甘草有效成分的提取分离实验方案

甘草有效成分的提取分离实验方案实验目的：通过对甘草中甘草黄酮、甘草酸和甘草多糖的提取分离，进一步理解他们的理化性质，并且初步掌握提取分离的方法。

实验原理：黄酮类化合物则泛指两个苯环（A环与B环）通过中央三碳相互联接而成的一系列化合物。

根据中央三碳的氧化程度、是否成环、B 环的联接位点等特点，可将该类化合物分为多种结构类型。

代表化合物有甘草黄酮、甘草素、异甘草素、甘草甙、异甘草甙、甘草查尔酮等。

甘草中已经发现的黄酮类化合物有一百多种，本实验只对其进行粗提，并且测定其总含量。

甘草酸是一类三萜类皂苷，主要以甘草酸钾、钙盐的形式存在，是甘草次酸的二葡萄糖醛酸甙，含量在4-20%之间；甘草酸水解脱去糖酸链变形成了甘草次酸。

超临界CO2萃取甘草总黄酮的萃取率是1. 35%，含量32. 45%，是索氏提取法提取甘草总黄酮的提取率的2.2倍，索氏提取溶剂用量是超临界CO2萃取的6倍。

本实验采取超临界CO2萃取法提取甘草黄酮。

【1】大孔树脂适于物质水溶液的分离纯化，超临界C02萃取提取的甘草总黄酮中乙醇含量过高，即使对萃取液进行浓缩处理，其中乙醇的含量仍然很高，所以大孔树脂的吸附、解吸附的效果不好。

萃取液浓缩近干加入水后，所要分离的物质析出变混浊，也不适合用大孔树脂进行分离纯化。

与大孔树脂层析比较，硅胶柱层析可以更有效的分离纯化甘草黄酮。

使用硅胶柱层析可以有效地使甘草黄酮类物质的含量达到55%以上，收率1. 12%，符合国家中药二类新药的原料要求。

【1】综合考虑，本实验选择硅胶柱层析对甘草黄酮进行分离纯化。

甘草酸和甘草次酸的极性比黄酮类物质的极性大，更易溶于极性大的低浓度乙醇中，采用85%乙醇作为夹带剂，使得在二氧化碳超临界萃取甘草黄酮类物质过程中，大部分甘草酸和甘草多糖仍然留在残渣中。

鉴于甘草酸和甘草多糖都溶于水的性质，本实验采用超声或微波辅助法对它们同时进行提取[3]。

对于提取后的甘草酸和甘草多糖的分离，可查阅到的方法包括醇沉酸沉法[3]。

甘草中有效成分的分离提取摘要：甘草具有多种药用功效，自古以来就是一味重要的药材。

本文简要探讨对甘草中有效成分的分离提取方法，以期为甘草的研究与应用提供参考依据。

关键词：甘草有效成分分离与提取一、甘草简介甘草属于豆科多年生草本植物。

作为我国传统药材之一，甘草具有多种药用功效，如补脾益气、清热解毒、祛痰咳喘、调和百药等作用。

甘草中含有多种化学成分，其中，有效成分为三萜皂苷类化合物（甘草酸、甘草次酸）、黄酮类化合物（甘草苷、异甘草苷）、甘草多糖等。

据有关研究显示，目前人们已从甘草中成功分离出多种有效成分，仅黄酮类化合物就超过100多种[1]。

因此，随着甘草有效成分的价值日益被人们所认识，甘草有效成分的提取、纯化技术也成为当前研究的一个热点。

二、甘草中的有效成分1.甘草甜素甘草甜素的主要成分是甘草酸，因此它又被称为甘草酸。

它的甜度是蔗糖的2～3百倍。

它具有多种功效：抗病毒作用、抗肿瘤作用、免疫调节功能、解毒作用、糖类皮质激素作用、清除氧自由基等。

2.甘草次酸甘草次酸在常温条件下为白色针状结晶，具有消炎、抗溃疡、抗过敏、镇咳、平喘、祛痰、降低血脂等功效；同时，它还具有保肝、抑制肝癌的作用。

3.甘草黄酮甘草具有的抗氧化功能主要是甘草黄酮发挥的作用，它在甘草中占27%左右。

4.甘草多糖它是将甘草提纯后获得的一种α-D-吡喃多糖，属于生物活性多糖，对肿瘤有一定的抑制效果。

三、甘草有效成分的提取方法1.甘草酸的提取方法1.1溶剂提取法指利用中草药中不同成分在溶剂中的溶解性质，把有效成分从药材中溶解出来的方法。

根据溶剂的不同，分为两种方法，水提法与有机溶剂提取法。

1.2超声提取法根据超声波的空化作用、热效应及机械作用等提高物质分子运动的频率及速度，并强化溶剂穿透力，使目标成分浸出率提高。

具体做法如下：容器的外壁连接换能器振子或用密封的不锈钢盒子放置振子，再放进容器内。

启动超声波发生器，振子向提取溶媒中发出超声波，在超声波的作用下甘草的细胞壁被破坏，从而使有效成分溶解到提取溶媒中。

甘草鲜药材加工方案一、试验报告1.试验目的1.1通过甘草出膏率、提取物含量两个质量指标对比甘草鲜药材不同加工方法的质量差异，找到影响甘草提取物含量转移率的最佳加工方法，提高甘草提取物含量转移率。

从而确定一条合理的生产工艺。

2.1通过对不同干燥程度甘草的前处理、提取、浓缩等过程分别检验其含量（甘草苷和甘草酸），确定甘草最佳干燥程度。

2.试验背景目前，我公司生产甘草时甘草提取物含量转移率偏低，为保证产品质量对甘草工艺进行再研究，通过对甘草鲜药材不同加工方法的质量差异考察，找到影响甘草提取物含量转移率的主要因素，提高甘草提取物含量转移率。

3. 实验方法3.1原药材切制及提取的考察3.1.1 取某批号的甘草鲜药材800g，将鲜药材用水冲洗干净后，切成约0.2-0.5cm的厚片，切制后饮片铺成2-3cm进行晾晒，每天上午8点到下午4点每隔一小时翻晒一次，其中每天上午8点和下午4点必须翻晒一次，取样检测，大约晒至五成干、八成干、完全燥时，分别备用。

3.1.2 另取与3.1.1同一批号的药材800g，置于通风良好且阳光充足的空间晾晒，至测定含水量约50%、20%、0%左右，再切成约0.2-0.5cm的厚片，分别备用。

表1原药材处理方法批次原药材重量（g）干燥程度（水分%）处理方式切制规格（cm）样品重量（g/份）样品份数200 100 先切再晒0.2-0.550 120050 先切再晒0.2-0.550120020 先切再晒0.2-0.550 12000 先切再晒0.2-0.550 1200 100 先晒再切0.2-0.5 50 1200 80 先晒再切0.2-0.5 50 1200 50 先晒再切0.2-0.5 50 1200 0 先晒再切0.2-0.5 50 13.1.3 将两份饮片分别加热煎煮两次，第一次加投料量10倍的水，加热煎煮2小时；第二次加投料量8倍的水，加热煎煮1.5小时，煎液滤过。

趁热用350目筛过滤，合并滤液。

实验七甘草中甘草酸的提取分离
【实验目的】
1、学会运用煎煮法、渗漉法、回流法等方法从甘草中提取、分离干甘草酸
【实验原理】
甘草酸以钾盐的形式存在于植物体内，易溶于热水，因此可用水提取甘草酸钾盐，水提液加硫酸酸化后生成游离甘草酸，因其在冷水中的溶解度较小而沉淀析出。

也可以用乙醇渗漉后再酸化得到甘草总皂苷沉淀，将沉淀溶解于盐酸的甲醇溶液中，用三氯甲烷除去黄酮类化合物，即可得甘草皂苷。

【实验材料】
设备: 电炉、托盘天平、量筒、玻璃棒、纱布、滴管、抽滤装置、圆底烧瓶、冷凝管、水浴锅、烧杯、锥形瓶、渗漉筒
药品: 甘草粗粉、蒸馏水、硫酸、氢氧化钾、乙醇、甲醇、盐酸、三氯甲烷
【实验步骤】
1、甘草酸（粗品）的提取
（1）水提法：取甘草粗粉100g，加水煎煮提取2-3次，滤过得水提液，静置，取上清液，浓缩得甘草浸膏（含甘草酸>20%）。

浸膏加3倍量水溶解，加硫酸酸化，放置，滤过得甘草酸粗品。

（2）醇提法：取甘草粗粉100g，加10%乙醇渗漉，收集渗漉液酸化，放置过夜，滤过得沉淀（甘草总皂苷）。

总皂苷用7%盐酸的甲醇，回流4~6小时，滤取甲醇液，冷却，放置后滤取沉淀，溶于三滤甲烷，用5%KOH萃取除去黄酮类，再用蒸馏水洗去碱性，所得沉淀用80%乙醇重结晶，滤过得甘草酸白色针状结晶。

【注意事项】
1、提取甘草酸粗品时，水提液酸化后析出的沉淀，杂质较多难以过滤，故可倾出上清液再抽滤。

【实验装置图】【实验结论】【实验注意】。

第1篇一、实验目的本实验旨在学习甘草中黄酮类化合物的提取方法，通过溶剂提取、分离纯化等步骤，获得甘草黄酮粗品，并对其理化性质进行初步分析。

二、实验原理甘草中含有丰富的黄酮类化合物，具有多种生物活性。

本实验采用溶剂提取法，利用有机溶剂（如甲醇、乙醇等）提取甘草中的黄酮类化合物，再通过有机溶剂萃取、浓缩等步骤进行分离纯化。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：甘草粉末（市售）甲醇（分析纯）乙醇（分析纯）氯仿（分析纯）碳酸氢钠（分析纯）石英砂烧杯蒸馏装置漏斗滤纸烧瓶恒温水浴锅紫外-可见分光光度计2. 实验仪器：上述实验材料所列仪器四、实验步骤1. 甘草粉末的制备：将甘草粉末过筛，取40目筛的粉末备用。

2. 甘草黄酮的提取：（1）取10g甘草粉末，加入100mL甲醇，在恒温水浴锅中回流提取2小时。

（2）提取液过滤，滤液浓缩至约10mL。

3. 甘草黄酮的分离纯化：（1）将浓缩液转移至分液漏斗中，加入等体积的氯仿，充分振荡，静置分层。

（2）分取氯仿层，加入5g碳酸氢钠，充分振荡，静置分层。

（3）分取水层，用氯仿萃取2次，合并氯仿层。

（4）将氯仿层浓缩至约1mL，加入适量乙醇，溶解，转移至50mL容量瓶中，用乙醇定容。

4. 甘草黄酮的鉴定：（1）取适量甘草黄酮溶液，在紫外-可见分光光度计上测定其吸收光谱。

（2）与标准黄酮溶液进行比较，确定甘草黄酮的吸收峰。

五、实验结果与分析1. 甘草黄酮的提取率：根据实验结果，甘草黄酮的提取率为1.5%。

2. 甘草黄酮的理化性质：（1）甘草黄酮的吸收光谱：在紫外-可见分光光度计上，甘草黄酮的吸收峰位于278nm和355nm。

（2）甘草黄酮的性状：甘草黄酮为黄色粉末，无臭，味苦。

六、实验讨论本实验采用溶剂提取法提取甘草黄酮，操作简便，提取率较高。

通过有机溶剂萃取、浓缩等步骤，可获得较纯的甘草黄酮粗品。

实验结果表明，甘草黄酮具有良好的理化性质，具有进一步研究开发的潜力。

七、实验总结本实验成功地从甘草中提取了黄酮类化合物，并对甘草黄酮的理化性质进行了初步分析。

甘草酸的提取、分离及纯化实验甘草酸的性质及用途甘草为豆科植物的根，主要产于我国内蒙古、山西、甘肃、宁夏、新疆等地。

甘草味甘，故又名甜草、蜜草。

其主要化学成分有四类：三萜类、黄酮类、生物碱类及多糖类。

其中三萜类成分有甘草酸、羟基甘草次酸等。

甘草酸又称甘草皂苷、甘草甜素。

白色结晶，可用冰醋酸结晶，有很强的甜味。

分子式为C42H62O16，分子量为822.90。

纯品为白色、无臭的结晶性粉末，熔点212～217℃，易溶于热水及热的稀乙醇，几乎不溶于无水乙醇或乙醚。

甘草酸在植物中常以钙、钾、铵盐等形式存在。

从甘草根为原料制得的甘草浸膏中提取的铵盐，其甜度为蔗糖的50～100倍，精制甘草酸钠、钾盐的甜度为蔗糖的200～300倍，是一种天然的甜味剂。

甘草素入口后不能立刻感觉到甜味，而是逐渐才有感觉，并且一直延续很长时间还留有余味，因此甘草素与砂糖、葡萄糖等糖类复配，可以得到口感良好的甜味。

因为它是非糖类、高甜度的甜味剂，因此没有褐变、吸湿及发酵等缺点。

甘草素在医药上还可用作消化道溃疡治疗剂、解毒剂、消炎剂以及降血脂、抗动脉粥样硬化、降胆固醇等。

目前，甘草素已广泛用于食品、医药、化妆品、饮料、卷烟等行业。

我国甘草资源丰富，带皮甘草中含甘草酸7%～10%，去皮甘草中约5.5%～9.0%。

甘草经溶剂浸取，可以制得甘草浸膏，再进一步加工可以制得甘草酸。

1 实验目的1.掌握甘草酸的提取原理和方法。

2.掌握甘草酸的分离纯化方法。

2 实验原理甘草酸在原料中以钾盐或钙盐形式存在，其盐易溶于水，因此可用极性溶剂提取。

提取后滤液再加硫酸，因难溶于酸性溶液而析出游离甘草酸。

3实验材料、仪器和试剂实验材料：甘草实验仪器：电子分析天平（精确至0.001g）、移液管、紫外分光光度计、超声波清洗器、抽滤装置、水浴锅、旋转蒸发仪、容量瓶（10mL、25mL、100mL）试剂：70 ％的乙醇溶液、蒸馏水、硫酸（3.5mol/L）、浓氨水、25 ％氨水、冰醋酸、80%甲醇质量分数为70 ％的乙醇溶液（100 mL）：用量筒量取75 mL 无水乙醇，25 mL 二次重蒸馏水于烧杯中，混匀；质量分数为10 ％的乙醇溶液（100 mL）：用量筒量取12．5 mL 无水乙醇，87．5 mL 二次重蒸馏水于烧杯中，混匀；质量分数为0．5 ％的氨水溶液（100 mL）：用量筒量取2 mL 25 ％氨水，98 mL 二次重蒸馏水于烧杯中，混匀；质量分数为0．5 ％的氨性醇溶液（100 mL 以无水乙醇为溶剂）：用量筒量取98．5 mL 无水乙醇，1．5 mL25 ％氨水于烧杯中，混匀。

论甘草药用价值及其提取分离方法发布时间：2021-09-25T00:38:08.915Z 来源：《探索科学》2021年8月下16期作者：林丽[导读] 甘草作为我国中医临床治疗中的一种常用药物，其中的甘草黄酮、甘草酸、甘草次酸等几类化合物都是其中的重要组成部分，并且在抗氧化、抗病毒等方面发挥着十分重要的作用。

本文针对甘草有效成分的医疗价值做出了深刻的分析，随后就常见的有效成分提取分离方法进行了研究。

广州市康伦生物技术有限公司 3708021973102****0 林丽广州 510320摘要: 甘草作为我国中医临床治疗中的一种常用药物，其中的甘草黄酮、甘草酸、甘草次酸等几类化合物都是其中的重要组成部分，并且在抗氧化、抗病毒等方面发挥着十分重要的作用。

本文针对甘草有效成分的医疗价值做出了深刻的分析，随后就常见的有效成分提取分离方法进行了研究。

关键词:甘草；有效成分；提取分离方法1、甘草中有效成分的实际药用价值1.1甘草黄酮成分甘草黄酮作为甘草内所含有的一类重要化合物，在抗肿瘤方面具备着十分优异的疗效。

在实际的临床治疗过程中，甘草黄酮这类化合物质能够更好地抑制肿瘤细胞的增殖，对其生长产生一定的阻碍，并对肿瘤组织内部调控细胞凋亡的蛋白表达给出合理的影响，以此来达成诱导肿瘤细胞逐渐凋亡的治疗目的。

黄酮类物质的抗氧化作用是其能够对抗肿瘤生长的重要因素，因为自由基可以引发脂质的过氧化反应，又能够和蛋白质、核酸等物质进行作用，从而引发DNA链的断裂以及碱基改变，从而带来基因突变导致癌症的发生[1]。

甘草黄酮类物质能够在清除多种类型自由基的前提下，对脂质过氧化反应做出有效的抑制，发挥其抗肿瘤的临床治疗作用。

除此之外，甘草内所含有的异甘草素作为黄酮类物质的一种，能够在对L型钙电流通道以及电压依赖性钾电流通道做出有效阻滞，做到在L型钙电流峰值及电压依赖性有效抑制的同时，对整流K+电流进行延迟，以此对心律失常的潜伏期进行有效延长，缩短心律失常现象出现、持续的时间，具备较为显著的抵抗心律失常的医疗作用。

毕业论文文献综述生物工程甘草有效成分的分离与纯化的研究进展1 前言甘草是临床最常应用的药品。

生甘草能清热解毒，润肺止咳，调和诸药性；炙甘草能补脾益气，临床用量特大，出口量大。

除药用之外，食品上也大量用甘草做糕点添加剂，它的甜度是蔗糖的百倍。

甘草的主要有效成分为甘草酸(glycyrrhizic acid)或甘草甜素(glycyrrhizin)及甘草次酸(gly-cyrrhetinic acid)等三萜类化合物、甘草黄酮类化合物以及甘草多糖等[1-2]。

研究表明[3]，甘草酸及甘草次酸具有解毒、消炎、镇痛、抗肿瘤的作用，还用于防治病毒性肝炎、癌症以及艾滋病等。

我国甘草资源丰富，具体分布情况如下表1.1[4-5]表1-1中国甘草资源的分布情况乌拉尔甘草新疆、甘肃、青海、陕两、宁夏、内蒙占、河北、山西、山东、辽宁、黑龙江, 光果甘草新疆和青海胀果甘草新疆刺果甘草黑龙江、辽宁、内蒙古、河北、山东、江苏、河南、陕西粗毛甘草仅分布在新疆的东部和北部黄甘草甘肃云南甘草云南、四川等高寒地区侧果甘草新疆甘草的主要有效成分为草酸(glycyrrhizic acid)或甘草甜素(glycyrrhizin)及甘草次酸(gly-cyrrhetinic acid)等三萜类化合物、甘草黄酮类化合物以及甘草多糖等。

此外，国内外对甘草及其制剂药理与临床应用方面也进行了研究。

本文就甘草的有效成分的分离及纯化，药理作用等方面的最新研究加以概述。

2 甘草的化学成分概述2.1 地上部分化学成分研究2.1.1 黄酮类成分有研究证明，已发现了160多种甘草黄酮类化合物，药用作用优于甘草甜素[6]，从云南甘草中已分离出12种化合物，刺果甘草中分离得42种化合物用。

2.1.2 其它化学成分1989年日本Toshio从黑龙江产乌拉尔甘草的地上部分分离得到1个香豆素类成分，后来又分离到5个其他酚类衍生物。

贾世山等从内蒙古自治区西部地区产乌拉尔甘草叶分离到1个酚酸甙类成分。

生化实验报告设计性实验甘草中甘草酸的提取纯化以及多糖的提取一.实验目的（一）掌握甘草酸的提取原理和方法。

（二）熟悉皂甙的性质和测定方法。

（三）掌握甘草酸的分离纯化方法。

（四）掌握多糖类物质的提取方法。

二.实验原理（一）甘草酸提取原理中药甘草，属豆科植物，生长于草原向阳干燥钙质土地以及河岸沙质地土壤中，富含甘草皂苷，又称甘草酸，特点是高甜度、低热能、安全无毒，起泡性和溶血作用很低。

具有增溶、增加药物稳定性、提高生物利用度及降低毒副作用的功效。

甘草酸的许多金属盐，人体可适当吸收，不易造成元素的积蓄中毒。

因此常被用来配制成健脾开胃、止咳化痰、顺气止喘、治疗慢性肝炎、降低血脂的良药。

同时还具有抗癌防癌、干扰素诱生剂及细胞免疫调节剂等功能。

甘草酸在原料中以钾盐或钙盐形式存在，其盐易溶于水，因此可用极性溶剂提取，提取后滤液再加硫酸，因难溶于酸性溶液而析出游离甘草酸。

（二）甘草酸的纯化原理提取的甘草酸溶液中，还含有大量的蛋白质、果胶、鞣质等物质，在提取过程中，这些杂质也转移到了提取液中。

由于这些物质的大量存在，使得产物的含量降低，试验误差加大，同时甘草酸作为药物和保健品等使用时，杂质还会引起一些副作用，因此必须将这些杂质除去，对甘草酸进行纯化。

提取后滤液再加硫酸，因难溶于酸性溶液而析出游离甘草酸。

（三）残渣中甘草多糖的提取分离原理甘草在中医处方中占有举足轻重的地位，被医药界誉为“众药之王”。

甘草的主要有效成分是甘草酸、黄酮和多糖类化合物，但目前多糖还没有被有效利用。

甘草多糖具有抗肿瘤、免疫调节作用、抗辐射、抗病毒、抗溃疡、降血糖、抗衰老和免疫调节等作用，因此对多糖的研究越来越受到人们的重视。

本实验以提取甘草酸后的甘草渣为原料提取多糖，这对甘草资源的综合利用和多糖的开发均具有特别重要的意义。

甘草多糖为易溶于水的白色粉末，熔点很高，不溶于酒精等有机溶剂，故可用水提醇沉法得到甘草多糖。

三.实验器材（一）仪器、用具:剪枝剪、粉碎机、烘箱、微波炉、电子天平、抽滤机、分光光度计、真空干燥箱、XAD9 型树脂、旋转蒸发仪、柱层析系统（层析柱，恒流泵，紫外监测仪，部分收集器）（二）试剂：甘草、极性溶剂、硫酸、苯酚、95%乙醇、葡萄糖标准品、70%乙醇、甘草酸标准品。