翻译调节肿瘤蛋白1(TPT1)ELISA试剂盒说明书

REV20190712仅供研究，不用于临床诊断。

客服热线: 400-7060-959﹡技术支持邮箱: **************公司官网: 目录简介 ......................................................................................................................................................................... - 3 -检测原理 ................................................................................................................................................................. - 3 -试剂盒组分 ............................................................................................................................................................. - 4 -储存条件 ................................................................................................................................................................. - 5 -其他实验材料 ......................................................................................................................................................... - 5 -注意事项 ................................................................................................................................................................. - 5 -样本收集处理及保存方法 ..................................................................................................................................... - 6 -试剂准备 ................................................................................................................................................................. - 6 -操作步骤 ................................................................................................................................................................. - 8 -操作流程图 ............................................................................................................................................................. - 8 -操作要点提示 ......................................................................................................................................................... - 9 -结果判断 ................................................................................................................................................................. - 9 -结果重复性 ........................................................................................................................................................... - 10 -灵敏度 ................................................................................................................................................................... - 10 -特异性 ................................................................................................................................................................... - 10 -参考文献 ............................................................................................................................................................... - 10 -该产品由北京四正柏生物科技有限公司研制。

新产业生物肿瘤标记物试剂说明书生物肿瘤标记物试剂广泛应用于肿瘤的早期筛查、诊断、治疗和预后评估等领域。

它们是通过检测体内的肿瘤相关分子或细胞表面标记物来判断是否存在肿瘤。

本说明书将介绍几种常见的生物肿瘤标记物试剂及其使用方法。

一、CA125试剂CA125是一种常见的肿瘤标记物，主要用于卵巢癌的检测和监测。

该试剂采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）进行检测。

使用前，请确保试剂保存在2-8摄氏度的温暖环境，避免阳光直射。

使用时，按照说明书指导将样本加入试剂盒中，并进行振荡混合。

然后在恒温水浴槽中孵育一段时间后，将试剂盒取出，用洗涤缓冲液洗涤，并向每孔加入辣根二抗。

再次孵育一段时间后，洗涤并加入底物。

最后，在适当的反应终止剂中加入试剂盒，用酶标仪测量吸光度。

二、CEA试剂CEA是一种常见的胃肠道肿瘤标记物，广泛用于大肠癌和胃癌的检测和监测。

该试剂也采用ELISA方法进行检测。

使用前，请检查试剂是否过期，过期试剂可能导致结果不准确。

将样本和标准品加入各个孔中，进行振荡混合。

然后将试剂盒放入恒温水浴槽中孵育一段时间。

取出试剂盒后，用洗涤缓冲液洗涤，并加入辣根二抗。

再次孵育一段时间后，洗涤并加入底物。

最后，加入试剂盒中的反应终止剂，并用酶标仪测量吸光度。

三、AFP试剂AFP是一种用于肝癌和其他肿瘤的标记物。

AFP试剂使用免疫荧光法（IF）进行检测。

使用前，请确保试剂保存在2-8摄氏度的温暖环境下，避免露光。

将样本加入试剂盒的相应孔中，并进行振荡混合。

然后将试剂盒放入适当的设备中进行孵育一段时间。

孵育结束后，取出试剂盒，用洗涤缓冲液洗涤孔，再加入荧光标记的二抗和底物。

最后，在黑暗条件下观察和测量荧光强度。

四、PSA试剂PSA是用于前列腺癌检测和监测的标记物。

PSA试剂使用放射免疫测定法（RIA）进行检测。

使用前，请确保试剂保存在2-8摄氏度的温暖环境下，避免冷冻。

将样本加入试剂盒的相应孔中，并进行振荡混合。

然后将试剂盒放入适当的设备中，进行孵育一段时间。

Catalog Number EK1200-48EK1200-96定量检测血清、血浆和细胞培养上清中的人酪氨酸蛋白激酶受体Tie1浓度。

本产品仅用于科学研究，非诊断试剂，不能用于临床诊断。

一、产品介绍1.背景介绍酪氨酸蛋白激酶受体Tie1是一个单次跨膜的I 型膜蛋白，属于蛋白激酶超家族、酪氨酸蛋白激酶家族和Tie 亚家族。

Tie1有三个EGF 样结构域、三个纤连蛋白III 型结构域、两个免疫球蛋白样C2型结构域和一个蛋白激酶结构域。

Tie1是一个专门在内皮细胞中表达的细胞表面蛋白，然而，研究表明它同样也可在不成熟的造血细胞和血小板中表达。

在血管发育的毛细管涌现阶段，Tie1对于微血管内皮细胞的存活和生长是必需的。

Tie1通过p38依赖性机制上调细胞粘附分子VCAM-1、E-selectin 和ICAM-1。

Tie1的表达可增强单核细胞来源的免疫细胞粘附于内皮细胞。

Tie1具有促炎症性效果，在内皮的炎症性疾病如动脉粥样硬化中起重要作用。

2.检测原理本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。

特异性抗人Tie1抗体预包被在高亲和力的酶标板上。

酶标板孔中加入标准品、检测样本和辣根过氧化物酶标记的检测抗体，经过孵育，样本中存在的Tie1与固相抗体结合和检测抗体结合。

洗涤后，加入显色底物TMB，避光显色。

颜色反应的深浅与样本中Tie1的浓度成正比。

加入终止液终止反应，在450nm 波长(参考波长570-630nm)测定吸光度值。

3.试剂盒检测的局限1)请在本试剂盒标示的有效期内使用。

2)试剂盒的试剂不能与其他批号的试剂或其他来源的试剂混合使用。

3)任何标准品稀释、操作人员、移液技术、洗涤技术、孵育温度、试剂盒保存时间的改变，都将影响结合反应。

4)本试剂盒在设计上去除或降低了生物学样本中的一些内源性干扰因素，并非所有可能的影响因素都已经去除。

Human Tie1ELISA Kit 检测试剂盒（酶联免疫吸附法）EK1200-01二、基本信息1.试剂盒提供的材料组分编号EK1200-48EK1200-96预包被酶标板EK1200P48T96T标准品EK1200S1vial2vials辣根过氧化物酶标记的检测抗体EK1200D1vial1vial标准品稀释液E02605ml5ml10×检测缓冲液E03105ml5ml显色底物TMB E02306ml11ml终止液E030011ml11ml20×洗液E028150ml50ml封板膜E0200662.未提供的材料设备1)能够检测450nm吸光度的酶标仪，参考波长570nm或630nm2)移液器及枪头、加样槽3)准备试剂用的试管、离心管、量筒等4)蒸馏水或去离子水5)涡旋振荡器、微孔板振荡器3.贮存试剂盒保存于2-8℃，有效期标注于标签上。

细胞沉默调节蛋白1 （SIRT1）活性比色法定量检测试剂盒（中文版）主要用途细胞沉默调节蛋白1 （SIRT1）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过比色探针对硝基苯胺标记人工合成的乙酰化p53多肽底物，经过SIRT1脱乙酰基后，被位点特异性氨基肽酶水解，释放黄色对硝基苯胺，即采用比色法来测定细胞裂解萃取样品中酶活性的权威而经典的技术方法。

该技术经过精心研制、成功实验证明的。

其适用于各种细胞裂解萃取液样品（动物、人体）、核蛋白样品、部分或完全纯化酶样品中SIRT1的活性定量检测，以及抑制剂和激活剂的筛选。

产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。

技术背景人体组蛋白脱乙酰基酶（histone deacetylase；HDAC）家属分成三类共20多个蛋白：种类I（class I）与酵母Rpd3蛋白同源，包括HDAC1、2、3、8，存在于细胞核中；种类II（class II）与酵母Hda1蛋白同源，包括HDAC4、5、6、7、9a、9b、10和HDRP/MITR，存在于细胞核和细胞浆里；上述两大种类的蛋白分子催化结构域含有锌，且曲古菌素A（trichostatin A；TSA）敏感。

种类III（class III）为NAD+辅助因子必需，又称为sirtuins，与酵母Sir2（Silent Information Regulator 2）同源，包括SIRT1至7等，为曲古菌素A（trichostatinA；TSA）不敏感型赖氨酸脱乙酰基酶（lysyl-deacetylase）。

催化赖氨酸脱乙酰基反应，以及由NAD+和乙酰（acetyl）基团转化产生的烟酰胺（nicotinamide）和O-乙酰ADP核糖（O-acetyl-ADP-ribose）。

SIRT1位于细胞核内，与酵母Sir2同源性最高。

其功能在于调节p53活性和抑制细胞凋亡。

基于人工合成的乙酰化p53（379至382氨基酸位点）多肽底物Ac-Arg-His-Lys-Lys（Ac）具有抗氨基肽酶切离的功能，首先使用比色染料对硝基苯胺（p-Nitroaniline；p-NA）来标记乙酰化p53多肽底物，其次进行脱乙酰化，最后底物进一步在氨基肽酶的催化酶解，释放出具有强烈吸光值的黄色对硝基苯胺（波长405nm），由此来定量测定沉默调节蛋白1的活性。

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线：400-168-3301或800-8283301 订货e-mail ：******************技术咨询：*****************网址：碧云天网站 微信公众号Human IL-1β ELISA Kit产品编号 产品名称包装 PI305Human IL-1β ELISA Kit96次产品简介：碧云天的Human IL-1β ELISA Kit (Human Interleukin-1β Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人白细胞介素1β酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆、细胞或组织裂解液、或细胞培养上清液中的IL-1β的ELISA 试剂盒。

本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。

多次重复检测结果表明，最小检出量为2.2pg/ml ，与人IL-1r α、IL-1sRII 、IL-1sRI 、小鼠IL-1α、小鼠IL-1β等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。

IL-1即白细胞介素-1(简称白介1)，其家族由IL-1α(也称IL-1F1)、IL-1β(也称IL-1F2)、IL-1受体拮抗剂(IL-1 receptor antagonist, 简称IL-1RA, 或IL-1F3)及IL-18、IL-33和IL-1F5~F10组成。

IL-1主要由巨噬细胞产生，此外几乎所有的有核细胞，如B 细胞、NK 细胞、体外培养的T 细胞、角质细胞、树突状细胞、星形细胞、成纤维细胞、中性粒细胞、内皮细胞以及平滑肌细胞均可产生IL-1。

正常情况下只有皮肤、汗液及尿液中含有一定量的IL-1，绝大多数细胞在受到外来抗原或细菌内毒素刺激后才能合成和分泌IL-1。

IL-1β在免疫和炎症反应、骨重建(bone remodeling)、发烧、碳水化合物代谢等生理、病理过程中都有重要作用。

人肿瘤特异性抗原（TSA）分析检测ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆上海乔羽生物专业供应：含量。

试验原理：TSA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知TSA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。

先将TSA和生物素标记的抗体同时温育。

洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。

再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。

产生颜色。

颜色的深浅和样品中TSA的浓度呈比例关系。

试剂盒内容及其配制自备材料1．蒸馏水。

2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3．振荡器及磁力搅拌器等。

安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。

一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3．不用的其它试剂应包装好或盖好。

不同批号的试剂不要混用。

保质前使用。

4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。

使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。

底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

避免用手接触，有毒。

实验完成后应立即读取OD值。

8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法1、血清－－－－-操作过程中避免任何细胞刺激。

使用不含热原和内毒素的试管。

收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

实验步骤1. 开始ELISA 前一天，稀释包被抗体，取酶标板每孔加入100ul 包被抗体溶液，4 度过夜2. 使用前将所有试剂放置室温，强烈建议所有标准品和样品做复孔或三孔，各次检测均要求做标准曲线3. 洗涤液不少于300ul 洗板4 次，并在吸水纸上拍干板子，后续洗涤液同此4. 为了阻断非特异性结合和减少背景，每孔加200ul 样品稀释液5. 封板并在摇床上室温孵育1h6. 在上述期间，准备标准品稀释液和适当的样品稀释液（如必需）7. 标准品稀释：500 pg/ml, 250 pg/ml, 125 pg/ml,62.5 pg/ml, 31.25 pg/ml, 15.6 pg/ml, 7.8pg/ml 和0 pg/ml8. 如步骤3 洗板4 次9. 每孔加入100ul 标准品稀释液和样品到对应孔，如有需要可对样品进行稀释10. 封板并在摇床上室温孵育2h11. 如步骤3 洗板4 次12. 每孔加入100ul 已稀释的二抗，封板并在摇床上室温孵育1h13. 如步骤3 洗板4 次14. 每孔加入100ul稀释的HRP,封板并在摇床上室温孵育30min15. 如步骤3洗板5次，每次洗涤洗涤液浸泡30s至1min，有利于减少背景16. 每孔加入100UITMB显色液，并在摇床孵育15-30min，阳性孔将变为淡蓝色，此步无需封板17. 每孔加入100ul 终止液终止反应，阳性孔将由蓝色变为黄色18. 终止反应半小时内测定OD值（450nm）ELISA 实验基本原理基本原理1971 年Engvall 和Perlmann 发表了酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA ）用于IgG定量测定的文章，使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。

这一方法的基本原理是：①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。

（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断！）QuicKey-人转铁蛋白(TF)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书QuicKey Human TF (Transferrin) ELISA Kit产品货号：E-TSEL-H000196T/48T/24T使用前请仔细阅读说明书。

如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话************，************技术部电话************QQ客服800110755具体保质期请见试剂盒外包装标签。

联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。

QuicKey系列与传统ELISA试剂盒相比，在实验时间节省至少1小时的同时，获得更加灵敏和精确的实验结果。

Elabscience 自主开发的新技术，旨在帮助客户以更为高效的方式进行科学研究。

用途该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆、尿液中TF浓度。

其它相关生物液体请咨询技术支持。

灵敏度、检测范围、特异性和重复性●灵敏度：0.13ng/mL。

●检测范围：0.14-100ng/mL。

●特异性：可检测样本中的人TF,且与其它类似物无明显交叉反应。

●重复性：板内，板间变异系数均<10%。

背景介绍转铁蛋白(Transferrin, Tf)是一种在血浆中发现的对细胞健康至关重要的铁结合蛋白，它为机体细胞提供天然铁，能作为细胞培养基的补充物。

转铁蛋白从肠道、网状内皮系统和肝实质细胞中携带铁，为体内所有的增殖细胞提供铁。

转铁蛋白与其他四种蛋白质共享同源氨基酸序列，包括乳转铁蛋白、卵转铁蛋白、黑色素瘤抗原p97和hublym1。

抗原p97和转铁蛋白受体基因共同定位在人类3号染色体上。

转铁蛋白的分子量约为80kda，含有两个特异的高亲和力铁(III)结合位点。

转铁蛋白与铁(III)亲和力非常高(缔合常数在pH值7.4时为1020M−1)，但将pH值从中性以下降低，其亲和力会逐渐减弱。

当不与铁结合时，转铁蛋白被称为Apo转铁蛋白。