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血清肌酐测定（生化分析仪）（一）检测目的规范血清肌酐（cr）检测实验，确保检测结果的准确性和重复性。
（二）标本米集1.血肌酐测定一般可以采用血清或血浆。
血清应新鲜无溶血；如用血浆，主张用肝素抗凝血浆。
2.稳定性：在4C冰箱可保存3天，在25C以下可保存较长时间。
3.建议使用带分离胶的真空采m管，并及时分离血清。
（三）测定方法1.方法：两点法波长：490-510nm 温度：25C、30C或37C 比色杯光径:1cm 将Ri与R n按1:1混和均匀，配成工作液，工作液预先保温到测试温度。
2.原理：苦昧酸法。
在碱性溶液中，苦味酸与肌酐作用生成橘红色的苦味酸肌酐复合物，在505nm波长监测吸光度，吸光度的速率变化（△ A/ min）与肌酐浓度呈正比。
（五）校准1.校准物的准备与保存，严格按照购置说明执行。
2.校准频率：（1）新仪器设备在开始使用时。
（2）设备进行重要维护保养以及发生故障维修之后。
（3）试剂盒在仪器上28天后。
（4）试剂批号更改后。
（5）更换试剂厂家后。
（6）由室内质控结果决定。
（7）定期校准，可由实验室根据检测系统（仪器与试剂）的情况自行决定校准周期。
（六）质量控制1.质控品：质控品应选择稳定、瓶问差小、基质效应小的物质。
同时，因为是定量检测项目，所以应选择两个不同浓度水平的质控品，这样有利于在不同的医学决定性水平上监测方法的性能。
2.质控方法的选择。
备选的质控规则如下：1 2s（一个质控结果超出i 土 2SD为违背此规则，提示警告）。
13s（一个质控结果超过i 土3SD为违背此规则，提示失控，存在随机误差）。
22s（两个连续质控结果同时超过i 土2SD提示失控，存在系统误差）。
R4s（当同一批内高和低值之间差值超过 4SD提示失控，存在随机误差）。
4 1s（4个连续的质控结果落在i+I SD或i 一 1SD的同一侧，提示存在系统误差，需具体分析）。
10x（10 个连续的质控结果落在靶值的同一侧，提示存在系统误差，需具体分析）。
一、实验目的1. 了解肌酐测定的原理和方法。
2. 掌握肌酐测定的操作步骤。
3. 学会使用肌酐测定试剂盒，并对其结果进行分析。
二、实验原理肌酐是人体肌肉代谢的终产物，主要由外源性和内源性两种组成。
外源性肌酐主要来源于食物中的肉类，内源性肌酐则是由人体肌肉代谢产生。
在正常情况下，肌酐主要通过肾脏滤过排出体外。
因此，通过测定血液或尿液中肌酐的浓度，可以评估肾脏的滤过功能。
本实验采用肌酐测定试剂盒，通过碱性苦味酸终点比色法测定血清肌酐浓度。
三、实验材料1. 肌酐测定试剂盒2. 血清样品3. 移液器4. 一次性吸管5. 比色皿6. 移液器吸头7. 混匀器8. 水浴锅9. 移液器吸头10. 洗耳球11. 计时器四、实验步骤1. 标准曲线的制备（1）取6个比色皿，分别加入不同浓度的肌酐标准溶液。
（2）在每个比色皿中加入适量的肌酐测定试剂A和B，混匀。
（3）将比色皿放入水浴锅中，加热至50℃恒温反应10分钟。
（4）取出比色皿，用洗耳球吹洗内壁，使其充分混合。
（5）用移液器取标准溶液和样品，分别加入比色皿中，混匀。
（6）用移液器将样品转移到比色皿中，立即放入比色仪中测定吸光度。
2. 样品测定（1）取3个比色皿，分别加入血清样品、试剂A和B，混匀。
（2）将比色皿放入水浴锅中，加热至50℃恒温反应10分钟。
（3）取出比色皿，用洗耳球吹洗内壁，使其充分混合。
（4）用移液器取样品，分别加入比色皿中，混匀。
（5）用移液器将样品转移到比色皿中，立即放入比色仪中测定吸光度。
3. 结果计算根据标准曲线，将样品的吸光度对应到肌酐浓度，即可得到样品的肌酐浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的制备根据实验数据，绘制标准曲线，得出线性方程：Y = 0.0162X - 0.0178（R² = 0.9989）2. 样品测定通过测定样品的吸光度，根据标准曲线计算得出样品的肌酐浓度为XX mg/dL。
六、实验结论本实验通过碱性苦味酸终点比色法测定血清肌酐浓度，操作简便，结果准确。
血尿液肌酐Cr测定作业指导书1. 实验原理Vitros CREA试剂是一种干燥，多涂层的，在透明的聚合物支撑基片上涂有分析成份的化学干片。
将一滴患者样品滴于干片上，分布层会使之均匀地分布。
随后，肌酐扩散至试剂层并水解为肌酸。
这样生成的肌酸在肌酸氨基水解酶的作用下转化为肌氨酸和尿素。
肌氨酸又在肌氨酸氧化酶的作用下氧化生成甘氨酸，甲醛和过氧化氢。
最后，过氧化氢催化白色染料生成呈色剂。
测定方式：两点比色法波长：670nm测试时间和温度：37℃约５分钟反应过程：肌酐氨基水解酶肌酐+ 水————→肌酸肌酸氨基水解酶肌酸+ 水———→肌氨酸+ 尿素肌氨酸氧化酶肌氨酸+ 氧气+ 水————→甘氨酸+ 甲醛+ 过氧化氢POD过氧化氢+ 白色染料————→呈色剂2. 标本：2.1 病人准备：无特殊。
2.2 样品类型：血清；肝素锂/钠和EDTA抗凝血浆。
定时收集的，稀释后的尿样。
2.3 标本采集与处理：2.3.1 血清和血浆样品特别要注意的是：不要用注射营养液的针管采集样品。
样品采集后4小时内要离心标本，吸出血清。
处理时要将其当成生物污染品。
2.3.2 尿液样品定时或随时采集的尿液。
测试前将1份样品加20份试剂级别的水进行稀释。
将测试结果乘以21，就得到原始样品中尿素氮的浓度。
冷藏的样品不能立即测试。
处理样品时要将其当成生物污染品。
3. 标本的存放：血清、血浆室温下最多5天；冷藏最多30天；冷冻保存可超过30天。
尿液样品室温下最多3天；冷藏最多5天；-18℃可长期保存。
4. 标本的运输：样品要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。
5. 标本拒收的标准：污染、抗凝剂、防腐剂不符合要求，标本放置时间过长。
6. 试验材料：6.1 测试Cr所需的物品包括：Vitros化学定标物Kit1；Vitros特制质控液；Vitros 7%BSA稀释液。
强生厂家提供原装进口，试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。
肌酐测定标准操作程序1. 摘要肌酐试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清或尿液中肌酐的含量。
2. 适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清尿液中肌酐的浓度。
3. 职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定CREA 浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行,室负责人监督管理；本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的肌酐（CREA ）试剂盒采用的是肌氨酸氧化酶法。
5. 原理上海科华生物工程股份有限公司的肌酐 (肌氨酸氧化酶法)试剂盒的测定原理如下：O H N N O H O H HCHO O O H O H O H 2222222224---42+−−−→−-+-+++−−−−→−+++−−−−→−+−−−−→−+醌亚胺间甲苯胺磺丙基乙基氨基安替比林甘氨酸肌氨酸尿素肌氨酸肌酸肌酸肌酐过氧化物酶肌氨酸氧化酶肌酸脒基水解酶肌酐氨基水解酶 肌酐在肌酐氨基水解酶的作用下水解成肌酸，肌酸在肌酸脒基水解酶的作用下生成肌氨酸和尿素，其中产物肌氨酸在肌氨酸氧化酶的作用下生成甘氨酸、过氧化氢和甲醛。
最后过氧化氢在过氧化物酶的催化下与色原底物4-氨基安替比林和N-乙基-N-磺丙基-间甲苯胺反应生成红色化合物醌亚胺.由于醌亚胺在波长546nm 处有最大吸收峰,所以在一定底物浓度范围内, 546nm 处吸光度的变化值与样本中肌酐的含量成正比.6. 仪器日立7600自动生化分析仪7. 试剂7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2 试剂瓶内主要成分：肌酸脒基水解酶、肌氨酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶、ESPMT 、肌酐胺基水解酶、4-氨基安替比林7.3试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为12个月。
试剂不可冰冻。
7.4试剂准备：试剂为即用式。
8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。
血清肌酐测定操作流程及评分标准血清肌酐测定是一种衡量肾脏功能的常见检测方法。
在临床上，通过检测血清中的肌酐水平来评估肾脏功能是否正常。
本文将介绍血清肌酐测定的操作流程以及评分标准。
一、操作流程1. 准备工作在进行血清肌酐测定前，首先应准备好所需的试剂和设备，包括：- 血清肌酐测定试剂盒- 10ml离心管和离心机- 比色皿或试管- 显微镜（可选）- 多功能生化分析仪2. 采集血样使用采血针和血管采血带，从患者的静脉或手指上采集适量的血液样本，约2-5ml。
注意遵循无菌操作规范，避免任何交叉污染。
3. 分离血清采集的血液样本放入10ml离心管中，并轻轻摇晃几次，确保血液充分混合。
然后将离心管放入离心机中，以3000 rpm的速度离心10分钟。
离心后，血液将被分离成血清和红细胞。
4. 转移血清用吸管小心地将离心管中的血清转移到比色皿或试管中，注意不要和红细胞混合。
将比色皿或试管放置在平台上，以便进行测量和分析。
5. 操作仪器根据试剂盒的说明书，将试剂按照比例加入到血清中，并轻轻混合。
然后使用多功能生化分析仪，根据仪器的使用说明进行操作。
在仪器上选择相关参数，如波长等，然后放入试管或比色皿进行测量。
6. 记录结果根据仪器上的显示结果，记录下测得的血清肌酐浓度。
同时，还可以观察血清的颜色和透明度，以便在有需要时进行进一步的分析。
二、评分标准血清肌酐测定的评分标准主要是基于测得的血清肌酐浓度进行划分。
一般来说，结果的评估可以按照以下标准进行：- 正常范围：男性0.6-1.2 mg/dl，女性0.5-1.1 mg/dl。
- 轻度肾功能异常：男性1.3-1.5 mg/dl，女性1.2-1.4 mg/dl。
- 中度肾功能不全：男性1.6-2.5 mg/dl，女性1.5-2.4 mg/dl。
- 重度肾功能不全：男性＞2.5 mg/dl，女性＞2.4 mg/dl。
需要注意的是，评估结果不仅仅依赖于血清肌酐浓度，还应综合考虑患者的年龄、性别、身体状况等因素，以获得更准确的肾功能评估结果。
肌酐测定的操作规程1、用途：测定人血清中肌酐的浓度。
2、原理：在碱性条件下，血清中的肌酐能够与苦味酸作用生成橘黄色的复合物，适用生化分析仪检测505nm波长处的吸光度的变化，可知被检测血清中肌酐的浓度。
3、适用仪器：奥林巴斯AU480型全自动生化分析仪.4、样本要求：4.1、样本种类：新鲜无溶血血清。
4.2、样本采集：常规静脉采血约2ml，不抗凝。
置普通管中，或采用含有分离胶的真空采血管。
4.3、样本干扰：对反映吸光度有干扰的样本，包括溶血和浑浊的样本都可能影响检测结果遇上述情况建议重新采集标本。
4.4、样本保存：血清样本2℃—8℃可稳定3天，-20℃可保存一个月，忌反复冻融。
5、检测方法：5.1、试剂的准备：试剂开瓶即可使用。
5.2、检测步骤：2、动生化分析仪操作步骤：参数设置→试剂装载→校准→质控→样品加载→测定→结果审核→报告。
5.3、校准：用K因素进行试剂空白校准，也可使用Diazyme公司校准品进行校准操作，当试剂更换批号、出现质控漂移、仪器做完保养后及重要零件更换时，须重新校准。
5.4、结果计算：全自动生化分析仪会自动给出检测结果。
6、参考范围：(医院应根据本地区实际情况建立自己的参考范围。
）7、注意事项：7.1、试剂具有一定的酸碱性，避免直接接触皮肤和眼睛，切勿吞咽。
7.2、使用后的器具应按照规定处理，扔入指定的垃圾箱内，不可随处乱扔，防止环境污染和二次使用。
7.3、由于运输过程产生渗液或漏夜的产品，或在运输贮存中没有按照说明书要求进行维护的试剂，不可使用。
7.4、试剂只用于体外诊断。
8、参考文献：中华人民共和国卫生部医政司，全国临床检验操作规程（第三版），东南大学出版社，2006。
王惠萱、李雪梅、王冈，临床检验操作手册，云南科技出版社，2008.。
肌酐测定试剂盒（肌氨酸氧化酶法）标准化操作规程1目的规范实验室操作，保证检验工作顺利有效进行特制定此规程。
2授权操作人经培训且考核通过的临床检验人员。
3适用范围本试剂适用于体外定量检测人血清、血浆或尿液中肌酐的浓度。
4检验方法本试剂采用酶法测定肌酐的浓度。
5检验原理样本中的肌酐在试剂中肌酐酰胺水解酶的催化下水解成肌酸，肌酸在试剂中肌酸脒基水解酶的催化作用下，被水解成肌氨酸和尿素，肌氨酸在肌氨酸氧化酶的作用下，生成的肌氨酸与水和氧反应，产生甘氨酸、甲醛和过氧化氢，生成的过氧化氢在过氧化物酶的催化下与苯胺类色原物质和4-氨基安替比林作用产生水和醍亚胺色素，醍亚胺色素的生成量与样本中总肌酐的含量成正比，通过测定特定波长处反应最终生成的色素量，可以计算出样品中总肌酐的浓度。
肌酐H O肌酐酰胺水解酶肌酸2"肌酸H O肌酸脒基水解酶，肌氨酸+尿素2肌氨酸+H O+O 肌氨酸氧化酶甘氨酸甲醛H O22'22H O +4-氨基安替比林+苯胺类色原物质过氧化物酶醌亚胺色素+H O22*26检验标本要求6.1样本为血清、血浆或尿液。
6.2血浆样本采用EDTA抗凝，应不溶血。
样本采集后应尽快分析。
6.3肌酐样本在2°C〜8°C可稳定7天。
7试剂及配套品7. 1试剂来源长春迪瑞医疗科技股份有限公司肌酐试剂盒（酶法）7.2试剂组成7.3试剂的稳定性与贮存：7.3.1试剂在2C8C条件下，干燥、避光、密封贮存，有效期为12个月。
7.3.2试剂开封后在2C8C条件下可稳定30天。
7.4试剂的变质指示：若试剂混浊，不能再使用。
8实验仪器及性能指标8.1实验仪器迪瑞CS系列全自动生化分析仪8.2试剂性能指标8.2.1空白吸光度：A<0.1o8.2.2分析灵敏度：测试1pnol/L被测物时，吸光度变化△ A>0.01。
8.2.3线性范围：30pnol/L〜25 pnol/L区间内，线性相关系数I r > 0.99;[30, 70] pnol/L区间内，线性偏差应不超过±7 mol/L; (70, 25] pnol/L区间内，线性偏差不超过±10%。
血清肌酐（Creatine）苦味酸法测定作业指导书1.实验原理不去除蛋白的Jaffe碱性苦味酸连续监测比色法。
肌酐与苦味酸在碱性条件下形成橙红色复合物，在固定的时间内吸光度增加速率与样品中肌酐浓度呈正比。
肌酐+ 苦味酸肌酐苦味酸复合物2. 标本采集2.1 病人准备：早晨空腹采血（空腹12小时左右），静脉采血。
2.2 类型：血清，肝素血浆，尿液。
3. 标本存放：血清、血浆的稳定性：4～25℃保存可稳定7天；-20℃保存至少可稳定3个月。
尿液的稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定6天；-20℃保存可稳定6个月对尿液用蒸馏水作1:49稀释后检测，结果乘50后报告。
4. 标本运输：常温条件下运输5. 标本拒收的标准：细菌污染的标本不能作测定。
6. 实验材料6.1 上海申能肌酐检测试剂盒（142 1717170 1 试剂1：6×64ml＋试剂2：6×16ml）。
6.1.1 试剂组成：试剂1（R1）：氢氧化钠0.16mol/L试剂2（R2）：苦味酸 4.0mmol/L6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.5 注意事项：试剂1中含氢氧化钠。
请按以下条例处理：R36/38: 刺激眼睛和皮肤。
S26:如与眼睛接触应立即用大量水冲洗并请医生诊视。
S37/39:戴上手套并采取合适的眼/脸的防护。
S45:如发生事故或感觉不适立即请医生诊视。
试剂2中含苦味酸。
吸入、接触皮肤、吞咽将会中毒。
戴上手套并采取合适的眼/脸的防护。
如与皮肤接触应立即用聚乙二醇400（DAB8）或大量水冲洗。
如情况严重，立即请医生诊视。
使用实验室试剂应采取必要的预防。
6.2 校准品：使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
肌酐（CREA）改良JAFF法测定标准操作程序（SOP）文件单位：故城县计划生育技术服务站编写者：宿金涛日期：2012年5月28日一、方法学原理肌酐与苦味酸在碱性条件下形成橙红色复合物，在固定的时间内吸光度增加速率与样本中肌酐浓度呈正比。
肌酐+苦味酸肌酐苦味酸复合物：二、试剂深圳迈瑞规格：R1：4*40mL，R2：4*40mL，S：1*1.5mL试剂文号：粤食药监械（准）字2010第2400511号主要组成成分：试剂1（R1）：NaOH溶液试剂2（R2）：苦味酸溶液校准品：肌酐溶液。
校准品最终可溯源至参考方法GC-MS，浓度见标识。
三、仪器迈瑞BS-390生化分析仪四、样本要求血清，肝素血浆，晨尿。
血清、血浆的稳定性，2-25℃保存可稳定3天。
尿液的稳定性，对尿液用蒸馏水作1+49稀释后检测，结果乘50后报告。
样本不可冰冻，不可使用已被污染的样本。
五、检验方法：测定条件：主波长510nm 次波长700nm温度37℃分析类型固定时间法，反应方向上升检测扣队空白杯六、操作步骤：空白/校准/样本18uL试剂1 180uL混匀，37℃孵育1min试剂2 180uL混匀，37℃孵育30s后连续测定2min内的吸光度，计算吸光度变化率（ΔA/min).*ΔA/min-ΔA/min样本营-ΔA/min空白管计算：建议使用校准品校准仪器，以吸光度变化率（ΔA/min）为Y轴，浓度为X轴，在生化分析仪上建立校准曲线，根据样本的ΔA/min在校准曲线上得到相应的浓度。
七、参考范围血清或血浆：男性62-106umoL/L(0.70-1.20mg/dl)妇性44-80umoL/L(0.50-0.90mg/dl)晨尿：男性3450~22900umoL/L(39~259mg/dl)女性2470-19200umoL/L(28-217mg/dl)八、临床意义1、血清Cr增高：①患急性和慢性肾小球肾炎、肾硬化、多囊肾、肾移植后排异反应等血清Cr含量增高，对于慢性肾炎者，血清Cr含量越高，预后越差。
一、实验目的本次实验旨在通过肌酐测定，了解肌酐在人体内的代谢过程，评估肾功能状况，并探讨影响肌酐水平的相关因素。
二、实验原理肌酐是人体肌肉组织代谢过程中产生的一种非蛋白含氮物质，主要由外源性肌酸代谢而来。
正常情况下，肌酐在体内保持相对稳定水平，主要通过肾脏排泄。
因此，肌酐测定可以反映肾脏的滤过功能，是评估肾功能的重要指标。
三、实验材料1. 样本：新鲜尿液、血液2. 试剂：肌酐酶、肌酸酶、肌氨酸氧化酶、尿素、甘氨酸、甲醛等3. 仪器：肌酐测定仪、离心机、水浴箱等四、实验方法1. 血清肌酐测定（1）取血清样本，按照试剂盒说明书进行肌酐酶催化反应，生成肌酸。
（2）加入肌酸酶，将肌酸水解产生肌氨酸和尿素。
（3）肌氨酸在肌氨酸氧化酶作用下氧化生成甘氨酸、甲醛等产物。
（4）通过测定产物浓度，计算血清肌酐含量。
2. 尿肌酐测定（1）取尿液样本，按照试剂盒说明书进行尿肌酐测定。
（2）通过测定尿液中肌酐浓度，评估肾功能状况。
五、实验结果1. 血清肌酐测定结果本次实验血清肌酐浓度为XX μmol/L，与正常值范围XX-XX μmol/L相符。
2. 尿肌酐测定结果本次实验尿肌酐浓度为XX μmol/L，与正常值范围XX-XX μmol/L相符。
六、讨论与分析1. 肌酐测定结果分析本次实验血清肌酐和尿肌酐测定结果均在正常范围内，说明受试者肾功能正常。
2. 影响肌酐水平的相关因素（1）蛋白质摄入：蛋白质摄入过多或过少均可影响肌酐水平。
高蛋白饮食可导致血清肌酐升高，低蛋白饮食则可能导致血清肌酐降低。
（2）肌肉含量：肌肉含量与肌酐生成密切相关。
肌肉含量增加，肌酐生成量也随之增加。
（3）肾功能：肾功能受损会导致肌酐排泄受阻，引起血清肌酐升高。
3. 肌酐测定的临床意义肌酐测定是评估肾功能的重要指标。
通过肌酐测定，可以早期发现肾功能异常，为临床诊断和治疗提供依据。
七、结论本次实验通过肌酐测定，成功评估了受试者的肾功能状况。
实验结果表明，受试者肾功能正常。
SOP标准操作程序CREA肌酐（货号：OSR6178）实验原理：肌酐测量用于诊断和治疗肾脏疾病。
血清肌酐测定被证明在评价肾小球功能和监测肾透析方面是有用的。
但是，血清水平对于早期肾损坏并不敏感，在治疗肾衰竭的过程中，它对血液透析的反应比尿素氮（BUN）慢得多。
血清肌酐和BUN都用来区分肾前性氮质血症和肾后性（梗阻性的）氮质血症。
血清BUN的增加并不伴随血清肌酐的增加对于识别肾前性氮质血症是非常重要的。
对于肾后性氮质血症，血清BUN和肌酐都增加，但是增加并不是成比例地大于BUN。
血清肌酐水平随人的年龄，体重和性别而变化。
有时它在肌肉块少，恶病质的病人，截肢者和老年人中的水平较低。
血清肌酐水平正常并不排除肾功能受损。
方法奥林巴斯AU640肌酐的测定是Jaffe方法的改良动力学法2，在这种方法中，肌酐在碱性条件下和苦味酸发生反应，形成一种红-橙色化合物。
但是，这个反应并不是肌酐所特有的，因为其它的物质，如葡萄糖，丙酮酸盐，抗坏血酸和乙酰乙酸盐与苦味酸也会发生反应，生成相似的颜色3。
Fabiny和Ertingshausen4发现，碱性肌酐苦味酸达到最大颜色变化与假性肌酐有不同的速率。
Cook5利用碱性苦味酸阳性物质不同的反应速率得到比Jaffe反应更有针对性的结果。
在520/800nm吸光度变化率与标本中肌酐浓度成正比。
肌酐+苦味酸-------------﹥红---橙色化合物标本：病人准备：无特殊要求。
类型：标本最好是无溶血的血清或肝素化的血浆。
血清应从红血球中尽快分离出来。
标本稳定性：血清肌酐在2～8℃下稳定7天，在冰冻条件下（-20℃）可长时间保存。
仪器与材料:仪器：奥林巴斯AU640生化分析仪材料：奥林巴斯AU640肌酐参与反应成份的最终浓度：氢氧化钠120 mmol/L苦味酸 2.9 mmol/L其中含有保护剂。
注意：1. 此试剂为体外诊断用，不要吞服。
2. R1有腐蚀性，可燃烧。
不要入口。
避免和眼睛，皮肤或衣服接触。
肌酐的测定(速率法1:概述肌酐(creatinine,Cr是肌肉在人体内代谢的产物,每20g肌肉代谢可产生1mg 肌酐。
肌酐主要由肾小球滤过排出体外。
血中肌酐来自外源性和内源性两种,外源性肌酐是肉类食物在体内代谢后的产物;内源性肌酐是体内肌肉组织代谢的产物。
内源性肌酐是体内肌肉组织代谢的产物。
在肉类食物摄入量稳定时.身体的肌肉代谢又没有大的变化,肌酐的生成就会比较恒定。
2 样本收集新鲜无溶血标本,血清或血浆样本均不溶血。
血浆样本只能采用肝素或EDTA 抗凝。
样本在4摄氏度可稳定7天。
采血前病人应禁食12小时,采集静脉3ml,待凝固后(最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟通常为加抗凝剂的血液在30-60分钟凝血析出血清。
3000r/min 离心5-10分钟,分离出血清备用。
不建议采用血浆标本。
3:方法原理样品中的肌酐与碱性苦味酸反应生成红色复合物,该反应为特异性反应,可与其他物质发生作用。
本试剂采用速率法,增强了反应的特性,反应过程中形成的红色复合物与杨品中肌酐的浓度成正比,可在波长500-520nm 处进行测定。
4剂来源,配置及储存试剂来源:试剂配置:试剂一和试剂二均为液体试剂,可直接使用。
启用后在2-8度可稳定30天。
若试剂混浊,或以蒸馏水为空白在510nm处的光吸收值低于1.0A,应予丢弃。
试剂储存:试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。
5分析仪器CS-600B全自动生化分析仪6计算方法肌酐(=( A/min*Tv*1000(6.3*Sv*P式中Tv=总反应体积Sv=样本体积6.3=NADH在510nm处的毫摩尔消光系数P=比色杯光径(cm7 线性范围:本实验的线性范围:0----2mmol/L8 参考范围:男性;62---115女性53--979 失控控理1:立即重测同一质控品,如重测后结果仍不再允许范围,请进行下一步。
2:新开一瓶质控品,重测失控项目,如新开的质控血清结果正常,那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质,如结果仍不再允许范围,则进行下一步。
肌酐测定的标准规程【目的】体外检测血清中肌酐（CR）的含量。
【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
2.本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机一、检测原理血清中的肌酐在肌酐氨基水解酶作用下水解产生肌酸，生成的肌酸在肌酸脒基水解酶作用下产生肌氨酸，肌氨酸再经肌氨酸氧化酶作用生成甘氨酸和过氧化氢，后者再在过氧化物酶作用下与酚衍生物和4-氨基安替比林反应生成红色的醌亚胺色素，根据比色测定醌亚胺色素的量，从而计算出肌酐的含量。
二、试剂1.试剂本科使用北京世纪沃德生物科技有限公司CR试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：2.校准要求用RONDOX 复合校准品，定标值可溯源到IFCC(国际临床化学联合会)标准品。
详细操作步骤参见仪器操作规程。
当发生下列情况时，重新定标分析:试剂批号改变或质控值显著变化；仪器提示需要定标时；对分析仪进行了重要的预防性维护，或更换了关键部件三、操作按生化分析仪操作要求结合长征试剂说明书输入测定参数，并按校准、质量控制、样本测定的顺序进行常规测定。
四、计算mol/L)(mol/L)(μμ校准品浓度（校准品）（样本）肌酐浓度⨯∆∆=A A 五、质控程序 1.建议采用朗道水平2(正常范围质控）和 水平3（病理范围质控）两个水平的血清进行室内质控。
一、实验目的1. 了解肌酐在人体中的生理作用和临床意义；2. 掌握酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定肌酐的原理和方法；3. 熟悉实验操作步骤，提高实验技能。
二、实验原理肌酐是人体内代谢产物，主要由肌肉组织产生，经肾脏排出。
血液中肌酐浓度可反映肾脏功能。
酶联免疫吸附测定法（ELISA）是一种常用的免疫学检测方法，通过抗原抗体特异性结合，利用酶催化底物产生颜色反应，从而实现对特定抗原或抗体的定量检测。
本实验采用双抗体夹心法测定肌酐。
首先，将纯化的人肌酐抗体包被在微孔板上，制成固相抗体。
然后，向微孔中加入待测样本，肌酐与固相抗体结合。
接着，加入HRP标记的肌酐抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。
经过彻底洗涤后，加入底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅与样本中的肌酐浓度呈正相关。
通过测定吸光度（OD值），利用标准曲线计算样本中肌酐浓度。
三、实验材料1. 试剂：肌酐ELISA试剂盒、TMB底物、洗涤液、盐酸；2. 仪器：酶标仪、微量移液器、微量离心机、加样器、吸管、离心管、移液管、培养箱、磁力搅拌器等；3. 样本：待测血清或血浆。
四、实验步骤1. 标准品制备：根据试剂盒说明书，将标准品稀释成不同浓度，分别加入微孔板中；2. 样本处理：取待测血清或血浆，按照试剂盒说明书进行稀释和加样；3. 抗体加样：向所有微孔中加入一定量的纯化人肌酐抗体；4. 标本孵育：将微孔板放入培养箱中，孵育一段时间；5. 洗涤：将微孔板放入洗涤液中，进行充分洗涤；6. 酶标抗体加样：向所有微孔中加入一定量的HRP标记的肌酐抗体；7. 标本孵育：将微孔板放入培养箱中，孵育一段时间；8. 洗涤：将微孔板放入洗涤液中，进行充分洗涤；9. 底物加样：向所有微孔中加入一定量的TMB底物；10. 酶标反应：将微孔板放入培养箱中，孵育一段时间；11. 终止反应：向所有微孔中加入一定量的盐酸终止反应；12. 测定吸光度：将微孔板放入酶标仪中，测定450nm波长下的吸光度（OD值）；13. 结果计算：根据标准曲线和样本OD值，计算样本中肌酐浓度。
肌酐测定SOP
1、检测方法原理
1.1酶法
1.2肌酐酶将肌酐水解为肌酸;肌酸酶水解肌酸形成肌氨酸;肌氨酸氧化酶氧化肌氨酸，产生过氧化氢。
在过氧化物酶的存在下，过氧化氢与4-氨基安替比林和HTIB 反应，产生红色醌亚胺。
显色强直接和肌酐浓度呈比例.
2、样品准备
用标准样品管收集血清。
肝素或者EDTA 抗凝血浆。
在1 小时内分离血清或血浆并立即检测,储存于：4℃- 8℃稳定7 天-20 ℃稳定3 个月 ,-70℃长期稳定.
3、试剂
产品目录号: 11491458
R1试剂，6×216ml
R1试剂，6×116ml
R1 即用液体试剂。
开瓶后上机冰箱稳定28 天。
R2 即用液体试剂。
开瓶后上机冰箱稳定28 天。
4、校准
4.1标准化：以CRM 470 参考品对肌酐检测方法进行标准化。
校准品（C.f.a.s ，产品目录号（Cat. No.759350）。
S1 0.9%NaCl
4.2校准周期和要求：每过28天。
推荐进行两点校准
4.2.1试剂批号更换时
4.2.2质量控制有问题时
5、质量控制
正常质控液名称: PreciControl ClinChen Multi 1
病理质控液名称: PreciControl ClinChen Multi 2
上述的各质控品在产品规定的条件下，可以储存至产品失效期。
复溶后25 ℃稳定12 小时;4 ℃稳定5 天;-20 ℃稳定1 个月（冻融一次）
控制区间和限值应适应各实验室的要求。
检测的控制值应在确定的限值内。
若控制值失控，实验室应建立纠正措施。
6、分析性能的确认
6.1 可报告范围：2.7–2652 µmol/L
6.2 灵敏度：2.7 µmol/L
最低灵敏度为非空白的最低可检测白蛋白浓度。
对最低总蛋白标准进行21 次重复测定，以3 倍标准差确定检测低限。
6.3 抗干扰能力
判断指标：脂血1250 时的回收率在初始值的±1 0%，干扰属可接受。
黄疸：I 指数低于24 结合胆红素和游离胆红素浓度约为60mg/dl 没有明显干扰。
溶血：H 指数低于700 血红蛋白浓度约为1 000mg/dl 没有明显干扰。
6.4 参考值< 6.2 mmol/L。
