沙门氏菌国标检测方法

食品微生物学检验 沙门氏菌检验GB GB 4789.44789.44789.4-20-20-201010北京陆桥技术有限责任北京陆桥技术有限责任公司公司技术服务电话：010-******** 销售服务电话：010-********技术部邮箱：luqiaotech@www. beijinglandbridge .com北京陆桥技术有限责任公司目 录�沙门氏菌简介�2010版国标主要修订内容�沙门氏菌的检验步骤及注意事项�沙门氏菌检验过程中的常见问题www. beijinglandbridge .com 北京陆桥技术有限责任公司沙门氏菌简介�沙门氏菌属沙门氏菌属：肠杆菌科：肠杆菌科�沙门氏菌能引起胃肠炎、伤寒、败血症等人类疾病，严重时能导致死亡。

�种类繁多，抗原结构复杂，种类繁多，抗原结构复杂，在在《ANTIGENIC FORMULAE OF THE SALMONELLA SEROVARS FORMULAE OF THE SALMONELLA SEROVARS》》(2007 9th edition)(2007 9th edition)中已公布了中已公布了2579个血清型个血清型。

�食物是人类感染沙门氏菌的主要途径。

www. beijinglandbridge .com 北京陆桥技术有限责任公司�形态特征：形态特征：革兰氏阴性革兰氏阴性革兰氏阴性、、两端钝圆短杆菌两端钝圆短杆菌，，无芽孢无芽孢，，一般无荚膜，除鸡沙门氏菌一般无荚膜，除鸡沙门氏菌和和雏沙门氏菌外，都有周身鞭毛，运动力强�培养特性：需氧或兼性厌氧，10℃~42℃都可生长，最适生长温度为37℃，最适pH 为6.8~7.8�革兰氏阴性、需氧或兼性厌氧无芽孢杆菌沙门氏菌简介：生物学特征www. beijinglandbridge .com 北京陆桥技术有限责任公司�修改了标准的中英文名称�修改了标准的范围�修改了培养基和试剂；�修改了设备和材料；�修改了附录修改了附录A A （规范性附录）培养基和试剂2010版国标主要修订内容www. beijinglandbridge .com 北京陆桥技术有限责任公司——关于培养基和试剂的修订说明�修改了修改了HE HE HE琼脂和三糖铁琼脂的配方。

食品沙门氏菌检测沙门氏菌为肠道细菌科，即引发食物中毒细菌。

根据既有研究结果表明，因沙门氏菌导致的食物中毒病例占比较高，所以对食品中沙门氏菌检测的重要性逐渐突显出来，并且备受关注。

而对食品沙门氏菌的检测需从多个角度展开分析，以解决食品安全问题。

1 沙门氏菌有哪些生物学特性？沙门氏菌会对人和动物的健康带来严重危害，是十分常见的致病菌。

此病菌的型别诸多且抗原复杂，其对于外界环境的抵抗性较为明显，而且能够在食品中存活较长时间，在粪便内的存活时间达到1-10个月之久。

沙门氏菌的传播路径一般包括肉产品、禽和蛋等，在身体状况的基础上，还和菌株血清型存在一定关联，会严重危害老人与孩童，或者是免疫有缺陷的人。

所以说，有必要对容易被污染的食品进行分类型地管理，以免沙门氏菌对我们的身体健康造成负面影响。

2 检测沙门氏菌的国标方法如何？现阶段，根据国家规定对沙门氏菌进行检测的方法被称作是国标方法。

而这种检测方法的步骤较为繁杂，需经过增菌→增菌→分离→生化试验→血清学检定等多个环节完成。

正是因为国标检测沙门氏菌的程序复杂，所以需要耗费较多的时间与精力，一般在4-7天之间才能够获得所要的检测结果。

3 采用分子生物学方法检测沙门氏菌第一种，扩增片段长度多态性技术的应用。

这种对沙门氏菌进行检测的技术相对便利且快速，可以获得稳定且可靠性较高的结果，因而在检测微生物方面的应用较为常见。

在众多研究中，针对沙门氏菌株展开了扩增片段长度多态性指纹分析，并了解到血清型的差异所获得的扩增片段长度多态性指纹图也有所差异，具有较高的分辨率，进而对不同的菌株进行有效地区分。

第二种，聚合酶连反应技术的应用。

聚合酶连反应技术本身敏感性与特异性较为突出，且应用十分便捷，同样被使用在检测微生物方面。

大部分研究者通过对聚合酶连反应技术的合理运用，开展了沙门氏菌的检测工作。

在对聚合酶连反应技术进行应用的过程中，对食品中的沙门氏菌进行检测，在和增强化学发光反应相互结合的基础上，即可实现交杂扩增产物的目的，最终实现了检测方法的成功研发。

食品沙门氏菌测试方法标准
食品沙门氏菌测试方法标准主要包括以下步骤：
1.样品采集：从待检测的食品中采集适量样品，确保样品的代表性。

2.样品处理：将采集的样品进行适当处理，如破碎、研磨等，以便后续的
检测操作。

3.增菌培养：将处理后的样品接种到选择性培养基中，进行增菌培养。

选
择性培养基可以抑制其他微生物的生长，促进沙门氏菌的增殖。

4.分离培养：将增菌培养后的样品划线接种到鉴别培养基上，进行分离培
养。

鉴别培养基可以进一步筛选出沙门氏菌，并对其进行鉴别。

5.生化鉴定：对分离培养得到的沙门氏菌进行生化鉴定，以确定其是否为
沙门氏菌。

常用的生化鉴定方法包括API 20E、三糖铁试验等。

6.血清学鉴定：对生化鉴定为沙门氏菌的菌株进行血清学鉴定，以确定其
具体血清型。

常用的血清学鉴定方法包括玻片凝集试验、试管凝集试验等。

7.药敏试验：对分离得到的沙门氏菌进行药敏试验，以确定其对不同药物
的敏感性，为临床治疗提供参考。

需要注意的是，食品沙门氏菌测试方法标准可能因不同国家和地区而有所差异。

因此，在实际操作中，应根据当地的标准和法规进行相应的调整和操作。

沙门氏菌检验国标检验步骤及接种方式沙门氏菌是一种常见的细菌引起的食源性疾病，可能会导致严重的胃肠道感染。

为了保障食品安全，确保公众的健康，我们需要进行沙门氏菌的国标检验。

下面是一份生动、全面且有指导意义的文章，详细介绍了沙门氏菌检验的国标检验步骤和接种方式。

第一步：样品准备在进行沙门氏菌检验之前，我们首先需要准备样品。

常见的样品包括食品、水、动物排泄物等，可能携带沙门氏菌。

样品应该收集自具有代表性的地点，并采取无菌采样容器进行收集。

收集样品时要注意避免污染，并确保样品的数量足够进行检验。

第二步：样品处理样品处理的目的是将潜在的沙门氏菌分离出来，并进行后续的检测。

可以采用不同的方法进行样品处理，常见的方法包括富集培养和选择性培养。

富集培养是将样品放入富集培养基中，利用培养基中的营养物质以及特定条件促使沙门氏菌生长。

选择性培养则是利用培养基中的特殊抑制剂抑制其他细菌的生长，从而使沙门氏菌生长出来。

第三步：菌落鉴定在样品处理后，我们需要对培养基上的菌落进行鉴定，确认是否为沙门氏菌。

常见的鉴定方法包括形态学鉴定、生理生化鉴定和分子生物学鉴定。

形态学鉴定主要通过观察菌落的形状、颜色和大小等特征来判断细菌的种类。

生理生化鉴定则是通过检测菌落对特定物质的代谢情况来确定细菌的种类。

分子生物学鉴定是利用特定的DNA序列来识别沙门氏菌的基因，通常使用PCR技术进行检测。

第四步：抗菌药敏试验沙门氏菌的抗菌药敏性检测是为了确定对何种抗生素具有敏感性。

通过抗菌药敏试验，我们可以选择合适的药物来治疗感染。

可以使用各种常见的抗生素盘进行试验，然后观察沙门氏菌对不同抗生素的反应。

根据抗生素的抑菌效果，可确定沙门氏菌的耐药性情况。

第五步：结果分析与报告最后一步是对检验结果进行分析，并撰写检验报告。

检验结果要结合国家标准进行评估，确定样品是否合格。

如果样品中检测到沙门氏菌，还需要评估其数量以及对公众健康可能造成的风险。

在撰写报告时，需要详细记录样品的来源、处理方法、检验步骤和结果，以及相应的建议和措施。

沙门氏菌的检测方式主要包括血常规检查、便常规检查、ELISA法检查等，能够判断疾病的严重程度。

1、血常规检查：感染沙门氏菌时，多数患者的白细胞、中性粒细胞以及嗜酸性粒细胞计数出现偏低的情况，大儿童的白细胞计数通常出现升高的现象，该项结果可以辅助诊断沙门菌病。

2、便常规检查：感染沙门氏菌以后，部分患者可能会出现黏液样变或血便的情况，通过明确患者急性胃肠炎的症状来辅助诊断沙门菌病。

3、ELISA法检查：检测患者血清中沙门菌抗原、抗体是否出现异常的情况，有助于沙门菌感染的诊断。

除此之外，沙门氏菌的检测方式还包括B超检查、肥达试验等，如果自身的病情比较严重，建议应及时到正规医院的感染病科进行检查并治疗，以免延误病情。

沙门氏菌的检验国标沙门氏菌是一类常见的致病菌，引起人和动物的沙门氏菌感染，是一种重要的公共卫生问题。

为了保障食品安全和人民的健康，各国都制定了相应的沙门氏菌检验国标，以确保食品和水源的安全。

沙门氏菌的检验国标是根据沙门氏菌的特性和致病机制制定的，旨在检测食品和水源中是否存在沙门氏菌。

根据国际标准化组织（ISO）和国家标准化组织（CNS）的规定，沙门氏菌的检验国标主要包括以下几个方面。

首先是样品的采集和处理。

在进行沙门氏菌检验之前，需要采集样品并进行处理。

样品的采集应该规范，避免交叉污染。

在样品处理过程中，要注意避免沙门氏菌的繁殖和生长，以防止结果的误判。

其次是培养基的准备和使用。

沙门氏菌的培养需要适当的培养基，以提供菌种生长所需的营养物质。

培养基的制备要符合国家标准，以确保培养过程的准确性和可重复性。

此外，在培养过程中要注意温度、pH值和氧气含量等因素的控制，以保证沙门氏菌能够正常生长。

第三是沙门氏菌的检测方法。

常用的沙门氏菌检测方法包括传统的培养方法和分子生物学方法。

传统的培养方法主要是通过培养基的选择和培养条件的控制，将沙门氏菌培养出来并进行鉴定。

分子生物学方法则是通过检测沙门氏菌的DNA序列来确定是否存在沙门氏菌。

这些方法各有优缺点，可以根据实际情况选择合适的方法进行检测。

最后是结果的解读和报告。

沙门氏菌的检验结果应该进行准确的解读，并进行相应的报告。

根据国家标准，沙门氏菌的检测结果可以分为阴性和阳性。

阴性表示样品中未检测到沙门氏菌，阳性表示样品中存在沙门氏菌。

在报告中，应该详细说明检测的方法、结果和结论，以便相关部门和人员能够及时采取相应的措施。

沙门氏菌的检验国标是保障食品安全和人民健康的重要举措。

通过采集样品、准备培养基、选择合适的检测方法和解读结果，可以有效地检测和防控沙门氏菌感染的风险。

各国应该根据实际情况和国家标准，制定和执行相应的沙门氏菌检验国标，以确保食品和水源的安全，保障人民的健康。

《农产品/食品微生物检验》课程-微教材知识讲解沙门氏菌操作程序及要点——传统鉴定沙门氏菌操作程序及要点分为检验程序和操作步骤一、检验程序根据国标，沙门氏菌的检验程序为: 检样经无菌处理后，称取25 g(mL)样品加入到225 mL BPW中36±1℃培养8~18h；取培养物1mL 接种到10mL的TTB中同时取1mL 接种到10mL 的SC中，分别于42±1℃和36±1℃培养18~24h；取培养后的增菌液分别划线接种于BS琼脂平板和XLD琼脂平板（或HE琼脂平板、显色培养基平板）中，于36±1℃培养18~24h，BS 需延长至40~48h；培养后挑取可疑菌落做生化试验。

挑取2 个以上典型或可疑菌落——接种三糖铁琼脂，赖氨酸脱羧酶试验管和对照管、供做靛基质试验的色氨酸肉汤、尿素（pH7.2)，KCN试验管和对照管，同时划线营养琼脂平板——如5项生化都符合——则直接判定为沙门氏菌——如五项中靛基质阳性——则补做甘露醇和山梨醇试验，如果两项均为阳性——为可疑沙门氏菌，但需结合血清学鉴定结果进行判定——如五项中H2S阴性——则需补做ONPG试验，ONPG阴性，同时赖氨酸脱羧酶阳性——为沙门氏菌——也可在三糖铁和赖氨酸脱羧酶试验初步判断结果后，使用商品化的生化鉴定系统进行生化鉴定——判定是否为沙门氏菌——如果5项反应中有2项以上不符合——则沙门氏菌阴性——最后报告结果二、操作步骤主要分为：1、样品处理与前增菌；2、增菌；3、分离；4、传统生化鉴定试验；5、系统生化鉴定试验；6、血清学鉴定。

其中传统生化鉴定试验又分为三糖铁和赖氨酸脱羧酶试验，靛基质、尿素和氰化钾试验、甘露醇、山梨醇以及ONPG试验三个部分。

本片以鸡肉为样品，演示沙门氏菌检验的样品处理和前增菌的操作过程。

1、前增菌：在无菌室内，以75%酒精擦拭样品外包装，尤其是包装的开口处，用无菌剪刀在样品封口处剪开包装袋，换用一个无菌剪刀将鸡肉样品剪碎至无菌罐内，用无菌镊子称取25 g样品至盛有225 mL BPW的样品瓶中，再转入注明样品信息、检测人员以及检测日期的均质袋中，密封，用拍击式均质器拍击2 min。