最新实验1(PDA培养基的制备)
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PDA培养基的配制方法PDA(Potato Dextrose Agar)是一种富含淀粉和葡萄糖的琼脂培养基,广泛用于真菌和霉菌的培养和鉴定。
下面是PDA培养基的精确配制方法:原料准备:-250克马铃薯-20克葡萄糖-15克琼脂工具准备:-秤-剪刀-玻璃容器或烧杯-培养瓶或琼脂培养皿-灭菌器或压力锅-pH计或pH试纸-搅拌棒或吹球步骤:1.清洁工具:将玻璃容器、培养瓶、搅拌棒等工具用肥皂水洗净,并用自来水冲洗干净。
2.马铃薯的制备:先用清洁的剪刀将250克马铃薯去皮,然后切成均匀的小块。
3.煮马铃薯:将马铃薯块放入玻璃容器或烧杯中,并加入足够的自来水,使其覆盖马铃薯。
然后将容器放入灭菌器或压力锅中,煮沸30分钟杀灭马铃薯中的微生物。
4.过滤溶液:将煮熟的马铃薯溶液用细网过滤器过滤出来,以去除固体残渣。
5.加入琼脂:将过滤后的马铃薯溶液重新倒回玻璃容器或烧杯中,随后加入15克的琼脂。
将容器放入微波炉中,加热溶解至琼脂完全溶解为止。
6.加入葡萄糖:将20克葡萄糖加入琼脂溶液中,搅拌均匀。
7.均匀分配:将培养基溶液分装到培养瓶或琼脂培养皿中。
每瓶或皿中的溶液量应根据需要进行调整,一般为20-25毫升。
8.pH调节:使用pH计或pH试纸检测培养基的酸碱度。
PDA培养基的理想pH值为5.6、如果pH值高于或低于此值,则使用盐酸或碳酸氢钠溶液进行调节,直到达到理想的pH值。
9. 灭菌:将装有培养基的瓶或皿盖好,然后放入灭菌器或压力锅,进行高温高压灭菌。
通常在121℃下压力为15磅(或1.05kg/cm²)下灭菌20分钟。
10.存储:在灭菌后的培养基冷却到接近室温后,将其存储在冰箱中,以防止微生物生长。
注意事项:-所有使用的工具和培养基都必须经过彻底的消毒。
-在煮马铃薯时,要确保马铃薯块完全煮熟,以确保有效杀灭微生物。
-在加入琼脂和葡萄糖时,要确保琼脂完全溶解,葡萄糖均匀分散。
-在调节pH时要小心,因为pH调节对微生物的生长有重要影响。
PDA培养基的配制方法和注意事项PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
它属于固体培养基、半合成培养基。
PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势,一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛。
PDA培养基的配制(1)称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。
(4)加棉塞培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。
(5)包扎加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
PDA培养基配制注意事项1.培养基经灭菌后,必须放在37C温箱培养24h,无菌生长者方可使用。
2.PDA培养基一般不需要调pH。
对于要调节pH的培养基,一般用pH试纸测定其pH。
如果培养基偏酸或偏碱时,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。
调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。
pda培养基
PDA(Potato Dextrose Agar)是一种常用的培养基,以马铃薯和葡萄糖为主要成分。
它适用于真菌和霉菌的培养和鉴定。
PDA培养基的配方如下:
- 马铃薯提取物:200 g/L
- 葡萄糖:20 g/L
- 洋葱提取液:1 g/L
- 干酪膜素:0.1 g/L
- 硫酸镁:0.5 g/L
- 琼脂:15 g/L
- 蒸馏水:1000 mL
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制备PDA培养基的步骤如下:
1. 将马铃薯洗净去皮,切成小块。
2. 将马铃薯块放入大容器中,加入适量的蒸馏水,煮沸1
小时,然后离心取得汁液。
3. 将马铃薯汁液过滤。
过滤液为马铃薯提取物。
4. 在一烧瓶中加入马铃薯提取物和葡萄糖,搅拌溶解。
5. 在另一烧瓶中加入洋葱提取液和硫酸镁,搅拌溶解。
6. 将两个烧瓶中的溶液混合在一起,调整pH值为5.6-6.2。
7. 在溶液中加入干酪膜素和琼脂,搅拌溶解。
8. 将培养基加热至沸腾,然后倒入培养瓶中。
9. 灭菌培养瓶,通常以121°C高压蒸汽灭菌20-30分钟。
PDA培养基可以用于分离和培养真菌,如酵母菌、霉菌和
子囊菌等。
它提供了合适的营养物质和适宜的条件,促进
真菌的生长和繁殖。
2。
PDA培养基的配方及配制方法PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
它属于固体培养基、半合成培养基。
PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势,一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛。
PDA培养基的配方土豆 200g葡萄糖 20g琼脂 15~20g水 1000mLpH值自然PDA培养基的配制(1)称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。
(4)加棉塞培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。
(5)包扎加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
pda培养基的制备实验报告
PDA培养基制备
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微生物实验中需要用到很多的培养基,而PDA是其中一种比较常见的,也是很容易配置的。
工具/原料
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新鲜土豆;琼脂;葡萄糖
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电磁炉;锅(带盖);漏勺;刀
•
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烧杯;纱布;玻璃棒;天平;称量纸;去离子水等
方法/步骤
这里按1L配制:
先用刀将土豆去皮,称取200g,然后切成条状
将锅和漏勺刷干净,并用去离子水清洗一遍,并在锅中加入1L去离子水
然后放在电磁炉上煮,等到土豆丝差不多煮烂时(用漏勺很容易碰断),关电磁炉;将纱布叠8层,然后放在烧杯上,将锅里的东西倒在上面过滤
.
将烧杯补充到1L,倒入已清洗的锅中(去离子水),打开电磁炉(900W左右即可)然后放入20g葡萄糖和18g琼脂粉,并用玻璃棒不断搅拌至完成溶解将上述液体倒入1L烧杯中,补充不足水分(去离子水),然后装入500ml的锥形瓶中,用封口膜封上,用橡皮筋缠下,外面再用报纸包一层
放入高压灭菌锅中,121°C 30min
.
整理实验器材,清洗仪器
注意事项
•
琼脂粉不要一次全部倒进去,等锅热时,一点一点倒进去
•。
PDA培养基的配方及配制方法PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
它属于固体培养基、半合成培养基.PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势,一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛.PDA培养基的配方土豆 200g葡萄糖 20g琼脂 15~20g水 1000mLpH值自然PDA培养基的配制(1)称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20—30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝.(4)加棉塞培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。
(5)包扎加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
PDA培养基的配制方法PDA(Potato Dextrose Agar)是一种常用的培养基,广泛用于真菌和霉菌的培养及鉴定。
以下是用于制备PDA培养基的配制方法。
1.准备所需材料和设备-马铃薯:5个中等大小的马铃薯-葡萄糖:20克-洁净水:1升- 环境灭菌器(autoclave)-秤和容器-酸性pH试纸-移液管-培养皿或试管-实验室纸2.前期准备-将马铃薯洗净并削去外皮。
然后切成薄片,约0.5-1厘米的厚度。
-将锅中的水煮沸,将准备好的马铃薯片放入沸水中煮10分钟。
煮熟的马铃薯要输送到室温。
-将煮熟的马铃薯捣碎,以去除固体残渣。
3.配制PDA培养基-在一个用适量的水洗净和灭菌的容器中称取适量的煮熟马铃薯制得的马铃薯糊。
-摄取10%的葡萄糖。
-将容器放在烧杯中,并在烧杯中添加适量的洁净水,直到容器中的总容积为1升。
-使用酸性pH试纸检查pH值,并将其调整至5.6-5.8的范围内,通过加入少量的1MHCl或1MNaOH。
-用实验室纸过滤培养基,以去除留在溶液中的固体残渣碎片。
-用环境灭菌器将培养基装在培养皿或试管中。
对于培养皿,约20-25毫升的培养基足够;对于试管,约为10毫升。
4.灭菌-将装有培养基的容器放入环境灭菌器中。
-设置灭菌温度为121°C,灭菌时间为15分钟。
-等待完全冷却后,取出培养基容器。
5.储存-将已灭菌和冷却的培养基存放在冰箱中,以避免细菌和真菌的污染。
-培养基通常可以储存在2-4°C的冰箱中,可保持约1-2个月。
注意事项:-在配制PDA培养基的过程中,需要严格遵守无菌技术和操作规范,以避免污染。
-培养基pH值的准确控制对于真菌和霉菌的生长至关重要。
-灭菌温度和时间需要根据实验室设备的不同进行调整,以确保完全灭菌。
-培养基的储存条件是保证其质量和无菌性的关键,需要避免高温、阳光暴露以及其他潜在的污染源。
总结:配制PDA培养基需要用到马铃薯、葡萄糖和水,通过煮马铃薯、制取马铃薯糊、加入葡萄糖并调整pH值,最后经过灭菌和储存,制得一种适用于真菌和霉菌培养的PDA培养基。