单克隆抗体及基因工程抗体的制备题库2-2-10

临床医学检验技师初级（师）临床免疫学及检验（单克隆抗体与基因工程抗体制备技术）-试卷1(总分：60.00，做题时间：90分钟)一、 A1型题(总题数：17，分数：34.00)1.下列关于杂交瘤细胞特点的错误描述是（分数：2.00）A.具备了双亲细胞的特点B.分泌人源性单克隆抗体√C.分泌鼠源性单克隆抗体D.体外繁殖快速E.能分泌抗体解析：解析：杂交瘤细胞是两个不同特性的细胞融合成一个异型核细胞，这两种细胞分别是小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞，分泌鼠源性单克隆抗体。

2.杂交瘤技术中最常用的骨髓瘤细胞株是（分数：2.00）A.NS-1和SP2／0细胞株√B.NS-2株C.SP5株D.HPG-2E.HAILA解析：解析：杂交瘤技术中最常用的骨髓瘤细胞株是NS一1和SP2／0细胞株。

3.HAT培养基中三种关键成分为（分数：2.00）A.次黄嘌岭、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷√B.黄嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷C.氨基嘌岭、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷D.腺嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷E.鸟嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷解析：解析：HAT系次黄嘌呤(hypoxantin)、氨基蝶呤 (aminopterin)和胸腺嘧啶脱氧核苷(thymidin)三种物质各英文首字之缀列，HAT培养基也就是指含有这三种物质的细胞培养基。

4.阳性杂交瘤细胞的克隆化培养方法不包括（分数：2.00）A.有限稀释法B.无限稀释法√C.显微操作法D.荧光激活细胞分选仪E.软琼脂平板法解析：解析：阳性杂交瘤细胞的克隆化(单个细胞培养)方法包括有限稀释法、显微操作法、荧光激活细胞分选仪、软琼脂平板法。

5.实验室最常用的阳性杂交瘤细胞的克隆化方法是（分数：2.00）A.无限稀释法B.有限稀释法√C.荧光激活细胞分选仪D.软琼脂平板法E.显微操作法解析：解析：阳性杂交瘤细胞的克隆化(单个细胞培养)方法包括有限稀释法、显微操作法、荧光激活细胞分选仪、软琼脂平板法。

动物细胞融合和单克隆抗体导学案高二生物组教学目标：知道动物细胞融合的方法；理解单克隆抗体制备的过程、原理和应用教学重、难点：单克隆抗体制备的过程、原理和应用考试命题分析：单克隆抗体制备过程是考试的热点，学习本部分内容，既要注重文字知识的记忆和理解，更重要的是能看懂单克隆抗体制备的流程图教学过程1 动物细胞融合⑴动物细胞融合的概念：。

⑵动物细胞融合的方法：⑶目前动物细胞融合最常用的方法是：⑷动物细胞融合方法和植物细胞融合方法的比较①植物细胞融合前要先去除，动物细胞融合无此操作②植物细胞融合的促融方法有两种：物理法和化学法；动物细胞融合的促融方法除了物理法和化学法外，还有。

2 单克隆抗体的制备⑴B淋巴细胞的特点：B淋巴细胞受抗原刺激后，可分化成效应B细胞，效应B细胞能分泌，对抗侵入机体的病原体。

刺激或侵入机体的病原体（抗原）有许多种，因此，被多种抗原刺激后的B淋巴细胞产生的效应B细胞也有许多种，每种效应B细胞产生一种特定的抗体。

人体内所有效应B细胞产生的抗体应该是混合抗体（含多种抗体）。

⑵医学上传统抗体的制备从人的血液中提取，但提取的抗体是多种抗体的混合物。

这种混合抗体，不能专一性地对抗某一种病原体，因此治疗效果差。

⑶制备化学性质单一的抗体的原理单个效应B细胞能产生化学性质单一的抗体，但在体外培养条件下，效应B细胞不能无限增殖，因此产生的抗体的量非常有限。

在体外培养的骨髓瘤细胞具有无限增殖的特点，但不能产生抗体根据上述事实，科学家大胆设想了制备单克隆抗体的方案。

⑷单克隆抗体制备过程示意图见课本①分离小鼠B淋巴细胞前，应给小鼠注射特定的抗原蛋白②被免疫过的B淋巴细胞的特点：能产生化学性质单一的抗体，但不能无限增殖；骨髓瘤细胞的特点：能无限增殖，但不能产生抗体。

③将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞在培养皿中混合，通过一定手段诱导融合，融合之后培养皿上存在哪几种细胞？④科学家应将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的细胞筛选出来，继续培养，去除或淘汰其他各种细胞。

第四章单克隆抗体与基因工程抗体的制备将单个B细胞分离出来加以增殖形成一个克隆群落，该B细胞克隆产生出针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体，称为单克隆抗体。

第一节杂交瘤技术的基本原理杂交瘤技术的原理是利用聚乙二醇（PEG）为细胞融合剂，使免疫的小鼠脾细胞与具有体外长期繁殖能力的小鼠骨髓瘤细胞融为一体，在HAT选择性培养基的作用下，只让融合成功的杂交瘤细胞生长，经过反复的免疫学检测、筛选和单个细胞培养（克隆化），最终获得既能产生所需单克隆抗体，又能长期繁殖的杂交瘤细胞系。

将这种杂交瘤细胞扩大培养，接种于小鼠腹腔，在小鼠腹腔积液中即可得到高效价的单克隆抗体。

杂交瘤技术是一项周期长和高度连续性的实验技术，涉及大量的细胞培养、免疫化学等方法。

具体包括两种亲本细胞的选择与制备，细胞融合，杂交瘤细胞的筛选与克隆化等。

一、杂交瘤技术（一）小鼠骨髓瘤细胞1.细胞株稳定，易于传代培养。

2.细胞株自身不会产生免疫球蛋白或细胞因子。

3.该细胞是次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转化酶（HGPRT）或胸腺嘧啶激酶（TK）的缺陷株。

4.目前最常用的骨髓瘤细胞是NS-1和SP2/O细胞株。

（二）免疫脾细胞免疫时选用与骨髓瘤细胞同源的BALB/c小鼠，鼠龄8～12周，体重约20g，雌雄均可，但必须分笼。

免疫用抗原尽量提高其纯度和活性，免疫途径多用腹腔内或皮内多点注射法。

如为珍贵微量抗原，可用脾脏内直接注射法进行免疫。

（三）细胞融合细胞融合是产生杂交瘤细胞的中心环节。

PEG（聚乙二醇）有助于细胞融合。

（四）杂交瘤细胞的选择性培养将经过融合的细胞置于含有次黄嘌呤、甲氨蝶呤和胸腺嘧啶核苷的HAT培养基中。

1.脾细胞：在一般培养基中不能生长繁殖。

2.骨髓瘤细胞：采用的小鼠骨髓瘤细胞都是HGPRT或TK代谢缺陷型细胞，在HAT培养基中，不仅合成DNA的主要途径被氨基蝶呤阻断，又因缺乏HGPRT或TK而不能利用次黄嘌呤，虽有TK可利用胸腺嘧啶核苷，但终因缺乏嘌呤不能完整合成DNA，而使骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能增殖而死亡。

临床医学检验技师初级（师）临床免疫学及检验（单克隆抗体与基因工程抗体制备技术）-试卷1(总分60,考试时间90分钟)1. A1型题1. 下列关于杂交瘤细胞特点的错误描述是A. 具备了双亲细胞的特点B. 分泌人源性单克隆抗体C. 分泌鼠源性单克隆抗体D. 体外繁殖快速E. 能分泌抗体2. 杂交瘤技术中最常用的骨髓瘤细胞株是A. NS-1和SP2／0细胞株B. NS-2株C. SP5株D. HPG-2E. HAILA3. HAT培养基中三种关键成分为A. 次黄嘌岭、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷B. 黄嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷C. 氨基嘌岭、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷D. 腺嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷E. 鸟嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷4. 阳性杂交瘤细胞的克隆化培养方法不包括A. 有限稀释法B. 无限稀释法C. 显微操作法D. 荧光激活细胞分选仪E. 软琼脂平板法5. 实验室最常用的阳性杂交瘤细胞的克隆化方法是A. 无限稀释法B. 有限稀释法C. 荧光激活细胞分选仪D. 软琼脂平板法E. 显微操作法6. 小鼠骨髓瘤细胞与下列哪种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生单克隆抗体A. 经过免疫的B淋巴细胞B. 经过免疫的T淋巴细胞C. 未经过免疫的B淋巴细胞D. 未经过免疫的T淋巴细胞E. 以上均不对7. 单克隆抗体与多克隆抗体主要的区别之一是A. 只和相应的一个抗原决定簇结合B. 与抗原结合牢固C. 生物活性多样D. 对热稳定E. 可用固相放射免疫测定含量8. 当前分离细胞最先进的方法是A. 显微操作法B. 软琼脂平板法C. 荧光激活细胞分选仪D. 有限稀释法E. 无限稀释法9. 可以得到完全人源化抗体，在肿瘤的诊断与治疗中具有独特优越性的是A. 嵌合抗体B. 小分子抗体C. 双特异性抗体D. 单克隆抗体E. 噬菌体抗体库技术10. 下列关于单克隆抗体的局限性叙述，错误的是A. 单克隆抗体固有的亲和性和局限的生物活性限制它的应用范围B. 单克隆抗体不能用于凝集反应C. 单克隆抗体能用于沉淀反应D. 反应强度不如多克隆抗体E. 制备技术复杂，费时费工11. 有关单克隆抗体的应用，下列叙述不正确的是A. 病原微生物抗原检测B. 肿瘤抗原的检测C. 免疫细胞及亚群的检测D. 激素测定E. 不能用于病原微生物抗体的检测12. 单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。

单克隆抗体及基因工程抗体的制备题库1-2-10问题：[单选,A2型题,A1A2型题]杂交瘤细胞保存最好在（）A.室温B.-4℃C.-20℃D.-70℃E.-196℃杂交瘤细胞保存最好在-196℃的液氮中。

问题：[单选,A2型题,A1A2型题]单克隆抗体是由下列何种细胞产生的（）A.杂交瘤细胞B.T细胞C.B细胞D.骨髓瘤细胞E.脾细胞借助化学手段，将2个不同特性的细胞融合成一个异型核细胞为杂交细胞。

杂交细胞经无限繁殖可形成克隆。

由一个细胞系衍生而来的称为"单克隆"，由单克隆细胞分泌的抗体称为"单克隆抗体"。

问题：[单选,A2型题,A1A2型题]多发性骨髓瘤细胞是B淋巴细胞杂交瘤细胞的理想细胞，其原因不包括下列哪项（）A.稳定和易培养B.自身无分泌功能C.改变细胞恶性变化D.融合度高E.HGPRT缺陷多发性骨髓瘤是浆细胞异常增生的恶性肿瘤，细胞由恶性变化。

(古诗词 )问题：[单选,A2型题,A1A2型题]在用小鼠制备单克隆抗体时常选用哪类细胞作为饲养细胞（）A.中性粒细胞B.腹腔细胞C.K细胞D.成纤维细胞E.肥大细胞在制备单克隆抗体过程中，许多环节需要加饲养细胞，如：在杂交瘤细胞筛选、克隆化和扩大培养的过程中，加入饲养细胞是十分必要的。

常用的饲养细胞有：小鼠腹腔巨噬细胞较为常用、小鼠脾脏细胞或小鼠胸腺细胞。

问题：[单选,A2型题,A1A2型题]在杂交瘤技术中常用的选择性培养基是（）A.氨甲蝶呤培养基B.次黄嘌呤培养基C.HAT培养基D.嘧啶核苷培养基E.胸腺嘧啶核苷培养基细胞杂交瘤技术中细胞融合的选择培养基含有三种关键成分：次黄嘌呤H、氨基蝶呤A、胸腺嘧啶核苷T，缩写为HAT培养基。

问题：[单选,A2型题,A1A2型题]下列哪种疾病可出现单克隆的免疫球蛋白（）A.系统性红斑狼疮B.多发性骨髓瘤C.类风湿性关节炎D.慢性粒细胞白血病E.前列腺癌多发性骨髓瘤时产生大量结构、性质均一的免疫球蛋白。

单克隆抗体及基因工程抗体的制备题库2-2-10问题：[单选]T淋巴细胞杂交瘤细胞的功能不包括（）A.分泌各种淋巴因子B.具有特异性杀伤功能C.具有自身反应性D.具有调节功能E.具有吞噬功能问题：[单选]制备单克隆细胞最理想的方法是（）A.在一个孔里多个细胞融合再克隆B.孔里多个细胞融合，筛选再克隆C.机体内免疫，筛选再克隆D.在一个孔一个瘤细胞和一个目的细胞融合，筛选再克隆E.在一个孔里一个瘤细胞加一个正常B细胞融合，再用目的抗原致敏，筛选克隆问题：[单选]单克隆抗体纯化法目前最有效的方法是（）A.盐析法B.凝胶过滤C.离子交换D.辛酸提取E.亲和纯化法(11选5 )问题：[单选]关于单克隆抗体描述下哪项是错误的（）A.生物活性专一B.纯度高C.特异性高D.可识别多个表位E.可用于诊断和治疗问题：[单选]双价抗体分子的应用不包括（）A.免疫学诊断B.肿瘤放射显像C.介导药物杀伤D.介导细胞杀伤E.介导补体的生物学活性问题：[单选]多发性骨髓瘤细胞是B淋巴细胞杂交瘤细胞理想细胞，其特点不包括（）A.稳定和易培养B.自身无分泌功能C.改变细胞恶性变化D.融合度高E.HGPRT缺陷问题：[单选]下列免疫不产生抗体的是（）A.人血清免疫马B.马血清免疫人C.人血清免疫羊D.羊细胞免疫兔E.兔血清免疫大鼠问题：[单选]体液免疫应答中最先产生的抗体是（）A.IgGB.IgAC.IgMD.IgDE.IgE。

临床检验技师-临床免疫学和免疫检验(2019)练习第四章单克隆抗体与基因工程抗体的制备12019第四章单克隆抗体与基因工程抗体的制备一、A11、HAT培养基中，阻断细胞DNA合成主要途径的成分是A、HB、AC、TD、H+AE、T+A2、小鼠骨髓瘤细胞与下列哪种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生单克隆抗体A、经过免疫的B淋巴细胞B、经过免疫的T淋巴细胞C、未经过免疫的B淋巴细胞D、未经过免疫的T淋巴细胞E、以上均不对3、制备单克隆抗体最常用的细胞融合剂为A、HATB、8-AGC、PEGD、PHAE、BSA4、细胞克隆化的常用技术为A、加饲养细胞B、HAT培养基培养C、有限稀释法D、软琼脂培养法E、显微操作技术5、关于杂交瘤细胞特点的错误描述A、具备了双亲细胞的特点B、分泌人源性单克隆抗体C、分泌鼠源性单克隆抗体D、体外繁殖快速E、能分泌抗体6、各种单克隆抗体分子都有的特性是A、分子量在10000以下B、具有两个完全相同的抗原结合部位C、H链与L链借非共价键相连D、能结合补体E、能产生沉淀反应7、小鼠骨髓瘤细胞与下列哪种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生单克隆抗体A、经过免疫的B淋巴细胞B、经过免疫的T淋巴细胞C、未经过免疫的B淋巴细胞D、未经过免疫的T淋巴细胞E、以上均不对8、阳性杂交瘤细胞克隆化培养时，多少细胞数才能进行克隆化培养A、单个B、多个C、双个D、混合E、没有数目限制9、人－鼠嵌合抗体是A、人IgV区与鼠IgC区连接B、人IgC区与鼠IgV区连接C、人Ig与鼠Ig重组D、鼠IgV与人IgV区重组E、以上都是10、多发性骨髓瘤细胞是B淋巴细胞杂交瘤细胞的理想细胞，其原因不包括下列哪项A、稳定和易培养B、自身无分泌功能C、改变细胞恶性变化D、融合度高E、HGPRT缺陷11、双特异性抗体分子的应用不包括A、免疫学诊断B、肿瘤放射显像C、介导药物杀伤D、介导细胞杀伤E、介导补体的生物学活性12、B细胞杂交瘤技术中细胞融合的选择培养基是A、HAT培养基B、次黄嘌呤培养基C、甲氨蝶呤培养基D、嘧啶核苷培养基E、胸腺嘧啶核苷培养基13、杂交瘤细胞保存最好在A、室温B、-4℃C、-20℃D、-70℃E、液氮14、能够在HAT培养基长期存活的细胞是A、脾-瘤融合细胞B、脾细胞C、骨髓瘤细胞D、脾-脾融合细胞E、瘤-瘤融合细胞15、HAT培养基中三种关键成分为A、次黄嘌岭、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷B、黄嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷C、氨基嘌岭、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷D、腺嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷E、鸟嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷16、多发性骨髓瘤细胞是制备B淋巴细胞杂交瘤细胞的理想细胞，其特点不包括A、稳定和易培养B、自身无分泌功能C、改变细胞恶性变化D、融合度高E、亲缘较近17、可以得到完全人源化抗体，在肿瘤的诊断与治疗中具有独特优越性的是A、嵌合抗体B、小分子抗体C、双特异性抗体D、单克隆抗体E、噬菌体抗体库技术18、生产单克隆抗体细胞最常用的培养方法为A、液体培养B、半固体培养C、固体培养D、鸡胚培养E、动物接种19、双特异性抗体分子的构建是A、特异性不同的两个小分子抗体连接B、特异性相同的两个小分子抗体连接C、在小分子抗体的氨基端设计半胱氨酸残基D、提高抗体的特异性E、只能从Fab组建20、制备单克隆抗体，选择培养基要选择融合的A、脾细胞与骨髓瘤细胞B、骨髓瘤细胞与淋巴瘤细胞C、脾细胞与脾细胞D、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞E、淋巴瘤细胞与淋巴瘤细胞二、B1、A.次黄嘌呤B.胸腺嘧啶核苷C.HGPRTD.甲氨蝶呤E.叶酸、次黄嘌呤磷酸核酸核糖转化酶是A B C D E、叶酸的拮抗药是A B C D E答案部分一、A11、【正确答案】B【答案解析】杂交瘤细胞由骨髓瘤细胞和脾细胞融合形成的，其合成DNA的主要途径被氨基蝶呤（A）阻断。

第二十五章免疫治疗复习要点：掌握免疫治疗的概念、分类及其用于治疗的原理；掌握抗体在免疫治疗中的应用；熟悉细胞因子、细胞在免疫治疗中的应用；了解常用的免疫抑制剂和免疫增强剂。

一、单项选择题1．下列哪项不是被动免疫治疗的制剂：A. 抗体B. 转移因子C. 瘤苗D. 免疫效应细胞E. 胸腺肽2．下列关于胎盘球蛋白的描述哪项不正确A．用于被动免疫治疗B．可预防麻疹、传染性肝炎等疾病C．可治疗丙种球蛋白缺乏症D．来自不同地区和人群的制剂中所含抗体的种类及数量不同E．具有较强特异性3．不属于免疫抑制剂的药物是A. 左旋咪唑B. 环孢菌素AC. FK-506D. 激素E. 烷化剂4．下列哪项不是免疫增强药物：A. 卡介苗B. 短小棒状杆菌C. 黄芪D. 雷公藤多甙E. 枸杞子多糖5．长期使用免疫抑制剂的不良后果是A．易出现感染和自身免疫病B．易出现感染和肿瘤C．易出现自身免疫病和免疫缺陷D．易出现免疫缺陷和肿瘤E．上述都不是6．为增强肿瘤患者的免疫力可以采用A. 激素B. 短小棒状杆菌C. 抗代谢药物D. 烷化剂E. 环孢菌素A7．不能用免疫抑制剂治疗的疾病是A. 肿瘤B. 器官移植后C. 类风湿性关节炎D. 肾病综合征E. 系统性红斑狼疮8．肿瘤疫苗与传统疫苗的主要区别是：A. 肿瘤疫苗主要用于肿瘤的预防B. 传统疫苗主要用于疾病的治疗C. 肿瘤疫苗主要用于肿瘤的治疗D. 肿瘤疫苗是免疫重建疗法E. 肿瘤疫苗是人工被动免疫疗法9．免疫毒素指的是：A. 抗肿瘤单抗与毒素的交联物B. 抗肿瘤单抗生于抗癌药物的交联物C. 抗肿瘤单抗与放射性核素的交联物D. 抗肿瘤单抗与特定细胞因子的交联物E. 抗肿瘤单抗与肿瘤疫苗的交联物10．关于活疫苗的特点下列哪项是错误的?A. 接种量少B. 接种次数少C. 易保存D. 免疫效果好E. 接种后副反应少11．关于抗毒素的使用，下列哪项是错误的?A. 可能发生过敏反应B. 治疗时要早期足量C. 可作为免疫增强剂给儿童多次注射D. 对过敏机体应采取脱敏疗法E. 只能用于紧急预防或治疗12．下列不属于人工主动免疫特点的是：A. 接种物常为抗原性物质B. 发挥作用较快C. 免疫力维持时间较长D. 主要用于预防E 可增强机体的抗病能力13．肿瘤的主动免疫治疗不包括下列哪种?*A. 减毒或灭活的瘤苗B. 异构的瘤苗C. 基因修饰的瘤苗D. 抗独特型抗体E. 抗肿瘤导向治疗14．抗肿瘤的导向治疗不包括：*A. 放射免疫治疗B. 抗体导向化学治疗C. 细菌毒素免疫疗法D. 输入淋巴细胞E. 植物毒素免疫疗法15．免疫抑制剂不适用于下列哪种情况?A. 艾滋病B. 类风湿性关节炎C. 系统性红斑狼疮D. 抗移植物排斥反应E. 超敏反应性疾病二、多项选择题1．主动免疫治疗可以应用：A．免疫效应细胞 B．瘤苗C．短小棒状杆菌 D．抗狂犬病毒抗体E．卡介苗2．免疫血清在免疫治疗中的特点有A．疗效发生快 B．疗效维持时间长C．特异性差 D．易导致超敏反应E．属于单克隆抗体3．具有免疫增强作用的化学药物是A．环孢菌素A B．环磷酰胺C．硫唑嘌呤 D．左旋咪唑E．西咪替丁4．下列哪些是人工被动免疫的生物制品?A.抗淋巴细胞血清B.抗淋巴细胞球蛋白C.抗 CD3 单克隆抗体D.抗 CD4 单克隆抗体E.抗 CD8 单克隆抗体5．BRM（生物应答调变剂）包括：*A. 造血干细胞和胸腺B. McAb 和导向药物C. 细胞因子及其活化的免疫细胞D. 分子疫苗E.基因治疗的基因、分子、细胞等6．骨髓和胎肝移植可用于治疗哪些疾病?*A. 超敏反应B. 血液系统疾病C. 遗传病D. 某些免疫缺陷病E. 放射病7．过继免疫疗法常用的细胞，有哪些?A.NK 细胞K 细胞C.Th细胞D.TIL 细胞E. 骨髓细胞8．免疫重建的方法主要有哪些?*A. 骨髓移植B. 胸导管引流C. 胎肝移植D. 胸腺移植E. 输入 LAK 细胞三、填空题1．在治疗感染、肿瘤、免疫缺陷时应采用_________疗法。