丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定试剂盒（丙氨酸底物法）
适用范围：用于体外定量测定人体血清中丙氨酸氨基转移酶的活性。1.1 试剂盒包装规格
试剂1：1×25ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×60ml，试剂2：2×12ml；
试剂1：3×40ml，试剂2：3×8ml；试剂1：4×60ml，试剂2：4×12ml；
试剂1：2×400ml，试剂2：1×160ml；试剂1：2×40ml，试剂2：2×8ml。
1.2 试剂盒主要组成成分
组 成 浓 度
试剂1 三羟甲基氨基甲烷（Tris Ultra Pure） 9.68g/L
盐酸 4.3ml/L
L-丙氨酸 17.82 g/L
乳酸脱氢酶 10KU/L
苹果酸脱氢酶 10KU/L
试剂2 1-氧代-2-羟基吡啶
（2-Hydroxypyridine-N-oxide(Oxy-PYRION,HPO)） 2g/L
烟酰腺嘌呤二核苷酸，还原型
（NADH） 1.4 g/L
氢氧化钾 0.7g/L
α-酮戊二酸 2.28g/L
2.1 外观
试剂1：无色液体；试剂2：无色液体。
2.2 净含量
液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白
2.3.1试剂空白吸光度
在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不小于1.0。
2.3.2试剂空白吸光度变化率
在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度变化率（ΔA/min）应不大于0.004。 2.4 分析灵敏度
测定活性为50U/L样本时，吸光度变化率（ΔA/min）应不小于0.014。
2.5 线性范围
在（0，600）U/L线性范围内，线性相关系数r不小于0.990。在(100，600）U/L范围内的线性相对偏差不大于±10%；测定结果（0，100]U/L时线性绝对偏差不大于±10 U/L。
2.6 重复性
重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于5%。
人丙氨酸氨基转移酶(ALT)试剂盒使用方法
检测范围： 96T
2 U/L -60U/L
使用目的：
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平。用纯化的人丙氨酸氨基转移酶(ALT)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入丙氨酸氨基转移酶(ALT)，再与HRP标记的丙氨酸氨基转移酶(ALT)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人丙氨酸氨基转移酶(ALT)浓度。
试剂盒组成
1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品（120U/L） 0.5ml×1瓶
3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶
4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张
6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
60U/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
30U/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
丙氨酸氨基转移酶ALT(GPT紫外乳酸脱氢酶法作业指导书
1、前言
试验名称：丙氨酸氨基转移酶测定，英文名称：ALT，方法：紫外-乳酸脱氢酶法。
本文件适用于安阳鼎城糖尿病医院检验科生化实验室，目的是指导工作人员正确的在科华KHB450全自动生化分析仪上测定血清、血浆样本中的丙氨酸氨基转移酶活力，以保证测定结果的准确可靠。
本试验用体外定量测定人血清或血浆样本中丙氨酸氨基转移酶的活力。
丙氨酸氨基转移酶在肝脏中有较高的浓度，而在肾、心、骨骼肌、胰、脾、肺脏中则含量较少，ALT升高通常是由某些与肝脏有关的疾病引起的，这些疾病包括：肝硬化、肝癌、病毒性或中毒性肝炎和阻塞性黄疸。在急性病毒性或中毒性肝炎时，ALT明显高于AST，而对于绝大多数的慢性肝炎病人ALT则低于AST，ALT升高也见于广泛损伤和肌肉疾病、伴有休克的循环衰竭、缺氧、心肌梗塞和溶血性疾病。
2、测定原理
本试验测定原理以IFCC推荐的方法为基础，实验分两步进行测定原理如下：
a、样本中的ALT催化丙氨酸氨基转换至α-氧代戊二酸，生成丙柄酸和L-谷氨酸。
b、枘柄酸被试剂中的乳酸脱氢酶（LDH）还原为L-乳酸，同时NADH被氧化为NAD+，从而合340nm处的光吸收值下降，通过监 测340nm处光吸收值下降的速率，可以测定ALT的活力。
L-丙氨酸+α-氧代戊二酸 ALT 丙酮酸+L-谷氨酸
丙酮酸+NADH LDH L-乳酸+ NAD+
3、试剂
试剂生产商：长海科华生物工程股份有限公司。
剂型：液体双试剂。
包装量：R1：4*40ml R2：4*20ml
注册号：沪食药监械（准）字2010第2400056号。
生产许可证号：沪药管械生产许20030916号。
基本成份：
试剂1：
L-丙氨酸 600mmol/l
乳酸脱氢酶 ﹥1820u/l
NADH 0.26mmol/l
丙氨酸氨基转移酶(ALT)
(一)简述
丙氨酸氨基转移酶是一组催化氨基酸与a-酮酸间氨基转移反应的酶类，旧称谷丙转氨酶，主要存在于肝、肾、心肌、骨骼肌、胰腺、脾、肺、红细胞等组织细胞中，同时也存在于正常体液如血浆、胆汁、脑脊液、唾液中。当富含ALT的组织细胞受损时，ALT从细胞释放增加，进入血液后导致ALT活力上升，其增高的程度与肝细胞被破坏的程度呈正比。
参考范围：速率法：成人<40U／L
(二)临床意义
ALT的测定可反映肝细胞损伤程度。ALT升高常见于以下疾病。
(1)肝胆疾病传染性肝炎、中毒性肝炎、肝癌、肝硬化活动期、肝脓疡、脂肪肝、梗阻性黄疸、胆汁淤积或淤滞、胆管炎、胆囊炎。其中慢性肝炎、脂肪肝、肝硬化、肝癌可见ALT轻度上升或正常。
(2)其他疾病急性心肌梗死、心肌炎、心力衰竭所致肝脏瘀血，以及骨骼肌病、传染性单核细胞增多症、胰腺炎、外伤、严重烧伤、休克等。
(3)用药与接触化学品服用有肝毒性的药物或接触某些化学物质，如氯丙嗪、异烟肼、奎宁、水杨酸、氨苄西林、利福平、四氯化碳、乙醇、汞、铅、有机磷等亦可使ALT活力上升。常见可致 ALT活力上升的其他药物主要有：①抗生素：四环素、利福平、林可霉素、克林霉素、羧苄西林、苯唑西林、氯唑西林、多黏菌素、头孢呋辛、头孢美唑、头孢曲松、头孢哌酮、头孢他啶、拉氧头孢、头孢地嗪、伊米配能／西司他丁等均偶可引起血清AST或ALT升高。尤其红霉素类的酯化物可致肝毒性，常在用药后10―12d出现肝肿大、黄疸、AST或ALT升高等胆汁淤积表现。其中依托红霉素对肝脏的损害比红霉素大，主要表现为AST或ALT升高。②抗真菌药：氟康唑、伊曲康唑等可致血清AST一过性升高。灰黄霉素大剂量时有肝毒性，可见AST或ALT升高，个别人出现胆汁淤积性黄疸。酮康唑偶可发生肝毒性，表现为乏力、黄疸、深色尿、粪色白、疲乏、AST及ALT一过性升高，另有引起急性肝萎缩而致死的报道。③抗病毒药：阿昔洛韦、泛昔洛韦可致ALT及AST升高。④血脂调节药：应用HMG―CoA还原酶抑制剂(他汀类血脂调节药)连续1年以上者有2％～5％可观察到无症状的 AST及ALT异常。
