家兔的氨茶碱静脉注射药代动力学研究
实验目的
1、掌握紫外分光光度法测定兔血中氨茶碱
2、掌握药动学参数的计算方法
【实验原理】
氨茶碱,多用于治疗支气管哮喘,为茶碱与乙二胺的复盐。茶碱是主要的药效成分,而乙二胺则能够提高药物的水溶性。由于其治疗窗相对较窄(10-20微克/毫升,大约有75%的患者在血药浓度超过25微克/毫升的时候出现中毒反应。因此,加强患者的氨茶碱的血药浓度监控非常必要。
茶碱是一种弱酸,所以可以用有机溶剂在酸性条件下将其从血清里面中提取分离,同时血清蛋白变成沉淀。随后,茶碱可以用碱液从有机溶剂中提取分离。茶碱的最大吸收波长是274nm,然而,空白血清在该波长处也有显著的吸收,所以使用双波长(274nm和298nm紫外分光光度法来测定兔血中的茶碱浓度。
【实验步骤】
1、参比溶液的标准曲线
取茶碱5.0g至10容量瓶中,用10ml NaOH溶液(0.1mol/L溶解并定容至刻度制成500ug/ml的储备液。分别取5.0,10.0,15.0,20.0,25.0和30.0ul的储备液加至装有500ul空白血清样品的试管中。最终的生物标准校正浓度范
围为5.0-30.0ug/ml。标准样品通过下述的方法进行测定。绘制以△A(A274-A298为纵坐标,以浓度为横坐标的标准曲线。
2、血清中茶碱浓度的测定
取200ul的盐酸(0.1mol/L和5ml的氯仿-异丙醇(95:5加入500ul的血清样品中。混合均匀后,将混合液用离心机(3000r/min离心10min。然后,取氯仿层(3.0ml转移进入另一试管中,再加入3.0ml的氢氧化钠(0.1mol/L混匀。混合液用离心机(3000r/min离心10min。取上清液(约2.5ml分别在274nm和298nm处测定其吸光度A。空白液为2.0ml的蒸馏水和4.0ml的氢氧化钠(0.1mol/L混匀制成。血液中的药物浓度使用茶碱标准曲线的线性回归方程进行计算。
新药转正西药标准
卫生部颁药品标准（新药转正标准西药第三十三）
(24种)
阿昔洛韦分散片
拼音名：Axiluowei Fensanpian
英文名：Aciclovir Dispersible Tablets
书页号：X33-158 标准编号：WS1-(X-054)-2003Z
本品含阿昔洛韦(C8H11N5O3)应为标示量的％～％。
【性状】本品为白色片。
【鉴别】(1)取本品的细粉适量(约相当于阿昔洛韦30mg)，加水10ml，振摇
使溶解，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加盐酸2ml，置水浴上蒸干，再加
盐酸1ml与氯化钾约30mg，置水浴上蒸干,冷却,于残渣中滴加氨试液2～3滴，
残渣显紫红色。再加氢氧化钠试液数滴，紫红色消失。
(2)在含量测定项下记录的色谱图中，供试品主峰的保留时间应与阿昔
洛韦对照品主峰的保留时间一致。
【检查】溶出度 取本品，照溶出度测定法(中国药典2000年版二部附录
Ⅹ C 第一法)以水900ml为溶剂，转速为每分钟100转,依法操作，经20分钟时，
取溶液适量，滤过，精密量取续滤液2ml，置25ml量瓶中,加水稀释至刻度，
摇匀，作为供试品溶液；另取阿昔洛韦对照品适量，精密称定，加水制
成每1ml约含8μg的溶液，作为对照品溶液。照分光光度法(中国药典2000年版
二部附录Ⅳ A)，在252nm的波长处测定吸收度，计算每片的溶出量。限度为
标示量的80％，应符合规定。
其他 应符合片剂项下有关各项规定(中国药典2000年版二部附录Ⅰ A)。
【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录Ⅴ D)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲
绿茶提取物中茶多酚含量测定方法（UV）
一、仪器与试剂
仪器：移液管（1ml）；容量瓶（100、25ml）；分析天平（1/10000）；紫外分光光度计
试剂：超纯水；硫酸亚铁（AR）；酒石酸钾钠（AR）；磷酸氢二钠（AR）；磷酸二氢钾（AR）
二、试剂的配制
酒石酸亚铁溶液：称取1g（精确至0.0001g）硫酸亚铁和5g酒石酸钾钠（精确至0.0001g）用水溶解并定容至1000ml。
PH7.5磷酸盐缓冲液：称取23.377g磷酸氢二钠，加水溶解并定容至1000ml；称取9.078g磷酸二氢钾（磷酸二氢钾在110℃干燥2h）加水溶解柄定容至1000ml;二溶液按85：15（V/V）混合均匀。
三、样品处理
称取本品40-45mg，置于50ml容量瓶中，加水，振摇使溶解，定容至刻度，摇匀，取5ml至25ml置容量瓶中，加水4ml，酒石酸铁溶液5ml，用PH7.5磷酸盐缓冲液定容至刻度，摇匀，即得。
四、紫外条件
检测波长：540nm 以试剂空白溶液对照
五、含量计算
茶多酚的含量按下式计算
X(%)=%100100050.0957.121MVVA
A：供试液吸光度；
1V：供试品提取液；
2V：测定时的取用量；
M：供试品的称样量（g）；
1.957:当吸光度等于0.50时，1ml供试品溶液中含茶多酚相当于1.957mg。
・５６・ＩＳＳＮ１６７１—２８３８ＰｈａｒｍＣａｒｅ＆ＲｅｓＥ—ｍａｉｌＰｈａｒｍＣＲ＠ｙａｏｘｕｅ．ｎｅｔ药学服务与研究２００５Ｍａｒ；５（１）Ｐｈｎ／Ｆａｘ８６—２１－６５５１９８２９
表１依西美坦片在３种介质中溶出的
平均Ｗｅｉｂｕｌｌ分布参数
Ｔａｂｌｅ１ＭｅａｎＷｅｉｂｕｌｌ’ｓｐａｒａｍｅｔｅｒｓｏｆｅｘｅｍｅｓｔａｎｅ
ｔａｂｌｅｔｓｉｎ３ｋｉｎｄｓｏｆｍｅｄｉｕｍ
（”一３）
剂的溶出质量［６］，初步探讨影响口服吸收速率的主
要因素。结果表明，依西美坦的水溶性较差，在水及
人工胃液中溶出缓慢，尤其是在酸性介质中溶出缓
慢，６０ｍｉｎ时的溶出百分率仍不能达到５０％；而其
在表面活性剂ＳＤＳ改性介质中溶出稳定而迅速，２０
ｍｉｎ已溶出７０％以上（见图２）。提示该药在胃内溶
出度差，主要在肠道溶出，吸收速率容易受胃排空速
度的影响；由于胃肠道中的介质环境对其溶出速度
影响较大，提示其溶出速度个体差异可能导致了达
峰时间的个体差异。故饭后服用可能有利于其迅速
吸收。影响制剂口服吸收的因素有很多，本研究仅考察了依西美坦在几种常用介质中的溶出特性，故
仅能提示一些与制剂工艺、溶出条件相关的主要特
性。由于考察条件不够多，样本量也不够大，尚有待
结合其体内药动学实验进一步研究。
［参考文献］
［１］ＤａｎｋＭ．Ｔｈｅｒｏｌｅｏｆａｒｏｍａｓｉｎｉｎｔｈｅｈｏｒｍｏｎａｌｔｈｅｒａｐｙｏｆ
ｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．ＰａｔｈｏｌＯｎｃｏｌＲｅｓ，２００２，８（２）：８７．Ｅ２］ＢｒｅｄａＭ，ＰｉａｎｅｚｚｏｌａＥ，ＢｅｎｅｄｅｔｔｉＭＳ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｅｘｅｍｅｓｔａｎｅ，ａｎｅｗａｒｏｍａｔａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，ｉｎｐｌａｓｍａｂｙｈｉｇｈ—ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｗｉｔｈｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔｄｅｔｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒ，１９９３，６２０（２）：２２５．［３］厉伟兰，郑向宇．ＲＰ—ＨＰＬＣ法测定依西美坦片中依西美坦的
