细胞化学染色68627
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细胞化学染色细胞化学染色是将形态和功能相结合的细胞科学。
它是在保持完整的细胞形态和细胞结构的前提下,运用化学反应将被检细胞内的各类化学成分和细胞结构及生理活性物质原位地显示。
因而对于探索细胞内的化学成分、生理功能、新陈代谢及细胞生理和病理改变有着重要意义。
血液细胞化学染色的范围一般可分为:蛋白质类(氨基酸、酶)、核酸类、多糖类、脂类、盐类或金属类,采用的方法通常为化学结合和物理溶解及酶-底物反应。
临床评价:1.细胞化学染色的开展,已有数十年的历史。
其在结合细胞形态学的基础上对各类白血病的确诊,对许多血液疾病鉴别诊断中的帮助,对各种良、恶性血液系统疾病疗效和预后估计提供一定的信息。
2.血液系统各种恶性疾病,特别是急性白血病,因其多为早期分化较差的病理细胞增殖,客观上存在着形态变异、畸形发育,即使是有经验的检验人员仅凭细胞形态也难以避免错误诊断的发生。
如将细胞形态和细胞化学染色相结合,能提高急性白血病的诊断和较正确地对其分型及亚型分型,即为急性白血病FAB 分型。
3.近年来,由于细胞免疫学、细胞遗传学、分子生物学和细胞超微结构等迅速发展,进一步推动了细胞化学染色这一领域的进展,并出现了细胞免疫组织化学染色、细胞超微化学染色等更新、更准确的检验方法与手段,对探讨各类血液疾病发病原理和观察治疗反应及预后起了极其重要的作用。
如将细胞免疫化学、细胞遗传学、分子生物学这三者与细胞化学染色及细胞形态学相结合,对各种白血病进行分型,即成为白血病的MICM分型诊断。
4.细胞化学染色通常应用在各种血液系统疾病特别是对各种急性白血病的诊断与鉴别诊断中。
但白血病细胞因其呈高度的异质性和多态性,有时即使是同一类型的白血病也可在细胞形态、细胞化学染色结果、细胞免疫表型及分子生物学等方面存在较大的差异。
所以对各类型白血病作一套较完整的细胞化学是补充了单凭形态对细胞辨认的不足。
因此我们在实际工作中若要对各类型白血病作出比较准确的诊断与鉴别诊断,应尽可能采用多项细胞化学染色或双(多)重染色。
细胞化学染⾊细胞化学染⾊检验前⾔细胞化学是细胞和化学相结合的⼀门科学。
细胞化学染⾊是根据化学反应的原理,应⽤涂⽚染⾊的⽅法,观察细胞的化学成分及其变化的重要⽅法。
在病理情况下,⾎细胞的化学成分可发⽣改变。
因此,细胞化学染⾊不仅对研究⾎细胞的代谢活动、⽣理功能,⽽且对⽣理和病理情况下⾎细胞的化学成分的变化、各种类型⾎细胞的鉴别、某些⾎液病的鉴别诊断、疾病的疗效观察以及发病机制的探讨均有重要意义。
研究⾎细胞的化学物质较多,如各种酶类、脂类、糖元、铁等。
下⾯主要介绍⾎液学中常⽤的⼀些细胞化学染⾊⽅法。
瑞⽒染⾊法:瑞⽒染⾊液的配制:瑞⽒染料(粉)1g纯甲醇60ml将染料放在乳钵内加少量甲醇研磨使染料溶解,然后将已溶解得倒⼊洁净的玻璃瓶内,剩下未溶解的再加少量甲醇研磨,如此继续操作,直到全部染料溶解及⽤完甲醇为⽌。
制配好的染液保存于温室中⼀周便可应⽤。
新鲜配制的染液偏碱性,放置后可呈酸性,染液储存愈久染⾊愈好。
缓冲液的配制及其作⽤:1% KH2PO4 (即1g KH2PO4+100ml蒸馏⽔) 30ml1% Na2HPO420ml加蒸馏⽔⾄1000mlPH 6.4~6.8过氧化物酶染⾊⼀、原理:细胞中的过氧化物酶(POX)分解底物过氧化氢(H2O2)产⽣新⽣态氧,后者使联苯胺氧化为联苯胺蓝沉淀⽽定位于POX活性部位。
⼆、过氧化物酶染⾊法染液的配制:(1)联苯胺(Benzidine)0.3g95%⼄醇(Ethye alcohol)99ml36%亚硝基铁氰化钠(Sodium Nitroprusside)1ml (0.36g+1ml蒸馏⽔,置于37℃⽔浴箱中促溶。
)(2)30%mlml过氧化氢溶液:30%双氧⽔,吸取⼀滴约0.05ml放⼊50ml蒸馏⽔内,每次⽤时必须新鲜配制。
三、结果判断:细胞质中有蓝⾊颗粒的为阳性细胞。
四、临床意义:粒细胞中除早期原粒细胞呈阴性反应外,晚期原粒细胞及以后各阶段粒细胞均呈阳性反应,细胞越成熟反应越强。
细胞化学染色细胞化学染色2011年03月02日老三届极品居认真做事,低调做人。
记住该记住的,忘记该忘记的,改变能改变的,接受不能改变的。
一、概述细胞化学是组织学的一个分支,是在细胞形态学的基础上研究细胞的生物化学成分,及其定位、定量及代谢功能状态的学科。
在细胞形态学的基础上,运用化学反应的原理对血细胞内的各种生化组成及其代谢产物(酶类、脂类、糖类、铁、蛋白质、核酸等)作定性、定位、半定量分析的方法。
细胞化学染色临床上主要用于:①辅助判断白血病的细胞类型。
白血病的诊断以形态学为基础,但有时仅采用瑞式染色是难以判断白血病细胞的类型的。
不同的细胞系列,其所含的化学物质成分、含量及分布各不相同,随着细胞的分化阶段及病理生理状态变化,这些物质的含量也会发生相应改变。
因此根据细胞化学染色结果的不同,可推断细胞的所属系列。
因此临床上细胞化学染色成为辅助诊断白血病必要的、有力的手段。
②其他血液系统疾病的诊断和鉴别诊断。
在病理情况下,血细胞的化学物质的成分及含量会发生改变,据此可以辅助疾病的鉴别诊断。
如中性粒细胞碱性磷酸酶染色、铁染色等。
③观察疾病的疗效和预后。
当病理状况纠正后,血细胞的化学物质的成分及含量会发生改变。
④发病机制的研究。
细胞化学染色的基本步骤为固定、显示及复染。
1、固定为了保持细胞结构及化学成分的不变,需要对细胞进行固定。
根据染色的成分不同,选择合适的固定液,使细胞内的蛋白质、酶类、糖等变成不溶性物质。
固定的方法有物理法和化学法,临床常用化学法固定。
物理法包括干燥和火焰固定,化学法包括甲醛、乙醇、甲醇、丙酮等固定。
采用蒸气或液体固定。
(1)蒸气固定:甲醛是常用的固定剂,极易挥发、氧化,常用40%甲醛蒸气固定。
方法为在封闭的玻璃器皿中加入40%甲醛,将涂片血膜朝下,固定5~10分钟。
(2)液体固定:将涂片浸在甲醛、乙醇、甲醇、丙酮等固定液中,也可将两种或两种以上固定液混合,如10%甲醛甲醇液,甲醛丙酮液等。
细胞化学染色名词解释好嘞,今天咱们聊聊细胞化学染色,听起来挺专业吧?别担心,咱们用简单有趣的方式来搞明白它!想象一下,细胞就像一个个小小的宇宙,里面住着各种各样的生物分子,它们有的像明星一样闪闪发光,有的则安静得像在深海里遨游。
可是,眼睛可看不见这些细小的东西,所以咱们需要一些“魔法”,那就是染色技术。
染色其实就是给细胞穿衣服,给它们增添点颜色。
想象一下,细胞本来是透明的,就像一块清水,突然间穿上了五彩斑斓的衣服,哇,那画面美得不要不要的。
细胞化学染色的关键在于,咱们通过不同的染料,把细胞里的一些成分染上颜色,让它们在显微镜下活灵活现。
就好比是给你的照片加滤镜,瞬间变得特别!染色的过程其实也不复杂,先得把细胞从“宿舍”里搬出来,经过一番“洗澡”,然后再涂上染料。
这个染料可不是随便哪个颜色就行,得选对颜色。
比如说,某些染料专门爱上细胞膜,染上后细胞膜就变得鲜亮无比;而有的染料则是对细胞核情有独钟,染上去后,细胞核瞬间成了瞩目的焦点。
哈哈,真是个“爱情故事”!每种染料都有自己的“情缘”,挑对了,细胞就会像明星一样闪耀。
你可能会想,这样染色有什么用呢?嘿嘿,别小看它,染色可是生物研究的好帮手!通过观察染色后的细胞,科学家能更清晰地看出细胞的结构和功能,甚至能发现细胞是否健康。
就像医生给病人做检查,只有通过显微镜看清楚,才能知道细胞是不是“病了”。
染色后的细胞,仿佛在显微镜下开了“演唱会”,各种细节都能看得一清二楚。
还有一点不得不提,染色技术的应用简直是广泛得让人惊讶。
从基础研究到临床诊断,染色都起着至关重要的作用。
比如,癌症的早期筛查就离不开这种技术。
科学家们可以通过染色判断细胞是否发生了变化,早发现早治疗,真是为生命争分夺秒。
想想看,这种技术就像是细胞界的“侦探”,为我们揭开细胞的秘密。
说到这里,可能有小伙伴会问,染色是不是有很多不同的方法呀?当然!这就像调味料一样,适合你的就是最好的。
有些染色方法简单易行,像用水彩画涂鸦;而有些则复杂得像高难度的舞蹈,需要精细的操作和高端的设备。
【收藏】检验科必须掌握的几种细胞化学染色一、细胞化学染色概念:细胞化学染色以细胞形态学为基础,结合运用化学、生物化学、免疫化学等技术,对血细胞的化学成分作定性、定位、半定量分析的方法。
二、细胞化学染色研究的临床应用1、辅助判断急性白血病的类型2、提供诊断与鉴别诊断依据三、细胞化学染色的基本方法:包括固定、显色反应、复染等步骤1、固定:保持细胞结构和化学成分不变。
包括液体固定、蒸汽固定。
2、显色反应通过不同的化学反应,将被检测的物质以稳定的有色沉淀显示出来,显色方法:偶氮偶联法、联苯胺法、普鲁氏蓝反应、过碘酸-雪夫反应、金属沉淀法等。
3、复染使细胞的结构和化学染色结果显示出来。
1.细胞核复染常用苏木素、甲基绿、中性红、沙黄2.细胞质复染常用:伊红、亮绿等。
下边就由小编带领大家了解下在咱们检验工作中常用到的几种染色方法:1:过氧化物酶染色2:特异性酯酶染色3:非特异性酯酶染色4:糖原染色5:中性粒细胞碱性磷酸酶染色6:骨髓铁染色一、髓过氧化物酶染色(POX)POX是中性粒细胞中含量最多的一种蛋白其主要成分是髓过氧化物酶(MPO)。
结果判定:(杆状及分叶呈强阳性是染色成功的标志,阳性颗粒呈蓝绿色或蓝棕色定位于胞浆中。
)临床意义▲正常分布1.粒系:早期原粒阴性,晚期原粒及以下各阶段呈不同程度阳性;嗜碱阴性,嗜酸阳性。
2.单核系:阴性或弱阳性,颗粒细小,弥散分布。
3.淋巴系、红系、巨核系、浆细胞系均为阴性。
判断急性白血病的类型pox计数100个未知细胞(白血病细胞),并计算其阳性率。
Pox阳性率>3%:M3 >M2 > M6>M4 > M1 > M5Pox阳性率<3%:急淋▲鉴别诊断1.急淋与急非淋相鉴别:原幼淋呈阴性,粒细胞及单核细胞呈阳性2.急单与组织细胞白血病和恶组的鉴别:单核细胞呈弱阳性反应,异常组织细胞过氧化物酶呈阴性反应成熟粒细胞过氧化物酶活性变化:1:活性增高:见于再障,感染,急淋,慢淋2:活性减低:见于急粒,慢粒,急单,MDS,放射病及退化性中性粒细胞。