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— 70 —现代中药研究与实践2010年第24卷第5期Chin Med J Res Prac,2010 Sept.,Vol.24 No.5灵芝是一种名贵的药用真菌，属于担子菌纲多孔菌科灵芝属真菌赤芝和紫芝的总称，始载于«神农本草经»，具有补中益气、滋阴强壮、扶正固本、延年益寿等功效。
灵芝主要成分为多糖类和三萜类。
三萜类成分复杂，曾祥丽等[1]报道灵芝含有122种三萜类成分，其中最主要是灵芝酸37种。
林志彬等研究认为灵芝三萜具有抗HIV-1及HIV-1蛋白酶活性、保肝、抗肿瘤和抗艾滋病毒等药理活性[2-5]。
本文对灵芝三萜的提取分离及总三萜的含量测定作以下报道。
1 仪器、试剂旋转蒸发仪（日本生产，EYELA ROTORYEVAPOPATOR N-1000）；GB204电子天平（瑞典）；751型紫外-可见分光光度计（上海分析仪器灵芝三萜的提取分离及总三萜的含量测定侯敏娜1，刘剑 2（1.陕西国际商贸学院，陕西咸阳 712046；2. 陕西香菊药业集团责任公司，陕西商洛 726000）摘要：目的研究灵芝三萜的最佳提取方法，并测定其总三萜的含量。
方法采用正交实验方法，用硅胶柱进行总三萜分离，通过紫外-可见分光光度法测定总三萜含量。
结果最佳提取方法为用5倍量95%乙醇回流提取3次，每次1.5 h ；用 30倍量硅胶装柱，以石油醚-乙酸乙酯（9：1和7：3）进行洗脱；经分离得到针状晶体Ⅰ和Ⅱ，测定该品种中灵芝总三萜含量为9.07%。
结论本提取方法稳定可行，可作为灵芝三萜工业化生产的参考。
关键词：灵芝三萜; 提取分离 ; 含量测定中图分类号：S567.3+1 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(201005-0070-02 Ganoderma Triterpenoids Extraction and Determination of the Total TriterpenoidHOU Min- na1 , LIU Jan2(1.Shan’anxi Institute of International Trade & Commerce, Xianyang 712046, China ;2. Shan’anxi Xiangju Pharmaceutical Group Co., Shangluo 726000,ChinaAbstract: Objective To design the best out of Ganoderma triterpenoids extract programs and separation methods, and measured the total content of triterpenoid. Methods Filter through the orthogonal extraction method, using silica gel column for the total separation of triterpenoids by ultraviolet - visible spectrophotometry triterpenoid content. Results The optimum extraction method is to use fi ve times the amount of 95% ethanol was extracted three times for 1.5 hours each time; loaded with 30 times the amount of silica gel column with petroleum ether - ethyl acetate (9:1 and 7:3 for elution; by ultraviolet - visible spectrophotometry in order to ursolic acid as a reference substance, the total triterpene content of Ganoderma lucidum were determined. Conclusion The extraction method is stable and feasible, and Ganoderma triterpene content was to 9.07%.Key words: Ganoderma lucidum Triterpenes; extraction and separation; content determination厂）；硅胶G （青岛高能达化工有限公司）；薄层层析硅胶板HSGF254（烟台江友硅胶开发有限公司）、氯仿、石油醚、乙酸乙酯、甲醇等试剂均为分析纯，熊果酸对照品（中国药品生物制品检定所）。
白桦茸三萜提取方法白桦茸是一种珍贵的中药材，它具有多种药用价值。
其中，白桦茸中的三萜类化合物是一类重要的活性成分，具有很高的药用价值。
本文将介绍白桦茸三萜的提取方法。
一、材料准备1. 白桦茸：选择新鲜、无虫蛀、无霉变的白桦茸作为原料。
2. 有机溶剂：可选择乙醇、甲醇等有机溶剂作为提取溶剂。
二、提取方法1. 粉碎：将白桦茸用研磨机或者研钵研磨成细粉。
2. 提取：将粉碎后的白桦茸放入提取器中，加入适量的有机溶剂，浸泡一段时间。
3. 过滤：将提取液过滤，去除固体残渣。
4. 浓缩：将过滤后的提取液放入蒸发器中，进行溶剂的蒸发浓缩，直到得到浓缩物。
5. 结晶：将浓缩物溶解于适量的溶剂中，加热至溶解，然后冷却结晶，得到纯净的白桦茸三萜。
三、注意事项1. 提取过程中要做好通风，避免有机溶剂蒸气对人体造成损害。
2. 选择合适的提取温度和时间，以保证提取效果。
3. 提取液的过滤要彻底，避免固体残渣带入浓缩物中。
4. 浓缩过程中要控制温度，避免溶剂挥发过多。
5. 结晶过程中要控制冷却速度，以获得较大的结晶颗粒。
6. 提取液和浓缩物要密封保存，避免受潮、受热和光照。
四、应用价值白桦茸三萜具有很高的药用价值，可以用于治疗风湿关节炎、骨质增生等疾病。
此外，白桦茸三萜还具有抗菌、抗炎、抗氧化等多种药理活性，对于提高免疫力、抗衰老等方面也有一定的作用。
总结：白桦茸三萜的提取方法主要包括粉碎、提取、过滤、浓缩和结晶等步骤。
在提取过程中需要注意通风、控制温度和时间等因素，以保证提取效果。
白桦茸三萜具有很高的药用价值，广泛应用于中药制剂的研究和开发中。
通过对白桦茸三萜的提取和研究，有助于进一步挖掘和开发白桦茸的药用价值。
灵芝中有效成分提取方法
灵芝是一种珍贵的中草药，在传统中医药和现代药物领域都有重要的应用价值。
灵芝
中的有效成分主要包括多糖、三萜类化合物和蛋白质等。
提取这些有效成分可以增强灵芝
的药用价值，下面将介绍一些灵芝中有效成分的提取方法。
一、多糖的提取方法：
1. 热水提取法：将灵芝切碎，加入适量的开水，水温保持在80-100℃之间，连续浸
泡2-3小时。
之后，过滤得到提取液，再用醇沉淀得到多糖。
2. 酶解法：将灵芝粉末加入含有酶的溶液中，温度保持在50℃左右，酶解2-3小时。
之后通过离心或过滤，得到多糖的提取液。
二、三萜类化合物的提取方法：
1. 乙醇提取法：将灵芝切碎，加入适量的乙醇中，浸泡12-24小时。
之后，过滤得到提取液，再用乙醇沉淀得到三萜类化合物。
2. 超临界流体萃取法：利用超临界二氧化碳作为溶剂，将灵芝粉末加入超临界流体
萃取设备中，进行高温高压的提取。
之后通过减压，得到三萜类化合物的提取物。
需要注意的是，在提取灵芝中有效成分的过程中，应根据具体成分的性质和目的选择
合适的提取方法。
提取过程中也需要控制温度、时间、浓度等条件，以保证提取效果和成
分的纯度。
为了确保提取物的质量和安全性，提取过程中还要注意卫生和消毒，以防止细
菌和其他有害物质的污染。
灵芝中有效成分的提取方法多种多样，选择合适的提取方法可以充分发挥灵芝药用价值。
在提取过程中要严格控制条件，确保提取物的纯度和质量。
提取物的应用还需要进一
步研究和开发，以发挥其在医药和保健品领域的作用。
三萜类化合物的分离1.分段沉淀法：（适合于皂苷的分离）①原理：利用皂苷难溶于乙醚、丙酮等溶剂。
②操作：将粗皂苷先溶于少量甲醇或乙醇中，然后逐滴加入乙醚、丙酮或乙醚-丙酮（1：1）的混合溶剂（加入量以能使皂苷从醇溶液中析出为限），边加边摇匀，皂苷即可析出。
③分段沉淀法，逐渐降低溶剂极性，极性不同的皂苷就可分批沉出，从而达到分离的目的。
分段沉淀法虽然简便，但难以分离完全。
2.胆甾醇沉淀法①原理：皂苷可与胆甾醇生成难溶性的分子复合物（三萜皂苷与胆甾醇形成的复合物不如甾体皂苷与胆甾醇形成的复合物稳定）。
②操作：先将粗皂苷溶于少量乙醇中，再加入胆甾醇的饱和乙醇溶液，至不再析出沉淀为止（混合后需稍加热），滤过，取沉淀用水、醇、乙醚依次洗涤以除去糖类、色素、油脂和游离的胆甾醇，然后将此沉淀干燥后，用乙醚回流提取，胆甾醇被乙醚提出，使皂苷解脱下来，残留物即为较纯的皂苷。
但是，此法已经基本不被应用。
3.色谱分离法色谱法是目前分离三萜类化合物最常用的方法，通常采用多种色谱法相组合的方法。
①吸附柱色谱法；②分配柱色谱法；③高效液相色谱法；④大孔树脂柱色谱；⑤凝胶色谱法。
（1）吸附柱色谱法：①常用方法，可用于分离各类三萜化合物。
②依据所用的吸附剂性质的不同，分为正相吸附柱色谱和反相吸附柱色谱。
③正相吸附柱色谱的吸附剂常用硅胶。
④反相柱色谱通常以键合相硅胶Rp-18、Rp-8或Rp-2等为填充剂。
（2）分配柱色谱法：多用于分离皂苷，常用硅胶等作为支持剂，固定相为3%草酸水溶液等，流动相为含水的混合有机溶剂：如氯仿-甲醇-水，正丁醇-水等。
（3）高效液相色谱法：是目前分离皂苷类化合物最常用的方法，分离效能较高。
用于皂苷的分离制备一般采用反相色谱柱，以甲醇-水、乙腈-水等系统为洗脱剂。
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灵芝中三萜类有效成分的提取技术任奕（本溪化学工业学校，辽宁本溪１１７００４）摘要：以灵芝三萜类成分的提取工艺研究成果为基础，介绍溶剂提取、超声波提取、酶解提取等传统提取方法，以及高压超临界ＣＯ２提取、高压脉冲电场提取等现代提取方法的研究进展，为进一步开展灵芝相关研究提供参考。
关键词：灵芝；三萜类成分；提取工艺；提取率中图分类号：Ｒ２８４．２文献标识码：Ａ文章编号：1674-1161（20２０）０２-00５２-0２灵芝（ＧａｎｏｄｅｒｍａＬｕｃｉｄｕｍＫａｒｓｔ）是孔菌科真菌灵芝的子实体，为我国传统的药食兼用的大型真菌，其孢子、菌丝和子实体均可利用，具有祛病延年、滋补强壮的作用。
灵芝三萜化合物是从灵芝中分离出来的一类具有生物活性的成分，具有较强的生理活性，能够增强免疫力、延缓衰老、抗肿瘤、抗病毒、降低胆固醇等。
为有效提取灵芝中的三萜类成分，诸多学者对相关提取工艺进行研究和优化，旨在为灵芝三萜类成分的开发利用提供数据支持和试验基础。
１灵芝三萜类成分的提取技术１．１溶剂提取法溶剂提取法包括乙醇热提、乙醇回流提取、冷凝回流提取和索氏提取等。
其中乙醇回流提取法较为常用。
李康等为确定破壁灵芝孢子粉中总三萜的最佳提取工艺，并对其体外抗肿瘤活性进行评价。
最佳提取工艺条件为：９５％乙醇，液料比６０∶１，在８５℃条件下回流提取２ｈ，提取２次，总三萜的含量可达６．４５％。
段晓颖等优选灵芝总三萜最佳提取与精制工艺参数时，以灵芝总三萜、灵芝酸Ａ为考察指标，通过均匀设计确定总三萜提取最佳工艺参数。
灵芝总三萜提取工艺为８倍量，用９００ｍＬ／Ｌ乙醇提取３次，每次１００ｍｉｎ，提取率达８８．３９％。
１．２超声辅助提取法超声波辅助提取是利用超声波的空化作用、机械作用和热效应等加速细胞内有效物质的释放、扩散和溶解，不仅提取率高，而且能够避免高温对有效成分的影响。
王石磊等选取云南文山产的竹灵芝作为研究对象，考察乙醇浓度、温度、料液比、提取时间等不同提取条件对灵芝中三萜类成分提取得率的影响，再利用正交试验法优化提取条件，最终确定最佳提取条件为：乙醇浓度１００％，料液比１∶２０，浸提温度４０℃，提取时间２０ｍｉｎ，提取得率达１．８％。
1 三萜类化合物的提取分离1.1 传统的三萜类成分提取分离方法一般根据其溶解性采用不同的有机溶剂进行提取分离，如：将药材用乙醇浸提3次，提取液浓缩得到的浸膏溶于适量水中，然后用氯仿萃取3次，合并氯仿层，减压浓缩到原体积的1/3，用饱和NaHCO3溶液碱化，取氯仿层部分浓缩，得到棕色浸膏将所得浸膏用硅胶柱层析分离等。
该方法需要消耗大量的有机溶剂易造成医药污染，且提取的选择不高，使制得药物剂型单一，多为汤剂或者丸、散等剂型，服用量大且携带不便，不利于中药的现代化。
1.2 超临界流体萃取法(SFE)由于SFE在萃取过程中几乎不用有机溶剂，萃取物中无有机溶剂残留，对环境无污染，且提取效率高，节约能耗等特点，在中药化学成分的萃取分离领域得到了蓬勃发展。
崔星明等［3］采用SFE得到的芦笋提取物，用甲醇溶解，采用液相色谱-质谱联用仪检测得到了56个组分。
发现有保留时间和熊果酸基本一致的峰，其质谱分子离子峰和特征碎片峰都与熊果酸的一致。
雒廷亮等［4］采用SFE对山茱萸中熊果酸提取方法的研究，结果表明，在熊果酸提取率基本相同的前提下，SFE不仅可以实现清洁生产，而且易于实现工业化。
1.3 半仿生提取该法模拟口服给药，为经消化道给药的中药制剂设计了一种新的提取工艺，即将药材先用一定pH值的酸水提取，继以一定pH 值的碱水提取，提取液分别滤过、浓缩、制成制剂，据报道此种方法经济实用，可保证疗效［5］。
龚慕辛等［6］通过比较水、不同浓度的乙醇、半仿生法及碱水提取对齐墩果酸提出量的影响，结果显示，半仿生提取齐墩果酸，提出量远高于一般水提。
以pH=12的碱液提取女贞子可以使齐墩果酸提出量大于75%乙醇的提出量，并且齐墩果酸不是以游离的形式存在，吸收利用率将提高，提取成本也大大降低。
1.4 超声循环技术黄书铭等［7］研究灵芝三萜类化合物的提取工艺时，在常规提取方法的基础上，增加超声循环的处理步骤，通过实验对比，超声循环提取所需各种溶剂用量减少，提取时间缩短，目的产物提取率提高了40%。
萜类化合物提取和分离及生理生态功能引言：一次代谢（primary metabolism）指在植物、昆虫或微生物体内的生物细胞通过光合作用、碳水化合物代谢和柠檬酸代谢，生成生物体生存繁殖所必须的化合物，如糖类、氨基酸、脂肪酸、核酸及其局和衍生物、乙酰辅酶A的代谢过程，这些化合物称为一次代谢产物。
一次代谢过程对各种生物来说，基本上是相同的，其代谢产物广泛分布于生物体内；而二次代谢是从某些一次代谢产物作为起始原料，通过一系列特殊生物化学反应生成表面上看来似乎对生物本身无用的化合物，如萜类、甾体、生物碱、多酚类等，这些二次代谢产物就是人物所熟知的天然产物[1]二次代谢产物在生成它们的生物体内有何影响或作用及对环境的作用，随着对这些天然产物的研究，开始逐步浮出水面。
例如，栎树中的鞣酸是幼虫生长的抑制剂，可以保护保护栎树生长。
二次代谢产物可以成为非滋养性化学物质，它能控制周围环境中其他生物的生态学。
由于天然产物数量种类繁多，结构迥异，根据研究的需要，人为的依据天然产物骨架和化学性质分成了八类①糖盒糖苷；②生物碱；③黄酮类；④萜类；⑤甾体类；⑥醌类；⑦香豆素和木脂素；⑧其他类。
本文就萜类化合物的提取分离和生物学特性做一综述。
关键词：萜类，提取分离，生理生态功能1. 萜类化合物的概述萜类化合物（terpenoid）是一一类异戊二烯（C10H16）的聚合体及其含氧的饱和程度不等的衍生物（分子式含C数在15~40个）的统称。
从结构上可划分为若干个异戊二烯单位，称为异戊二烯规则。
但是生物体内萜类并非异戊二烯相互聚合二形成的，在植物体内萜类的真正前提是由乙烯生成的甲戊二羟酸，称为生源的异戊二烯规则[2]。
萜类化合物按照异戊二烯单位的多少可分为单萜、二萜、三萜等，见表1表1 萜类化合物的分类类别异戊二烯单位数（n）含碳数存在单萜（mono-terpenoid） 2 10 挥发油（精油）倍半萜（sesqui-terpenoid） 3 15 挥发油、树脂二萜（di-terpenoid） 4 20 树脂三萜（tri-terpenoid） 6 30 皂苷、树脂四萜（tetra-terpenoid）8 40 色素多萜（poly-terpenoid）>8 >40 天然橡胶倍半萜约有7000多种，是萜类化合物中最大的一类[3].二萜类以上也称“高萜化合物”[4]。
