高三生物实验总结打印

1 专题1 实验

第一讲 实验总结

教材中的经典实验（看书）

光和作用的探究历程

生长素的发现

孟德尔实验

肺炎双球菌转化实验

噬菌体浸染细菌实验

2 试剂总结

1、斐林试剂——还原糖（除蔗糖，多糖）——砖红色沉淀（沸水浴）

2、班氏试剂——还原糖（与斐林试剂不同的是可以长期使用）

3、双缩脲试剂——蛋白质——紫色反应

4、苏丹Ⅲ——脂肪——橘黄色（巧计：三黄）

5、苏丹Ⅳ——脂肪——红色

6、质量分数50%酒精——脂肪鉴定时洗去浮色

7、碘——淀粉——蓝色

8、甲基绿——DNA——绿色

9、二苯胺——DNA——蓝色（沸水浴）

10、吡罗红——RNA——红色

11、健那绿——线粒体——蓝绿色

12、溴麝香草酚蓝——CO2——由蓝色变绿在变黄

13、Ca(OH)2——CO2——变浑浊

14、NaOH——吸收二氧化碳

15、重铬酸钾——乙醇——灰绿色（酸性条件）

16、无水乙醇——溶解色素（可用丙酮替代）

17、层析液——分离色素（原理：色素溶解度不同，扩散的速度不同）

18、CaCO3——防止研磨时色素被破坏

19、SiO2——使研磨更充分

20、龙胆紫——染色体着色——紫色

21、醋酸洋红——染色体着色

22、体积分数为15%HCl和95%酒精（1:1）——用于解离根尖（可以杀死细胞）

23、秋水仙素——使染色体加倍（原理：抑制纺锤体的形成，导致染色体不能移向细胞两极从而染色体加倍）

23、冷却的95%酒精——DNA提纯（原理：DNA不溶于酒精）

24、0.14mol/L NaCl——析出DNA（原理：DNA溶解度最小）

25、0.015mol/LNaCl和2 mol/L NaCl——溶解DNA（原理：溶解度大）

3 第二讲、

一、观察类实验

1.实验归类

实验名称 细胞的状态 染色剂 生物材料

观察DNA、RNA

在细胞中的分布 死细胞 甲基绿吡罗红

人的口腔上皮细胞

观察线粒体 活细胞 健那绿

观察细胞的减数分裂 死细胞 无(为固定装片) 蝗虫精母细胞

低温诱导植物染

色体数目的变化 死细胞 改良苯酚品红染液

洋葱根尖细胞

观察细胞的有丝分裂 死细胞 龙胆紫(或醋酸洋红)

观察多种多样的细胞 活或死细胞

无(无需染色) 酵母菌细胞、水绵细胞、叶的保卫细胞、鱼的红细胞等

观察叶绿体 活细胞 藓类的叶(或菠菜叶、黑藻叶)

观察植物细胞的

质壁分离与复原 活细胞 紫色洋葱鳞片叶表皮细胞

说明：

(1)以上实验除了“观察植物细胞的质壁分离与复原”使用低倍镜外，其余均需使用高倍镜。

(2)鉴定类实验中的“脂肪的切片法鉴定”、探究性实验中的“培养液中酵母菌种群数量的动态变化”都需用显微镜观察。

2．显微镜相关的知识

(1)观察：高倍镜使用要诀——先低后高，找移转调

4 (2)放大倍数与镜头长度及细胞数目的关系归纳

①物像放大倍数＝目镜的放大倍数×物镜的放大倍数。

②目镜越短，放大倍数越大；物镜越短，放大倍数越小，与玻片距离越远。

③低倍镜下视野中：细胞数多、细胞体积小、视野明亮。高倍镜下视野中：细胞数少、细胞体积大、视野较暗。

④放大倍数的变化与视野中的细胞数量变化的关系：

第一种情况：一行细胞数量的变化，可根据放大倍数与视野成反比的规

律计算。

第二种情况：圆形视野范围内细胞数量的变化，可根据看到的实物范围

与放大倍数的平方成反比的规律计算。

(3)视野中异物的位置判断

只有三种可能——在载玻片的标本上、在目镜上、在物镜上。判断方法如下：

①移动玻片：污点随载玻片的移动而移动，则其位于载玻片的标本上。

②换目镜：污点不随载玻片移动，换目镜后消失，则其位于目镜上。

③换物镜：污点不随载玻片移动，换目镜后不消失，但换物镜后消失，则其位于物镜上。

注意事项：

1．注意取材问题

(1)观察DNA、RNA在细胞中的分布不能选用哺乳动物成熟的红细胞(无细胞核，也就几乎不含DNA、RNA)；

(2)不能用观察叶绿体的材料来观察线粒体(叶绿体中的色素颜色会掩盖健那绿染色后的颜色变化)；

(3)观察细胞的有丝分裂或低温诱导植物染色体数目的变化时，应注意观察呈正方形的根尖分生区细胞(长方形的细胞可能是根尖的伸长区或成熟区的细胞，没有分裂能力)；

(4)观察细胞的减数分裂所选的材料可以是动物的精巢和植物的雄蕊，而不宜选用动物的卵巢和植物的雌蕊(雄配子的产生数量远远多于雌配子，更容易观察到减数分裂的细胞)；

(5)观察叶绿体时，若选用菠菜叶则取稍带些叶肉的下表皮(靠近下表皮的叶肉细胞中的叶绿体较大而数目较少)；

(6)观察植物细胞的质壁分离与复原应选取成熟的植物细胞(含有大的液泡)。

5 2．玻片标本的制作

适用于显微观察，凡需在显微镜下观察的生物材料，必须先制成玻 片标本。包括：

（1）压片法（如洋葱根尖细胞的有丝分裂）。压片的一般过程是：取材→固定→解离(对不易分散的材料用盐酸处理)→漂洗→染色→压 片→观察。

（2）装片法（如高倍镜下观察叶绿体和细胞质的流动）。其过程是：将材料在载玻片水滴中展平→放盖玻片时应从一侧慢慢盖在水滴上，防止气泡产生→对材料染色或改变溶液浓度→观察。

【例题1】回答下列与细胞有关的实验问题。

(1)下列4项实验中，需保持细胞生理活性的有________(填序号)。

①观察叶绿体和原生质的流动 ②观察洋葱鳞片叶内表皮细胞中DNA的分布③探究酵母菌的呼吸方式

④红细胞中血红蛋白的提取和分离

(2)按下面步骤进行质壁分离实验。

步骤一：在洁净的载玻片中央加一滴清水，取一片藓类小叶，盖上盖玻片。

步骤二：从盖玻片一侧滴入0.3 g/mL的蔗糖溶液，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。这样重复几次，使盖玻片下面的藓类小叶浸润在0.3 g/mL的蔗糖溶液中。

步骤三：在显微镜下观察，结果如图所，①图中A、B处的颜色分别

是________________。

②如果上述实验步骤二中从盖玻片的一侧滴入的是加有伊红(植物细胞不吸收的红色染料)的0.3 g/mL的蔗糖溶液，则在显微镜下观察到A、B处颜色分别是________________。

③如果将步骤二中浸润在0.3 g/mL的蔗糖溶液中的藓类小叶的装片，放在80℃条件下处理一段时间(装片中的藓类小叶保持在0.3 g/mL的蔗糖溶液中)。在显微镜下清晰地观察到细胞结构后，为更准确地判断A处颜色，对显微镜的操作方法是______________、_____________________。如果A处呈绿色，可能的原因是______________________________________________________________。

答案：(1)①③ (2)①无色、绿色 ②红色、绿色 ③改变光圈大小调节反光镜(电光源亮度)

高温下细胞膜、叶绿体膜失去选择透过性，叶绿素等色素进入A处

6 二 鉴定类实验

1． 实验归类

实验名称 鉴定对象 试剂 颜色 生物材料 备注

淀粉的鉴定 淀粉 碘液 蓝色 脱色的叶片 无

还原糖的鉴定 还原糖 斐林试剂 砖红色沉淀 苹果或梨的匀浆等 甲乙液现混现用、水浴加热

脂肪的鉴定 脂肪 苏丹Ⅲ(或Ⅳ)

染色 橘黄(或红)色 花生种切片 需用高倍镜观察

蛋白质的鉴定 蛋白质 双缩脲试剂 紫色 豆浆、稀蛋清等 先加A液，后加B液，摇匀

尿糖的检测 葡萄糖 葡萄糖试纸 有色 水、葡萄糖溶液、三份模拟“尿样” 无

叶绿体中色素

的提取和分离 四种色素 提取液：

无水乙醇；

分离液：

层析液 胡萝卜素：橙黄色；叶黄素：黄色；叶绿素a：蓝绿色；叶绿素b：黄绿色 新鲜的绿叶

(如菠菜叶) 加入二氧化硅是为了研磨得更充分；碳酸钙可防止研磨中色素被破坏

2.生物学中常用的试剂和药品

试剂 鉴定(染色)的物质(结构) 是否加热 颜色 注意事项

斐林试剂 还原糖 是 砖红色 现用现配

双缩脲试剂 蛋白质 否 紫色 A液与B液不能混合，需先滴加A液，再滴加B液

苏丹Ⅲ染液 脂肪 否 橘黄色

苏丹Ⅳ染 脂肪 否 红色

甲基绿 DNA 否 绿色 DNA、RNA同时存在时要混合使用且现用现配 7 吡罗红 RNA 否 红色

健那绿 线粒体 否 蓝绿色

龙胆紫溶液

(醋酸洋红) 染色质(体) 否 深紫色

(红色) 染色前必须漂洗彻底

注意问题

(1)有关蛋白质的鉴定

①若用蛋清进行蛋白质鉴定时，需将鸡蛋清用水稀释，通常是0.5 mL蛋白液加入5 mL水，搅拌均匀。如果蛋白液稀释程度不够，与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管的内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不容易刷洗干净。

②鉴定蛋白质时，向样液中加入2 mL双缩脲试剂A摇匀，再向样液中加入3～4滴双缩脲试剂B摇匀。其中双缩脲试剂B不能过量，因为过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，从而掩盖生成的紫色。

(2)叶绿体中色素的提取和分离

①区分色素提取和分离的原理：色素提取的原理——无水乙醇提取法；色素分离的原理——纸层析法。

②注意事项：a.滤液细线要画得细且直，以防止色素带重叠而影响分离效果；待滤液干燥后要再画一两次，目的是积累更多的色素，使分离后的色素带明显。b.分离色素时，层析液不能没及滤液细线，以防止色素溶解于层析液中而无法分离。

【例题2】.对下表中所列待测物质的检测，所选用的试剂及预期结果都正确的是( )

待测物质 检测试剂 预期显色结果

① DNA 甲基绿 红色

② 脂肪 苏丹Ⅲ 橘黄色

③ 淀粉 斐林试剂 蓝色

④ 蛋白质 双缩脲试剂 紫色

A.①③ B．②③ C．①④ D．②④