6种野生花卉植物种子硬实破除研究及引种初探

浅析秦岭野生植物种质资源现状及利用方向5 宝鸡市风景名胜区管理处7210006 宝鸡市马头滩林业局 721000摘要：通过调查分析我市秦岭野生植物种植资源现状和利用现状，提出利用野生植物种植资源的技术路线和利用方向，真正实现“绿水青山就是金山银山”的目标。

关键词：野生种质资源现状利用方向1.我市秦岭野生植物种质资源现状我市地处关中西部，秦岭山脉横贯我市。

秦岭主峰太白山素有“世界植物园”之称，这里不仅是华北、华中、横断山脉等三个植物区系交汇地，且兼有东北、华东等植物成份。

从而造就了我市极为丰富的植物种质资源。

据调查，全区共有各类林业种质资源2200多种（未包括蕨类、真菌类、微生物等种质资源）。

其中乔木350多种，灌木460多种，草本1200多种。

有重要野生纤维植物28科79种（包括亚种、变种、变型），野生糖类及淀粉植物29科119种（包括亚种、变种、变型），野生油脂、芳香油植物61科225种（包括亚种，变种、变型），野生鞣料植物33科90种（包括亚种、变种、变型），野生观赏植物66科423种（包括亚种、变种、变型），用于药物的种子植物76科474种；有国家重点保护植物17种，陕西省重点保护植物68种；在植物志中以宝鸡地名命名的植物有40多种。

2.野生种质资源利用的现状我国农业文明已历经数千年,而3万多种高等植物中，被人类归化的谷物、蔬菜、瓜果等栽培种也只是寥寥可数。

不论是选择、杂交等传统育种还是转基团、基因重组的现代遗传工程，都离不开基因资源即种质资源。

作为用材树种的油松、华山松、侧柏、云杉是我们林业工作者早期驯化野生植物成为栽培种的范例，原属野生的白皮松、七叶树、栾树、火棘等观赏树种在园林上已大量应用。

利用秦岭北坡分布的野生柳树培育的柳树新品种也广泛应用。

如水曲柳育苗、刺楸育苗、红桦育苗、漆树育苗、椴树育苗、栎类育苗及直播已经用于林业生产。

四照花、膀胱果、小花香槐、流苏树、白鹃梅、朱砂玉兰等一批秦岭野生植物的育苗试验已获得成功。

破除植物种子休眠方法研究进展摘要：在植物界，种子休眠是植物适应环境的一种常见现象，对延续和保护物种具有积极的作用，但是，在生产和研究中往往需要破除种子睡眠。

要解除种子休眠，当前采用的主要方法有对种子进行机械、温度、射线、声波、电磁场以及干燥后熟和层积处理的物理方法和类似化学药物和激素处理的化学方法以及一些生物方法。

还有很多植物种子休眠的打破需要综合运用这些方法。

关键词：种子；休眠；破除方法种子休眠是指在适合种子发芽的条件下，有生命力的种子不能发芽的现象。

一般情况下，绝大多数植物种子都具有强弱不同的休眠特征，某些热带植物、柳属和许多栽培植物的种子除外。

在过去，有很多文章围绕破除木草、花卉和栽培植物的种子休眠来展开研究，但很少进行综合全面的探索和说明，而在近几年的文献资料中有很多文章提出了破除种子休眠的方法，所以对种子休眠的方法进行系统的归纳具有重要的现实意义，为更好的进行生产和研究打下基础。

1 种子休眠的类型我们可以将种子休眠的类型分为两大类。

第一类是由内因引起的，也就是胚没有发育完全，生理上还不成熟，要么缺乏必要的生长激素要么有抑制种子发芽的物质存在，降低了胚的存活率，使得胚本身有生理障碍，银杏、山楂、梨、苹果、小麦等植物的种子休眠都由这些原因造成的，称为胚休眠，它可以分为形态胚休眠和生理胚休眠。

另一类休眠是由外因引起的，它是指由于种壳的物理阻碍、缺乏通透性及种壳中存在抑制发芽的物质等引起的休眠，这些由于受胚外面的各种组织的约束而产生的休眠称为种壳休眠，比如，椴树、苜蓿和三叶草种子。

而在实际情况中，有些植物的种子同时具有两种休眠类型。

植物种子的休眠是植物适应外界环境、保持自身生殖和发育稳定性的生物特性，它的多样性也体现了生物多样性。

2 种子休眠的破除方法2.1 有机化学药物处理用某些有机溶剂处理种子可以破除种子休眠。

兰引三号结缕草种子用浓度为0.25 %硫脲试剂浸泡24小时后，其发芽率比对照组明显增高。

第４７卷　第５期２０２３年９月南京林业大学学报（自然科学版）ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｎｊｉｎｇＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓＥｄｉｔｉｏｎ）Ｖｏｌ．４７，Ｎｏ．５Ｓｅｐｔ．，２０２３　收稿日期Ｒｅｃｅｉｖｅｄ：２０２２ ０４ ０４ 修回日期Ａｃｃｅｐｔｅｄ：２０２２ ０６ ０７　基金项目：２０１９年厦门市社会科技指导性项目（３５０２Ｚ２０１９９００８）；２０２１年厦门市社会发展领域指导性项目（３５０２Ｚ２０２１４ＺＤ４００１）。

　第一作者：周群（５９２８５４９７２６＠１６３．ｃｏｍ），高级农艺师。

引文格式：周群．三角梅新品种‘中闽２号’［Ｊ］．南京林业大学学报（自然科学版），２０２３，４７（５）：２６８－２７０．ＺＨＯＵＱ．ＢｒｅｅｄｉｎｇｏｆａｎｅｗｃｕｌｔｉｖａｒｏｆＢｏｕｇａｉｎｖｉｌｌｅａ‘Ｚｈｏｎｇｍｉｎ２’［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｎｊｉｎｇＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓＥｄｉｔｉｏｎ），２０２３，４７（５）：２６８－２７０．ＤＯＩ：１０．１２３０２／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－２００６．２０２２０４００３．三角梅新品种‘中闽２号’周　群（厦门市园林植物园，福建　厦门　３６１００３）摘要：【目的】为丰富我国三角梅（Ｂｏｕｇａｉｎｖｉｌｌｅａｓｐｐ．）种质资源，促进园林应用品种多样化，选育三角梅新品种。

【方法】在２０１６年，采收三角梅‘中闽１号’（Ｂｏｕｇａｉｎｖｉｌｌｅａ‘Ｚｈｏｎｇｍｉｎ１’）自然授粉的种子进行播种，选育出具有特异性的实生苗，进行扦插培育。

【结果】通过对品种性状进行调查后，选育出花色呈淡紫色的新品种，并在表型性状和分子水平均能与其近似品种区分开。

该新品种在福建种植时自然花期为９月至翌年４月，花序主要着生于枝顶端和中部，叶为阔卵形，叶基呈宽模型。

经４年的连续观察，性状稳定，将其命名为‘中闽２号’（Ｂｏｕｇａ ｉｎｖｉｌｌｅａ‘Ｚｈｏｎｇｍｉｎ２’）。

第４９卷第４期２０２２年１２月福建林业科技ＪｏｕｒｏｆＦｕｊｉａｎＦｏｒｅｓｔｒｙＳｃｉａｎｄＴｅｃｈＶｏｌ ４９　Ｎｏ ４Ｄｅｃ ，２０２２ｄｏｉ：１０．１３４２８／ｊ．ｃｎｋｉ．ｆｊｌｋ．２０２２．０４．０２２云南省重点保护野生植物濒危等级和资源多样性吴富勤１，谢　靖２，郑静楠１，蔡文婧１，郑进?１，王　勇１（１ 云南省林业调查规划院，云南昆明６５００５１；２ 沾益海峰省级自然保护区管护局，云南曲靖６５５３３１）摘要：为更好地掌握云南省重点保护野生植物濒危等级与资源特征，以云南省第二次重点保护野生植物资源调查的１５０种目的物种作为研究对象，通过查阅文献资料进行统计分析。

结果表明：在云南省重点保护野生植物１５０种中，被《国家重点保护野生植物名录》收录的有１２９种、被《中国生物多样性红色名录：高等植物卷》收录的有１０４种、被ＩＵＣＮ物种红色名录收录的有１１２种、被ＣＩＴＥＳ收录的有３３种、被《云南省生物物种红色名录》收录的有１１５种，有中国特有种４６种，云南特有种２７种；依据植物原料与经济用途划分为７类，包含观赏植物８６种、药用植物４９种、材用植物３９、芳香植物１０种、食用植物２３种、油脂植物７种、鞣料植物４种。

并在此基础上提出植物资源保护与利用建议。

关键词：野生植物；濒危等级；资源特征；云南省中图分类号：Ｓ７５７ ５；Ｑ９４９ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００２－７３５１（２０２２）０４－０１２０－０５ＥｎｄａｎｇｅｒｅｄＧｒａｄｅａｎｄＲｅｓｏｕｒｃｅＤｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＫｅｙＰｒｏｔｅｃｔｅｄＷｉｌｄＰｌａｎｔｓｉｎＹｕｎｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅＷＵＦｕｑｉｎ１，ＸＩＥＪｉｎｇ２，ＺＨＥＮＧＪｉｎｇｎａｎ１，ＣＡＩＷｅｎｊｉｎｇ１，ＺＨＥＮＧＪｉｎｘｕａｎ１，ＷＡＮＧＹｏｎｇ１（１ ＹｕｎｎａｎＦｏｒｅｓｔＳｕｒｖｅｙａｎｄＰｌａｎｎｉｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｋｕｎｍｉｎｇ６５００５１，Ｙｕｎｎａｎ，Ｃｈｉｎａ；２ ＺｈａｎｙｉＨａｉｆｅｎｇＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＮａｔｕｒｅＲｅｓｅｒｖｅＡｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎａｎｄＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎＢｕｒｅａｕ，Ｑｕｊｉｎｇ６５５３３１，Ｙｕｎｎａｎ，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＩｎｏｒｄｅｒｔｏｂｅｔｔｅｒｇｒａｓｐｔｈｅｅｎｄａｎｇｅｒｅｄｇｒａｄｅａｎｄｒｅｓｏｕｒｃｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｔｈｅｋｅｙｐｒｏｔｅｃｔｅｄｗｉｌｄｐｌａｎｔｓｉｎＹｕｎｎａｎＰｒｏｖ ｉｎｃｅ，１５０ｔａｒｇｅｔｓｐｅｃｉｅｓｆｒｏｍｔｈｅｓｅｃｏｎｄｓｕｒｖｅｙｏｆｋｅｙｐｒｏｔｅｃｔｅｄｗｉｌｄｐｌａｎｔｒｅｓｏｕｒｃｅｓｉｎＹｕｎｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅｗｅｒｅｕｓｅｄａｓｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｏｂｊｅｃｔｓ，ａｎｄｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌａｎａｌｙｓｉｓｗａｓｃａｒｒｉｅｄｏｕｔｂｙｃｏｎｓｕｌｔｉｎｇｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔ：ａｍｏｎｇｔｈｅｍ，１２９ｓｐｅｃｉｅｓａｒｅｌｉｓｔｅｄｉｎｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＫｅｙＰｒｏｔｅｃｔｅｄＷｉｌｄＰｌａｎｔｓＬｉｓｔ，１０４ｓｐｅｃｉｅｓｉｎｔｈｅＲｅｄＬｉｓｔｏｆＢｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙｉｎＣｈｉｎａ ＴｈｅＶｏｌｕｍｅＯｆＨｉｇｈｅｒＰｌａｎｔｓ，１１２ｓｐｅｃｉｅｓｉｎｔｈｅＩＵＣＮＲｅｄＬｉｓｔｏｆＳｐｅｃｉｅｓ，３３ｓｐｅｃｉｅｓｉｎｔｈｅＣＩＴＥＳ，１１５ｓｐｅｃｉｅｓｉｎｔｈｅＲｅｄＬｉｓｔｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＳｐｅｃｉｅｓｉｎＹｕｎｎａｎＰｒｏｖ ｉｎｃｅ，４６ｓｐｅｃｉｅｓｅｎｄｅｍｉｃｔｏＣｈｉｎａａｎｄ２７ｓｐｅｃｉｅｓｅｎｄｅｍｉｃｔｏＹｕｎｎａｎ；ａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｐｌａｎｔｒａｗｍａｔｅｒｉａｌｓａｎｄｅｃｏｎｏｍｉｃｕｓｅ，ｉｔｉｓｄｉｖｉｄ ｅｄｉｎｔｏ７ｃａｔｅｇｏｒｙ，ｉｎｃｌｕｄｅｓ８６ｏｒｎａｍｅｎｔａｌｐｌａｎｔｓ，４９ｍｅｄｉｃｉｎａｌｐｌａｎｔｓ，３９ｔｉｍｂｅｒｐｌａｎｔ，１０ａｒｏｍａｔｉｃｐｌａｎｔｓ，２３ｅｄｉｂｌｅｐｌａｎｔｓ，７ｏｉｌ ｂｅａｒｉｎｇｐｌａｎｔｓ，４ｔａｎｎｉｃｐｌａｎｔｓ Ｂａｓｅｄｏｎｔｈｅａｂｏｖｅａｎａｌｙｓｉｓ，ｓｕｇｇｅｓｔｉｏｎｓｏｎｔｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎａｎｄｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎａｒｅｐｕｔｆｏｒｗａｒｄｏｆｔｈｅｋｅｙｐｒｏｔｅｃｔｅｄｗｉｌｄｐｌａｎｔｓｉｎＹｕｎｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅＫｅｙｗｏｒｄｓ：ｗｉｌｄｐｌａｎｔｓ；ｅｎｄａｎｇｅｒｅｄｇｒａｄｅ；ｒｅｓｏｕｒｃｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ；ＹｕｎｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ 重点保护野生植物作为区域生物多样性的重要组成部分和主要保护对象，在经济、科研、旅游观光与生态功能方面有着极其重要的价值［１－２］。

金丝楠木引种繁育与林下种植技术罗贤华（湖北省钟祥市大口林场，湖北钟祥431900）摘要:金丝楠木是我国特有的珍贵树种,具有很高的经济价值和医用价值,但因掠夺式采伐等原因现已濒危。

为解决这一问题,以湖北省钟祥市大口林场成功实现金丝楠木幼苗的林下大面积人工培育为例,对金丝楠木的引种繁育和林下种植技术进行了研究,总结了金丝楠木引种繁育和林下种植技术的关键要领。

以期为进行此类研究的相关人员提供参考。

关键词:金丝楠木;引种繁育;林下种植技术中图分类号:S792.24文献标识码:A文章编号:1005-7897(2024)06-0004-030引言金丝楠木为樟科桢楠属植物，1984年被列入《珍稀濒危保护植物目录》和《重点保护植物目录》，是国家二级保护植物，常见的树种有闽楠、紫楠、桢楠等。

其材质坚硬细密，加工后的家具不易变形，耐腐蚀、防虫，若是生长年久的大径材质，木材纹理细密瑰丽，会在光照下发出丝丝金光，极具观赏价值；同时，金丝楠木茎、叶等可作为一味中药材，能够起到散寒化浊、利水消肿的功效，具有一定的医用价值[1-4]。

但现如今野生金丝楠木受掠夺式采伐和原生地生态环境破坏而逐渐濒危，所以对实现可持续发展，保护我国的生物多样性而言，金丝楠木人工培育技术的研究具有重要的现实意义。

下文将以湖北省钟祥市大口林场为例，具体介绍金丝楠木人工引种、繁育与林下种植技术。

1金丝楠木的引种繁育1.1金丝楠木的形态特征、产地生境和生长习性金丝楠木是高大常绿乔木，其高度可达30多m，整树干直高大，小枝一般较细；椭圆形叶片，长7~ 11cm、宽2.5~4cm，先端处渐尖；聚伞状圆锥形花序，每伞形花序多伴有3~6朵花，花长3~4mm，花梗与花等长，花期4—5月；果实呈椭圆形，长1.1~1.4cm，直径6~ 7mm，果期9—10月。

金丝楠木喜爱阴凉、潮湿及降雨充沛的生态环境，却又耐热抗寒，一般多生长于山脚山洼或山谷河边。

我国四川、贵州、云南与四川相接壤的区域、湖北等雨水多、气候湿润的南方地区天然散生分布。

最受欢迎的花卉：马蔺栽培生长习性和药用价值最受欢迎的花卉系列一二年生草花导读:马蔺,栽培,草本,草花,一二年生马蔺栽培生长习性和药用价值马蔺，亦称马莲(花、草)、马兰(花)、紫蓝草、兰花草、箭秆风、山必博、蠡实、旱蒲，是鸢尾科鸢尾属多年生草本宿根植物。

在中国广泛分布于东北、华北、西北等地。

从生态学角度看，以草原区分布较为普遍。

马蔺抗逆性强，尤其耐盐碱，是盐化草甸的建群种。

由于马蔺具有独特的生态生物学特性和利用价值，近年来逐渐被用作水保护坡、园林绿化观赏地被建设的优良材料。

多年生草本植物，根状茎粗壮，木质，有多数须根。

叶基生、宽线形，长可达50厘米，宽4-10毫米，呈灰绿色、花茎高约10厘米，具2－4朵花，4－6月开花，花浅蓝色、蓝色或蓝紫色，花期50天左右。

蒴果长椭圆状柱形，长4－6厘米，种子9月成熟。

中文名：马蔺学名：cteaPallVarChinensis(Fish)Koidz英文名：Japaneseiris别名：马莲、马兰、马兰花、旱蒲、蠡（音:里）实、荔草、剧草、豕首、三坚、马韭马蔺是鸢尾科多年生宿根草本植物，丛密；根茎粗壮，须根细长而坚韧；叶基生，狭线形，长50-60厘米，宽4-6毫米，无明显中脉；基部具纤维状老叶鞘，叶下部带紫色，质地较硬；花莛光滑，与叶近等高；苞片3-5枚，革质，内含花2-4朵；花浅蓝色至蓝紫色，直径约5-6厘米；垂瓣倒披针形，长4.5-6.5厘米，宽0.8-1.2厘米；旗瓣狭倒披针形，长4.2-4.5厘米，宽5-7厘米；蒴果长椭圆状柱形，有6条明显的肋，顶端有短喙，沈阳地区花期5月，果期9月，各地随气候不同花期有变化。

原产中国，中亚细亚、朝鲜亦有野生分布。

耐盐碱，耐践踏，根系发达，生长于荒地路旁、山坡草丛、盐碱草甸中，可用于水土保持，盐碱地、工业废弃地改造，园林绿化的地被、镶边或孤植等。

全株入药，有清热、止血、解毒的作用。

叶可作梆扎及草编材料。

国内还有宽叶马蔺、黄花马蔺、红花马蔺及白花马蔺等野生分布.水保护坡观赏优良地被植物----马蔺2003年11月5日马蔺，亦称马莲(花、草)、马兰(花)、紫蓝草、兰花草、箭秆风、山必博、蠡实、旱蒲，是鸢尾科鸢尾属多年生草本宿根植物。

濒危植物花榈木野生种质资源调查与分析吴炜圣（福建省林业科学研究院，福建福州350012）摘要：对闽西、闽北地区野生花榈木种质资源情况进行调查分析，结果表明：闽西北区域共有野生花榈木大树49株、小树6株、小苗180多株，野生花榈木资源十分稀少，大部分生长于林缘地带，多为零星分布，生长速度缓慢，存在花榈木大树间隔2~3a 才开花结果一次的情况，46.9%的花榈木处于亚健康或不健康状态，因此加大对花榈木的保护和人工繁殖非常有必要。

关键词：花榈木；资源调查；分布状况；保护中图分类号：S792.99文献标识：A文章编号：1003-4382（2023）06-0023-04WU Weisheng(Fujian Academy of Forestry Sciences,Fuzhou350012,Fujian,China)This paper investigated and analyzed the wild resources in western and northern Fujian to provide a reference for pro-tecting and developing resources.The results showed thatin northwest Fujian Province,there were49large trees,6small trees and more than180small plants of wild.Wild resources were very scarce,most of them grew sporadically in the forest margin area and grew slowly.There was a situation where it took2~3a intervals for the trees to bloom and bear fruit,and46.9%of the was in a sub-healthy or unhealthy state.Therefore,it was necessary to enhance the protection and increase the number of artificial breeding on.;resource survey;distribution status;conservation花榈木（）又名花梨木、红豆树，属于豆科（Fabaceae）红豆属（），于1999年被列入我国第一批国家重点保护野生植物名录，是国家二级保护野生植物，自然分布于我国长江以南的浙江、江西、湖南、湖北、安徽等亚热带气候省份[1-4]。

8种子生活力测定Z—1概述种子生活力（Seed viability）是指种子发芽的潜在能力。

种子生活力测定在农业生产上具有重要的意义：①测定休眠种子的生活力。

许多植物种子因存在休眠，暂时不能萌发，因此发芽率很低，尤其是新收获的和野生性较强的种子，必须进行生活力测定，才能了解种子的发芽潜力，以便合理利用种子。

播种前对发芽率低而生活力高的种子，应进行适当处理。

种子检验时，若发芽试验末期有新鲜不发芽种子或硬实种子，也应接着进行生活力测定，以正确评定种子品质。

②快速预测种子的发芽力。

休眠种子可借助于各种处理措施打破休眠，然后进行发芽试验，但所需时间较长。

而种子贸易中，有时因时间紧迫，不可能采用标准发芽试验来测定发芽力，因为发芽试验所需时间更长，如小麦需8d，水稻需14d，某些蔬菜和牧草种子需2～3周，而多数林木种子则需要更长的时间。

在这种情况下，可用生物化学速测法测定种子生活力作为参考。

种子生活力测定方法有10多种，根据其测定原理可大致分为4类：①生物化学法，如四唑测定法、溴麝香草酚蓝法、甲烯蓝法、中性红法和二硝基苯法等。

②组织化学法，如靛蓝染色法、红墨水染色法和软x射线造影法等。

③荧光分析法。

④离体胚测定法。

本节主要介绍四唑测定法、离体胚测定法、染料染色法和软x射线造影法。

Z—2生活力测定方法一、测定原理有生活力的种子，其活细胞原生质膜具有选择透性，当种子浸入染料后，染料大分子不能进入活细胞内，所以胚部等活组织不能被染料染色，而死的种胚细胞因原生质膜丧失选择吸收能力，故可被染料染色。

二、测定方法（一）染色法1．靛蓝染色法此法适用于豆类、谷类、棉花、瓜类和林木等大粒种子的生活力测定。

所用试剂为靛蓝（或称靛蓝洋红），分子式为C18H8O2N2（SO5Na）2，系蓝色粉剂，能缓慢溶于水。

测定方法如下：(l) 种子预处理：将种子浸人30℃水中，水稻、向日葵、蓖麻、花生和棉籽等种子须先去壳再浸种，浸种时间因种子不同而异，小麦、大麦、大豆、豌豆和向日葵等为3h，燕麦、芝麻等4h，油菜、花生、棉籽等6 h，蓖麻、红麻、大麻等7 h、黍8 h、水稻12 h、玉米20 h将充分吸胀的种子(100粒2次重复），沿胚中线纵切（如禾谷类）或剥去种皮（如双子叶种子），以备染色用。

Q1: 种子带菌、种子健康状况检测种子外部带菌检测:每个品种选出一百粒种子,放入250ml锥形瓶中,加25ml无菌水后充分震荡,收集悬浮液,以2 000r/min的转速离心10分钟,加少量无菌水悬浮,各吸取1ml加到9cm直径的PDA平板上,涂匀,相同条件下设无菌水空白对照。

放入22℃恒温箱中黑暗条件下培养5天后观察。

种子内部带菌检测:将不同品种种子在5%次氯酸溶液中浸泡5分钟,然后用无菌水冲洗三遍,取40粒种子按照不同种子类型结构将其解剖,并将籽粒在5%的次氯酸钠溶液中浸泡5分钟进行表面消毒,分别将同一品种的整粒种子及解剖后不同部分均匀摆放在9cm直径PDA平板上,每皿摆放10粒种子或者10个组织块,每个处理4个重复。

在22～28℃温箱中12小时光照/黑暗交替培养5～7d后检查,记录种子带菌情况。

并将分离到的各种真菌分别进行纯化,转管保存后,镜检,鉴定到属。

参考文献: 杨峻,刘西莉,王慧敏,李健强,张龙. 五种豆科林草种子带菌检测及药剂消毒处理效果[J].种子,2002,(1):20-21.Q2: 种子处理方法:采用NaOH浸泡、H2SO4浸泡、物理摩擦(细砂纸摩擦)、清水浸泡、GA 和CaCl2)方法Q3:种子生理指标测定:相对含水量: 采用常压加热干燥法进行测定过氧化物酶活性测定: 采用愈创木酚法[ 14 ] ,未处理和经30 % NaOH处理过的种子在培养0、3、6、9、12、15、18 d,分别取种子1 g,重复3 次,置于研钵中,加1. 5 ml、20mol/L KH2 PO4 在研钵中研磨成浆,以4 000r /min离心15min,取3ml反应混合液(28μｌ愈创木酚以50、100 mmol/L pH 0. 6 磷酸溶液, 加19 μl 30%H2O2 混合均匀) ,加0. 2 ml待测样液,用DNA定量光度计(U2008 OD)在470 nm下测量每分钟吸光度的变化值。

α２淀粉酶活性的测定: 采用3, 52二硝基水杨酸比色法( (DNS 法) ,用加热的方法钝化β２淀粉酶粉酶,测出α２淀粉酶的活力。