生物化学---酶类
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生物化学第3章酶生物化学第3章酶第3章酶自学建议1.掌握酶及所有相关的概念、酶的结构与功能的关系、酶的工作原理、酶促反应动力学特点、意义及应用。
2.熟识酶的分子共同组成与酶的调节。
3.了解酶的分类与命名及酶与医学的关系。
基本知识点酶是对其特异底物起高效催化作用的蛋白质。
单纯酶是仅由氨基酸残基组成的蛋白质,融合酶除所含蛋白质部分外,还所含非蛋白质辅助因子。
辅助因子就是金属离子或小分子有机化合物,后者称作辅酶,其中与酶蛋白共价紧密结合的辅酶又称辅基。
酶分子中一些在一级结构上可能相距很远的必需基团,在空间结构上彼此靠近,组成具有特定空间结构的区域,能与底物特异结合并将底物转化为产物,这一区域称为酶的活性中心。
同工酶就是指催化剂相同化学反应,酶蛋白的分子结构、化学性质乃至免疫学性质相同的一组酶,就是由相同基因编码的多肽链,或同一基因mRNA分解成的相同mrna所译者的相同多肽链共同组成的蛋白质。
酶促反应具有高效率、高度特异性和可调节性。
酶与底物诱导契合形成酶-底物复合物,通过邻近效应、定向排列、表面效应使底物容易转变成过渡态。
酶通过多元催化发挥高效催化作用。
酶促反应动力学研究影响酶促反应速率及其影响因素,后者包括底物浓度、酶浓度、温度、ph、抑制剂和激活剂等。
底物浓度对反应速率的影响可用米氏方程表示。
v?vmax[s]km?[s]其中,km为米氏常数,其值等同于反应速率为最小反应速率一半时的底物浓度,具备关键意义。
vmax和km需用米氏方程的双倒数作图去求得。
酶在拉沙泰格赖厄县ph和拉沙泰格赖厄县温度时催化活性最低,但拉沙泰格赖厄县ph和拉沙泰格赖厄县温度不是酶的特征性常数,受到许多因素的影响。
酶的抑制作用包含不可逆遏制与对称遏制两种。
对称遏制中,竞争抑制作用的表观km值减小,vmax维持不变;非竞争抑制作用的km值维持不变,vmax增大,反竞争抑制作用的km值与vmax均增大。
在机体内酶活性与含量的调节是代谢调节的重要途径。
酶(enzyme):生物催化剂,除少数RNA外几乎都是蛋白质。
酶不改变反应的平衡,只是通过降低活化能加快反应的速度。
脱脯基酶蛋白:酶中除去催化活性可能需要的有机或无机辅助因子或辅基后的蛋白质部分。
全酶:具有催化活性的酶,包括所有必需的亚基,辅基和其它辅助因子。
酶活力单位:酶活力单位的量度。
1961年国际酶学会议规定:1个酶活力单位是指在特定条件(25oC,其它为最适条件)下,在1min内能转化1μmol底物的酶量,或是转化底物中1μmol的有关基团的酶量。
比活(specific activity):每分钟每毫克酶蛋白在25oC下转化的底物的微摩尔数。
比活是酶纯度的测量。
活化能(activation energy):将1mol反应底物中所有分子由其态转化为过度态所需要的能量。
活性部位(active energy):酶中含有底物结合部位和参与催化底物转化为产物的氨基酸残基部分。
活性部位通常位于蛋白质的结构域或亚基之间的裂隙或是蛋白质表面的凹陷部位,通常都是由在三维空间上靠得很进的一些氨基酸残基组成。
酸-碱催化(acid-base catalysis):质子转移加速反应的催化作用。
共价催化(covalent catalysis):一个底物或底物的一部分与催化剂形成共价键,然后被转移给第二个底物。
许多酶催化的基团转移反应都是通过共价方式进行的。
靠近效应(proximity effect):非酶促催化反应或酶促反应速度的增加是由于底物靠近活性部位,使得活性部位处反应剂有效浓度增大的结果,这将导致更频繁地形成过度态。
初速度(initial velocity):酶促反应最初阶段底物转化为产物的速度,这一阶段产物的浓度非常低,其逆反应可以忽略不计。
米氏方程:表示一个酶促反应的起始速度(υ)与底物浓度([s])关系的速度方程:υ=υmax[s]/(Km+[s])米氏常数:对于一个给定的反应,异至酶促反应的起始速度(υ0)达到最大反应速度(υmax)一半时的底物浓度。
单元测试二:酶
班级:姓名:分数:
一.填空题(每空1.5分,共30分)
1.酶的化学本质大部分是蛋白质。
2.酶能与底物结合,并将其转化成产物,这一区域称为酶的活性中心。
3.根据酶的催化反应类型,把酶分为氧化还原酶类,转移酶类,裂解酶类,异构酶类,合成酶类和水解酶类。
4.酶与一般催化剂的不同点在于它具有催化效率高,高度的专一性,易失活 (条件温和)和活性受调节控制的特点。
5.酶活性中心的必需基团有两种,一种是催化基团,还有一种是结合基团。
还有一些必需基团位于酶的活性中心以外部位。
6.无活性状态的酶的前身物称为酶原,其转化成有活性的酶的过程称为酶原的激活作用。
7.抑制剂按其作用方式可分为可逆抑制作用和不可逆抑制作用。
判断题
1.结合蛋白酶中的辅酶(不牢固,易出错)与酶蛋白结合牢固,不能用透析或超滤法除去。
错(辅酶应该改为辅基)
2.所有的酶都是蛋白质。
错
3.并不是所有的酶都含有辅酶或辅基错
4.所有的酶都能在体内外起催化作用对
5.酶都能降低反应的活化能加速反应的进行对
6.所有酶(应改为一些酶)在细胞内合成或初分泌时都以酶原形式存在,须经过激活才能转变为有活性的酶。
错
7.一种酶仅能催化一种反应或仅对一种底物起催化作用,称为相对特异性。
错
8.一种酶蛋白只能与一种辅助因子结合。
对
9.一种辅助因子只能与一种(种应改为类)酶蛋白结合。
错
10.醛缩酶属于水解酶类。
错(应为裂解酶类)
11.酶能大幅度降低活化能,使反应速度加快。
对
12.酶对底物的相对特异性是指酶对底物没有严格的选择性。
错
13.只有维生素B可以作为酶的辅酶。
错
14.同工酶都是寡聚酶。
对(寡聚酶:几个或几十个亚基)
15.对结合酶来说,辅基与辅酶也在酶的活性中心。
对
16.酶的抑制剂与变性剂对酶活性影响的作用方式是相同的错
17.酶是由活细胞产生的具有催化功能的蛋白质,其作用与一般催化剂完全相同。
错
18.酶分子中形成活性中心的氨基酸残基在一级结构上位置往往并不相连, 而在空间结构上却处于相近位置。
对
19.同工酶是一组功能与结构(删去)相同的酶。
错
20.酶的最适温度是酶的特征性常数。
错
21.酶的最适pH是酶的特征性常数。
错
22.米氏常数km是酶的特征性常数。
对
23. 米氏常数km越大标明酶和底物的亲和力就越大。
错(应为越小)
24.酶具有高度催化效率是因为酶能降低反应的活化能,从而使活化分子数增多,而加速了化学反应。
对
25.酶在体外实验时,最适温度可以随作用时间的缩短而有所提高,所以最适温度不是酶的特征性常数。
对
26.测定酶活力时, 一般测定产物的生成量比测定底物的减少量更为准确。
对
27.米氏常数km等于该酶反应最大速度一半时的底物浓度。
对
28.所有的维生素都可以作为酶的辅酶。
错
29.维生素B族可以作为酶的辅酶。
对
30.维生素吃的越多越好。
错
三.多选题(每题2分,共20分)
1.Km的意义包括( ADE)等。
A: 是酶的特征性常数 B: 不是酶的特征性常数 C: 与酶浓度有关 D: 与酶浓度无关E: 能反映酶
与底物的亲和力
2.关于酶活性中心的叙述正确的是(ABCE )。
A: 必需基团集中的部位B: 位于酶分子表面,只占微小区域C: 辅助因子结合的部位
D: 所有必需基团都位于活性中心内 E: 是酶与底物结合的部位
3.结合酶的正确叙述是( ABCE)。
A: 酶蛋白上有活性中心 B: 辅助因子是酶活性中心的组成部分 C:酶蛋白对辅助因子的选择性强
D: 一种辅酶只能与一种酶蛋白结合 E: 只有全酶才具有催化活性
4.关于竞争性抑制剂的叙述是(ABCD )。
A: 其结构与底物十分相似 B:与酶的活性中心部位结合 C: 结合力为非共价键
D:用增大底物浓度方法可解除抑制 E: 对酶的抑制作用是不可逆的
5.关于pH能改变酶活性的叙述是(ABCD )。
A:pH能影响酶的必需基团解离程度 B:pH能影响底物的解离程度 C: pH能影响酶与底物的结合程度 D: pH能影响辅助因子的解离程度 E: pH能降低反应所需的活化能
6.关于同工酶的叙述,正确的是(ABCDE )
A: 可催化相同的反应 B: 有多种存在形式 C: 不同组织中各种形式比例不同 D: 不同形式
的同工酶电泳区带不同E: 酶蛋白分子结构不同
7.酶作用的特点是(BE )。
A: 结构不变性 B:高效的催化效率 C: 活性不可调节 D: 高度特异性 E: 敏感性高
8.使酶失活的因素有(ACE )。
A: 强酸或强碱 B: 低温 C:煮沸 D: 中性盐 E:震荡
9.结合酶类的特点,下列说法正确的是(CDE )。
A: 辅助因子种类多,酶蛋白种类少 B: 一种酶蛋白可以与多种辅助因子结合 C: 酶蛋白决定催化反应的类型
D:酶蛋白与辅助因子组成全酶才有活性 E: 一种酶蛋白只能与一种辅助因子结合
10.对于变构酶特点的叙述,正确的是( BDE) 。
A: 均为单体酶,由一个(多个)亚基组成 B:除具有活性中心外,还具有调节中心 C: 催化部位与调节部位均不在(应可在)同一亚基上(的不同部位) D:与底物结合起催化作用亚基称催化亚基 E: 与变构剂结合起调节作用的亚基称调节亚基(能与效应剂作用的亚基或部位)
四.问答题(此部分做在作业本上)
1.称取25mg蛋白酶粉配制成25毫升酶溶液,从中取出0.1毫升酶液,以酪蛋白为底物,用Folin-酚比色法测定酶活力,得知每小时产生1500微克酪氨酸.另取2毫升酶液,用凯氏定氮法测得蛋白氮为0.2毫克(蛋白质中氮的含量比较固定:16%).若以每分钟产生l微克酪氨酸的酶量为1个活力单位计算.根据以上数据求:(a)1毫升酶液中所含蛋白质量及活力单位.(b)比活力.(c)1克酶制剂的总蛋白含量及总活力.
略
2.从酶的空间结构阐述酶为何具有催化功能。
从活性中心解释
3.简述酶的催化机制
从三大反应机理方面解释
4.设计实验方案,研究淀粉酶水解淀粉的最佳实验条件?。