实时荧光PCR定量检测乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸的检测及临床意义

实时荧光PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义【摘要】目的:探究实时荧光PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义。

方法:本次研究选取我院2021年3月-2022年3月收治的乙型肝炎患者180例作为研究目标，所有患者均进行标准的abbot 药盒检测，其中大三阳100例，小三阳80例。

所有患者入院后都采集空腹静脉血，然后采用全自动化学发光技术测定和荧光PCR技术测定，对两种检测技术检测乙肝类型的阳性检出率进行对比。

结果:荧光PCR测定组大三阳、小三阳的阳性检出率均高全自动化学发光技术测定组P＜0.05，差异存在统计学意义。

结论:实时荧光PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义较高，可以准确诊断出乙肝类型，为临床诊断提供有效依据，值得推广。

【关键词】荧光PCR检测；乙肝病毒DNA；检测；临床意义乙肝是一种比较常见的传染性的肝病，致病病原体为乙型肝炎病毒，属于嗜肝DNA病毒。

临床上表现症状大多数有食欲减退、疲倦乏力、厌食油腻、恶心、呕吐、腹胀、肝区不适或隐痛、腹泻等[1]。

还有患者可能出现黄疸发热和肝功能损害，严重者甚至发展成肝硬化，少数患者可发展为肝癌[2]，严重影响了患者的身体健康和生活质量。

所以，要对患者应用具有高度准确度的检测方法来确诊乙肝病毒的类型，从而针对患者的乙肝病毒类型进行对症治疗，因此本次研究选取我院2021年3月-2022年3月收治的乙型肝炎患者180例作为研究目标，均实施全自动化学发光技术测定和荧光PCR技术技术测定，对两种检测技术的检测效果进行研究，并分析荧光PCR技术检测乙肝病毒DNA的临床意义，情况如下：1资料与方法1.1一般资料选取我院2021年3月-2022年3月收治的乙型肝炎患者180例作为研究目标，经过标准的abbot 药盒检测，其中测出大三阳患者100例，小三阳患者80例。

大三阳患者年龄20-60岁，中位年龄（31.5±2.7）岁；小三阳患者年龄21-65岁，中位年龄（32.5±2.9）岁。

实时荧光PCR检测在乙型肝炎病毒DNA检测方面的临床意义邹敏【摘要】目的对采用血清学标志物检测确定为乙型肝炎的患者进行实时荧光PCR 检测,探讨实时荧光PCR检测的临床应用价值.方法对乐昌市人民医院自2007年7月到2009年12月门诊及体检中心进行血清学标志物检测(HBV-M)诊断为阳性的乙型肝炎患者336例,采取实时荧光PCR检测,对其结果进行分析.结果大部分乙型肝炎患者定量PCR检测HBV-DNA的结果与HBV血清学标志物检测结果一致.大三阳、小三阳患者血清中PCR结果拷贝数均较高,而HBsAb(+)或HBsAg(-)的标本PCR有个别阳性结果,但其拷贝数很低.结论实时荧光PCR检测HBV-DNA在判断体内HBV是否在复制,复制程度以及HBV血清学标志阴性肝炎患者的诊断方面,较优于血清学标志物检测,值得临床推广.【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2010(008)019【总页数】2页(P196-197)【关键词】乙型肝炎病毒;实时荧光PCR;DNA;临床意义【作者】邹敏【作者单位】广东省乐昌市人民医院检验科,512200【正文语种】中文【中图分类】R512.6+2目前肝炎病毒至少有5型。

在肝炎病毒当中，乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)危害性最大，其传播广泛，易形成持续性带病毒状态或转变为慢性感染，少数可演变为肝硬化、原发性肝细胞癌。

因此，准确、快速诊断HBV的感染情况对于防治乙型肝炎极为重要。

HBV基因组为双股环状DNA，考虑到HBV-DNA是直接反应HBV存在、活动性复制及具有传染性的可靠指标，本研究采用实时荧光PCR法进行HBV-DNA检测共336例，报道如下。

1 材料和方法1.1 标本来源本组为乐昌市人民医院从2007年7月至2009年12月门诊及体检中心进行血清学标志物检测(HBV-M)为阳性的乙型肝炎患者336例，其中男171例，女165例，16～83岁，平均为56岁。

实时荧光PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义目的用实时荧光定量PCR检测乙型肝炎患者HBVDNA结果进行分析,以探讨其临床诊疗意义。

方法对850例临床标本用时间分辨荧光免疫技术定量测定乙肝病毒血清学指标,用荧光定量PCR法检测血标本中的HBVDNA,并依据乙肝两对半结果进行归类分组。

结果302份HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)标本中有261份HBVDNA为阳性,阳性率为86.4%,其PCR定量拷贝数为(2.21±0.76)×107/ml;321份HBsAg(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)标本有96份HBVDNA 阳性,阳性率达到29.91%,PCR定量拷贝数为(1.69±0.98)×106/ml;32份HBsAg(+)、HBcAb(+)标本中有9份HBVDNA为阳性,阳性率为28.13%,28份HBeAb(+)、HBcAb(+)标本有4份PCR HBVDNA阳性,阳性率14.29%;11份HBcAb(+)标本有6份PCR HBVDNA阳性,阳性率为42.9%;74份HBsAb(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)标本有5份HBVDNA阳性,阳性率6.75%;13份HBsAb(+)、HBeAb(+)阳性标本有2份PCR HBVDNA阳性,阳性率为14.3%;12份HBsAb(+)、HBcAb(+)标本有1份HBVDNA阳性,阳性率7.69%;4份HBsAb(+)的标本HBVDNA均为阴性,PCR 定量拷贝数为<1.00E×103;24份HBsAg(+)、HBsAb(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)标本中有21份HBVDNA为阳性,阳性率为87.50%;1份HBsAg(+)标本HBVDNA 均为阳性,阳性率为100%;10份HBsAg(+)、HBsAb(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)标本有3份HBVDNA均为阳性,阳性率30.00%,其余38例全阴性结果和各少见模式基本见有HBVDNA的检出。

荧光定量PCR在乙型肝炎病毒检测中的应用及临床意义胡庆宏;刘明珪;陈奕东;彭燕【期刊名称】《南昌大学学报（医学版）》【年(卷),期】2003(043)004【摘要】目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染者不同血清免疫标志物模式与HBV DNA定量的关系.方法对1 025份临床血清标本用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)的方法进行HBV DNA定量检测,并同时用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行乙肝免疫学指标的对比检测.结果 HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)模式HBV DNA阳性率为99.2% (390/393),其平均拷贝数为4.65×108拷贝/ml;在HBsAg(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)模式中HBV DNA阳性率为62.5% (261/417);而68例HBsAg(+)、HBcAb(+)模式中,26例(占38.2%)检出HBV DNA.结论单凭血清免疫标志物模式难以准确判断HBV的复制程度及传染性的强弱,定量检测HBV DNA能真实反映HBV复制情况,为乙型肝炎的诊断及治疗监测提供客观依据.【总页数】3页(P38-40)【作者】胡庆宏;刘明珪;陈奕东;彭燕【作者单位】江西医学院第一附属医院细胞基因诊断中心,江西,南昌,330006;江西医学院第一附属医院细胞基因诊断中心,江西,南昌,330006;广东省广州达安基因诊断中心,广东,广州,510070;江西医学院第一附属医院流式细胞实验室,江西,南昌,330006【正文语种】中文【中图分类】R512.6+2;R446.6【相关文献】1.不同荧光定量PCR技术在乙型肝炎病毒检测中的应用评价 [J], 朱明岩;叶英2.荧光定量PCR法与酶联免疫吸附法在乙型肝炎病毒检测及疗效评价中的应用价值探究 [J], 陈春妍3.荧光定量PCR在乙型肝炎病毒检测中的应用及临床意义 [J], 梁民4.荧光定量PCR法在乙型肝炎病毒检测中的应用价值 [J], 张会娟5.荧光定量PCR法与酶联免疫吸附法在乙型肝炎病毒检测中的应用 [J], 张辉;吴冬生;方敏;董丽因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

乙型肝炎病毒DNA实时荧光定量PCR检测在临床诊断中的价值【摘要】目的：分析在临床诊断中实施乙型肝炎病毒DNA实时荧光定量PCR 检测的应用价值。

方法：将本院2020年2月～2022年6月期间收治的64例乙型肝炎病毒患者作为本次研究对象（其中HBsAg(+）、HBeAg（+）、抗-HBc（+）患者25例，HBsAg(+）、抗-HBe（+）、抗-HBc（+）患者23例，HBsAg（+）、抗-HBc（+）患者16例），对所有患者分别实施PCR检验HBV-DNA检验（研究组）及ELISA检验（参照组），比较两种检验技术的诊断价值。

结果：两组检验诊断后对比的各项指标的差异较为显著（P＜0.05），统计学有意义。

结论：在临床检验乙型肝炎病毒的过程中实施DNA实时荧光定量PCR检测的特异性、敏感度较高，能准确真实的反映HBV在体内的复制程度，为患者治疗方案的制定提供可靠的参考依据。

【关键词】乙型肝炎病毒；DNA实时荧光定量；PCR检测；应用价值乙型肝炎病毒--Hepatitis B，主要是指临床中引发乙型肝炎的病原体，是一种嗜肝DNA病毒科类型，乙型肝炎病毒感染者不论是在潜伏期、慢性期或急性期血液均具有一定的传染性，可通过血液传播、母婴传播、医源性传播、密切接触传播等传染[1]。

HBV的感染是一个动态变化和连续性的过程，在临床病毒检验的过程中一般使用ELISA检验法进行检验，能准确的反映出病毒是否处于复制状态，但这一检验技术局限性较高[2]。

而PCR检验技术在HBV-DNA含量测定的过程中具有更高的敏感性和特异性，能更好的帮助临床诊断和治疗，保障患者预后[3]。

为了分析乙型肝炎病毒DNA实时荧光定量PCR检测的应用价值和效果，本院针对收治的乙型肝炎病毒患者64例展开了不同检验技术的对比分析。

1资料与方法1.1临床资料将本院收治的乙型肝炎病毒患者64例作为本次研究对象，64例患者中男性患者30例，女性患者34例，最大年龄为86岁，最小年龄为55岁，均值（71.15±5.26）岁，病程时间2-22年，平均病程（11.25±3.63）年。

乙型肝炎病毒核酸的实时荧光定量PCR检测及其临床意义王旭东;张冬雷;李立人;施健;崔之础;王惠民【期刊名称】《现代检验医学杂志》【年(卷),期】2006(021)003【摘要】目的建立实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RFQ-PCR)检测HBV-DNA含量的方法,探讨其在乙型肝炎预防、诊断、治疗及判断病情等方面的临床应用价值.方法在HBV S基因高保守区设计了特异性的引物和探针,利用TaqMan探针的基本原理,PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,根据标准品建立的标准曲线,由软件自动计算出待测样本中HBV-DNA的准确含量.结果 220例临床样本的检测结果显示,乙肝大三阳患者HBV-DNA阳性率(98.8%)显著高于其它各组(P＜0.01),病毒平均含量为7.52±0.43 copies/ml;小三阳患者HBV-DNA阳性率低于大三阳组(P＜0.01),但平均病毒含量与大三阳组无差异(P＞0.05),高达7.41±0.26 copies/ml;单独HBsAg阳性和单独HBsAb阳性组HBV-DNA阳性率分别为56.4%,19.2%,平均病毒含量分别为5.35±0.32 copies/ml,4.02±0.31 copies/ml;80例献血员血清仍有3例HBV-DNA阳性,其病毒含量低于其它各组.结论 RFQ-PCR检测HBV-DNA含量比ELISA法具有更好的灵敏度和特异性,能准确反映HBV在体内的复制情况,对临床上抗病毒药物的选择和判断疾病的预后意义重大.【总页数】5页(P15-19)【作者】王旭东;张冬雷;李立人;施健;崔之础;王惠民【作者单位】南通大学附属医院检验医学中心,江苏南通,226001;南通大学附属医院酶学研究室,江苏南通,226001;南通大学附属医院消化内科,江苏南通,226001;南通大学附属医院酶学研究室,江苏南通,226001;南通大学附属医院酶学研究室,江苏南通,226001;南通大学附属医院检验医学中心,江苏南通,226001【正文语种】中文【中图分类】Q503;R512.6+2【相关文献】1.实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒核酸载量的测量不确定度构成分析 [J], 余南;毕晓云;崔进;陈小坚;李汛2.实时荧光定量PCR检测TMPRSS4mRNA在41例肺腺癌中的表达及临床意义[J], 李受南;吴正球;卢强昌;雷敬富;罗德丰3.实时荧光定量PCR检测胃癌SOX2的表达及其临床意义 [J], 黄正接;江龙;尤俊;曾岳岳;吴炳霖;陈百胜;冯庆钊;罗琪4.乙型肝炎病毒核酸实时荧光定量PCR检测在临床诊断中的价值 [J], 黄四爽;熊勤5.实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的临床意义分析 [J], 谭天照; 李学仿; 黄广荣因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

实时荧光定量PCR检测临床上的运用与意义叶明奇（厦门安普利生物工程有限公司，福建厦门 343，技术工程部）【摘要】目的分析临床使用实时荧光定量PCR法在临床检测的各个项目情况，并探讨实时荧光定量PCR法的临床意义。

主要介绍核酸DNA或RNA的提取、实时荧光定量 PCR技术以及实时荧光定量PCR方法临床运用的意义：乙型肝炎病毒核酸实时荧光定量ＰＣＲ检测在临床诊断中的应用、实时荧光PCR检测丙型肝炎病毒核酸及其临床应用、实时荧光定量PCR 法在检测血浆结核杆菌DNA 的临床应用、实时荧光定量PCR检测HPV病毒的临床运用、泌尿生殖道感染沙眼衣原体的临床应用、传染性疾病检测临床应用、测胰腺癌中HIF1α、VEGF 和bFGF 的表达及其临床意义、绵羊肺腺瘤病毒检测、胃癌淋巴结微转移敏感且特异的方法，实时荧光定量PCR法在临床检测的运用在临床分期、判断预后以及治疗方案选择具有重要意义。

【关键词】实时荧光定量PCR；乙型肝炎；丙型肝炎；传染性疾病；HPV；MTB；[Abstract]Objective using real-time fluorescence quantitative PCR method in clinical detection of each project, and to explore the clinical significance of real-time fluorescent quantitative PCR method.Mainly introduces the nucleic acid extraction of DNA or RNA, real-time fluorescent quantitative PCR and real-time fluorescence quantitative PCR method for clinical application significance: hepatitis B virus DNA by real-time fluorescent quantitative PCR assay application in clinical diagnosis, real-time fluorescent PCR detection of hepatitis C virus nucleic acid and its clinical application, the real-time fluorescence quantitative PCR assay in the detection of Mycobacterium tuberculosis DNA in plasma clinical application, real-time fluorescence quantitative PCR detection of HPV virus, the clinical application of urogenital Chlamydia trachomatis infection in the clinical application of infectious diseases, clinical application, measured in pancreatic cancer HIF1 α, VEGF and bFGF expression and its clinical significance, sheep pulmonary adenomatosis virus detection of lymph node micrometastasis, sensitive and specific method, real-time fluorescence quantitative PCR method applied in clinical detection in clinical staging, prognosis and treatment options have important significance.[keyword]real-time fluorescence quantitative PCR; hepatitis B; hepatitis C virus; infectious diseases; HPV; MTB;PCR法最初由Khorana(1971)等提出在体外经DNA变性,与适当引物杂交,再用DNA聚合酶延伸,克隆DNA的设想。

HBV荧光定量PCR技术在乙肝临床检测中的意义1、荧光PCR定量检测HBV的优点l灵敏性高，可检出血清学方法不能发现的病例l HBV DNA是病毒血症的直接证据l可检测HBV变异株l可以对血清中的HBV DNA进行准确定量2、荧光PCR在乙肝诊断中的意义A)提高对患者的诊断率，检出隐蔽感染–我国人群中约有1-3%HBsAg阴性的乙肝携带者。

HBV感染后HBsAg （-）首先与检测方法的灵敏度有关，其次为S基因变异。

–我国较多的非甲—戊型肝炎经进一步的检测证实很多为漏检的HBV感染。

–PCR检测在以下情况下可帮助明确诊断：血清学指标阴性的无症状慢性感染；感染的窗口期；病毒变异株感染B)当血清学的结果有疑问或与临床表现不符合时，可作为确诊可疑病人的重要手段。

- 在乙肝变异株感染时，HBeAg 和/或HBsAg阴性，这些变异株可逃避免疫监视系统，常常会引起较严重的肝损害和临床症状，但血清学指标却与病情的严重程度不一致，此时PCR检查显得尤为重要。

C)对HBV传染性的估计D)PCR方法可修正血清学诊断的不足，有助于对病情的全面了解E)PCR HBV DNA定量方法使全程动态观察病毒含量成为可能F) PCR检测HBV DNA可作为乙肝病人的严格判愈指标3、定量PCR方法用于乙肝治疗的意义1)定量方法使全程动态观察病毒含量成为可能由于HBV DNA是乙肝病毒存在和复制的直接证据，因此我们可以通过动态检测血清HBV DNA含量而对各种乙肝病人病毒活动情况有更真实和全面的了解，使人们对乙肝的认识上升到一个更高的水平，对科研、临床以及流行病研究均可提供有力的依据。

2)选择治疗时机PCR方法检测患者血中病毒含量，有利于明确乙肝病毒活动复制情况，决定是否接受治疗以及采取何种治疗方案，对既往依据临床表现、肝功及血清学指标决定治疗的方法是一个很好的补充。

3)估计治疗反应研究表明，血清乙肝病毒高拷贝者对干扰素治疗不敏感，低拷贝者对干扰素治疗较敏感。