真菌d葡聚糖产生的原理
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真菌(1-3)--D葡散糖检测反应机理之阳早格格创做暂时临床上随着广谱抗死素、百般免疫压造剂、移植插管等新技能的没有竭死少应用,其真菌熏染越收是深部真菌熏染出现明隐降下趋势,而动做临床诊疗的细菌培植其阳性率很矮,且检测周期少,没有克没有及符合临床治疗诊疗的央供,果此迫切需要赶快、准确的检测要领.果此对于血液中的早期(1-3)--D葡散糖赶快定量检测,将对于临床对于症治疗具备很深的现真意思.人体血浆中(1-3)--D葡散糖赶快检测对于早期诊疗深部真菌熏染具备要害的参照价格.该考查的基根源基本理是试剂中含凝固酶本及凝固蛋黑本的热冻搞燥品. 正在相宜条件下, 微量(1-3)--D葡散糖能激活试剂中的凝固酶本爆收凝集反应,通过测定凝集反应历程中的浊度变更进而定量检测血浆中(1-3)--D葡散糖含量.内毒素定量检测的反应机理细菌内毒素动做革兰阳性菌细胞壁中层中的脂多糖成份(LPS), 具备多种的死物活性, 微量的内毒素加进肌体将会出现收热、血压落矮、热战、引起DIC、内毒素败血症等一系列临床反应, 果此对于血液中的早期内毒素赶快定量检测,将对于临床对于症治疗具备很深的现真意思.人体血浆中内毒素检测对于分别诊疗革兰阳性杆菌熏染具备要害的参照价格.反招考剂中含凝固酶本及凝固蛋黑本的热冻搞燥品.正在相宜条件下, 微量革蓝氏阳性菌内毒素能激活试剂中的凝固酶本爆收凝集反应产死凝胶,通过测定正在产死凝胶历程中的浊度变更进而定量检测血浆中革蓝氏阳性菌内毒素.一、检测体液内毒素的临床意思由革兰氏阳性菌所引起的内毒素血症及脓毒血症是暂时临床上的主要牺牲本果之一.正在百般抗死素杀灭革兰氏阳性菌的共时,也会使后者释搁出一定数量的内毒素,进而加沉内毒素血症.早期诊疗的细菌教培植需时少,而且由于抗死素的应用,其培植阳性率矮.早期的数小时内动做临床上抢救熏染性戚克的闭键,临床医师仅能根据临床特性与体征估计病源教而戴有一定的盲目性,果此,早期体液中内毒素的粗确、赶快定量检测及相映的对于症治疗便隐得格中要害.往日的内毒素检测能定性而没有克没有及定量,而且个体好别战真验室间的缺面较大,无法成为有价格的临床考验名目,北京金山川公司研造的MB-80微死物赶快动向检测系统能定量检测体液内毒素的含量,经海内多家单位使用现已正在其余省市启初动做临床考验名目举止支费.该仪器检测内毒素具备截止宁静、检测快(1小时)、沉复性好、准确率下、分歧的检测人员支配引起的缺面小等便宜.内毒素定量检测正在沉症病人、熏染病人(如脑膜炎)以及其余有宽沉创伤等徐病的病人均有要害的临床意思,那使得内毒素钻研向去是热面,但是往日由于要领的节造,内毒素检测也是临床的易面.两、深部真菌检测的临床意思动向定量检测体液中真菌含量是应用MB-80微死物赶快动向检测系统举止的.该要领不妨赶快诊疗用惯例要领易以确诊的深部真菌熏染,应用MB-80检测真菌,其检出率近近下于保守的血培植要领,使病本体的监测越收准确,更赶快,MB-80系统具备很下的敏捷度战劣同的数据分解功能,检测矮限5pg/ml的真菌1-3--β-D葡散糖量.果连年去,一些罕睹的条件致病真菌引起深部熏染,临床沉症病人,特天是广谱抗死素战化疗药物的应用,真菌熏染已成为熏染引导牺牲的要害本果之一,而有钻研创造早期创造并赋予适合的治疗,真菌熏染不妨较好天得到统造,那便央供一种能赶快决定有无深部真菌熏染的要领,果系统抗真菌药物种类较少,抗菌谱较广,没有果真菌种类而同.当检测到标本中葡散糖含量较下时,马上给予系统造疗,没有必等审定出种属,可则会贻误最好治疗时机.而惯例真菌血培植需时少,审定历程搀纯,阳性率矮,没有克没有及赶快提供粗确临床指示.MB-80应用试剂盒及仪器检测,能赶快天检测出体液中真菌1-3-β-D葡散糖的本质含量,对于沉症病人,有着非常要害的临床意思,对于少久住院病人应用广谱抗死物,肿瘤化疗等等病人,必然戴去一定的临床效率.三、MB-80微死物赶快检测系统技能指标及功能1.敏捷度:最小检出值1pg/ml;2.粗稀度:批间好CV<10%;3.准确性:回支率75-125%;4.尺度直线范畴:1-9000pg/ml;5.相闭系数r:千万于值≥0;6.检测时间:60分钟.可定量检测人体体液(血液、尿液、脑积液、胸积液、背火等)中细菌内毒素、深部真菌的含量,为临床医死早期确诊内毒素血症及真菌熏染症提供有价格的参照依据.一、MB-80微死物赶快定量检测系统本理采与光电变换本理,通过测定死物试剂与微死物细胞的特定身分反应爆收的浊度变更,修坐反当令间(T)与微死物含量(C)闭系的尺度直线,进而定量测定样品中细菌内毒素、真菌葡散糖的含量.二、MB-80微死物赶快定量检测系统用途1.人体体液(血液、尿液、血浑、背火、脑脊液等)细菌内毒素、真菌葡散糖、革兰阳性菌肽散糖定量检测;2.人用及兽用注射药品、死物造品及调理器械(一次性血袋、血小板的一次性管讲、一次性注射器、消毒棉棒、注射死理盐火等)的细菌内毒素(热本)的定量检测;3.血小板保存液、黑细胞保存液及血液造品中的细菌内毒素、真菌葡散糖、革兰阳性菌肽散糖定量检测;三、MB-80微死物动向赶快检测测定系统检测要领1.动向比浊时间分解法2.动向隐色时间分解法3.凝胶法。
葡聚糖的原理你有没有过这种体验,身体像被抽干了力气,干啥都提不起劲,免疫力好像也跟着 “开小差” 了,生病频繁得让人头疼?这时候,要是有一种神奇的 “能量小卫士”,能钻进身体里,帮咱们把身体状态调整得棒棒哒,那可就太好了!嘿,葡聚糖有时候就能扮演这样的角色,今儿咱就唠唠它到底是啥原理,咋就这么厉害。
咱先瞅瞅葡聚糖是啥模样。
它是一种多糖,就像由好多小小的 “糖积木” 拼接而成,这些 “糖积木” 手拉手,组成了长长的链条,看着普普通通,本事可不小。
葡聚糖在大自然里分布还挺广,像酵母、燕麦这些食物里都有它的身影,默默藏在里面,等待被人们发现它的神奇。
当葡聚糖进入人体后,就好比一群训练有素的小战士奔赴战场。
它们的第一个目标就是咱们的免疫系统,免疫系统就像身体的 “防御城堡”,里面住着好多免疫细胞,像白细胞这些,时刻警惕着外敌入侵。
葡聚糖就像给免疫细胞吹响了 “集结号”,刺激它们变得更加活跃。
你想啊,免疫细胞本来在城堡里按部就班地巡逻,葡聚糖一来,它们立马精神抖擞,干劲十足,这是不是有点像平静的校园里突然来了个体育老师,同学们一下子都活跃起来,准备运动啦?再看看葡聚糖对巨噬细胞的作用,巨噬细胞可是免疫系统里的 “清道夫”,专门吞噬那些入侵身体的病菌、异物。
葡聚糖就像给巨噬细胞戴上了一副 “超强眼镜”,让它们识别病菌的能力大大提升,而且还像给它们注入了 “能量药水”,吞噬能力也变强了。
原本巨噬细胞可能只能吃掉几个病菌,有了葡聚糖助力,好家伙,一口气能吞掉一大批,就像原本只能搬几块小砖头的工人,突然变得力大无穷,能扛起一大堆建筑材料,病菌哪还敢在身体里嚣张?还有在肠道里,葡聚糖也能发挥大作用。
肠道就像人体的 “营养加工厂”,里面住着好多有益菌,它们帮忙消化食物、吸收营养。
葡聚糖就像给这些有益菌送来了 “大礼包”,是它们爱吃的 “食物”,有益菌吃了葡聚糖,数量增多,活力增强,肠道这个加工厂就能更高效地运转,咱们吸收营养不就更顺畅了?就像给工厂里的工人发了奖金,大家干活更带劲,产品产量蹭蹭上涨,身体也跟着受益。
真菌(1-3)-?-D葡聚糖检测反应机理目前临床上随着广谱抗生素、各类免疫抑制剂、移植插管等新技术的不断发展应用,其真菌感染尤其是深部真菌感染出现明显上升趋势,而作为临床诊断的细菌培养其阳性率很低,且检测周期长,不能适应临床治疗诊断的要求,因此迫切需要快速、准确的检测方法.因此对血液中的早期(1-3)-?-D 葡聚糖快速定量检测,将对临床对症治疗具有很深的现实意义。
人体血浆中(1-3)-?-D葡聚糖快速检测对早期诊断深部真菌感染具有重要的参考价值。
该试验的基本原理是试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品. 在适宜条件下, 微量(1-3)-?-D葡聚糖能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应,通过测定凝集反应过程中的浊度变化从而定量检测血浆中(1-3)-?-D葡聚糖含量.内毒素定量检测的反应机理细菌内毒素作为革兰阴性菌细胞壁外层中的脂多糖成份(LPS), 具有多种的生物活性, 微量的内毒素进入机体将会出现发热、血压降低、寒战、引起DIC、内毒素败血症等一系列临床反应, 因此对血液中的早期内毒素快速定量检测,将对临床对症治疗具有很深的现实意义。
人体血浆中内毒素检测对分别诊断革兰阴性杆菌感染具有重要的参考价值。
反应试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品. 在适宜条件下, 微量革蓝氏阴性菌内毒素能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应形成凝胶,通过测定在形成凝胶过程中的浊度变化从而定量检测血浆中革蓝氏阴性菌内毒素.一、检测体液内毒素的临床意义由革兰氏阴性菌所引起的内毒素血症及脓毒血症是目前临床上的主要死亡原因之一。
在各类抗生素杀灭革兰氏阴性菌的同时,也会使后者释放出一定数量的内毒素,从而加重内毒素血症。
早期诊断的细菌学培养需时长,而且由于抗生素的应用,其培养阳性率低。
早期的数小时内作为临床上抢救感染性休克的关键,临床医师仅能根据临床特征与体征推断病源学而带有一定的盲目性,因此,早期体液中内毒素的正确、快速定量检测及相应的对症治疗就显得格外重要。
真菌β-D-葡聚糖检测与真菌沾染诊断一.概述经研讨标明,(1-3)-β-D-葡聚糖是一种普遍消失于真菌细胞壁的抗原成分, 占其湿润重量的80%~90%,其它微生物.动物及人的细胞成分和细胞外液均不含有.深部真菌沾染患者中血浆(1-3)-β-D-葡聚糖含量增高,两者消失相干性.当真菌进入人体血液或深部组织后,经吞噬细胞的吞噬.消化代谢后,(1-3)-β-D葡聚糖可从胞壁中释放出来,从而使血液或其它体液中(1-3)-β-D葡聚糖含量增高.当真菌在体内含量削减时,机体免疫可敏捷对其消除.而在浅部真菌沾染中,(1-3)-β-D葡聚糖未被释放出来,故其在体液中的量不增高,它在血液及无菌体液中的消失可以很大程度上视为IFI(深部真菌沾染)的标记.二.深部真菌沾染的诊治近年来,因为造血干细胞移植.实体器官移植的普遍开展.高强度免疫克制剂和大剂量化疗药物的运用以及各类导管的体内介入.留置等,临床上侵袭性真菌沾染(invasive fungal infections,IFI)的患病率显著上升.IFI也日益成为导致骨髓及器官移植受者.接收化疗的恶性血液病和恶性肿瘤患者.AIDS以及其他危宿疾患者的轻微并发症及重要逝世亡原因之一.因为缺乏有用的早期诊断手腕,深部真菌沾染病逝世率居高不下.对深部真菌沾染治疗成败的症结在于早期诊断,及早用药治疗.通例病原学诊断“微生物造就”可为临床供给直接的诊断根据,但其造就办法耗时长(4-7天),不合适用作早期诊断.并且,跟着光谱抗生素.抗菌药物的大量运用,使得造就的阳性率极低.经常运用的免疫学办法,也因为抗原抗体反响的特异性差,往往对某一疑似真菌沾染患者要作多种真菌抗原或抗体检测,既费时又不经济,并且当所用药盒的抗原谱或抗体谱不全时也极易造成漏诊.对一些以往接触过响应真菌抗原的个别,作抗体检测时还会消失阳性反响,因而反抗体的检测往往请求作动态不雅察才干作出诊断,期末属性较差.有研讨报导血清葡聚糖在念珠菌血症时显著升高,将其用于念珠菌血症的早期诊断显著优于传统的造就法和血清学诊断实验.固然检测(1-3)-β-D葡聚糖只能提醒有无真菌侵袭性沾染,不克不及肯定为何种真菌,但也可能转化为一种优势.因近年来,一些罕有的前提致病真菌也可引起深部沾染,这就请求一种能敏捷肯定有无深部真菌沾染的办法.因体系抗真菌药物种类较少,抗菌谱较广,且不因真菌种类而异,当检测到标本中的(1-3)-β-D葡聚糖含量较高时,可赐与以体系治疗,不必耗时等待判定出种属,不然会贻误最佳治疗机会.是以,血清(1-3)-β-D葡聚糖含量检测不掉为一种适用的真菌沾染早期诊断办法.并且,相干研讨标明,(1-3)-β-D葡聚糖程度在确诊IFI患者的血清中消失中断升高,而跟着药物的运用,对药物迟钝者可很快消失(1-3)-β-D葡聚糖程度降低及转阴,而药物治疗无效人群(1-3)-β-D葡聚糖值无显著转变.是以,(1-3)-β-D葡聚糖可以用来断定药物的疗效,以协助临床医师实时进行药物种类及剂量的调剂.经由过程对人体体液进行(1-3)-β-D葡聚糖含量检测,可帮忙断定人体是否已被真菌沾染.对高危患者的样本进行中断剖析,可为临床检测供给入侵真菌的量值或阴性预示值,为临床诊断和治疗供给了一种快速检讨办法,对进步病人治疗治愈率和指点大夫合理用药,以及促进我国医疗事业的成长具有重要意义.三.国表里相干成长情形今朝,临床上诊断侵袭性真菌沾染(invasive fungal infections,IFI)的办法重要由宿主身分.临床特点.微生物学检讨和组织病理学4部分构成.血液.支气管肺泡灌洗液中的各类真菌PCR测定,是诊断IFI的微生物学的检测办法.但传统真菌判定办法都因周期长.血造就率低而难于快速诊断.研讨者也逐渐将早期诊断的留意力转向树立血清学办法来检测真菌菌体成分或代谢产品,如测定白念珠菌的甘露聚糖.烯醇化酶.D-阿拉伯糖醇等.鉴于深部真菌沾染时,经吞噬细胞处理,菌胞壁降解成分大量入血,90年月初,有学者树立了以检测血浆或血清中真菌胞壁成分曲霉半乳甘露聚糖抗原(GM)和(1-3)-β-D葡聚糖抗原[(1-3)-β-D-gluean,BG]的含量, 用于早期诊断深部真菌沾染具有较好敏锐度和特异性,且敏捷.轻便,并能提醒抗真菌药物治疗.BG检测(也称G实验)是一种新的真菌抗原检测办法,重要由以下研讨机构开展,日本东京Wako纯化学研讨所,Seikagaku Kogyo公司,Ma-ruha公司和美国Cape Code协会.个中Cape Code协会研制的Fungitell试剂盒已被美国FDA同意用于血液病.肿瘤等免疫受损的患者IFI的诊断.BG是酵母和丝状真菌细胞壁的多聚糖成分,作为真菌抗原具有较高的特异性,原核生物.病毒和人体细胞都不消失这种多聚糖.是以,它在血液及无菌体液中的消失可以很大程度上视为IFI的标记.真菌细胞壁的重要成分BG的比色法检测试剂盒已普遍用于临床.美国FDA已于2003年同意该实验用于可疑IFI患者血清定性检测.2008年欧洲肿瘤研讨治疗组织(EORTC)IFI合作组(IFICG)和国度过敏及沾染类疾病研讨(NIAID)真菌病研讨组(MSG)将G实验成果列为诊断IFI的诊断尺度,但试剂盒必须是FDA认证的.国外多个研讨中间为评估该实验的特点已做了大量的回想性查询拜访,证实其迟钝度.特异度及临床一致性均较好.编辑: gaowei2010 起源:丁喷鼻园。
一、概述经研究标明, (1-3)-β-D-葡聚糖是一种广泛存在于真菌细胞壁的抗原成份, 占其干燥重量的80%~90%, 其它微生物、植物及人的细胞成份和细胞外液均不含有.深部真菌感染患者中血浆(1-3)-β-D-葡聚糖含量增高,两者存在相关性.认真菌进入人体血液或深部组织后, 经吞噬细胞的吞噬、消化代谢后, (1-3)-β-D葡聚糖可从胞壁中释放出来, 从而使血液或其它体液中(1-3)-β-D葡聚糖含量增高.认真菌在体内含量减少时, 机体免疫可迅速对其清除.而在浅部真菌感染中, (1-3)-β-D葡聚糖未被释放出来, 故其在体液中的量不增高, 它在血液及无菌体液中的存在可以很年夜水平上视为IFI(深部真菌感染)的标识表记标帜.二、深部真菌感染的诊治近年来, 由于造血干细胞移植、实体器官移植的广泛开展、高强度免疫抑制剂和年夜剂量化疗药物的应用以及各种导管的体内介入、留置等, 临床上侵袭性真菌感染(invasive fungal infections, IFI)的患病率明显上升.IFI也日益成为招致骨髓及器官移植受者、接受化疗的恶性血液病和恶性肿瘤患者、AIDS以及其他危重病患者的严重并发症及重要死亡原因之一.由于缺少有效的早期诊断手段, 深部真菌感染病死率居高不下.对深部真菌感染治疗成败的关键在于早期诊断, 及早用药治疗.惯例病原学诊断“微生物培养”可为临床提供直接的诊断依据, 但其培养方法耗时长(4-7天), 不适宜用作早期诊断.而且, 随着光谱抗生素、抗菌药物的年夜量应用, 使得培养的阳性率极低.经常使用的免疫学方法, 也由于抗原抗体反应的特异性差, 往往对某一疑似真菌感染患者要作多种真菌抗原或抗体检测, 既费时又不经济, 而且当所用药盒的抗原谱或抗体谱不全时也极易造成漏诊.对一些以往接触过相应真菌抗原的个体, 作抗体检测时还会呈现阳性反应, 因而对立体的检测往往要求作静态观察才华作出诊断, 期末属性较差.有研究报道血清葡聚糖在念珠菌血症时明显升高, 将其用于念珠菌血症的早期诊断明显优于传统的培养法和血清学诊断试验.虽然检测(1-3)-β-D葡聚糖只能提示有无真菌侵袭性感染, 不能确定为何种真菌, 但也可能转化为一种优势.因近年来, 一些罕见的条件致病真菌也可引起深部感染, 这就要求一种能迅速确定有无深部真菌感染的方法.因系统抗真菌药物种类较少, 抗菌谱较广, 且不因真菌种类而异, 当检测到标本中的(1-3)-β-D葡聚糖含量较高时, 可给予以系统治疗, 不用耗时等候鉴定出种属, 否则会贻误最佳治疗时机.因此, 血清(1-3)-β-D葡聚糖含量检测不失为一种实用的真菌感染早期诊断方法.而且, 相关研究标明, (1-3)-β-D葡聚糖水平在确诊IFI患者的血清中呈现继续升高, 而随着药物的使用, 对药物敏感者可很快呈现(1-3)-β-D葡聚糖水平下降及转阴,而药物治疗无效人群(1-3)-β-D葡聚糖值无明显改变.因此,(1-3)-β-D葡聚糖可以用来判断药物的疗效, 以协助临床医师及时进行药物种类及剂量的调整.通过对人体体液进行(1-3)-β-D葡聚糖含量检测, 可帮手判断人体是否已被真菌感染.对高危患者的样本进行连续分析, 可为临床检测提供入侵真菌的量值或阴性预示值, 为临床诊断和治疗提供了一种快速检查方法, 对提高病人治疗治愈率和指导医生合理用药, 以及增进我国医疗事业的发展具有重要意义.三、国内外相关发展情况目前, 临床上诊断侵袭性真菌感染(invasive fungal infections, IFI)的方法主要由宿主因素、临床特征、微生物学检查和组织病理学4部份组成.血液、支气管肺泡灌洗液中的各种真菌PCR测定, 是诊断IFI的微生物学的检测方法.但传统真菌鉴定方法都因周期长、血培养率低而难于快速诊断.研究者也逐渐将早期诊断的注意力转向建立血清学方法来检测真菌菌体成份或代谢产物, 如测定白念珠菌的甘露聚糖、烯醇化酶、D-阿拉伯糖醇等.鉴于深部真菌感染时, 经吞噬细胞处置, 菌胞壁降解成份年夜量入血, 90年代初, 有学者建立了以检测血浆或血清中真菌胞壁成。
真菌(1-3)-β-D葡聚糖检测反应机理目前临床上随着广谱抗生素、各类免疫抑制剂、移植插管等新技术的不断发展应用,其真菌感染尤其是深部真菌感染出现明显上升趋势,而作为临床诊断的细菌培养其阳性率很低,且检测周期长,不能适应临床治疗诊断的要求,因此迫切需要快速、准确的检测方法.因此对血液中的早期(1-3)-β-D葡聚糖快速定量检测,将对临床对症治疗具有很深的现实意义。
人体血浆中(1-3)-β-D葡聚糖快速检测对早期诊断深部真菌感染具有重要的参考价值。
该试验的基本原理是试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品. 在适宜条件下, 微量(1-3)-β-D葡聚糖能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应,通过测定凝集反应过程中的浊度变化从而定量检测血浆中(1-3)-β-D葡聚糖含量.内毒素定量检测的反应机理细菌内毒素作为革兰阴性菌细胞壁外层中的脂多糖成份(LPS), 具有多种的生物活性, 微量的内毒素进入机体将会出现发热、血压降低、寒战、引起DIC、内毒素败血症等一系列临床反应, 因此对血液中的早期内毒素快速定量检测,将对临床对症治疗具有很深的现实意义。
人体血浆中内毒素检测对分别诊断革兰阴性杆菌感染具有重要的参考价值。
反应试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品. 在适宜条件下, 微量革蓝氏阴性菌内毒素能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应形成凝胶,通过测定在形成凝胶过程中的浊度变化从而定量检测血浆中革蓝氏阴性菌内毒素.一、检测体液内毒素的临床意义由革兰氏阴性菌所引起的内毒素血症及脓毒血症是目前临床上的主要死亡原因之一。
在各类抗生素杀灭革兰氏阴性菌的同时,也会使后者释放出一定数量的内毒素,从而加重内毒素血症。
早期诊断的细菌学培养需时长,而且由于抗生素的应用,其培养阳性率低。
早期的数小时内作为临床上抢救感染性休克的关键,临床医师仅能根据临床特征与体征推断病源学而带有一定的盲目性,因此,早期体液中内毒素的正确、快速定量检测及相应的对症治疗就显得格外重要。
真菌(1-3)--D葡聚糖检测反应机理时间:2021.03.12 创作:欧阳文目前临床上随着广谱抗生素、各类免疫抑制剂、移植插管等新技术的不断发展应用,其真菌感染尤其是深部真菌感染出现明显上升趋势,而作为临床诊断的细菌培养其阳性率很低,且检测周期长,不能适应临床治疗诊断的要求,因此迫切需要快速、准确的检测方法.因此对血液中的早期(1-3)--D葡聚糖快速定量检测,将对临床对症治疗具有很深的现实意义。
人体血浆中(1-3)--D葡聚糖快速检测对早期诊断深部真菌感染具有重要的参考价值。
该试验的基本原理是试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品. 在适宜条件下, 微量(1-3)--D葡聚糖能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应,通过测定凝集反应过程中的浊度变化从而定量检测血浆中(1-3)--D葡聚糖含量.内毒素定量检测的反应机理细菌内毒素作为革兰阴性菌细胞壁外层中的脂多糖成份(LPS), 具有多种的生物活性, 微量的内毒素进入机体将会出现发热、血压降低、寒战、引起DIC、内毒素败血症等一系列临床反应, 因此对血液中的早期内毒素快速定量检测,将对临床对症治疗具有很深的现实意义。
人体血浆中内毒素检测对分别诊断革兰阴性杆菌感染具有重要的参考价值。
反应试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品. 在适宜条件下, 微量革蓝氏阴性菌内毒素能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应形成凝胶,通过测定在形成凝胶过程中的浊度变化从而定量检测血浆中革蓝氏阴性菌内毒素.一、检测体液内毒素的临床意义由革兰氏阴性菌所引起的内毒素血症及脓毒血症是目前临床上的主要死亡原因之一。
在各类抗生素杀灭革兰氏阴性菌的同时,也会使后者释放出一定数量的内毒素,从而加重内毒素血症。
早期诊断的细菌学培养需时长,而且由于抗生素的应用,其培养阳性率低。
早期的数小时内作为临床上抢救感染性休克的关键,临床医师仅能根据临床特征与体征推断病源学而带有一定的盲目性,因此,早期体液中内毒素的正确、快速定量检测及相应的对症治疗就显得格外重要。
β-1,3-d-葡聚糖
β-1,3-d-葡聚糖是一种多糖类化合物,由许多β-1,3-葡萄糖分子组成。
它是一种天然的多糖,广泛存在于真菌、海藻、细菌和植物细胞壁中。
1. 结构和性质
β-1,3-d-葡聚糖的结构是由多个β-1,3-葡萄糖分子通过1-4键连接而成。
它的分子量很大,通常在100,000到1,000,000之间。
β-1,3-d-葡聚糖的分子结构使它具有很好的水溶性和生物相容性。
2. 生物活性
β-1,3-d-葡聚糖具有多种生物活性,包括免疫调节、抗肿瘤、抗炎、抗氧化等。
它可以通过激活免疫细胞来增强机体的免疫力,从而抵御疾病的侵袭。
此外,β-1,3-d-葡聚糖还可以抑制肿瘤细胞的生长和扩散,对于肿瘤的治疗有很好的潜力。
同时,它还可以减轻炎症反应和氧化应激,对于预防和治疗多种疾病都有一定的作用。
3. 应用领域
β-1,3-d-葡聚糖已经被广泛应用于医药、保健品、食品等领域。
在医药领域,它被用于治疗肿瘤、免疫调节、预防感染等。
在保健品领域,它可以作为一种营养补充剂,增强机体免疫力、改善肠道菌群等。
在食品领域,β-1,3-d-葡聚糖可以作为一种功能性食品添加剂,具有增强免疫力、改善肠道健康等作用。
总之,β-1,3-d-葡聚糖是一种具有广泛应用前景的天然多糖,具有多种生物活性和应用价值。
附1真菌(1-3)-β-D葡聚糖检测标准操作规程1.目的规范真菌(1-3)-β-D葡聚糖检测的操作规程,保证结果准确性。
2.原理实验条件下,来源于某些真菌细胞壁的(1-3)-β-D葡聚糖能够特异性地激活本试剂盒反应试剂的酶促凝集系统,使反应溶液的透光度发生变化。
利用(1-3)- β-D葡聚糖标准品建立β-D-葡聚糖生物效应与透光度变化关系的标准曲线,便可定量地测定人血液的(1-3)- β-D葡聚糖含量。
3.试剂真菌(1-3)-β-D葡聚糖检测试剂盒,湛江安度斯生物有限公司。
试剂盒包装规格:20人份/盒。
复溶后的试剂溶液应在10分钟内使用。
若当次试验有剩余,可将剩余的试剂溶液置-20℃以下冷冻保存,一周内使用。
不能反复冻融试剂溶液。
4.检测设备:LKM动态试管检测仪。
5.实验用具:250 μl无热原吸头、20-200 μl移液器、75℃试管恒温仪、旋涡混合器、塑料试管架、无热原真空采血管(肝素抗凝剂)。
6.标本采集及送检要求6.1标本采集要求6.1.1采集过程要求无菌操作,用指定的肝素类抗凝、无菌、无β葡聚糖采血管;6.1.2常规住院病人早上用药前空腹采血,血透患者透析前采血。
6.2标本的送检和保存要求标本采集后应在半小时内离心,4小时内检测完。
若当日不能及时检测的标本应将离心后的血浆转移至无β葡聚糖的容器内-20℃以下冷冻保存,一周内使用。
7.实验操作7.1在试验开始前,先开启LKM动态试管检测仪,预热,一段时间后发出哔的一声,试管仪温度达到37℃,待用;7.2取本试剂盒所配的无热原真空采血管取受试者静脉血1~2 ml,以400 g离心10分钟;7.3取富含血小板的血浆100 μl,加到样品稀释瓶中,在旋涡混合器上轻轻混匀,然后插入75℃试管恒温仪中加热10分钟;7.4加热10分钟后,将样品稀释瓶从75℃试管恒温仪中取出,使其降至室温即可,即为1:10稀释的样品供试溶液;7.5取β-G试剂1支,开启;7.6取β-G试剂复溶液1支,开启后用移液器取0.25 ml加入β-G试剂中,轻轻摇匀,澄清后得试剂溶液备用;7.7打开检测软件连接LKM动态试管检测仪,进入临床检查采集数据界面,点击“开始”按钮,使检测软件进入待采集状态;7.8取本试剂盒所配的专用反应试管,先取已制备好的样品供试溶液100 μl加入反应试管中,然后加入50 μl试剂溶液,每个样品供试品溶液平行两管;7.9加样完毕,依次拿起试管在旋涡混合器上轻点一下,使试管中的溶液均匀混合,然后把各试管逐一插到LKM动态试管仪中,反应开始,37℃反应75分钟,在反应结束前填写试验相关的信息;7.10反应完毕,检测软件将自动处理数据,计算出样品供试溶液中的(1-3)-β-G葡聚糖测量值,进入“临床检查数据报告”可查看检验结果,进入“临床检查数据分析”可查看反应曲线。
真菌d葡聚糖产生的原理
真菌D-葡聚糖是一种在真菌细胞壁中存在的聚糖,其产生的原理可以从真菌细胞壁的组成、合成机制以及功能等方面来解释。
首先,真菌细胞壁是由多种不同的聚糖、蛋白质和脂类等复合物组成的复杂结构。
其中,葡聚糖是真菌细胞壁的重要组成成分之一,也是真菌细胞壁中含量最高的聚糖。
真菌D-葡聚糖通常是由β-1,3-葡聚糖和β-1,6-葡聚糖两种不同的聚糖链构成的。
其次,真菌D-葡聚糖的合成主要通过真菌细胞壁合成途径进行。
在真菌细胞中,D-葡聚糖的合成是由细胞膜上的酵母菌葡聚糖合成酶(Gls)和真菌特异性蛋白质参与的。
具体来说,酵母菌葡聚糖合成酶可以催化UDP-葡糖转化为β-1,3-葡聚糖,而真菌特异性蛋白质则可以催化β-1,3-葡聚糖与β-1,6-葡聚糖的结合,从而形成D-葡聚糖。
真菌D-葡聚糖的合成是高度调控的过程,相关的合成酶和调控因子的活性和表达水平均对其合成能力起着重要的影响。
最后,真菌D-葡聚糖在真菌细胞壁中具有多种重要的功能。
首先,真菌D-葡聚糖可以增强真菌细胞壁的结构稳定性和机械强度,保护真菌细胞不受外界环境压力和损害。
其次,真菌D-葡聚糖还可以作为真菌细胞壁与外界环境之间的界面,参与抵抗外界逆境的侵袭和提高真菌的生存能力。
此外,真菌D-葡聚糖还可以诱导宿主免疫反应,被认为是真菌致病性和免疫反应之间的重要桥梁。
综上所述,真菌D-葡聚糖的产生主要源于真菌细胞壁的组成和合成机制。
真菌D-葡聚糖在真菌细胞壁中具有重要的结构和功能,参与保护真菌细胞、抵抗外界环境压力以及诱导宿主免疫等重要生物学过程。
对真菌D-葡聚糖的深入研究可以为真菌防治、药物开发以及免疫调控等领域提供理论和实践基础。