Waters2487型高效液相色谱仪操作规程

Waters高效液相色谱操作说明一．简介本高效液相色谱实验包括：waters1525泵+waters2487双波长检测器+色谱柱+电脑（breeze 图谱处理软件）+流动相二．操作流程0.准备工作确定色谱实验方法，处理好流动相1，换好流动相，确定色谱柱选择无误1.开机打开泵开关，听到两声“嘀”的响声之后，再打开波长检测器。

检测器进入预热阶段（此时检测器面板进入5min倒计时）这期间打开电脑，进入英文windows操作系统2，待检测器自检完毕（整个自检过程约6~7min），打开电脑桌面的（Breeze软件）。

待程序完全启动，整个开机过程结束。

系统默认进入上次使用的方案。

2.建立新方法和新方案2.1新建方案方案主要用来储存你的各个实验方法，数据等内容，你可以把它理解为一个文件夹。

2.1.1创建步骤选择→单击→单击"next"→在"project name"中输入方案名称（如abc），"comments"中可填注释，也可不填。

→单击"finish"2.1.2打开创建的方案在界面下→单击→在"project"中找到你创建的方案（如abc）→点击"OK",即进入到我们自己的方案中了2.2新建方法在新建的方案中，需要建立不同的试验方法。

试验方法主要设定的包括洗脱方式，检测波长等参数。

2.2.1新建方法步骤单击→单击→单击（Flow选项卡）→在programmed flow中设定你的洗脱方式（此步在2.2.2详述）→单击→单击（channel 1选项卡）→在"wavelength"框内设定你的检测波长（如265nm,280nm,215nm等等）→（设定结束，保存）：单击→输入方法名称如（abc 1）→单击"save"32.2.2洗脱方式的设定（重要）在programmed flow中可看到。

第一部分：仪器准备1. 确保waters超高效液相色谱仪处于正常工作状态，检查仪器是否连接电源，是否有故障指示灯显示。

2. 打开色谱仪软件，检查仪器参数设置是否符合实验要求，包括流速、温度、检测波长等。

3. 准备所需的色谱柱、色谱柱连接器、进样器以及其他实验所需的耗材。

第二部分：样品准备1. 准备实验所需的样品，确保样品已经滤过或者处理过以去除杂质。

2. 根据实验要求，将样品溶解在适当的溶剂中，并进行稀释或者稀释。

第三部分：超高效液相色谱仪操作步骤1. 开始操作前，先进行系统平衡。

具体操作步骤为：将色谱柱连接至色谱柱连接器上，然后连接至色谱仪，用洗脱液平衡色谱柱。

2. 设置色谱仪的操作参数，包括流速、温度、检测波长等。

3. 进行样品进样，具体操作步骤为：将进样器连接至色谱仪，将稀释好的样品注入进样器中，设置好进样量。

4. 开始进行实验，监控色谱图谱的变化，记录实验数据。

5. 实验结束后，对色谱柱和色谱仪进行清洗和维护，确保仪器干净、整洁。

第四部分：数据处理和分析1. 对实验获得的数据进行处理和分析，比对标准曲线，计算样品中所含物质的浓度或者纯度。

2. 对实验结果进行统计分析，进行数据呈现，如绘制色谱图谱、制作数据统计图表等。

3. 通过数据处理和分析，得出实验结论，对实验结果进行解释和讨论。

第五部分：实验安全及注意事项1. 在操作过程中，注意个人安全，避免发生化学品溅泼或者接触有害物质。

2. 操作过程中需严格按照实验要求和操作规程进行，如有疑问请及时向实验指导老师或专业人士请教。

3. 实验结束后，及时清理实验台面和仪器设备，妥善存放试剂和耗材。

通过以上步骤的操作，可以保证在使用waters超高效液相色谱仪进行实验时，能够得到准确、可靠的实验结果，为科研工作和学术研究提供有力支持。

第六部分：精密控制与调试1. 在进行实验操作前，要确保色谱仪的各项参数已经精确调试完毕。

这包括流速、温度、压力、检测波长等参数的精准控制。

1. 目的规范Waters高效液相色谱系统的使用和维护。

2. 范围本规程适用于Waters高效液相色谱系统的使用和维护。

3. 职责质检室仪器分析员负责Waters高效液相色谱系统的日常使用和维护。

4. 系统组成本系统由Waters 600E多溶剂输送系统（有梯度控制器的高压输液泵）、Waters1. 目的规范Waters高效液相色谱系统的使用和维护。

2. 范围本规程适用于Waters高效液相色谱系统的使用和维护。

3. 职责质检室仪器分析员负责Waters高效液相色谱系统的日常使用和维护。

4. 系统组成本系统由Waters 600E多溶剂输送系统（有梯度控制器的高压输液泵）、Waters在线脱气机、Rheodyne 7725i手动进样阀、Waters 2487双通道紫外检测器、Millennium32色谱工作站/电脑等组成，另外还包括打印机、UPS和通风柜等辅助设备。

5. 程序5.1. 准备 5.1.1. 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相（应足够；流动相必须用0.45?m滤膜过滤）、样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），更换合适的色谱柱（柱进出口位置应与流动相流向一致）和定量环。

5.1.2. 通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

5.2. 开机和泵操作5.2.1. 开机5.2.1.1. 接通UPS的电源，依次打开断电保护器、脱气机、600E泵、2487检测器，待检测器自检结束显示测量状态时，打开打印机、电脑显示器、主机。

5.2.1.2. 打开Millennium32软件，按「Login...」，输入用户名和密码，按「OK」注册进入系统主界面。

在Project档内选择所需的项目，右击『Run Samples』图标，选择色谱系统“600_2487”后打开QuickSet窗口。

5.2.2. 更换溶剂5.2.2.1. 打开600E泵后，转动进口集合管阀手柄（以下简称手柄）至RUN位置；5.2.2.2. 将一塑料烧杯放在参照阀出口管下以收集分流的溶剂，向右打开参照阀（断开柱和进样器）；5.2.2.3. 按［Direct］键使其显示直接控制屏幕，设流速为1ml/min（梯度配比阀在0ml/min 时不工作）；5.2.2.4. 选择欲使用的某一溶剂通道，设其比例为100%，其它为0%；5.2.2.5. 将输液管从原有溶剂瓶中取出，放入一干净的空瓶中；5.2.2.6. 逆时钟转动手柄至DRAW位置，用启动注射器从进口集合管阀的接口抽出约2ml溶剂；5.2.2.7. 再将输液管放入新溶剂瓶内，继续抽吸直到新溶剂出来并无气泡为止；5.2.2.8. 转动手柄至RUN位置，将启动注射器取下并排掉筒内的溶剂。

WATERS 2695-2487 HPLC 仪器操作简明流程WATERS 2695-2487 HPLC 仪器操作简明流程1、2487检测器开、关机及使用：打开电源仪器自检1-2min 预热5min 稳定约30min 设定通道、波长模式、波长（也可在工作站上设置）回零（Auto Zero）分析检测实验完毕关掉电源开关即退出。

2、2695分离单元使用操作：1) 开机自检打开电源开关，仪器开始自检（4-5min），待屏幕上方出现“Idle”字样表示自检成功。

2) 脱气（Degas）按面板右下方“Menu/Status”键进入“Status（1）”界面，移动光标至“Degasser Mode”，按Enter选择“On”，打开在线脱气。

3) 设定柱温（可选项）在“Status（1）”界面，移动光标至“Col Htr Set”，输入目标温按Enter即可。

（可在工作站方法中设置）4) Prime Seal Wash（清洗柱塞杆）按“Menu/Status”键回到“Menu”界面，按下排功能键“Diag”，然后再按下排功能键“Prime Seal Wsh”，“Start”，冲洗1~2min后，“HALT”，“CLOSE”。

5) Wet Prime在“Status（1）”界面中“Composition”下，选择将用到的溶剂通道为“100%”，按液晶屏幕右下角“Direct Function”键，移动光标选择“2 Wet Prime”，“OK”，流速及时间可使用默认值，也可自行设定（如：5ml/min，3min），“OK”即可。

将每一个会用到的溶剂通道按照上述操作一次。

6) Purge Injector（注射器排气泡及清洗）进入“Direct Function”界面后，选择“3 Purge Injector”，“OK”，默认数值为6，“OK”。

7) Prime Needle Wash（清洗注射针）进入“Diagnostics”界面，按下排功能键之“Prime Ndl Wsh”，“Start”，默认30秒钟，“Close”，即可返回“Diagnostics”界面。

1Waters 2487Dual λ Absorbance Detector 中文操作说明书一. 显示画面说明:A/B Channel Selector 显示目前之波长画面是A 波长或是B 波长. 入(波长) 显示目前之波长数值，可直接输入数值设定. AUFS (感度) 显示目前之感度数值,可直接输入数值设定,此设定只 对2V 与10mV 讯号输出端子之数据处理器有作用，对 于以IEEE-488联机讯号输出者，并无作用. Next 显示可继续按”Next ”键，以设定其它功能. Run Time 显示执行某一程序方法之过程时间.2 ?. 键盘说明:液晶显示屏Shift 键 Enter 键 HOME将显示画面回复至基本起始画面. A/B切换波长画面A 与波长画面B. DIAG用以做维修诊断之各项功能. Shift转换键盘至第二操作功能. Chart Mark在层析图谱上作记号，但只对10mV 输出之传统记录器有作用，并不影响积分器或软件计算机之输出信号. CE清除错误的输入值. AutoZero检测器讯号自动归零装置. Run/Stop启动或停止执行程序化控制. ▲/▼光标移动键. Next/Previous切换前后画面按键.3 TRACE 显示波长A 或B 之层析追踪图(最长至60分钟).Enter 输入数值与功能设定确认键.Shift 功能键 (第二操作功能键): ? 功能说明键. METHOD 显示可选用之功能方法(例如制作或删除可程序化控制之操作) CONFIGURE 进入”Configuration ”画面，作硬件的基本规划.Scale 当进行层析图追踪或光谱扫瞄功能时，用以改变坐标轴之大小. SCAN 执行光谱扫瞄功能.Lamp 用以显示D2灯源使用时间或执行手动关灯.4System Info 显示仪器基本数据，包括版本号码,序号与IEEE 内码. Cancel 在特殊方法操作功能内，终止某一执行工作.λ/λλ 用以切换单一波长或双波长功能键. Lock 锁定键盘操作，避免触碰影响参数设定. +/- 输入具有正负性之参数. Reset 回复控制方法至起始状态，或将定时器归零. Calibrate 执行校正检测器之波长准确性. Contrast 调整液晶屏幕之显示亮度.?. 基本操作说明:1. 打开电源开关至ON(1)的位置.2. 画面即刻出现自我诊断检查字样: Startup Diagnostics, 注意是否有任 何故障讯息出现.3. 接着出现Waters 2487 Dual λ Absorbance Detector, 并开始执行”热机”检查，出现Warmup Time 倒数时间画面.4.待”热机”检查完毕无误，画面之上排显示吸收讯号数字，下两排显示前一次关机时之波长与AUFS设定值.5. 欲设定使用之波长λ,将游标移至λ位置，输入波长数字，Enter即可.6.等系统平衡稳定后, 于注入检体前，按一下Autozero键,使检测器自动归零,再开始进样做分析检测.※注意事项:<1>. 建议于做分析检测前，至少须让检测器或D2灯源”热机”30分钟以上.<2>. 当使用水性塩类移动相后，须以超纯水冲洗，再以甲醇冲洗.<3>. 若此检测器是以IEEE-488联机做计算机控制时，以上之操作条件参数必须在Millennium 32计算机软件操作方法内加以储存设定,才得以作有效之控制.?.　关机方法:1. 直接关掉电源开关至OFF(0)位置,所有的输入值将被保存至下一回开机时.5。

Waters高效液相色谱系统操作规程一. 准备1. 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相（应足够；流动相必须用滤膜过滤）、样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制）。

2. 通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

3. 接通电源，依次打开1525泵、2487检测器，待检测器自检结束显示测量状态时，打开打印机、电脑显示器、主机。

4. 打开Breeze软件，进入系统主界面。

二. 操作步骤1.更换流动相。

2.在主界面中点击“Manage Breeze”按钮，选择system选项，出现系统连接示意图，观察各个部件是否连接好。

若未连接好，则需点击“Diagnostics/Reconfigure”进行诊断。

3.回到主界面，选择“Manage Breeze”中的project选项，单击“Make a new project”，“Next”，在“Project Name”中输入名称，单击“Finish”。

单击“Change a project/User”，在“Project”中选择输入的名称，单击“OK”。

4.单击“View Method”按钮，点击“Pump”图标，设置泵的参数。

点击“UV Det”图标，设置紫外检测器的波长。

单击“Save Method”按钮保存设置方法。

5. 打开泵的抽液阀，使用灌注注射器抽取一定量的洗脱剂。

单击Purge图标，出现“Purge Wizard”对话框，选中“Purge Pump”选项，点击“Next”“Next”，调节A、B泵的流量分别为约3ml/min。

打开泵的参考阀，点击“Next”。

Purge结束后关闭参考阀。

6.点击主界面中的“press to equilibrate system/ monitor baseline”按钮，平衡系统0.5－1h，直至基线稳定。

7.点击“press to make a single injection”按钮，进入“Specify Single Inject Parameters”对话框，设置参数，点击“inject”。

Waters高效液相色谱液相色谱仪操作规程4.主要内容（操作步骤）4.1. 准备4.1.1. 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相（应足够；流动相必须用0.45μm滤膜过滤）、样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），更换合适的色谱柱（柱进出口位置应与流动相流向一致）和定量环。

4.1.2. 通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

4.2. 开机和泵操作4.2.1. 开机4.2.1.1. 接通UPS的电源，依次打开断电保护器、脱气机、600E泵、2487检测器，待检测器自检结束显示测量状态时，打开打印机、电脑显示器、主机。

4.2.1.2. 打开Empower软件，输入用户名和密码；4.2.2.1. 打开600E泵后，转动进口集合管阀手柄（以下简称手柄）至RUN位置；4.2.2.2. 将一塑料烧杯放在参照阀出口管下以收集分流的溶剂，向右打开参照阀4.2.2.3. 按［Direct］键使其显示直接控制屏幕，设流速为1ml/min（梯度配比阀在0ml/min 时不工作）；4.2.2.4. 选择欲使用的某一溶剂通道，设其比例为100%，其它为0%；4.2.2.5. 将输液管从原有溶剂瓶中取出，放入一干净的空瓶中；4.2.2.6. 逆时钟转动手柄至DRAW位置，用启动注射器从进口集合管阀的接口抽出约2ml 溶剂；4.2.2.7. 再将输液管放入新溶剂瓶内，继续抽吸直到新溶剂出来并无气泡为止；4.2.2.8. 转动手柄至RUN位置，将启动注射器取下并排掉筒内的溶剂。

4.3. 平衡系统（分两种情况进行）4.3.1. 等度模式4.3.1.1. 每次以0.1ml/min的增量加大流速至1ml/min，以超纯水冲洗系统10min。

4.3.1.2. 检查管路连接、柱接口及泵头处是否漏液，如漏液应予以排除。

4.3.1.3. 观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应在平均值的5~10%以内。

如超出此范围，可初步判断为柱前管路仍有气泡，重复5.2.3.下的步骤。

Waters600E-2487高效液相色谱系统操作规程1.目的规范Waters高效液相色谱系统的使用和维护。

2.范围本规程适用于Waters高效液相色谱系统的使用和维护。

3.职责质检室仪器分析员负责Waters高效液相色谱系统的日常使用和维护。

4.系统组成本系统由Waters600E多溶剂输送系统（有梯度控制器的高压输液泵）、Waters在线脱气机、Rheodyne7725i 手动进样阀、Waters2487双通道紫外检测器、Millennium32色谱工作站/电脑等组成，另外还包括打印机、UPS和通风柜等辅助设备。

5.程序5.1.准备5.1.1.使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相（应足够；流动相必须用0.45μm滤膜过滤）、样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），更换合适的色谱柱（柱进出口位置应与流动相流向一致）和定量环。

5.1.2.通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

5.2.开机和泵操作5.2.1.开机5.2.1.1.接通UPS的电源，依次打开断电保护器、脱气机、600E泵、2487检测器，待检测器自检结束显示测量状态时，打开打印机、电脑显示器、主机。

5.2.1.2.打开Millennium32软件，按「Login...」，输入用户名和密码，按「OK」注册进入系统主界面。

在Project档内选择所需的项目，右击『Run Samples』图标，选择色谱系统600_2487后打开QuickSet 窗口。

5.2.2.更换溶剂5.2.2.1.打开600E泵后，转动进口集合管阀手柄（以下简称手柄）至RUN位置；5.2.2.2.将一塑料烧杯放在参照阀出口管下以收集分流的溶剂，向右打开参照阀（断开柱和进样器）；5.2.2.3.按［Direct］键使其显示直接控制屏幕，设流速为1ml/min（梯度配比阀在0ml/min时不工作）；5.2.2.4.选择欲使用的某一溶剂通道，设其比例为100%，其它为0%；5.2.2.5.将输液管从原有溶剂瓶中取出，放入一干净的空瓶中；5.2.2.6.逆时钟转动手柄至DRAW位置，用启动注射器从进口集合管阀的接口抽出约2ml溶剂；5.2.2.7.再将输液管放入新溶剂瓶内，继续抽吸直到新溶剂出来并无气泡为止；5.2.2.8.转动手柄至RUN位置，将启动注射器取下并排掉筒内的溶剂。

WATERS 2695/2487/2414/2998高效液相色谱仪操作规程1. 目的：为使对WATERS 2695/2487/2414高效液相色谱仪的使用规范化，特制定本规程。

2. 范围：涉及对WATERS 2695/2487/2414高效液相色谱仪的使用。

3. 职责：QC检验员应严格遵守本规程。

4. 内容：4.1开机4.1.1接通电源，打开电脑主机、显示器的开关，进入Windows画面。

4.1.2 打开Alliance 2695系统的电源，仪器进行自检，“Idle”状态表示开机测试正常。

4.1.3 Wet Prime冲洗：少量气泡，执行Wet Prime。

A利用方向键将光标移至“composition”字段，将欲Wet Prime的溶剂输入100%。

B按“Direct Function”功能键，选择Wet Prime，按“OK”。

C选择流速和冲洗时间，按“OK”。

D重复上述步骤直至所有溶剂做完Wet Prime。

4.1.4 Dry Prime冲洗：大量气泡或者通道走空，执行Dry Prime。

A按“Direct Function”功能键，选择Dry Prime，按Enter。

B利用方向键将光标移至各通道，选择待Dry Prime的通道。

B同时打开阀门，用注射器帮助排液D重复上述步骤直至所有溶剂做完Dry Prime。

4.1.5设定溶剂：在Status(1)画面，利用方向键将光标移至“composition”字段，将所需溶剂输入适当的百分比。

4.1.6设定流速：在Status(1)画面，利用方向键将光标移至“Flow”字段，输入所需流速。

4.1.7脱气：在Status(1)画面，利用方向键将光标移至“Degasser”位置，按Enter，利用上下键选择所需要的模式（On:除气装置开启；Off：除气装置关闭）4.1.8置入转盘A打开样品转盘舱门，屏幕会显示A、B、C、D、E五个转盘，按A可取出A盘（每个转盘上可放置24个样品瓶，共计120个）。

Waters 高效液相色谱仪（515+7725i+2487）基本操作方法1） 打开515泵及2487 UV 检测器电源开关，等待自检结束。

2） 在溶剂瓶中加入充足的，脱过气的，用0.45μm 滤膜过滤过的，新配制的流动相。

将515泵的入口塑料管带滤头的一端插入溶剂瓶液面以下。

3） 逆时针旋转515泵的排液阀（Draw off Valve ）半圈，用注射器抽取适当体积的流动相直到气泡排净并且流动相置换完成。

4） 确认色谱柱未安装在系统中，将进样器手柄板到Inject 位置。

按下515泵的键，用来清洗整个系统，注意在泵出口处收集废液。

约5分钟后，再次按下键，停止清洗系统。

5） 将色谱柱连接在系统中，按下515泵的键两次，看到屏幕上的光标在小数点后第一位闪烁时，按或键将流速设定为0.100，按下键，泵开始运行，随时注意观察压力变化。

排液阀泵头出口单向阀 入口单向阀柱塞杆指示棒 泵出口泵入口 压力传感器清洗孔（看不见）高压过滤器（看不见） 泵入口塑料管6) 将光标（黑框）移至λ后，按数字键输入需要的波长数，按回车键确认。

7）将光标（黑框）移至AUFS前，按数字键输入需要的灵敏度数，按回车键确认。

8）系统已经平衡好后，启动工作站软件，当工作站处于等待进样时，用微量注射器抽取所需体积的，过滤过的标准品或样品，将微量注射器针头插入进样器的进样口，针头至进样器的底部插不动为止，将进样器手柄板到Load位置，把样品推入到进样器中，迅速扳下进样器手柄至Inject位置。

9）收尾工作：用适当的流动相清洗系统，色谱柱的最终保存液为甲醇或乙腈。

缓慢的降低流速至0.100，停泵流速，关闭515泵及2487检测器电源开关。

10）若超过3天不使用仪器，应该将色谱柱清洗干净后取下，两端用堵头封好。

11）仪器若长时间不使用，应该泵入甲醇清洗系统，以防系统长菌。

然后将溶剂头从溶剂瓶中取出，用干净的塑料袋封好。