禽流感病毒研究

《春季传染病防治》研究报告

——禽流感病毒

陈静

化工与制药专业 化药1103班 学号110150094

指导老师 刘雪凌讲师

摘 要

禽流感病毒属于正黏病毒科，RNA病毒。自从1997年发现可以感染人类致死以来，引起世界极大的关注。禽流感病毒的基因组由8条独立的单股负链组成，分别编码不同的蛋白质，具有高度的重组性。其中NA和HA变异性最强，也是划分病毒不同亚型的依据。

很多研究表明，H5N1型高致病性禽流感病毒基因与1918年的流感病毒有很大的相似性，也暗示了流感病毒进化的一个途径：禽流感——猪流感——人流感。现阶段预防和治疗的主要方法是抗病毒药物和疫苗，其中，疫苗比较有效而且几乎没有副作用。本文概述了禽流感的概念及生物学分类，感染的临床症状、防治措施，及其历史发展与近年来的现状。还从高致病性禽流感病毒的基因组研究，H5N1 型禽流感病毒可能的起源及其与人的关系，以及针对高致病性禽流感的疫苗研究方面进行了阐述。

关键词：禽流感 感染 进化 人流感

目 录

前 言...................................................1

第1章 课题研究价值.......................................

第1.1节 选题背景.....................................

第1.2节 研究目的与研究方法..........................

第2章 禽流感病毒........................................

第2.1节 禽流感病毒的基本概念........................

第2.2节 禽流感病毒特征.............................

第3章 培养基的制备.......................................

第3.1节 禽流感病毒的采集分离纯培养...................

第3.2节 禽流感病毒分离...............................

第4章 禽流感病毒的显微镜下形态............................

第5章 禽流感病毒的生长繁殖方式...........................

第6章 禽流感病毒的鉴别方式................................

第7章 禽流感病毒是怎么传染到人的 .............................

第7.1节 禽流感诊断技术.................................

第7.2节 禽流感病毒是如何传染到人的.....................

第8章 禽流感药物研发...................................

第8.1节 药物研发理由...................................

第8.2节 新药研发初现曙光...............................

第9章 基因工程制药 ...........................................

第9.1节 现代生物技术基因工程...........................

第9.2节 我国基因工程制药产业现状分析................... 第10章 微生物对中药发酵的作用..........................第10章 微生物对中药发酵的作用..........................

第10.1节微生物类群为中药发酵提供了充足的选择余地......

第10.2节 发酵制药的意义...............................

结 论 ........................................................

参考文献 ......................................................

前 言

禽流感是禽流行性感冒（Avian Influenza，AI）的简称，这是一种由甲型流感病毒的一种亚型引起的传染性疾病综合征，被国际兽疫局定为Ａ类传染病，又称真性鸡瘟或欧洲鸡瘟。禽流感是A型流感病毒引起的，对于鸟类的一种感染性疾病[1]。由于它可能对所有的鸟类都有感染作用，有些鸟类即使携带了这种病毒也不会产生特定的表状。现阶段科学界讨论最多的是高致病性禽流感，高致病性的病毒最初是1878年在意大利发现，具有突然发作，传染迅速的特点，感染的鸟类一般在48小时内死亡率达到近100%，被称为埃博拉病毒。

禽流感病毒基因组由8个负链的单链RNA片段组成。这8个片段编码10个病毒蛋白，其中8个是病毒粒子的组成成分（HA、NA、NP、M1、M2、PB1、PB2和PA），另两个是分子质量最小的RNA片段，编码两个非结构蛋白——NS1和NS2。NS1与胞浆包含体有关，但对NS1和NS2的功能目前尚不清楚。现在已经获得了包括H3、H5和H7在内的几个禽流感病毒亚型HA基因的全部序列以及所有14个血凝素基因的部分序列。

禽流感病毒一般为球形，直径为80～120纳米，但也常有同样直径的丝状形态，长短不一。病毒表面有10～12纳米的密集钉状物或纤突覆盖，病毒囊膜内有螺旋形核衣壳。两种不同形状的表面钉状物是HA（棒状三聚体）和NA（蘑菇形四聚体）。

禽流感病毒粒子大约由0.8%～1.1%的RNA，70%～75%的蛋白质，20%～24%的脂质和5%～8%的碳水化合物组成。脂质位于病毒的膜内，大部分为磷脂，还有少量的胆固醇和糖脂。几种碳水化合物包括核糖(在RNA中)、半乳糖、甘露糖、墨角藻糖和氨基葡糖，在病毒粒子中主要以糖蛋白或糖脂的形式存在。病毒蛋白及潜在的糖基化位点是病毒基因组特异的，但病毒膜的糖蛋白或糖类链的脂质和碳水化合物链的成分，是由宿主细胞确定的。

感染人的禽流感病毒亚型主要为H5N1、H9N2、H7N7，其中感染H5N1的患者病情重，病死率高。研究表明，原本为低致病性禽流感病毒株（H5N2、H7N7、H9N2），可经6～9个月禽间流行的迅速变异而成为高致病性毒株（H5N1）。

第一章 课题研究价值

第1.1节 选题背景

近年来，禽流感（Avian Influenza）先后在亚洲等一些国家局部爆发，逐渐由东南亚向欧洲扩散，日趋严重，引起了世界各国的高度重视。世界卫生组织（WHO）2005 年10 月24 日公布最新人类感染H5N1 禽流感病例，自2003 年底以来，共有121 件病例，62 未死亡。到现在为止，约有1.5 亿只禽鸟因病死亡，造成的直接经济损失高达30 亿关元。当前，禽流感的发生和流行，不但造成了巨大的经济损失，而且危及到人类身体健康，禽流感的防控已经成为全球瞩目的焦点之一。本文通过对禽流感病毒的病原治病的分子基础、流行病学、临床特征及防治措施等方面的研究现状进行综述，旨在了解感染禽流感的研究进展，为人感染禽流感的有效防控提供科学依据。

第1.2节 研究目的与研究方法

1.2.1 研究目的

禽流感（Avian Influenza，AI），是由禽流感病毒（Avian Influenza

Virus, AIV）引起的禽类的一种烈性传染病.由于AI 具有临床症状复杂，病死率高，病原体亚型多以及容易发生抗原漂移和转换等特点，使其防治难度加大，相应地造成了严重的经济损失，影响畜禽业的发展。1997 年在香港发生的AIV

感染人的事件，突出了其公共卫生意义。本文就AI 的病原学，流行病学，发病机制，临床表现与诊断，防治等方面进行综述，目的是在丰富专业数据库的同时，增加公众对AI 的大体了解，便于普及AI 的预防知识和应急处理。

1.2.2 研究方法

1.2.2.1宿主中流感病毒受体的研究

通过对多种动物中H5N1毒株的分离及对多种动物血清中抗H5N1的研究, 已发现除禽以外, 多种哺乳类动物也可感染, 其中包括虎、豹、猪、犬等。

日本学者Kida认为被AIV感染者中在其咽喉部的细胞具有一种多糖受体〔a一2,3相连的唾液酸(SA)受体糖链〕。这一种受体与多数人的主要受体a一2,3相连的SA不同, a一2,6糖链与AIV结合, 导致病毒人侵并复制, 而a一2,6受体仅与人流感病毒结合。目前正在越南寻找经感染后的存活者进行受体研究, 希望发现不同比例a一2,3与a一2,6 , 以证实这一推断是合理的。

Ibricevic等对小鼠及人肺细胞受体进行了模拟试验。通过将呼吸道上皮细胞进行培养, 并实施鼠体内感染, 他们发现在人、鼠中, a一2,3连接的SA受体在肺上皮细胞及纤毛呼吸道细胞中均存在。但是a一2, 6相连的受体在鼠中并不表达, 因此有些流感病毒株不会感染鼠。在人呼吸道上皮细胞,a—2, 6相连的SA不仅表达而且在纤毛细胞及杯状细胞中都具有功能, 可以与相应的病毒相结合。因此,鼠动物模型可用于研究仅与a一2,3SA结合的毒株,而分化的人呼吸道上细胞培养可用于评估一些毒株是否容易感染人的一种工具。

1.2.2.2诊断AIV技术

为建立可靠又准确的诊断的方法,Das等建立了一个内参阳性对照设计是应用AIV的基质基因为靶, 可用于实时聚合酶链反应或反转录一聚合酶链反应。应用后一方法在血、肾、肺、脾、肝中发现有对这一技术的抑制物。应用冻干珠子则可提高检测的敏感性。应用这一方法对禽类AIV分离的阳性符合率可达97%—100%, 对泄殖腔病毒分离阳性符合率可达81%。Di等则报道了在禽中除用RRT_PCR外, 用1个阴探针进一步排除假阳性结果, 可用于现场标本的检测。

图1.1 禽流感病毒

第二章 禽流感病毒

第2.1节 禽流感的基本概念

2.1.1 禽流感病毒概念