２００８年第１８期 叩酗散
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高效毛细管电泳技市及其应用
。扬州大学 韩庆广 罗四维 王潍波
高效毛细管电泳（ＨＰＣＥ）又称毛细管电泳 （ＣＥ），是２０世纪末发展的一种高效、快速的分 离技术，是经典电泳技术和现代微柱分离相结合
的产物，是继高效液相色谱（ＨＰＬＣ）之后又一 重大进展。它使分析科学进入纳米水平，为小体 积样品分析提供可能，适合于从无机离子到有
机、从核电离子到中性分子的分离分析。 １技术介绍
１．１基本原理毛细管电泳统指以高压电场为驱 动力，以毛细管为分离通道，依据试样中各组分
间淌度（指单位场强下离子的平均电泳速度）和 分配行为上的差异而实现分离的一类分离技术。
它可实现很小体积带电或不带电组分的快速、高 效分离。在电解质溶液中，带电粒子在电场作用 下，以不同的速度向其所带电荷相反方向迁移的
现象叫电泳。而此时双电层中的水合阳离子引起 流体整体向负极方向移动的现象叫电渗。电渗流
的大小取决于电场强度、电解质ｐＨ、缓冲液的 组成和离子强度、内摩擦和毛细管表面的特点
等，这些因素单一或互相结合，均能提高分离效 果。粒子在电解质中的迁移速度等于电泳流和电 渗流两种速度的矢量和。阳离子的移动方向和电
渗流一致，最先流出；中性粒子的电泳流速度为 零，其迁移速度等于电渗流速度；阴离子的移动
方向与电渗流相反，但因电渗流速度一般都大于
电泳速度，它将在中性粒子之后流出，从而实现 分离。 １．２分类特点ＣＥ白诞生以来，已由最初的蛋
白质、肽类分离，扩大到从离子到中性物质、从 小分子到生物大分子一系列化合物的分离，主要
分离模式由１种增加至６种。其中，ＣＥ的分离原
理及应用见表１。ＣＥ相对于其他分离方法如 ＨＰＬＣ、薄膜色谱法等具有如下优点：分离速度 快，适用于临床快速诊断；运行费用少，只要少
量的缓冲液即可；分离效率高，柱效可达１０ 以 上，适用于体内药物分析、生化分析等。
国际检验医学杂志２０１１年７月第３２卷第１Ｏ期Ｉｎｔ Ｊ ＬａｂＭｅｄ，Ｊｕｌｙ ２０１１，Ｖｏ１．３２，Ｎｏ．１０
［ｎ］Ｓａｎｄｙ Ｆ．Ｌｏｎｇ—ｔｅｒｍ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｆｔｅｒ ｐｅ— ｄｉａｔｒｉｅ ｌｉｖｅｒ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉ０ｎ［Ｊ］．Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｏｒｇａｎ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ，
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・综 述・ ・ ｌＯ８３ ・
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1. 固定相：固体物质（微粒高效填充剂和均匀填充技术）柱效高（速率理论可判）
2. 流动相：液体物质
3. 与经典液相色谱的不同点：引入气相色谱理论，采用高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器。
4. 优点：分析速度快，分离效率高，灵敏度高，操作自动化。
5. 与气象色谱比较的差异性：
气象色谱适于测定较易挥发，热稳定性差，相对分子质量大的物质。仅采用有限的种类的惰性气体作为流动相，通过载气种类改变分离效果有限。
高效液相色谱流动相与固定相有亲和力，分离过程是组分，固定相和流动相三者之间相互作用的结果，所以分离效果好。可选择的流动相种类多，通过改变多种与流动相相关的因素（如化合物种类、浓度、强度等）已达到分离的目的。
6. 影响液相色谱柱效的因素：
H=He+Hd+Hs+Hm+Hsm
涡流扩散项He：微粒高效，影响微弱
纵向扩散项Hd：流速较大时，可以忽略
流动相传质阻力相Hm：小径填料，减小柱空间，有利于分配平衡
传质阻力相Hs：化学键合色谱可以忽略。
滞留流动相传质阻力相Hsm：
提高柱效的方法：缩短进样时间、使用细粒径填料，改善传质过程，减小检测器的死体积。
7. 高效液相色谱仪：高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统。
8. 基本类型:
液固吸附色谱液液分配色谱化学键合色谱离子交换色谱
毛细管电泳和其他分离技术
第２７卷第２期 ２００２年２月 中国中药杂志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｆｌｉｅａ Ｖｏ１．２７．Ｎｏ ２
．２００２
谱法等，其中以成像法和薄层色谱法使用较为普
遍Ｌ５Ｊ，因此我们采用简便有效的成像法和薄层色谱
法进行鉴别。
２．５．１显微成像法取含挥发油的包合物与按制
备方法制备的不加任何药物的空白包合物各少许，
用水装片置光学显微镜下观察（１０×１０倍），结果：
空白包合物为规则的半透明板状结晶，含油的包台
物为不规则的粉末状或内含黑色物质的不透明的块
状物。证明挥发油与Ｂ＿环糊精确已形成包合物。
２．５．２薄层层析法将挥发油和回收后的挥发油
加无水乙醇溶液（５０％，ｖ／ｖ）， 环糊精及口一环糊精
挥发油包合物制成饱和溶液，吸取上述４种溶液各
１０ Ｌ分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以正己烷一氯
仿（３：２）为展开剂展开，喷以５％香草硫酸溶液，１０５
℃烘至斑点显色清晰，羌活挥发油和回收后的挥发
油分别显４个相同颜色的斑点，Ｂ一环糊精挥发油包
台物和Ｂ．环糊精都在原点未展开，表明挥发油包合
后确已形成包合物而非混合物。
２．６加速试验
分别将挥发油包合后干法制粒的颗粒（定量加
人含２ ｍＬ油的包合物）和将挥发油直接喷洒制备的
颗粒（定量加入２ ｍＩ 油）各２０ ｇ放置于蒸发皿中，
于６０℃恒温箱烘４８ ｈ，取出，作为加速试验样品，测
定挥发油保留率。挥发油经包合保留了９４％，ＲＳＤ
＝０．４９％（ ＝３）；不经包台的保留了１３．５％，ＲＳＤ ＝３．７ ｏｋ（ ：３）。
３小结与讨论
３．１本实验通过３种包合方法的比较，胶体磨法的
挥发油利用率较高，并且从生产操作来说此法最为
实用，较搅拌法、超声法快速、简便，尤其适合工业化
生产。
３．２挥发油经Ｂ＿环糊精包合后能增加挥发油的溶
解性，降低其挥发性，并且通过加速实验表明，包合
后能大大提高制剂的稳定性和挥发油的利用率。
