气相色谱法测定食用油中反式脂肪酸
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收 稿 日 期 ：2010-01-14 基 金 项 目 ：华 南 农 业 大 学 校 长 基 金 （K07321） 作 者 简 介 ：徐 小 艳 (1977-)，女 ，硕 士 ，实 验 师 ，E-mail：yanzixu_20 01@
1.2 试验方法 1.2.1 样 品 甲 酯 化 准 确 称 取 100 mg 样 品 于 具 塞 试 管 中，加入 2 mL 正己烷，摇动溶解，再加入 2 mL 2 mol/mL 的氢氧化钾-甲醇溶液，震荡 5 min，静置 30 min 后，取上 层澄清溶液用作气相色谱分析。 1.2.2 色谱条件 选用 DB-23（30 m×0.25 mm×0.25 μm） 毛细管色谱柱。 进样口温度 250℃；检测器温度 250℃；色 谱 柱 温 度 ： 程 序 升 温 ，140℃ 保 持 2 min，2℃ /min 升 至 220℃，保持 3 min。 载气：氮气，流速 1 mL/min；氢气，流速 30 mL/min；空气流速 300 mL/min，分流比 100∶1。 1.2.3 样品测定 进样体积 1 μL，外标法定量。 1.2.4 标 准 贮 备 液 的 配 制 分 别 准 确 称 取 100 mg 反 式 油酸甲酯标准品和反式亚油酸甲酯标准品于 50 mL 容量 瓶中，用正己烷溶解定容，得到反式油酸甲酯、反式亚油酸 甲酯各为 2 mg/mL 的混合标准贮备液。
参考文献：
[1] 魏 丽 芳 . 反 式 脂 肪 酸 检 测 方 法 的 建 立 及 应 用 [D]. 重 庆 ： 西 南 大 学 ， 2008.
[2] Mensink R P, Katan M B. Effect of dietary trans fatty acids on high -density and low -density lipoprotein cholesterol levels in healthy subjects[J]. N. Engl . J . Med,1990，323：439-445.
表 1 线性回归方程和检出限
1：正 己 烷 ；2：C18；3：反 式 油 酸 甲 酯 ；4：顺 式 油 酸 甲 酯 ； 5：反 式 亚 油 酸 甲 酯 ；6：顺 式 亚 油 酸 甲 酯
图 2 大豆油样品色谱图
2.5 回收率试验 精确称取同一大豆油样品 2 份， 分别选择 2 个水平，
加入反式油酸甲酯、反式亚油酸甲酯标准贮备液，每个水 平检测 2 次，结果取平均值，结果（表 3）表明，样品回收率 在 90.2%~98.0%之间。
2.3 标准曲线与检出限 准 确 吸 取 1.2.4 中 制 备 的 标 准 贮 备 液 0、2.5、5.0、7.5、
10.0 mL 于 5 个 10 mL 容量瓶中， 用正己烷稀释定容，配 制 成 0、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL 的 标 准 系 列 溶 液 进 行 测 定。 以标准物的浓度为横坐标，所对应的峰面积为纵坐标 进行线性回归分析，得到线性回归方程和相关系数。 根据 S/N=3 确定二组分的检出限，结果见表 1。
1 材料与方法
1.1 试验材料 试验原料为不同品牌的食用油，市购。正己烷、氢氧化
钾、浓硫酸、甲醇钠、甲醇均为分析纯，由天津市大茂化学 试剂厂生产；顺/反式油酸甲酯标准品和顺/反式亚油酸甲 酯标准品为武汉美泰克科技有限公司产品。
试验使用的主要仪器设备有 PerkinElmer 气相色谱仪 （带 FID 检测器及 TotalChrom WorkStation 6.3.0 色谱工作 站， 美国 PE 公司产品）、Milli-Q 超纯水处 理系统 （美 国 Millipore 公司产品）、DK-8D 电子恒温水浴锅 （上海 精密 实验设备有限公司产品）、FA2004 电子分析天平 （上海精 科天平仪器有限公司产品）。
国内对反式脂肪酸的研究才刚刚起步，目前还没有普 遍接受的反式脂肪酸检测标准方法。 植物油脂在精炼和 氢化过程中都会产生反式脂肪酸，本研究以反式油酸和反 式亚油酸为检测对象， 采用 DB-23 强极性毛细管柱和配 备 FID 检测器的毛细管气相色谱仪， 研究食用油中反式 脂肪酸的分离效果，并对其测定条件进行了优化。
广东农业科学 2010 年第 6 期
153
气相色谱法测定食用油中反式脂肪酸
徐小艳， 蓝国东 （华南农业大学食品质量与安全研究所/广东省食品质量与安全重点实验室，广东 广州 510642）
摘 要：采用氢氧化钾－甲醇甲酯化、DB-23 强极性毛细管柱气相色谱法对食用油中反式脂肪酸进行分离和分析。 结果表明，在优化
中 图 分 类 号 ：O657.7+1
文 献 标 识 码 ：A
文章编号：1004-874X（2010）06- 0153-02
Determination of trans fatty acids in edible oil by gas hromatography
XU Xiao-yan，LAN Guo-dong （Institute of Food Quality and Safety，South China Agricultural University/Food Quality and Safety Key
粒、青辣椒、红辣椒，在用 0.5%的柠檬酸+0.4%Na2SO3 热烫 液处理后，能较好地保持蔬菜的色泽及风味，在添加 0.5% 的 CMC-Na 和 6%变 性 淀 粉 后 能 很 好 地 保 持 果 酱 的 感 官 品质并使做出的产品在经高温烘焙后仍能保持柔滑体态， 不塌陷、不流散、不起皮、色泽光亮，具有良好的涂抹性。
[3] 陈 宜 ，张 青 ，林 丛 ，等.食 品 中 反 式 脂 肪 酸 的 研 究 进 展[J].食 品 科 技 ， 2009，16（5）：25-28.
[4] 宋 立 华 ，李 云 飞 ，汤 楠.食 品 中 反 式 脂 肪 酸 的 分 析 方 法 研 究 进 展 [J]. 上 海 交 通 大 学 学 报 （农 业 科 学 版 ），2007，25（1）：80-85.
试验条件下，反式油酸甲酯和反式亚油酸甲酯的线性范围均为 0~2.0 mg/mL，相关系数 0.999，检出限 10 μg/mL（S/N=3），加标回收率在
90.2%~98.0%之间，相对标准偏差为 1.5%~4.1%。 本试验方法简便、快捷、准确，适用于食用油中反式脂肪酸的分析。
关键词：气相色谱； 食用油； 反式脂肪酸
Laboratory of Guangdong Province，Guangzhou 510642，China）
Abstract：After converted to methyl esters with KOH-CH3OH, trans fatty acids in edible oil were separated and analyzed by capillary gas (DB-23) chromatography with high polarity. The results showed that a good linear relationship (r=0.999)existed in the range of 0 ~2.0 mg/mL under optimal conditions and the detection limit were10 μg/mL （S/N=3）. The recoveries ranged from 90.2% to 98.0%, with the relative standard deviations of 1.5%~4.1%. The method was shown to be simple, convenient and accurate and was suitable for the determination of trans fatty acids in edible oil.
表 3 回收率试验结果
组分 反式油酸
反式亚油酸
本底值 (mg/g)
5.4 5.4 2.6 2.6
加入量 (mg/g)
5.0 10.0 2.5 5.0
测定平均值 (mg/g) 9.7 13.9 5.0 7.4
回收率 （%） 93.3 90.2 98.0 97.4
组分
标准曲线方程 相关系数 r 检出限(μg/mL)
表 2 样品测定结果
样品 大豆油
花生油
组分
反式油酸 反式亚油酸
反式油酸 反式亚油酸
测 定 平 均 值(mg/g)
5.4 2.6 3.0 2.0
RSD（%）
1.5 2.6 4.1 2.0
3 结语
在优化试验条件下，反式油酸甲酯和反式亚油酸甲酯 的的线性范围均为 0~2.0 mg/mL，相关系数为 0.999，检出 限为 10 μg/mL，加标回收率在 90.2%~98.0%之间，相对标 准偏差为 1.5%~4.1%。 本试验方法简便、快捷、准确，可为 食品中营养标签标注提供参考依据，为消费者健康消费提 供科学指导。
理的情况下，改变色谱分离条件，比较二者的分离效果。试
验 结 果 发 现 ，HP-INNOWax 毛 细 管 柱 对 脂 肪 酸 甲 酯DB-23 毛
细管柱则能较好地满足分离要求。图 1 为选定的色谱条件
下得到的分离图。
2
6 4 35
12
1：反式油酸甲酯； 2：反式亚油酸甲酯 图 1 混合标准品色谱图
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（上接第 144 页）
的 发 展 之 路[J].中 华 烘 焙 ，2006（9）：56-57.
蔬菜型果酱最佳的蔬菜成分搭配为黑木耳 、青 豌 豆 、玉 米 [2] 上虞市华丰食品机械有限公司.蔬菜加工过程中热烫（漂烫)蔬菜
2 结果与分析
2.1 甲酯化方法的选择 油脂样品的主要成分是各种相对质量不同的甘油三
1.2 试验方法 1.2.1 样 品 甲 酯 化 准 确 称 取 100 mg 样 品 于 具 塞 试 管 中，加入 2 mL 正己烷，摇动溶解，再加入 2 mL 2 mol/mL 的氢氧化钾-甲醇溶液，震荡 5 min，静置 30 min 后，取上 层澄清溶液用作气相色谱分析。 1.2.2 色谱条件 选用 DB-23（30 m×0.25 mm×0.25 μm） 毛细管色谱柱。 进样口温度 250℃；检测器温度 250℃；色 谱 柱 温 度 ： 程 序 升 温 ，140℃ 保 持 2 min，2℃ /min 升 至 220℃，保持 3 min。 载气：氮气，流速 1 mL/min；氢气，流速 30 mL/min；空气流速 300 mL/min，分流比 100∶1。 1.2.3 样品测定 进样体积 1 μL，外标法定量。 1.2.4 标 准 贮 备 液 的 配 制 分 别 准 确 称 取 100 mg 反 式 油酸甲酯标准品和反式亚油酸甲酯标准品于 50 mL 容量 瓶中，用正己烷溶解定容，得到反式油酸甲酯、反式亚油酸 甲酯各为 2 mg/mL 的混合标准贮备液。
参考文献：
[1] 魏 丽 芳 . 反 式 脂 肪 酸 检 测 方 法 的 建 立 及 应 用 [D]. 重 庆 ： 西 南 大 学 ， 2008.
[2] Mensink R P, Katan M B. Effect of dietary trans fatty acids on high -density and low -density lipoprotein cholesterol levels in healthy subjects[J]. N. Engl . J . Med,1990，323：439-445.
表 1 线性回归方程和检出限
1：正 己 烷 ；2：C18；3：反 式 油 酸 甲 酯 ；4：顺 式 油 酸 甲 酯 ； 5：反 式 亚 油 酸 甲 酯 ；6：顺 式 亚 油 酸 甲 酯
图 2 大豆油样品色谱图
2.5 回收率试验 精确称取同一大豆油样品 2 份， 分别选择 2 个水平，
加入反式油酸甲酯、反式亚油酸甲酯标准贮备液，每个水 平检测 2 次，结果取平均值，结果（表 3）表明，样品回收率 在 90.2%~98.0%之间。
2.3 标准曲线与检出限 准 确 吸 取 1.2.4 中 制 备 的 标 准 贮 备 液 0、2.5、5.0、7.5、
10.0 mL 于 5 个 10 mL 容量瓶中， 用正己烷稀释定容，配 制 成 0、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL 的 标 准 系 列 溶 液 进 行 测 定。 以标准物的浓度为横坐标，所对应的峰面积为纵坐标 进行线性回归分析，得到线性回归方程和相关系数。 根据 S/N=3 确定二组分的检出限，结果见表 1。
1 材料与方法
1.1 试验材料 试验原料为不同品牌的食用油，市购。正己烷、氢氧化
钾、浓硫酸、甲醇钠、甲醇均为分析纯，由天津市大茂化学 试剂厂生产；顺/反式油酸甲酯标准品和顺/反式亚油酸甲 酯标准品为武汉美泰克科技有限公司产品。
试验使用的主要仪器设备有 PerkinElmer 气相色谱仪 （带 FID 检测器及 TotalChrom WorkStation 6.3.0 色谱工作 站， 美国 PE 公司产品）、Milli-Q 超纯水处 理系统 （美 国 Millipore 公司产品）、DK-8D 电子恒温水浴锅 （上海 精密 实验设备有限公司产品）、FA2004 电子分析天平 （上海精 科天平仪器有限公司产品）。
国内对反式脂肪酸的研究才刚刚起步，目前还没有普 遍接受的反式脂肪酸检测标准方法。 植物油脂在精炼和 氢化过程中都会产生反式脂肪酸，本研究以反式油酸和反 式亚油酸为检测对象， 采用 DB-23 强极性毛细管柱和配 备 FID 检测器的毛细管气相色谱仪， 研究食用油中反式 脂肪酸的分离效果，并对其测定条件进行了优化。
广东农业科学 2010 年第 6 期
153
气相色谱法测定食用油中反式脂肪酸
徐小艳， 蓝国东 （华南农业大学食品质量与安全研究所/广东省食品质量与安全重点实验室，广东 广州 510642）
摘 要：采用氢氧化钾－甲醇甲酯化、DB-23 强极性毛细管柱气相色谱法对食用油中反式脂肪酸进行分离和分析。 结果表明，在优化
中 图 分 类 号 ：O657.7+1
文 献 标 识 码 ：A
文章编号：1004-874X（2010）06- 0153-02
Determination of trans fatty acids in edible oil by gas hromatography
XU Xiao-yan，LAN Guo-dong （Institute of Food Quality and Safety，South China Agricultural University/Food Quality and Safety Key
粒、青辣椒、红辣椒，在用 0.5%的柠檬酸+0.4%Na2SO3 热烫 液处理后，能较好地保持蔬菜的色泽及风味，在添加 0.5% 的 CMC-Na 和 6%变 性 淀 粉 后 能 很 好 地 保 持 果 酱 的 感 官 品质并使做出的产品在经高温烘焙后仍能保持柔滑体态， 不塌陷、不流散、不起皮、色泽光亮，具有良好的涂抹性。
[3] 陈 宜 ，张 青 ，林 丛 ，等.食 品 中 反 式 脂 肪 酸 的 研 究 进 展[J].食 品 科 技 ， 2009，16（5）：25-28.
[4] 宋 立 华 ，李 云 飞 ，汤 楠.食 品 中 反 式 脂 肪 酸 的 分 析 方 法 研 究 进 展 [J]. 上 海 交 通 大 学 学 报 （农 业 科 学 版 ），2007，25（1）：80-85.
试验条件下，反式油酸甲酯和反式亚油酸甲酯的线性范围均为 0~2.0 mg/mL，相关系数 0.999，检出限 10 μg/mL（S/N=3），加标回收率在
90.2%~98.0%之间，相对标准偏差为 1.5%~4.1%。 本试验方法简便、快捷、准确，适用于食用油中反式脂肪酸的分析。
关键词：气相色谱； 食用油； 反式脂肪酸
Laboratory of Guangdong Province，Guangzhou 510642，China）
Abstract：After converted to methyl esters with KOH-CH3OH, trans fatty acids in edible oil were separated and analyzed by capillary gas (DB-23) chromatography with high polarity. The results showed that a good linear relationship (r=0.999)existed in the range of 0 ~2.0 mg/mL under optimal conditions and the detection limit were10 μg/mL （S/N=3）. The recoveries ranged from 90.2% to 98.0%, with the relative standard deviations of 1.5%~4.1%. The method was shown to be simple, convenient and accurate and was suitable for the determination of trans fatty acids in edible oil.
表 3 回收率试验结果
组分 反式油酸
反式亚油酸
本底值 (mg/g)
5.4 5.4 2.6 2.6
加入量 (mg/g)
5.0 10.0 2.5 5.0
测定平均值 (mg/g) 9.7 13.9 5.0 7.4
回收率 （%） 93.3 90.2 98.0 97.4
组分
标准曲线方程 相关系数 r 检出限(μg/mL)
表 2 样品测定结果
样品 大豆油
花生油
组分
反式油酸 反式亚油酸
反式油酸 反式亚油酸
测 定 平 均 值(mg/g)
5.4 2.6 3.0 2.0
RSD（%）
1.5 2.6 4.1 2.0
3 结语
在优化试验条件下，反式油酸甲酯和反式亚油酸甲酯 的的线性范围均为 0~2.0 mg/mL，相关系数为 0.999，检出 限为 10 μg/mL，加标回收率在 90.2%~98.0%之间，相对标 准偏差为 1.5%~4.1%。 本试验方法简便、快捷、准确，可为 食品中营养标签标注提供参考依据，为消费者健康消费提 供科学指导。
理的情况下，改变色谱分离条件，比较二者的分离效果。试
验 结 果 发 现 ，HP-INNOWax 毛 细 管 柱 对 脂 肪 酸 甲 酯DB-23 毛
细管柱则能较好地满足分离要求。图 1 为选定的色谱条件
下得到的分离图。
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1：反式油酸甲酯； 2：反式亚油酸甲酯 图 1 混合标准品色谱图
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的 发 展 之 路[J].中 华 烘 焙 ，2006（9）：56-57.
蔬菜型果酱最佳的蔬菜成分搭配为黑木耳 、青 豌 豆 、玉 米 [2] 上虞市华丰食品机械有限公司.蔬菜加工过程中热烫（漂烫)蔬菜
2 结果与分析
2.1 甲酯化方法的选择 油脂样品的主要成分是各种相对质量不同的甘油三
