多克隆抗体
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多克隆抗体特点1.引言1.1 概述概述多克隆抗体是一种由多个不同B细胞克隆产生的抗体,与单克隆抗体相比,它具有更高的抗原特异性和更广泛的抗原识别能力。
多克隆抗体的制备方法相对简单,能够同时识别抗原上的多个表位,因此在科学研究和医学应用中具有重要的价值。
本文将首先介绍多克隆抗体的定义和原理,包括多克隆抗体的组成、产生过程以及克隆筛选的方法。
接着,将详细探讨多克隆抗体的制备方法,包括抗原免疫、脾细胞融合、杂交瘤筛选等步骤。
同时,还将介绍如何利用多克隆抗体对特定抗原进行鉴定和检测,以及多克隆抗体在各种实验和临床应用中的优势和局限性。
最后,本文将总结多克隆抗体的优点,包括更好的抗原识别能力、更高的敏感性和更广泛的应用范围。
同时,也将展望多克隆抗体在生物医学领域的应用前景,包括药物研发、病毒检测、免疫治疗等方面。
通过深入了解多克隆抗体的特点和应用前景,我们可以更好地理解这一技术的潜力,为生物医学研究和临床诊断提供更多的选择和可能性。
1.2 文章结构文章结构部分的内容主要是对整篇文章的结构进行介绍和概述。
在本文中,文章的结构分为引言、正文和结论三个部分。
引言部分(1. 引言)用于引出本文的研究背景和意义,对多克隆抗体的特点进行概述,说明本文将要探讨的问题和目的,即本文要对多克隆抗体的特点进行详细的介绍和分析。
正文部分(2. 正文)是文章的核心部分,主要包括两个小节:多克隆抗体的定义和原理(2.1)和多克隆抗体的制备方法(2.2)。
在多克隆抗体的定义和原理中,将从理论角度对多克隆抗体的概念进行解释,并介绍多克隆抗体的产生原理。
而在多克隆抗体的制备方法一节里,则会详细介绍多克隆抗体的制备过程和方法。
结论部分(3. 结论)对文章进行总结和归纳,列举多克隆抗体的优点,并探讨了多克隆抗体在未来的应用前景。
通过本文对多克隆抗体特点的介绍和分析,可以更好地认识和理解多克隆抗体,为其在临床和科研领域的应用提供参考和指导。
综上所述,本文主要从引言、正文和结论三个部分介绍了多克隆抗体特点。
多克隆抗体的原理及制作方法一、原理多克隆抗体是由针对多种不同抗原表位的抗体组成的混合物。
外源性抗原初次进入动物体内后,可引发机体初次免疫应答,即在抗原呈递细胞(antigenpresenting cell,APC)和T细胞的作用下,未成熟B细胞被激活分化为产生抗体的浆细胞,对于大多数可溶性蛋白抗原而言,动物注射后5~7天,血清中开始出现抗体,并在12天左右达到顶峰,然后逐渐下降。
初次免疫应答产生的抗体持续时间较短,亲和力也较低。
但是受抗原刺激的B细胞除了分化为抗体产生细胞外,还增殖形成大量记忆性B细胞,它们在实施加强免疫时被快速激活,加强免疫后抗体滴度迅速上升,并持续更长时间,抗体合成率也比初次反应增加几倍到几十倍,加强免疫后7~14天出现抗体的峰值。
由于记忆B细胞的存在,需要更少的抗原刺激即可引起再次免疫应答。
记忆B细胞是长寿细胞,因此,特异性抗体应答在最后一次加强免疫之后6个月到一年都会存在。
本节介绍用佐剂乳化的抗原免疫动物获得多克隆抗血清的方法。
该法可用于免疫家兔,小鼠、大鼠或地鼠,也可用于更大的动物如绵羊、山羊或马。
二、材料(一)动物选择根据需要可选择适当品系的家兔,小鼠,大鼠或地鼠等动物进行免疫获得抗体。
动物的选择取决于所需的抗血清量以及特异性抗原的物种来源和免疫动物物种之间进化上的差异。
家兔常被选作免疫动物,因为兔与人、兔与小鼠之间的遗传学差异大,而人和小鼠来源的蛋白是最经常被研究的对象。
每次获取25ml血清的采血量,对兔本身没有明显的损伤。
(二)抗原制备优质抗血清很大程度上取决于抗原的质量、纯度和数量。
常用纯化的抗原或部分纯化的抗原免疫动物,所用抗原往往是蛋白质或肽。
一般而言,细菌或病毒蛋白如血凝素或细菌包膜蛋白有很强的免疫原性,而哺乳动物蛋白如多肽类激素或细胞膜受体则免疫原性较弱。
有时也会用到与适当的蛋白质载体、细胞或细胞与组织提取物相交联的半抗原(多糖、核酸、脂类和小分子化学物质等)以增强半抗原的免疫原性,通过化学方法将半抗原连接到已知的免疫原性强的载体蛋白上,常用的载体蛋白有匙孔戚血蓝素(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清蛋白(OVA)等。
多克隆抗体多克隆抗体: 原理、应用和优势摘要:多克隆抗体是一种可以广泛应用于生物医学研究、临床诊断和治疗的重要工具。
本文将介绍多克隆抗体的原理、应用和优势,帮助读者更好地了解和使用多克隆抗体。
1. 引言多克隆抗体是由多个不同的B细胞克隆所产生的抗体群体。
相比于单克隆抗体,多克隆抗体具有多种来源细胞、多样性抗体特异性和高抗原亲和力的优势。
2. 多克隆抗体的原理多克隆抗体的制备需要经历免疫原注射、免疫细胞制备、抗体筛选和克隆扩增等步骤。
通过注射抗原刺激机体免疫系统,激发B细胞产生特异性抗体。
然后通过细胞融合技术或酶消化法获得抗体产生的细胞系,最后经过筛选和扩增获得多克隆抗体。
3. 多克隆抗体的应用多克隆抗体在生物医学研究、生物工程和医学诊断等领域具有重要应用价值。
在科研中,多克隆抗体可用于蛋白质表达分析、免疫组化染色、免疫印迹、酶联免疫吸附测定等实验技术。
在临床诊断中,多克隆抗体可用于检测病原体感染、肿瘤标志物和药物浓度。
此外,多克隆抗体还可应用于治疗,如癌症免疫治疗和抗体药物研发。
4. 多克隆抗体的优势相比于单克隆抗体,多克隆抗体具有以下几个优势:4.1 多源性:多克隆抗体通过多个细胞克隆产生,能够识别抗原上的多个不同部位,从而提高抗体的特异性和亲和力。
4.2 可灵敏性:多克隆抗体可以通过融合多个细胞系来增加抗体的生产量,提高实验的灵敏性和可靠性。
4.3 高特异性:多克隆抗体可识别抗原上多个不同的表位,在检测复杂样本中具有更高的特异性。
4.4 宽适应性:多克隆抗体对于不同类型的抗原具有较强的适应性,可以应用于多种研究领域和技术平台。
5. 多克隆抗体的挑战与优势相对应的是多克隆抗体也存在一些挑战。
制备多克隆抗体需要免疫动物,然后通过脾细胞和骨髓细胞等制备免疫细胞,这个过程较为复杂且不易实施。
此外,多克隆抗体的批次间差异性较大,因此需要进行一定的筛选和验证工作。
6. 结论多克隆抗体作为一种重要的实验工具,在生物医学研究、生物工程和医学诊断等领域发挥着重要作用。
多克隆抗体和单克隆抗体的用途盘点单克隆抗体的定义:单克隆抗体是仅与目标蛋白某一特定表位结合的单一抗体。
单克隆抗体的制备:简洁来说就是将免疫原注射到宿主动物体内产生免疫反应,之后把 B 细胞从脾脏中移出,单种 B 细胞与骨髓瘤细胞融合为 B 细胞杂交瘤,成为一个永生化胞株。
这样一来,杂交瘤的 B 细胞就会始终产出只识别单一表位的单克隆抗体,通常这个胞株会有一个特定的克隆号(clone number),用来与其他胞株区分。
杂交瘤接下来可以被注射到小鼠的腹腔中大量生产,杂交瘤分泌富含抗体的一种液体,被称作腹水,用注射器抽取纯化,就可获得大量的单克隆抗体。
多克隆抗体定义:多克隆抗体是指与目标蛋白上多种不同表位结合的多种不同抗体. 多克隆抗体制备:多克隆抗体的第一步和单克隆抗体一样,都是将免疫原注射到宿主体内产生免疫反应,激活了多种B细胞。
不同的是免疫过后,多克隆抗体就直接从免疫宿主的血清中分别出来,或接着进行纯化,没有与骨髓瘤细胞融合的过程。
一旦宿主动物死亡,需要免疫新的动物,这时血清中的抗体就会有所不同。
虽然多抗每批次有稍微差别,但是由于它识别的表位多,这个差别影响并不算太大,而单克隆抗体虽然价格偏高,可是特异性更强更稳定。
可以说单抗和多抗是各有各的优点。
多克隆抗体和单克隆抗体的用途:1、定义多克隆抗体和单克隆抗体有用性的两个关键特征涉及它们各自对抗原的特异性和灵敏度。
2、抗体的特异性是由其结合域和目标抗原之间的相对亲和力打算的,而其他分子是存在的。
对这种特异性的利用对免疫学讨论人员和临床医生来说是至关重要的,由于很多应用都是利用多克隆和/或单克隆抗体来特地检测目标分子。
结合抗原特异性,抗体的灵敏度是一个重要的参数,打算了它在试验室的有用性。
3、高灵敏度的抗体特别适用于诊断应用,如免疫沉淀、West Blot 和酶联免疫吸附试验(ELISA),由于它们能够识别低水平的目标抗原。
免疫沉淀是一种分析技术,通过使用特异性结合抗原的抗体将抗原从混合物中分别出来。
多克隆抗体科技名词定义中文名称:多克隆抗体英文名称:polyclonal antibody定义1:由多个B细胞克隆所产生的抗体,可与不同抗原表位结合且免疫球蛋白类别各异。
应用学科:免疫学(一级学科);免疫系统(二级学科);免疫分子(三级学科)定义2:对特定抗原所产生的一组免疫球蛋白混合物,每种免疫球蛋白能识别抗原分子上的一个表位。
应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科);总论(二级学科)定义3:多种抗原表位刺激机体免疫系统后,机体产生的针对不同抗原表位的混合抗体。
应用学科:细胞生物学(一级学科);细胞免疫(二级学科)抗原刺激机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白,这就是免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。
组织结构:抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体(Monclone antibody)。
由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;除了抗原决定簇的多样性以外,同样一类抗原决定簇,也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD 等五类抗体。
抗原上那部分可以引起机体产生抗体的分子结构,叫做抗原决定簇。
一个抗原上可以有好几个不同的抗原决定簇,因而使机体产生好几种不同的抗体,最终产生出抗体是浆细胞。
只针对一个抗原决定簇起作用的浆细胞群就是一个纯系,纯系的英文为Clone,音译就是克隆。
由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。
单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结合,就象导弹精确地命中目标一样。
另一方面,即使是同一个抗原决定簇,在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体,形成好几种单克隆抗体混杂物,称为多克隆抗体。
多克隆抗体又简称多抗。
与之相对应的叫单克隆抗体,简称单抗。
传统的抗体制备方法是将一种天然抗原经不同途径免疫动物,由于抗原性物质具有多个抗原决定簇,可以刺激机体产生多种抗体形成细胞克隆,合成和分泌抗各种决定簇的抗体,故在其血清中实际上是含多种抗体的混合物,所以称这种免疫法所获得的免疫血清为多克隆抗体(polyclonal antibody ,PcAb)。
多克隆抗体的亲和力较一般单克隆抗体高。
多克隆抗体的制备是一个复杂的过程,为制备高效价和高特异性的多克隆抗体,必须要有理想的免疫原、适宜的动物及切实可行的免疫方法。
本章主要介绍多克隆抗体的制备及相关技术。
第一节动物选择实验动物是生物医学中的重要组成部分。
目前常用于生物医学科学研究的实验动物种类很多,主要包括有两栖纲的青蛙、蟾蜍,鸟纲的鸡、鸭、鸽等,哺乳纲啮齿目的小鼠、大鼠、豚鼠等,兔形目的家兔,食肉目的猫、狗,有蹄目的羊、猪和灵长目的恒河猴、猩猩、绒猴等。
其中最常用和用量最大的是哺乳纲啮齿目动物,其次是兔形目和食肉目等。
一、实验动物的生物学特性实验动物选择得当与否是实验研究成败关键之一。
掌握实验动物的生物学特性,则能以最佳的设计选择实验动物,进行科学实验,从而获得预期的实验结果。
1. 小鼠小鼠是啮齿目中体型较小的动物。
新生小鼠 1.5g 左右,21 天断乳时12~15g,至 2 月龄体重达20g 以上,可供实验使用。
成年雌小鼠体重18~35g,成年雄鼠体重20~40g。
小鼠性情温顺,易于捕捉,对外来刺激敏感,喜群居于阴暗环境。
2 .兔草食性动物,性情温顺,胆小易惊,喜居安静、清洁、干燥、凉爽、空气新鲜的环境,耐冷不耐热,耐于不耐湿。
兔耳大,表面分布有清晰的血管。
有特殊的血清型和唾液型,血清型分为α ' 、β ' 、α'β'和O型四种。
α ' 、α' β'型易产生人A型抗体,β ' 、O型易产生人B型抗体。
唾液型分两种:排出型与非排出型。
排出型易获得人血细胞 A 型物质,非排出型不易获得,这种A型物质与A型抗体产生能力有关。
多克隆抗体名词解释多克隆抗体,也称多抗,是由许多不同的抗体分子组成的复合物,它们有助于提高体内免疫力和减少对外界病原体的抵抗能力。
抗体是体内产生的蛋白质分子,可以与外界病原体结合,从而抑制病原体的复制和毒性。
它们能够分辨外来物质与内部物质的区别,并能够识别外来的病原体,从而阻止它们对人体的入侵。
不同的抗体分子有不同的结构,因此它们能够识别和结合外来病原体的不同结构。
由多种抗体分子组成的多克隆抗体可以更有效地识别和结合外来病原体,从而提高人体抗感染的能力。
多克隆抗体主要分为三类:单克隆抗体(scFv)、二克隆抗体(Fab)和四克隆抗体(Fc)。
单克隆抗体是一种由同种单克隆抗体分子组成的抗体,该抗体可以特异性结合抗原,从而抑制抗原的复制和毒性。
二克隆抗体是在单克隆抗体的基础上改进的一种抗体,它由一个可以特异性识别抗原的单克隆抗体分子和一个能够促进抗体与抗原结合的二克隆抗体组成。
四克隆抗体是由两个二克隆抗体分子组成的抗体,该抗体有助于抗体与抗原结合,能够在单克隆抗体和二克隆抗体之间发挥补充作用。
多克隆抗体的使用有助于提高人体的免疫力,能够更有效地抵御外界的病原体侵害。
现在,多克隆抗体的应用已经在分子生物学、生物药学、微生物学、免疫学、药物开发以及肿瘤研究方面发挥了重要作用。
例如,多克隆抗体可以用于识别和抑制病毒颗粒,有助于抑制病毒的复制和毒性;多克隆抗体可以用于检测和识别细菌,有助于抑制细菌的生长;多克隆抗体可以用于识别肿瘤细胞,有助于抑制肿瘤细胞的生长。
多克隆抗体的研究也可以用于抗癌疗法,例如局部抗癌治疗,其中抗体可以与特定的癌细胞结合,有助于抑制肿瘤细胞的生长。
此外,多克隆抗体还可以用于抗AIDS疗法,其中抗体可以结合HIV病毒,抑制HIV病毒的复制和毒性。
总之,多克隆抗体是一种有效的抗感染技术,它能够提高人体对外界病原体的抵抗能力,具有重要的应用价值。
多克隆抗体在分子生物学、生物药学、微生物学、免疫学等领域的研究和应用,将为抗感染技术和抗癌治疗提供新的思路,为人类健康作出重大贡献。
多克隆抗体的名词解释多克隆抗体(Polyclonal Antibodies)指的是由多个免疫细胞分泌的抗体所组成的混合群集。
它们的产生源于免疫系统对外来抗原的免疫应答过程。
多克隆抗体的形成包括多个B细胞克隆繁殖和分化,每个克隆细胞产生的抗体略有不同,因此呈现多样性。
多克隆抗体的制备可通过动物免疫或体外方法获得。
动物免疫法是最常用的制备多克隆抗体的方法之一。
在此方法中,动物(如小鼠、兔子等)被注射具有抗原性的物质,刺激免疫系统产生抗体。
随着时间的推移,免疫系统会生成多个B细胞克隆,每个克隆都会产生特定的抗体。
继而,从动物体内采集血清以获得多克隆抗体。
体外方法也能制备多克隆抗体,它通过将抗原添加到体外培养的免疫细胞中,例如淋巴细胞或骨髓细胞。
这些免疫细胞与抗原接触后,会分泌出一系列具有不同特异性的抗体。
多克隆抗体在科学研究和诊断应用中具有广泛的用途。
首先,多克隆抗体能够同时识别多个抗原表位,因为通过免疫原处理产生的抗体是由多个克隆细胞所分泌,因此对目标抗原具有多个抗体的覆盖,增加了检测的灵敏性和特异性。
此外,多克隆抗体还具有在不同实验条件下鲁棒的可重复性,使其成为许多实验室中常用的工具。
在疾病诊断中,多克隆抗体也发挥着重要的作用。
通过制备针对特定疾病标记物的多克隆抗体,可以进行准确、敏感的疾病检测。
例如,在癌症早期筛查中,通过使用针对特定癌细胞标志物的多克隆抗体,可以帮助识别早期癌症病例。
多克隆抗体还广泛应用于生物医药研究中,在药物研发、蛋白质识别和定量分析等领域发挥着重要角色。
然而,多克隆抗体也存在一些局限性。
由于多克隆抗体是由免疫细胞分泌的抗体混合物,其中可能存在非特异性抗体,这些抗体无法区分目标抗原。
此外,多克隆抗体的制备涉及动物实验,存在动物福利和伦理问题,因此在科研界推动开发替代方法以避免或减少动物免疫的使用。
总的来说,多克隆抗体是一类由多个克隆B细胞分泌的抗体所组成的抗体混合物。
多克隆抗体广泛应用于科学研究和诊断应用中,具有多样性和灵敏性优势,为疾病检测和药物研发提供了有力的工具。
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传统的抗体制备方法是将一种天然抗原经不同途径免疫动物,由于抗原性物质具有多个抗原决定簇,可以刺激机体产生多种抗体形成细胞克隆,合成和分泌抗各种决定簇的抗体,故在其血清中实际上是含多种抗体的混合物,所以称这种免疫法所获得的免疫血清为多克隆抗体(polyclonal antibody,PcAb)。
多克隆抗体的亲和力较一般单克隆抗体高。
多克隆抗体的制备是一个复杂的过程,为制备高效价和高特异性的多克隆抗体,必须要有理想的免疫原、适宜的动物及切实可行的免疫方法。
本章主要介绍多克隆抗体的制备及相关技术。
第一节动物选择实验动物是生物医学中的重要组成部分。
目前常用于生物医学科学研究的实验动物种类很多,主要包括有两栖纲的青蛙、蟾蜍,鸟纲的鸡、鸭、鸽等,哺乳纲啮齿目的小鼠、大鼠、豚鼠等,兔形目的家兔,食肉目的猫、狗,有蹄目的羊、猪和灵长目的恒河猴、猩猩、绒猴等。
其中最常用和用量最大的是哺乳纲啮齿目动物,其次是兔形目和食肉目等。
一、实验动物的生物学特性实验动物选择得当与否是实验研究成败关键之一。
掌握实验动物的生物学特性,则能以最佳的设计选择实验动物,进行科学实验,从而获得预期的实验结果。
1. 小鼠小鼠是啮齿目中体型较小的动物。
新生小鼠1.5g左右,21天断乳时12~15g,至2月龄体重达20g以上,可供实验使用。
成年雌小鼠体重18~35g,成年雄鼠体重20~40g。
小鼠性情温顺,易于捕捉,对外来刺激敏感,喜群居于阴暗环境。
2.兔草食性动物,性情温顺,胆小易惊,喜居安静、清洁、干燥、凉爽、空气新鲜的环境,耐冷不耐热,耐于不耐湿。
兔耳大,表面分布有清晰的血管。
有特殊的血清型和唾液型,血清型分为α'、β'、α'β'和O型四种。
α'、α'β'型易产生人A型抗体,β'、O型易产生人B型抗体。
唾液型分两种:排出型与非排出型。
排出型易获得人血细胞A型物质,非排出型不易获得,这种A型物质与A型抗体产生能力有关。
多克隆抗体名词解释免疫学
多克隆抗体是指由多个不同的B细胞克隆产生的抗体,它们能
够识别并结合到不同的抗原。
在免疫学中,B细胞是一类产生抗体
的免疫细胞,它们可以分化为多克隆B细胞,每个多克隆B细胞产
生的抗体具有特异性,因此可以结合到不同的抗原上。
多克隆抗体在免疫应答中起着重要作用。
当机体暴露于病原体
或异物抗原时,多个B细胞克隆被激活,每个克隆产生特异性抗体,因此形成了多克隆抗体应答。
这种多克隆抗体应答确保了机体对抗
原的全面覆盖,提高了免疫系统对抗原的识别和清除能力。
此外,多克隆抗体也被广泛应用于实验室研究和临床诊断。
科
研人员可以利用多克隆抗体来识别和分离不同的抗原,从而进行蛋
白质检测、免疫组化染色等实验。
在临床诊断中,多克隆抗体也被
用于制备诊断试剂盒,用于检测疾病标志物或病原体抗原,帮助医
生进行疾病的诊断和监测。
总的来说,多克隆抗体是免疫学中一个重要的概念,它代表了
免疫系统对抗原的多样性识别能力,对于免疫应答和疾病诊断具有
重要意义。
多克隆抗体名词解释多克隆抗体是指由多个B细胞克隆所产生的抗体,能够针对同一种抗原的多个不同的位点进行识别和结合。
与单克隆抗体相比,多克隆抗体具有更高的亲和力和更广泛的抗原识别能力。
多克隆抗体因其独特的特性被广泛应用于生物医学研究、临床诊断和生物工程等领域。
多克隆抗体的制备过程通常包括以下几个步骤:首先,通过免疫动物(如小鼠、兔子等)免疫目标抗原,以激发其免疫系统产生抗体。
接着,从免疫动物体内采集血清,其中包含了众多的B细胞克隆所产生的不同抗体。
再经过一系列的加工和处理,如离心、加热灭活等,最终得到多克隆抗体产品。
多克隆抗体具有以下几个优点:首先,多克隆抗体能够识别和结合抗原的不同位点,从而提高抗原的检测敏感性和特异性。
其次,多克隆抗体可用于大规模和复杂多样的抗原检测,覆盖范围广,适用性强。
此外,多克隆抗体的制备工艺相对简单,成本较低。
然而,多克隆抗体也存在一些局限性。
首先,多克隆抗体的制备过程中可能会产生一些非特异性的抗体,从而降低了其特异性和纯度。
其次,多克隆抗体在不同免疫动物体内可能会产生批次差异,导致其品质和稳定性存在一定的波动。
此外,多克隆抗体由于来源于免疫动物,可能存在个体差异和免疫相容性问题。
为了克服多克隆抗体的局限性,科学家们也不断努力进行研究和改进。
例如,通过筛选和优化制备过程,可以提高多克隆抗体的特异性和纯度。
此外,还可以利用单克隆抗体技术将多克隆抗体中特异性较高的成分筛选出来,以获得更具特异性和统一性的抗体产品。
综上所述,多克隆抗体是一种能够针对同一种抗原的多个不同位点进行识别和结合的抗体。
多克隆抗体具有广泛的应用价值,但也存在一些局限性。
通过不断的研究和改进,科学家们正在努力提高多克隆抗体的质量和稳定性。
简述抗体的种类:抗体分类:抗体分为天然抗体、多克隆抗体、单克隆抗体及基因工程抗体四类
(1)天然抗体,正常个体未经免疫而在血清中存在的抗体称为天然抗体。
典型的实例是ABO血型系统的天然抗体。
(2)多克隆抗体由多种抗原分子组成的、或是由多种决定簇组成的抗原可刺激具有相应抗原受体的不同淋巴细胞,因此所产生的抗血清是多种抗体的混合物,即多克隆抗体。
(3)单克隆抗体,是指识别一种抗原决定簇的细胞克隆所产生的均一性抗体,称为单克隆抗体,应用杂交瘤技术可获得几乎所有的抗原的单克隆抗体,只要这种抗原能引起小鼠的抗体应答。
单克隆抗体由于具有高度的单一性和均一性,在很大程度上提高了各种血清学方法检测抗原的敏感性及特异性,短短几年内在许多不同领域发挥巨大作用。
(4)基因工程抗体,由于绝大多数单克隆抗体是鼠源的,临床重复给药时体内产生抗鼠抗体,使临床疗效减弱或消失。
因此临床应用理想的单克隆抗体应是人源的,但人一人杂交瘤技术是目前未获得突破,即使研制成功,也还存在的人一人杂交瘤体外传代不稳定,抗体亲和力低及产量不高等问题.较好的解决办法是研制基因工程抗体来代替鼠源单克隆抗体。
基因工程抗体这一技术是在对工g基因结构与功能的充分了解的基础上与DNA重组技术相结合,然后根据研究者的意图在基因水平对Ig分子进行剪切、连接或修饰,甚至是在人工全合成后导入受体细胞表达,产生新型抗体,也称为第三代抗体。
多克隆抗体技术简介一、技术说明由多种抗原决定簇刺激机体。
一系列抗体生成细胞会不同程度地与抗原结合,在血液中相应地产生不同类型的单克隆抗体,这种由一种抗原刺激产生的混杂在一起的单克隆抗体称为多克隆抗体。
通过免疫动物、血清效价检测、采集血清、纯化抗体等过程制备针对同一抗原不同表位的抗体的技术称之为多克隆抗体制备技术。
二、技术原理当抗原注射入实验动物体内时,刺激网状内皮细胞系统,使淋巴结和脾脏的淋巴细胞大量增殖。
首次注射后大约7d,在血清中可以观察到抗体,但抗体的浓度维持在一个较低的水平,大约10d抗体的滴度会达到最大值。
但同种抗原注射而产生的二次免疫应答的结果明显不同,和初次免疫应答相比抗体的合成速度明显增加并且保留时间也长。
进而通过收集动物血清,借助亲和纯化方法将抗体从血清中纯化出来以得到多克隆抗体。
三、技术流程四、研究进展(一)抗原获得方法制备多克隆抗体所用的抗原一般来源有两种,即原核表达和合成多肽。
原核表达可以在较短的时间内获得基因表达产物,所需成本较低,但是也有些外源基因无法进行原核表达。
多肽合成是将分析好的多肽抗原进行固相或液相合成,抗原性高,但成本也高。
因此在实际实验过程中应该把原核表达和多肽合成有效结合起来完成多克隆抗体的制备。
(二)所用动物的选择获得多克隆抗体的最终步骤是动物免疫。
其中选择合适的免疫动物尤为重要。
一般来讲,所选择的蛋白抗原供体与免疫动物种系不可太接近,亲缘太近不易产生良好抗体,甚至不产生抗体(如兔和大鼠、鸡和鸭)。
免疫动物包括家兔、啮齿类、鸡等小型实验动物以及绵羊、马、山羊等大型家畜。
其中家兔是最适合制备抗体的动物;小鼠一般用于单克隆抗体制备,在需要大量抗血清时,主要用大型家畜。
在动物性别、年龄以及数量上的选择一般选用雌性、青壮年期1只以上的个体。
患病或处于感染、饥饿状态均会影响免疫效果,因此应选用健康壮实的动物。
在实际免疫过程中还需要根据不同性质的免疫原选择使用动物进行免疫。