肝功能丙氨酸氨基转移酶

实验十九 赖氏法测定血清丙氨酸氨基转移酶

【原理】

L-丙氨酸 + α-酮戊二酸α-丙酮酸 + L-谷氨酸

α-丙酮酸 + 2，4-二硝基苯肼2，4-二硝基苯腙

（红棕色，λ=505nm）

利用比色分析原理将样品显色与丙酮酸标准品配制成的系列标准液比较，求出样品中丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性。

【试剂】

1．0.1mol/L磷酸二氢钾溶液 称取KH2PO4 13.61g，溶解于蒸馏水中，加水至1 000ml，4℃保存。

2．0.1mol/L磷酸氢二钠溶液 称取Na2HPO414.22g，溶解于蒸馏水中，并稀释至1 000ml，4℃保存。

3．0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.4） 取420ml 0.1mol/L磷酸氢二钠溶液和80ml 0.1mol/L磷酸二氢钾溶液，混匀，即为pH7.4的磷酸盐缓冲液。加氯仿数滴，4℃保存。

4．基质缓冲液 精确称取D-L-丙氨酸1.79g，α-酮戊二酸29.2mg，先溶于0.1mol/L磷酸盐缓冲液约50ml中，用1mol/L NaOH调pH至7.4，再加磷酸盐缓冲液至100ml，4～6℃保存，该溶液可稳定2w。每升底物缓冲液中可加入麝香草酚0.9g或加氯仿防腐，4℃保存。配成200mmol/L丙氨酸与2.0mmol/Lα-酮戊二酸基质缓冲液。

5．1.0mmol/L 2，4-二硝基苯肼溶液 称取2，4-二硝基苯肼（AR）19.8mg，溶于1.0mol/L盐酸100ml，置棕色玻璃瓶中，室温中保存，若冰箱保存可稳定2个月。若有结晶析出，应重新配制。

6．0.4mol/L NaOH溶液 称取NaOH 1.6g溶解于蒸馏水中，并加蒸馏水至100ml，置具塞塑料试剂瓶内，室温中可长期稳定。

7．2.0mmol/L丙酮酸标准液 准确称取丙酮酸钠（AR）22.0mg，置于100ml容量瓶中，加0.05mol/L硫酸至刻度。此液不稳定，应临用前配制。丙酮酸不稳定，开封后易变质（聚合），相互聚合为多聚丙酮酸，需干燥后使用。

科普：丙氨酸氨基转移酶偏高怎么办

丙氨酸氨基转移酶偏高的原因是什么？丙氨酸氨基转移酶偏高怎么办？相信很多朋友对于丙氨酸氨基转移酶这个词汇非常陌生，但是在平常的体检或者化验报告中常常会遇到丙氨酸氨基转移酶偏高的情况，因而疑惑不解。要想明白丙氨酸氨基转移酶偏高的原因，我们首先要了解丙氨酸氨基转移酶是什么？

丙氨酸氨基转移酶是什么？

丙氨酸氨基转移酶是一种参与人体蛋白质新陈代谢的酶（相当于工业生产中的催化剂），起加快蛋白质氨基酸在体内转化的作用，并广泛存在于人体各种组织、器官、肌肉、骨骼中，其中以肝脏细胞的细胞浆中最多。如果丙氨酸氨基转移酶偏高，很有可能是人体某个器官组织发生病变的提示。

丙氨酸氨基转移酶偏高的原因是什么？

由于丙氨酸氨基转移酶比较敏感，它的数值可能受到各种因素的影响，因而如果体检发现丙氨酸氨基转移酶偏高时，我们首先要排除生理性的因素引起的化验数值偏高，例如：过量饮酒、药物刺激、过度疲劳、剧烈运动以及未空腹化验等诸多原因。在排除以上因素后，我们就要警惕丙氨酸氨基转移酶偏高是否由一些病理性因素导致了。因为当人体内某个组织器官发生病变时，就会把该器官中的丙氨酸氨基转移酶释放到血液中，使血清丙氨酸氨基转移酶含量增加。因此，面对丙氨酸氨基转移酶偏高不要慌，配合医生先排除非病理性因素后，再做进一步检查以明确病因。

丙氨酸氨基转移酶偏高应该怎么办？

丙氨酸氨基转移酶偏低,天冬氨酸氨基转移酶偏低

丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（AST）是人体内的两种重要酶类，在肝脏疾病的检测中扮演着至关重要的角色。当肝脏受损或发生疾病时，ALT和AST的水平往往会出现异常变化，这是常见的临床表现之一。本文将以此为主题，深度探讨丙氨酸氨基转移酶偏低以及天冬氨酸氨基转移酶偏低的相关知识，并结合个人观点进行分析和解读。

一、丙氨酸氨基转移酶偏低的意义和影响

1. 丙氨酸氨基转移酶（ALT）概述

丙氨酸氨基转移酶是一种存在于肝脏细胞内的酶，其功能主要是参与氨基酸的代谢和蛋白质合成。当肝细胞受损或肝病发生时，ALT会释放入血液中，因此其血清水平反映了肝细胞的损伤程度。

2. 丙氨酸氨基转移酶偏低的可能原因

丙氨酸氨基转移酶偏低可能是因为肝病严重程度较轻或者其他原因导致的。丙氨酸氨基转移酶偏低并不一定意味着肝功能良好，需要综合考虑其他指标进行综合分析。

3. 丙氨酸氨基转移酶偏低的临床意义

丙氨酸氨基转移酶偏低可能会导致诊断错误，对某些肝脏疾病的诊断可能会产生干扰。需要慎重解读丙氨酸氨基转移酶偏低的情况，结合临床症状和其他检测指标进行分析。

二、天冬氨酸氨基转移酶偏低的意义和影响

1. 天冬氨酸氨基转移酶（AST）概述

天冬氨酸氨基转移酶是一种酶类，主要存在于肝脏、心脏、骨骼肌和其他组织中，参与氨基酸代谢和能量产生。AST的升高常见于心肌损伤、急性肝炎、药物损害等情况。

2. 天冬氨酸氨基转移酶偏低的可能原因

天冬氨酸氨基转移酶偏低可能是因为长期酒精滥用导致的肝功能退化、严重心肌病变、低蛋白饮食等情况。天冬氨酸氨基转移酶偏低也不一定意味着肝脏功能正常，需要结合其他指标进行全面评估。

3. 天冬氨酸氨基转移酶偏低的临床意义

天冬氨酸氨基转移酶偏低可能会影响对肝脏和心脏疾病的诊断判断，需要结合病史、临床症状和其他检测指标进行综合分析。

杭州余杭邦尔医院检验科 生化项目SOP文件

13 文件编号：YHBE-JYK-SHS-05 标准操作规程

丙氨酸氨基转移酶测定 编制人：江斐琼

生效日期：2018年1月1日 审核人：钟剑

版本号/修订号：1/3 批准人：张延亮

发布部门：检验科 共4页

1. 检测目的

用于定量测定人体血清或血浆中丙氨酸氨基转移酶的含量

2. 检测原理

IFCC速率法：谷丙转氨酶催化L-丙氨酸的氨基转移，生成丙酮酸。丙酮酸与NADH在LDH的催化下反应生成乳酸和NAD+。NADH在340nm处有特异吸收峰，其被氧化的速率与血清中ALT的活性成正比，在340nm处测定NADH下降速率，即可测出ALT活性。

ALT

L-丙氨酸 + a-酮戊二酸 ---------- 丙酮酸 + L-谷氨酸

LDH

NADH + 丙酮酸 + H+---------- L-乳酸 + NAD+

3． 适用范围

血清，或用肝素抗凝的血浆

4． 试剂

1.试剂品

迈瑞公司ALT试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

组 成 R1:R2=4:1

R1: Tris缓冲液: 150mmol/L

L-丙氨酸 750mmol/L

LDH ≥1200U/L

R2: 起动液

NADH 0.9mmol/L

a-酮戊二酸 90mmol/L 杭州余杭邦尔医院检验科 生化项目SOP文件

14 2.校准品

由迈瑞公司提供的校准液,在更换试剂批号或出现质控漂移；仪器进行保养；仪器重要零件更换后进行校准。