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《农产品/食品质量安全检测技术》课程-微测试一、单选题1、在做沙门氏菌干制生化鉴定试剂盒试验时，挑取新鲜培养的适量单菌落接至适量无菌水中，与试剂盒中的标准比浊管进行比对，制成浓度为（）菌悬液。
A、0.5麦氏B、0.6麦氏C、0.4麦氏D、0.8麦氏参考答案：A难度：低2、在做沙门氏菌干制生化鉴定试剂盒试验时，最好从（）平板上挑取纯化的可疑菌落进行试验。
A．营养琼脂B．BSC．XLDD．HE参考答案：A难度：低3、沙门氏菌干制生化鉴定试剂盒试验时,接种菌悬液分别至试剂盒的9个圆孔中，每孔接种量为（）；A、0.3mLB、0.2mLC、0.5mLD、0.8mL参考答案：B难度：中二、多选题1、沙门氏菌干制生化鉴定试剂盒一般包括哪几项生化试验试剂？（）A、三糖铁B、靛基质C、尿素D、赖氨酸脱羧酶及其对照参考答案：ABCD难度：中三、判断题1、沙门氏菌赖氨酸脱羧酶对照管黄色，试验管紫色为阴性。
参考答案：F难度：中2、沙门氏菌甘露醇黄色为阳性；山梨醇黄色为阴性。
参考答案：F难度：低四、填空题1、沙门氏菌干制生化鉴定试剂盒一般包括、、、、、、、和生化试验试剂。
参考答案：赖氨酸脱羧酶及其对照、氰化钾及其对照、靛基质、尿素、甘露醇、山梨醇、ONPG、三糖铁难度：高2、沙门氏菌干制生化鉴定试剂盒检验时，在、、和实验孔中滴加2滴矿物油覆盖培养基表面，盖上盒盖；参考答案：氨基酸对照、赖氨酸脱羧酶、氰化钾对照、氰化钾难度：中五、问答题1、沙门氏菌干制生化鉴定试剂盒的主要操作步骤有哪些？参考答案：接种：第一步：从铝箔袋中取出试剂盒，打开盒盖；第二步：用接种针从平板上挑取新鲜培养的适量单菌落接至适量无菌水中，与试剂盒中的标准比浊管进行比对，制成0.5麦氏菌悬液，注意菌悬液浓度不宜过大，否则可能产生假阳性结果；第三步：接种菌悬液分别至试剂盒的9个圆孔中，每孔接种量0.2mL；第四步：在氨基酸对照、赖氨酸脱羧酶、氰化钾对照、氰化钾实验孔中滴加2滴矿物油覆盖培养基表面，盖上盒盖；第五步：与三糖铁生化管一同置于36 ℃±1 ℃的恒温恒湿培养箱中培养24 h，其中ONPG 实验培养1～3h观察结果，如为阴性继续培养至24h观察结果；氰化钾实验若24h仍为阴性，可延长培养至48h观察结果；第六步：培养结束后，在靛基质实验孔中滴加2滴靛基质试剂，即刻观察结果。
沙门氏菌的检验流程及每一步检验过程的作用下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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《农产品/食品微生物检验》课程-微教材知识讲解沙门氏菌操作程序及要点——干制生化鉴定试剂盒检测工作中，由于沙门氏菌类型繁多，生化反应复杂多样，可根据三糖铁和赖氨酸脱羧酶试验的初步判断结果，从营养琼脂平板上挑取可疑菌落，用生理盐水制备成浊度适当的菌悬液，使用生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统进行鉴定。
干制生化鉴定试剂盒一般包括赖氨酸脱羧酶及其对照、氰化钾及其对照、靛基质、尿素、甘露醇、山梨醇、ONPG、三糖铁共8项生化试验试剂，通过接种可疑菌落悬浊液培养一定时间后，观察生化现象，结合标准从而判定鉴定结果。
由于此生化鉴定试剂盒中适配三糖铁实验现象不明显，一般将这个实验单独操作。
按照产品说明书，主要操作步骤如下：接种：第一步：从铝箔袋中取出试剂盒，打开盒盖；第二步：用接种针从平板上挑取新鲜培养的适量单菌落接至适量无菌水中，与试剂盒中的标准比浊管进行比对，制成0.5麦氏菌悬液，注意菌悬液浓度不宜过大，否则可能产生假阳性结果；第三步：接种菌悬液分别至试剂盒的9个圆孔中，每孔接种量0.2mL；第四步：在氨基酸对照、赖氨酸脱羧酶、氰化钾对照、氰化钾实验孔中滴加2滴矿物油覆盖培养基表面，盖上盒盖；第五步：与三糖铁生化管一同置于36 ℃±1 ℃的恒温恒湿培养箱中培养24 h，其中ONPG 实验培养1～3h观察结果，如为阴性继续培养至24h观察结果；氰化钾实验若24h仍为阴性，可延长培养至48h观察结果；第六步：培养结束后，在靛基质实验孔中滴加2滴靛基质试剂，即刻观察结果。
结果观察：按照说明书进行结果观察，根据颜色反应，判读是阴性还是阳性。
如：赖氨酸脱羧酶（对照管黄色，试验管紫色）为阳性；氰化钾（对照管生长，试验管不生长）为阴性；靛基质实验（黄色）为阴性；尿素（黄色）为阴性；甘露醇（黄色）为阳性；山梨醇（黄色）为阳性；ONPG（不变色)为阴性判定：根据标准描述进行结果判定。
拓展阅读《GB4789.4-2010食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》食品微生物检验论坛：/forum-1-1.html。
《农产品/食品微生物检验》课程-微教材知识讲解沙门氏菌检验准备依据国标，检验准备分为设备和材料、培养基和试剂两个部分.一、设备和材料，沙门氏菌检验的主要设备有：冰箱、恒温培养箱/均质器、振荡器、电子天平、pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸、全自动微生物生化鉴定系统。
沙门氏菌检验的主要器具有：灭菌剪刀、镊子等，微量移液器和无菌吸头，以及无菌试管等。
二、培养基与试剂，培养基和试剂有前增菌、增菌、分离、生化试验、血清学鉴定试剂。
1、前增菌试剂：缓冲蛋白胨水：不含任何抑菌成分，有利于受损沙门氏菌的复苏，使受损伤细胞恢复到稳定的生理状态。
分装体积225ml，高压灭菌；注意：样品呈酸性、碱性时，需调PH值至6.8±0.2。
2、增菌试剂四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液和亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液.TTB中含有胆盐，抑制革兰氏阳性球菌和部分大肠埃希氏菌的生长，而伤寒与付伤寒沙门菌仍能生长。
SC可对伤寒及其他沙门菌作选择性增菌，亚硒酸与蛋白胨中的含硫氨基酸结合，形成亚硒酸和硫的复合物，影响细菌硫代谢，从而抑制大肠埃希氏菌、肠球菌和变形杆菌的增殖。
配制要求及注意事项：TTB 需在121℃高压灭菌20min后，临用前每100ml需无菌添加碘液和0.1%煌绿溶液各1支，摇匀后分装，每试管10mLSC 无需高压灭菌，只需煮沸至完全溶解，临用前无菌分装试管,每试管10mL，SC干粉开封后建议用封口膜密封后冷藏保存，如变红，则不能使用。
3、分离平板：亚硫酸铋（BS）琼脂平板、HE 琼脂平板、木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂平板、沙门氏菌属显色培养基平板。
为最大可能的检出沙门氏菌，必须使用两种或以上选择性分离培养基。
BS含有煌绿、亚硫酸铋能抑制大肠杆菌、变形杆菌和革兰氏阳性菌的生长,但对伤寒、副伤寒等沙门氏菌的生长无影响。
HE在保证细菌所需营养的基础上，加入了一些抑制剂，如：胆盐、柠檬酸盐、去氧胆酸钠等，可抑制某些肠道致病菌和革兰氏阳性菌的生长，但对革兰氏阴性的肠道致病菌则无抑制作用。
沙门氏菌检验国标检验步骤及接种方式沙门氏菌是一种常见的细菌引起的食源性疾病，可能会导致严重的胃肠道感染。
为了保障食品安全，确保公众的健康，我们需要进行沙门氏菌的国标检验。
下面是一份生动、全面且有指导意义的文章，详细介绍了沙门氏菌检验的国标检验步骤和接种方式。
第一步：样品准备在进行沙门氏菌检验之前，我们首先需要准备样品。
常见的样品包括食品、水、动物排泄物等，可能携带沙门氏菌。
样品应该收集自具有代表性的地点，并采取无菌采样容器进行收集。
收集样品时要注意避免污染，并确保样品的数量足够进行检验。
第二步：样品处理样品处理的目的是将潜在的沙门氏菌分离出来，并进行后续的检测。
可以采用不同的方法进行样品处理，常见的方法包括富集培养和选择性培养。
富集培养是将样品放入富集培养基中，利用培养基中的营养物质以及特定条件促使沙门氏菌生长。
选择性培养则是利用培养基中的特殊抑制剂抑制其他细菌的生长，从而使沙门氏菌生长出来。
第三步：菌落鉴定在样品处理后，我们需要对培养基上的菌落进行鉴定，确认是否为沙门氏菌。
常见的鉴定方法包括形态学鉴定、生理生化鉴定和分子生物学鉴定。
形态学鉴定主要通过观察菌落的形状、颜色和大小等特征来判断细菌的种类。
生理生化鉴定则是通过检测菌落对特定物质的代谢情况来确定细菌的种类。
分子生物学鉴定是利用特定的DNA序列来识别沙门氏菌的基因，通常使用PCR技术进行检测。
第四步：抗菌药敏试验沙门氏菌的抗菌药敏性检测是为了确定对何种抗生素具有敏感性。
通过抗菌药敏试验，我们可以选择合适的药物来治疗感染。
可以使用各种常见的抗生素盘进行试验，然后观察沙门氏菌对不同抗生素的反应。
根据抗生素的抑菌效果，可确定沙门氏菌的耐药性情况。
第五步：结果分析与报告最后一步是对检验结果进行分析，并撰写检验报告。
检验结果要结合国家标准进行评估，确定样品是否合格。
如果样品中检测到沙门氏菌，还需要评估其数量以及对公众健康可能造成的风险。
在撰写报告时，需要详细记录样品的来源、处理方法、检验步骤和结果，以及相应的建议和措施。
沙门氏菌检验程序沙门氏菌是一种常见的致病微生物，能引起人类和动物的感染疾病。
因此，在食品、水源、环境等方面对沙门氏菌的检测尤其重要。
下面我们将介绍一下沙门氏菌检验的步骤和方法。
1. 样品采集对于食品、水源等样品的采集需要遵守严格的规定。
例如，食品样品需要在加工、贮存和分配之前采集，以确保沙门氏菌检验的准确性。
样品应当在采集之后尽快送到实验室进行检测。
2. 样品处理根据不同的样品类型和特性，采用不同的处理方法。
例如，对于牛奶、鸡蛋等液态食品，需要进行破坏性处理，以确保沙门氏菌的释放。
对于土壤、粪便等样品，需要进行外层细菌的去除处理。
3. 培养培养基选择含有适当氧气和营养物质的培养基，如SS（Salmonella-Shigella）培养基、XLD（Xylose-Lysine-Desoxycholate）培养基等。
将样品分别接种到不同的培养基上。
4. 培养将分别接种的培养基放入恒温箱中进行培养。
将温度设定为37°C至42°C，进行18小时至24小时的培养。
在培养过程中观察样品的生长和变化。
5. 分离取出培养好的样品进行观察。
将预处理样品浸泡在缓冲液中，将溶液过滤。
过滤的溶液留下来，转移到盘子上。
用肉眼观察菌落的形态，观察不同菌落的特点。
根据菌落的特点进行分离。
6. 鉴定在鉴定步骤中，需要进行各种化学试剂处理，如氧化氢酶测试、葡萄糖测试等。
同时需要使用专业仪器，如API试剂盒、ELISA试剂盒等。
通过这些鉴定手段，确定检测出的菌落是否为沙门氏菌。
7. 结论最后，根据检测结果得出客观和准确的结论，以便针对食品、水源或环境污染等问题采取相应的措施。
总之，沙门氏菌的检验程序是一个非常复杂和严谨的过程，需要专业的实验室和技术人员进行操作。
我们应当高度重视沙门氏菌检验的重要性，以确保我们的食品质量和健康安全。
沙门氏菌的检验方法与注意事项在日常微生物检验中，沙门氏菌比较常见，是一种致病性细菌，国家规定在每25g的食品样本中不能检测出沙门氏菌，所以在检验沙门氏菌时，对试剂与培养基有很高的要求，下面本文针对沙门氏菌的检验方式和注意事项作出简单介绍！一、沙门氏菌检测的原因和意义根据相关统计显示，我们国家因细菌性食物中毒的人中，有70%-80%左右的人是通过沙门氏菌造成的。
人体倘若含有过多的大量沙门氏菌的动物性食物，就会造成细菌性感染，以此在毒素的影响下产生食物中毒，造成伤寒、胃肠炎及副伤寒。
而且沙门氏菌的传播途径较多，肉、蛋和其他食物，从加工至销售的整个过程当中都极易引发感染情况，所以准确、有效检验沙门氏菌有重大意义。
二、沙门氏菌的检验（一）前增菌(无选择性)BPW（缓冲蛋白胨水）属于一种比较常见的增菌培养基，不包括任何抑制物质，有助于修复受损的沙门氏菌。
促使受损的沙门氏菌细胞复苏至相对平稳的生理状态。
（二）选择性增菌TTB（四硫磺酸钠煌绿增菌液）内含有硫代硫酸钠，结合四硫磺酸钠，能够对肠道共生菌进行有效抑制，而包含四硫磺酸钠还原酶的细菌，可以在这一培养基当中生长繁殖；煌绿及胆盐能够控制大肠群菌、革兰氏阳性菌的繁殖，而伤寒沙门氏菌依旧可以生长。
SC（亚硒酸盐胱氨酸增菌液）能够对其他和伤寒沙门氏菌进行选择性增菌，其含有的亚硒酸结合蛋白胨内的含硫氨基酸，促使亚硒酸与硫的复合物生产，对细菌硫的代谢产生干扰，进而减少肠球菌、变形杆菌、大肠埃希氏菌的繁殖生长。
（三）分离培养基(选择性)①BS（亚硫酸铋琼脂）内含亚硫酸铋指示剂，可对大肠菌群、革兰氏阳性菌进行抑制，但不会对沙门氏菌的繁殖产生影响；其他沙门氏菌、伤寒杆菌可以借助葡萄糖，还原亚硫酸铋，使其形成硫酸铋，使黑色菌落附近有黑棕色的环，对光可看到金属光泽。
BS的压力和温度不可过高，避免选择性下降，需在使用前配制，放置阴暗处储存，48小时后丧失选择性，储存不合理会造成色浅，表示效果开始减弱，联合TTB、SC使用能够提高检出率。
沙门氏菌临床检测质量控制指标及标准操作程序1. 引言1.1 概述本文旨在介绍沙门氏菌临床检测质量控制指标及标准操作程序。
沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌，它可以引发沙门氏菌感染，导致人们出现食物中毒等健康问题。
为了确保食品安全和公共卫生，对沙门氏菌进行准确可靠的检测非常关键。
1.2 文章结构本文分为引言、正文、沙门氏菌临床检测质量控制指标、标准操作程序和结论五个部分。
正文将详细介绍沙门氏菌的相关知识，包括其生物学特性、传播途径以及潜在风险。
随后，我们将重点探讨如何进行沙门氏菌的临床检测，并提供相应的质量控制指标和标准操作程序。
1.3 目的本文目的是提供临床实验室从事沙门氏菌检测工作所需的正确操作步骤和相关质量控制指标。
通过遵循标准程序并确保质量控制准则的合规性，临床实验室可以提高检测的准确性和可靠性，从而更好地服务于食品安全和公共卫生领域。
以上是“1. 引言”部分的内容，主要涵盖了概述、文章结构和目的。
通过引言部分的介绍，读者能够对本文要讨论的内容有一个整体的了解，并明确阅读该文的价值所在。
2. 正文沙门氏菌（Salmonella），又称沙门氏埃希菌，是一种常见的致病性细菌。
它可以通过食物、水源以及接触感染等途径传播给人体，引发沙门氏菌肠道感染或伤寒等严重疾病。
因此，对于沙门氏菌的临床检测质量控制非常重要。
在进行沙门氏菌的临床检测时，需要遵循一系列标准操作程序以确保结果的准确和可靠性。
这些操作程序包括但不限于样本采集、处理和分析过程中的相关步骤。
首先，在样本采集时，应该选择合适的标本类型。
一般来说，粪便、血液、尿液等可以作为潜在的沙门氏菌感染标本类型。
采集样本应注意无菌操作，避免污染和交叉感染。
其次，在处理样本前，需要进行适当的预处理。
这包括将样本进行离心分离，并使用合适的缓冲液稀释。
此外，在进行培养前应彻底混匀样品，确保细菌均匀分布。
接下来是沙门氏菌的检测。
传统方法主要是通过进行培养和鉴定来确定有无沙门氏菌的存在。
《农产品/食品微生物检验》课程-微教材知识讲解沙门氏菌操作程序及要点——传统鉴定沙门氏菌操作程序及要点分为检验程序和操作步骤一、检验程序根据国标，沙门氏菌的检验程序为: 检样经无菌处理后，称取25 g(mL)样品加入到225 mL BPW中36±1℃培养8~18h；取培养物1mL 接种到10mL的TTB中同时取1mL 接种到10mL 的SC中，分别于42±1℃和36±1℃培养18~24h；取培养后的增菌液分别划线接种于BS琼脂平板和XLD琼脂平板（或HE琼脂平板、显色培养基平板）中，于36±1℃培养18~24h，BS 需延长至40~48h；培养后挑取可疑菌落做生化试验。
挑取2 个以上典型或可疑菌落——接种三糖铁琼脂，赖氨酸脱羧酶试验管和对照管、供做靛基质试验的色氨酸肉汤、尿素（pH7.2)，KCN试验管和对照管，同时划线营养琼脂平板——如5项生化都符合——则直接判定为沙门氏菌——如五项中靛基质阳性——则补做甘露醇和山梨醇试验，如果两项均为阳性——为可疑沙门氏菌，但需结合血清学鉴定结果进行判定——如五项中H2S阴性——则需补做ONPG试验，ONPG阴性，同时赖氨酸脱羧酶阳性——为沙门氏菌——也可在三糖铁和赖氨酸脱羧酶试验初步判断结果后，使用商品化的生化鉴定系统进行生化鉴定——判定是否为沙门氏菌——如果5项反应中有2项以上不符合——则沙门氏菌阴性——最后报告结果二、操作步骤主要分为：1、样品处理与前增菌；2、增菌；3、分离；4、传统生化鉴定试验；5、系统生化鉴定试验；6、血清学鉴定。
其中传统生化鉴定试验又分为三糖铁和赖氨酸脱羧酶试验，靛基质、尿素和氰化钾试验、甘露醇、山梨醇以及ONPG试验三个部分。
本片以鸡肉为样品，演示沙门氏菌检验的样品处理和前增菌的操作过程。
1、前增菌：在无菌室内，以75%酒精擦拭样品外包装，尤其是包装的开口处，用无菌剪刀在样品封口处剪开包装袋，换用一个无菌剪刀将鸡肉样品剪碎至无菌罐内，用无菌镊子称取25 g样品至盛有225 mL BPW的样品瓶中，再转入注明样品信息、检测人员以及检测日期的均质袋中，密封，用拍击式均质器拍击2 min。
注意：若样品为液态，不需均质，振荡混匀即可；如需测定pH 值，用1 mol/mL的无菌NaOH 或HCl（调pH至6.8±0.2；均质完成的检测样品通过传递窗出无菌室，清理无菌室，打开紫外灯，辐照灭菌30 min。
将上述均质完成的检测样品放于预先设置36 ℃±1 ℃的恒温恒湿培养箱中培养8 h～18 h。
2、增菌：将前增菌培养物通过传递窗入BSL-2实验室，在生物安全柜内轻轻摇动培养过的样品混合物，移取 1 mL，转种于10 mL TTB增菌液内，同时，另取 1 mL，转种于10 mL SC增菌液内。
选择性增菌的目的是最大可能的检出沙门氏菌，原则上必须使用两种选择性增菌液，一种是抑制除沙门氏菌以外其肠道菌的生长，一种是在不影响其他肠道菌生长的情况下促进沙门氏菌的生长。
注意区分两种增菌培养温度不同。
SC增菌液经过培养后，肉汤没有变红，仍然需要转接分离平板；接种完成的物品通过传递窗出BSL-2实验室，清理BSL-2实验室与生物安全柜，分别打开紫外灯，辐照灭菌60 min。
将接种后的TTB增菌液和SC增菌液分别置于42 ℃和36 ℃培养18 h～24 h。
注意：下述步骤均在BSL-2实验室里的生物安全柜内进行，相应的准备和工作要求同前所示。
3、平板分离分别用接种环取培养后的TTB增菌液和SC增菌液各1 环，分别划线接种于一个BS 琼脂平板、XLD 琼脂平板、HE 琼脂平板和沙门氏菌属显色培养基平板。
置于36 ℃培养箱中培养，除BS 琼脂平板需培养40 h～48 h外，另三种分离平板培养时间均为18 h～24 h。
沙门氏菌检测用到的分离平板主要有BS 琼脂平板、XLD 琼脂平板、HE 琼脂平板和沙门氏菌属显色培养基平板，为了最大可能的检出沙门氏菌，必须使用两种或以上选择性分离培养基。
本片将分别演示这四种平板的分离现象。
由于沙门氏菌属种类比较多，所以不同菌在平板上的现象不同，本实验中各分离平板上的菌落特征如下：BS 琼脂平板上菌落为黑色有金属光泽、棕褐色或灰色，菌落周围培养基呈黑色或棕色；XLD 琼脂平板上菌落呈粉红色，不带黑色中心；HE 琼脂平板上菌落为蓝绿色或蓝色，多数菌落中心黑色或几乎全黑色；沙门氏菌属显色培养基平板上菌落特征需按照显色培养基的说明进行判定。
本实验采用法国科玛嘉显色培养基，沙门氏菌在该培养基上菌落为紫色。
沙门氏菌种类复杂，在分离培养基上的菌落形态不唯一，凡是符合标准中描述的典型菌落及可疑菌落均需进行后期生化鉴定。
甲型副伤寒、伤寒等不产或弱产H2S的沙门氏菌在传统培养基上易漏检；奇异变形杆菌等产H2S的非沙门氏菌在传统培养基上假阳性率很高，会增加后期生化鉴定的工作量。
在显色培养基上沙门氏菌和伤寒沙门氏菌均为紫色，大肠杆菌为蓝色，变形杆菌为无色，很容易辨认。
因此，有条件的话建议使用显色培养基。
若平板上无菌落生长，则可判定为阴性。
实际工作中如需开展染色镜检，可挑取分离平板上的典型菌落，涂片，进行革兰氏染色。
沙门氏菌为革兰氏阴性，两端钝圆的短杆菌，无芽孢。
4、生化鉴定生化鉴定这里指的是传统生化鉴定。
沙门氏菌检验传统生化鉴定所用的试剂有：三糖铁琼脂斜面、赖氨酸脱羧酶试剂及对照、靛基质试剂及其添加剂、尿素酶试剂和氰化钾试剂及对照；有时还需要用到甘露醇、山梨醇和ONPG试剂。
1）三糖铁和赖氨酸脱羧酶试验：从选择性琼脂平板上分别挑取 2 个以上典型或可疑菌落，接种三糖铁琼脂，先在斜面划线，再于底层穿刺；接种针不要灭菌，直接接种营养琼脂平板和赖氨酸脱羧酶试验管及其对照管，接种后，需在赖氨酸脱羧酶试验管及其对照管中滴加矿物油，形成厌氧环境，一株待检菌需同时接种赖氨酸脱羧酶试验管和氨基酸脱羧酶对照管各一支，且两管均需滴加矿物油或液体石蜡覆盖液面。
将以上接种物于36 ℃培养18 h～24 h，必要时可延长至48 h。
本实验在三糖铁琼脂上的反应结果为：三糖铁斜面产碱，颜色加深，底层产酸变为黄色，产硫化氢，产气。
三糖铁培养基含有葡萄糖、蔗糖和乳糖等三种可发酵的碳源，这些碳源被菌体利用产酸，可使酚红指示剂变色。
某些菌能还原Na2S2O3产生H2S，与硫酸亚铁铵反应生成黑色的FeS，而使培养基变黑。
本实验赖氨酸脱羧酶的反应结果为：赖氨酸脱羧酶对照管黄色、试验管紫色，反应为阳性。
结合三糖铁和赖氨酸脱羧酶试验的结果，可筛掉大部分非沙门氏菌。
本次实验中根据以上反应结果初步判断为可疑沙门氏菌。
需进一步做生化鉴定。
2）靛基质、尿素和氰化钾试验：从营养琼脂平板上挑取可疑菌落接种至供做靛基质实验的色氨酸肉汤、尿素酶、氰化钾试验管及其对照管。
靛基质、尿素和氰化钾实验挑取的菌落应为上一步做三糖铁和赖氨酸脱羧酶实验时纯化的营养琼脂平板上的菌落，也可在接种三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试剂的同时，直接接种。
接种后置于36 ℃培养18 h～24 h，必要时可延长至48 h。
注意：一株待检菌需同时接种氰化钾试验管和氰化钾对照管各一支。
两管均需滴加矿物油或无菌液体石蜡覆盖液面，因为氰化钾易分解，产生氢氰酸易挥发，影响试剂浓度。
氰化钾剧毒，实验时应做好个人防护，避免接触、入口或吸入。
按照产品说明书，观察结果时，需在色氨酸肉汤实验管中滴加1滴靛基质试剂。
本实验靛基质反应不变色为阴性、尿素酶变黄为阴性、氰化钾对照管生长，试验管不生长，为阴性。
对照标准中的表3，符合标准中的反应序号A1，为典型反应，判定为沙门氏菌属。
为防止漏检应从选择性琼脂平板上分别挑取 2 个以上典型或可疑菌落进行以上生化实验，并将已挑菌落的平板和纯化的营养琼脂平板储存于 2 ℃～5 ℃或室温至少保留24 h，以备必要时复查。
本实验反应序号A1后三项全符合，直接判定沙门氏菌阳性；如果后三项有两项以上不符合，则沙门氏菌阴性；如果后三项有1项不符合，补做血清学试验按表4判定是否为沙门氏菌。
即当赖氨酸脱羧酶阴性时，可能为甲型副伤寒沙门氏菌，需结合血清学鉴定结果进行判定；当氰化钾阳性时，可能为沙门氏菌IV型或V型，需结合沙门氏菌属生化群鉴定结果进行判定；当尿素反应阳性时，可能为沙门氏菌的个别变体，需结合血清学鉴定结果进行判定。
如果生化反应结果符合反应序号A2：即靛基质反应阳性时，需要补做甘露醇和山梨醇试验，两项试验结果均为阳性，为可疑沙门氏菌，但需要结合血清学鉴定结果进行判定。
如果生化反应结果符合反应序号A3：补做ONPG。
ONPG 阴性，同时赖氨酸脱羧酶阳性为沙门氏菌，甲型副伤寒沙门氏菌为赖氨酸脱羧酶阴性。
必要时按标准中表5 进行沙门氏菌生化群的鉴别。
这就需要使用系统生化鉴定的方法，来减少生化鉴定的工作量，保证生化鉴定的准确性.5、血清学鉴定生化鉴定结果符合沙门氏菌属特征的继续做血清学鉴定。
血清学鉴定需使用沙门氏菌的多价菌体（O）抗原和多价鞭毛（H）抗原诊断血清。
血清学实验必须基于生化实验的结果，不能单纯以血清学实验结果来报告最终结果。
血清学分型为选作项目，可不做。
本片仅展示常用的O抗原的鉴定和H抗原的鉴定，检验步骤及注意事项有：（1）在玻片上划出两个区域，分别标记对照和O抗原，从营养琼脂上挑取 1 环待测菌，各放1/2 环于玻片上的每一区域上部，（2）在标记为O抗原的区域下部加 1 滴O抗血清（或H抗血清），在标记为对照区域的下部加入1 滴生理盐水，作为对照。
（3）再用无菌的接种环或针分别将两个区域内的菌落研成乳状液（4）将玻片倾斜摇动混合1min ，并对着黑暗背景进行观察，任何程度的凝集现象皆为阳性反应。
注意：O抗血清和对照的生理盐水都不凝集时，应考虑待检菌是否存在荚膜抗原。
可将浓菌液在100℃条件下加热处理15-60min，破坏荚膜抗原，然后再做O抗原鉴定。
本实验的对照均匀浑浊，O抗血清凝集成块，为阳性H抗血清实验步骤与O抗血清相同。
本实验的对照均匀浑浊，H抗原为絮状或绒毛状凝集，为阳性。
注意：实验结束后，阳性平板和试管以及感染材料，使用的阳性对照菌株均需高压灭活，再处置；氰化钾反应管灭菌后每管加入数粒硫酸亚铁和0.5mL 20%氢氧化钾溶液，然后才可清洗。
拓展阅读《GB4789.4-2010食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》食品微生物检验论坛：/forum-1-1.html。
