4)诱导小鼠急性肝损伤的保护作用,为白花败酱草醇提物的药用及作为保健野菜的开发利用提供参考.[方法]以40只洁净级昆明小鼠为研究对象,设空白对照组、模型组、白花败酱草醇提物低剂量组、中剂量组、高剂量组5个处理,用CCl4腹腔注射诱导建立小鼠急性肝损伤模型,采用苏木精-伊红(HE)染色法对肝脏组织进行病理检测;采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色检测小鼠肝细胞凋亡情况;采用蛋白质免疫印迹(Western blot)检测小鼠肝组织细胞凋亡相关蛋白的表达水平.[结果]白花败酱草醇提物能显著改善肝组织病变情况,显著降低小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性及肝匀浆中丙二醛(MDA)含量和乳酸脱氢酶(LDH)活性,显著提高小鼠肝匀浆中超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、总抗氧化能力(T-AOC)和谷胱甘肽(GSH)含量.TUNEL染色结果显示,白花败酱草醇提物能显著抑制CCl4诱导的肝细胞凋亡.与模型组相比,白花败酱草醇提物使CCl4刺激的小鼠肝组织Bcl-2蛋白表达显著升高,Bax蛋白表达显著降低,Bcl-2/Bax升高.[结论]白花败酱草醇提物通过抗氧化及抑制肝细胞凋亡而改善CCl4诱导的小鼠急性肝损伤.【期刊名称】《西北农林科技大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2019(047)007【总页数】8页(P47-53,61)【关键词】白花败酱;醇提物;急性肝损伤;肝细胞凋亡;小鼠【作者】黄素华;陈彤;林芳;洪雅军;洪燕女;邱龙新【作者单位】龙岩学院生命科学学院,福建龙岩364000;龙岩学院生命科学学院,福建龙岩364000;龙岩学院生命科学学院,福建龙岩364000;龙岩学院生命科学学院,福建龙岩364000;龙岩学院生命科学学院,福建龙岩364000;龙岩学院生命科学学院,福建龙岩364000【正文语种】中文【中图分类】Q786;S567.9肝损伤是临床上常见的危害人类健康的疾病。

牡蛎汤对四氯化碳所致实验性肝损伤的影响

牡蛎汤对四氯化碳所致实验性肝损伤的影响

及科研工作。 收稿 日 ：０６ １ ４ 期 ２ｏ —１ —１
细胞坏死
无 灶 性 弥漫 无 点状
Ｏ ３
１ ｌ ２
灶状
０
４ ４
Ｏ
２ பைடு நூலகம்
１ Ｏ
１ ２
Ｏ
５ ４
（ ４２ｏ ４ ０３） ０
作者简介： 徐强 （ ６ 一）男 ， １ ６ ， 副教授 ， ９ 主要从事＜ 解剖）＜ 、组胚） 的教学
参 考文献 ：
［］ 中华人 民共 和国卫 生部医政 司 ． 国临床检 验操作规 程 （ １ 全 第二 版） Ｍ ． ： Ｅ ］南京 东南大学 出版杜 。 ９ ． ５ １ ７１ ． ９ ５ ［］ 张均田 ． ２ 现代药理实验方法学 Ｉ ］北京 ： ｓ ． 北京医科大学中国协和 医科大学联合出版社 ， ９ ． ９ ． １ ８１ ８ ９ ３
表 ２ 牡蛎汤对 Ｃ 所 致急性肝损伤小鼠肝脏病理组织学观察
组别 正常对照组 模型对 照组 阳性对 照组 低剂量 中剂量 ｎ 炎性 浸润
１ Ｏ ５
８ ９ ８
（０ ） 连续给药 １ ， 次给药后除空 白对照组动 １ｇ～， 周 末
基金项 目： 黑龙江省中医管理局课题 ＊
胞呈不同程度的细胞坏死 ， 细胞浸润 。牡蛎汤给药 炎
２１ 牡蛎汤对 Ｃ １所致小 鼠急性肝损伤的影响［ Ｊ ． Ｃ 卜４
取健康小鼠 ６ ０只， 雄性， 体重 １ — ２ ， ８ ２ｇ 随机分 为
６ ， 组 分别为空白对照组 、 模型对照组、 阳性对照组、 牡 蛎汤低 、 高剂量组。空 白对照组和模型对照组动物 中、
维普资讯
中医药信息 ２０年第 ２卷第 ２ ０７ ４ 期
・５ ７・
葛根提取物对CCl4致小鼠急性肝损伤的保护作用

葛根提取物对CCl4致小鼠急性肝损伤的保护作用

葛根提取物对CCl4致小鼠急性肝损伤的保护作用作者：陈苑红陈国权来源：《中国民族民间医药·下半月》2021年第09期【摘要】目的：探讨葛根提取物对四氯化碳（CCl4）致小鼠急性肝损伤的保护作用。

方法：将60只昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组，葛根提取物高、中、低剂量组（400、200、100mg/kg），联苯双酯组（100mg/kg）。

连续灌胃给药14 d后腹腔注射0.2% CCl4溶液诱发急性肝损伤，24h后处死小鼠，检测血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆汁酸（TBA）、总胆红素（TBIL）、碱性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨酰转移酶（γ-GT）含量和肝组织中总超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px），总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、转化生长因子-β（TGF-β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量。

结果：与模型组比较，各给药组小鼠ALT、AST、TBA、TBIL、ALP、γ-GT、MDA、IL-1β、IL-6、TGF-β、TNF-α的含量降低（P<0.05或0.01），SOD、T-AOC、GSH-Px含量升高（P<0.05或0.01）。

结论：葛根提取物对CCl4致小鼠急性肝损伤具有较好的保护作用，其机制可能与增强抗氧化能力及抗炎作用相关。

【关键词】葛根提取物;急性肝损伤;抗氧化;抗炎【中图分类号】R285.5【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2021）18-0008-04Protective Effect of Pueraria Lobata Extract on CCl4-induced Liver Eamage in MiceCHEN YuanhongCHEN Guoquan*The Third Peoples Hospital of Shunde（Beijiao hospital）， Foshan 528000，ChinaAbstract：Objective To explore the effect of Pueraria lobata extractt on CCl4-induced liver damage inmice.Methods 60 mice were randomly divided into normal control group，model group，Pueraria lobata extract high，medium and low dose groups （400，200，100 mg/kg），and bifendate group （100 mg/kg）. After continuous intragastric administration for 14 days. Acute liver injury model was established by intraperitoneal injection of 0.2% CCl4 olive oil solution. After 24 hours of modeling，the contents of alanine aminotransferase （ALT），aspartate aminotransferase （AST），total bile acid （TBA），total bilirubin （TBIL），alkaline phosphatase （ALP），gamma glutamyltransferase （γ- GT） in serum and total superoxide dismutase （SOD），malondialdehyde （MDA），total antioxidant capacity （T-AOC） glutathione peroxidase （GSH-Px），interleukin-1β （IL-1β），interleukin-6 （IL-6），transforming growth factor-β （TGF-β）and tumor necrosis factor-α （TNF-α） in liver tissue were detected.Results Compared with the group，pueraria extract significantly reduced ALT、AST、TBA、TBIL、ALP、γ-GT、MDA、IL-1β、IL-6、TGF-βand TNF-α levels in mice with acute liver injury（P<0.05 or 0.01），significantly increased SOD，T-AOC，GSH-Px levels（P<0.05 or 0.01）.Conclusion Pueraria lobata extract has a significant protective effect against acute liver injury induced by CCl4 in mice，the mechanism may be related to the enhancement of antioxidant capacity and anti-inflammatory effect.Keywords：Pueraria lobata Extract; Acute Live Injury; Anti-oxidation; Anti-inflammatory急性肝损伤是临床上常见的肝脏疾病，许多因素如化学物质、感染、缺血、药物及酒精等均会造成急性肝脏损伤，引发肝功能的不全[1]。

疏肝健脾方对化学性肝损伤小鼠的保护作用

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疏肝健脾方对化学性肝损伤小鼠的保护作用陈金锋;高家荣;姜辉【期刊名称】《航空航天医学杂志》【年(卷),期】2014(000)003【摘要】目的：研究疏肝健脾方（ SGJP）对CCl4诱发的化学肝损伤小鼠的保护作用。

方法将小鼠随机分为6组：正常对照组、模型组、疏肝健脾方低剂量组、疏肝健脾方中剂量组、疏肝健脾方高剂量组、阳性药（联苯双酯， BP）组，给药组灌胃给药，每天1次，连续灌胃10 d，正常组和模型组用等量的溶媒，于末次给药8 h后，除正常组外其余每组腹腔注射0．1％CCl4橄榄油溶液（0．1mL/10 g）复制小鼠化学性肝损伤模型，检测小鼠血清谷氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、肝脏指数、肝组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量，HE染色观察肝组织形态学变化。

结果疏肝健脾方中、高剂量组能显著抑制小鼠血清ALT、AST活性的升高（ P＜0．01），抑制肝组织MDA含量升高（ P＜0．05或P＜0．01），提高肝组织SOD、GSH 活性（ P＜0．05或P＜0．01），降低肝指数（ P＜0．05或P＜0．01），减轻肝脏的病理损伤。

结论疏肝健脾方对小鼠化学性肝损伤具有一定的保护作用。

%Objetc ive To study the protective effect of shuganjianpifang (SGJP) on carbon tetrachloride -induced chemical liver injury.Methods The mice are randomly divided into six groups: The Control, The model, The SGJP (7.8,15.6,31.2 g/kg),The BP.The SGJP were given by avage,1 times a day for 10 days.After being given drug for 8 hours, the Model were induced by injection of carbon 0.1%tetrachloride-olive oil solution (0.1 mL/10 g) byintra-peritoneal injection.After being given drug for 10 days, the ALT and the AST were assayed by spectrophotometry .The SOD, MDA,GSH were examined by Colorimetric methods .The liver index were also examined .The histopathologic chan-ges of the hepatic tissues were observed by the HE stained method .Results The liver index, the ALT level, the AST level and the MDA level were decreased by SGJP (15.6,31.2g/kg).The SOD level and the GSH level were increased by SGJP.Moreover, the degree of the liver injury were also inhibited by SGJP .Conclu is ons SGJP is a significantly pro-tective drug in chemical liver injury mice .【总页数】3页(P273-275)【作者】陈金锋;高家荣;姜辉【作者单位】安徽中医药大学药学院，合肥 230038;安徽中医药大学第一附属医院/国家中医药管理局中药制剂三级实验室，合肥 230031;安徽中医药大学第一附属医院/国家中医药管理局中药制剂三级实验室，合肥 230031【正文语种】中文【中图分类】R-322【相关文献】1.六堡茶总黄酮对小鼠化学性肝损伤的保护作用 [J], 钱波;周燕园;王程强;任源;顾廉洁;宋家乐2.疏肝健脾方对化学性肝损伤小鼠的保护作用 [J], 陈金锋;高家荣;姜辉;3.杠板归乙醇提取物对化学性肝损伤小鼠的保护作用 [J], 何国鑫;邓青芳;陈华国;赵丹妮;周欣4.赶黄草总黄酮对四氯化碳所致小鼠急性化学性肝损伤的保护作用 [J], 付满玲;九红;袁叶飞5.保肝汤对小鼠四氯化碳致慢性化学性肝损伤的保护作用 [J], 李谚语;刘丽;范颖;李军;张英利;卢健因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。