紫花苜蓿转基因的研究进展分析
- 格式:doc
- 大小:14.00 KB
- 文档页数:2
紫花苜蓿研究进展紫花苜蓿(Medicago sativa L.)是一种重要的牧草和绿肥作物,被广泛种植用于草地改良、畜牧业和土壤保护。
随着生物技术和分子生物学的发展,紫花苜蓿的研究也取得了许多进展,为其栽培和利用提供了更多的可能性。
本文将从遗传育种、生物工程、抗逆性等方面介绍紫花苜蓿研究的最新进展。
一、遗传育种方面的进展遗传育种是改良作物品质和性状的重要手段,也是提高紫花苜蓿产量和抗逆性的关键途径。
随着现代分子生物学和遗传学的不断发展,越来越多的分子标记和功能基因被应用于紫花苜蓿的遗传育种中。
研究人员通过分子标记辅助选育,成功地开发出了许多具有高产、抗逆和优质性状的新品种,例如抗逆禾草(resistant alfalfa)和高蛋白紫花苜蓿(high-protein alfalfa)等。
近年来,研究人员还利用CRISPR/Cas9技术对紫花苜蓿进行基因编辑,成功地实现了特定基因的靶向改良。
这些基因编辑紫花苜蓿具有抗逆性更强、生长更健壮、产量更高等优点,为紫花苜蓿的遗传育种提供了新的途径。
二、生物工程方面的进展生物工程技术的应用,为紫花苜蓿的改良和利用带来了新的希望。
近年来,研究人员通过转基因技术成功地将一些植物抗病、抗逆和提高养分利用效率的基因导入紫花苜蓿,使其具有了更强的抗逆能力和更高的产量。
利用RNA干扰技术对某些基因进行抑制或激活,也为紫花苜蓿的品质和产量改良提供了新的途径。
近年来,利用代谢工程技术对紫花苜蓿的次生代谢物进行调控,已取得了一些重要进展。
通过利用代谢工程技术,成功地提高了紫花苜蓿中一些重要次生代谢物的含量,例如花青素和黄酮类化合物,为其药用和营养价值的提高提供了新的途径。
近年来,研究人员还通过利用生物学、生物化学和分子生物学等多种手段,成功地培育出了一些抗逆紫花苜蓿品种,并对其抗逆性进行了深入研究和应用。
这些抗逆性更强的紫花苜蓿品种,不仅具有更好的生态效益,还能够为畜牧业和土壤保护提供更多的可能性。
《MfERF028基因提高转基因紫花苜蓿耐寒性的研究》篇一一、引言紫花苜蓿作为一种重要的牧草作物,在农业生产中具有广泛的应用价值。
然而,由于气候变化带来的低温环境,紫花苜蓿的生长发育常常受到严重影响。
为了改善这一状况,本研究利用转基因技术,将MfERF028基因导入紫花苜蓿中,以期提高其耐寒性。
本文将对这一研究的目的、方法、结果及讨论进行详细阐述。
二、研究目的与意义本研究旨在通过转基因技术,将MfERF028基因导入紫花苜蓿中,以提高其耐寒性,从而增强其在低温环境下的生长和发育能力。
此项研究不仅有助于提高紫花苜蓿的产量和品质,还对农业生态环境的改善具有重要意义。
三、研究方法1. 实验材料:选取适宜转基因的紫花苜蓿品种作为实验材料,同时获取MfERF028基因。
2. 转基因操作:采用农杆菌介导的叶盘法进行转基因操作,将MfERF028基因导入紫花苜蓿中。
3. 转基因紫花苜蓿的培育与鉴定:对转基因紫花苜蓿进行培育,并通过PCR、RT-PCR等方法进行鉴定。
4. 耐寒性试验:在低温环境下对转基因紫花苜蓿进行耐寒性试验,观察其生长和发育情况。
四、实验结果1. 转基因紫花苜蓿的培育与鉴定结果:成功将MfERF028基因导入紫花苜蓿中,并通过PCR、RT-PCR等方法证实了转基因的成功。
2. 耐寒性试验结果:在低温环境下,转基因紫花苜蓿的生长和发育情况明显优于非转基因紫花苜蓿。
转基因紫花苜蓿的株高、叶绿素含量、光合速率等生长指标均有所提高,且在低温下受到的损伤程度较低。
五、讨论本研究表明,将MfERF028基因导入紫花苜蓿中可以提高其耐寒性。
这可能是由于MfERF028基因在紫花苜蓿中发挥了调控作用,促进了其在低温环境下的生长和发育。
此外,我们还发现转基因紫花苜蓿的其他生长指标也有所提高,这表明MfERF028基因的导入对紫花苜蓿的生长和发育具有全面促进作用。
然而,本研究仍存在一定局限性。
首先,我们仅在实验室条件下进行了耐寒性试验,实际田间环境可能更为复杂。
紫花苜蓿研究进展紫花苜蓿是一种重要的牧草,具有丰富的营养价值和广泛的生态适应性,因此受到了广泛的关注和研究。
随着科学技术的不断进步,紫花苜蓿的研究也在不断取得新的进展。
本文将对紫花苜蓿的研究进展进行介绍,包括其遗传改良、营养价值、栽培管理等方面的最新研究成果。
一、遗传改良紫花苜蓿的遗传改良是当前研究的一个热点领域。
传统育种方法和分子生物学技术的结合,为紫花苜蓿的遗传改良提供了更多的手段。
在传统育种方面,研究人员通过杂交选育,培育出了具有高产量、高抗逆性、高抗病性的新品种,如“紫花苜蓿527”、“紫花苜蓿808”等。
这些新品种在不同的生态环境下表现出良好的适应性和稳定的生产性能,在提高紫花苜蓿的生产能力和品质方面发挥了重要作用。
利用分子生物学技术进行的遗传改良也取得了一些突破性进展。
研究人员通过基因工程技术,成功地将外源基因导入紫花苜蓿,使其获得了抗病、抗逆、抗虫等重要性状。
利用激素信号转导途径的基因进行转基因改良,可以增强紫花苜蓿的逆境适应性和生长发育能力。
这些遗传改良技术的应用,为提高紫花苜蓿的抗逆性和生产性能提供了新的途径和手段。
二、营养价值紫花苜蓿是一种优质的饲草,具有丰富的营养价值。
研究表明,紫花苜蓿含有丰富的蛋白质、维生素和矿物质,尤其是含有丰富的植物雌激素,对动物的生长和免疫功能有着重要的影响。
近年来,研究人员对紫花苜蓿的营养价值进行了深入的研究,不仅对其主要营养成分进行了分析和评价,还对其抗氧化、抗炎、抗衰老等健康功能进行了探讨。
研究发现,紫花苜蓿中富含的异黄酮类物质对人体具有多种有益作用,可以预防心血管疾病、调节内分泌功能、改善骨质疏松等。
这些研究成果为紫花苜蓿的开发利用提供了科学依据,为其在保健食品、药品等领域的应用奠定了基础。
三、栽培管理紫花苜蓿的栽培管理是影响其生长发育和产量形成的重要因素。
近年来,研究人员对紫花苜蓿的栽培管理进行了系统的研究,包括土壤肥力管理、种植密度、水分管理、病虫害防治等方面。
紫花苜蓿转基因的研究进展分析紫花苜蓿属于一种豆科多年生牧草,具备高产量、高营养、适应力强、适口性好等特点,具有悠久的栽培历史,得到广泛的应用[1-2]。
紫花苜蓿不单单是一种饲料作物,它还具有保持水土、改良土壤、保护生态环境的作用。
传统的栽培方法具有时间长,产量低,成本高的局限性,无法满足现今社会对于育种多元化的需求。
随着转基因技术的不断发展,植物转基因技术在紫花苜蓿的遗传改良中具有极高的应用价值,从根本上加大育种进程,提高生产产量以及质量。
1 电击法该方法主要是通过对植物物原生质体具有整合以及表达外源 DNA 的能力的有效利用,对植物细胞进行脱壁,借助电机所释放出来的电脉冲,对植物细胞进行刺激而产生原生质体细胞膜出现微孔,促使分布在原生质体四周位置的外源 DNA可以进入到原生质体内。
此外,电击法还可以把GUS 基因向紫花苜蓿根原生质体直接导入以此获得转基因植株。
有相关关于GUS 酶活性检测报告指出,在转化的紫花苜蓿细胞内,GUS基因不但转化的紫花苜蓿细胞内,还在其内进行表达,转化的频率大约为6.5%。
但是该方法在应用过程中却受到很多局限,例如:在重新建立植物原生质体再生系统不仅仅难度很大,且转化率很低。
2 农杆菌介导法农杆菌介导法是使用最早、最广泛以及效果最好的一种转化方法。
通过使用农杆菌介导法对受体进行转化,整个操作过程简单便捷、经济实惠。
该方法在基因组上的外源基因进行整合,不但拷贝数少,且重排程度较低,转化效率高,是当前对紫花苜蓿改良过程中最长使用的一种有效方法。
该方法之所以可以建立起稳定的遗传转化,其主要的作用原理是:双子叶植物以及单子叶植物均受到土壤农杆菌的侵染,当植物受到来自农杆菌侵染的时候,植物则会释放出酚类物质诱导进行诱导,质粒上 Vir区基因表达,可以把粒上 T-DNA向植物的基因组中进行整合,使其在植物体内进行表达,以此达到改变植物的遗传性状的最终目的。
因为农杆菌自身具备天然转移 DNA这一特性,所以在植物基因工程中得到了广泛的应用。
紫花苜蓿研究进展紫花苜蓿是一种优质牧草,被广泛用于家畜饲料和土壤改良。
它不仅具有高蛋白质和营养物质含量,还具有良好的抗逆性和适应性。
近年来,随着生物技术和遗传学的发展,紫花苜蓿的研究进展取得了许多突破。
本文将就紫花苜蓿的遗传育种、生理生化特性和分子生物学研究进展进行综述。
一、遗传育种紫花苜蓿的遗传育种是改良其生产性能和抗逆性的重要途径。
近年来,研究人员通过传统育种方法和分子生物学技术相结合,取得了一系列突破。
一方面,通过选育出具有高产量、高蛋白质含量和抗逆性的新品种,提高了紫花苜蓿的生产性能。
利用分子标记辅助育种技术,加速了紫花苜蓿的育种进程。
利用分子标记技术辅助选择高产量和抗逆性状的基因,从而培育出更具优势的紫花苜蓿品种。
目前,已经选育出许多具有优良性状的紫花苜蓿新品种,并在不同地区进行了推广应用,取得了显著的经济和社会效益。
二、生理生化特性紫花苜蓿的生理生化特性是其生长发育和抗逆性的重要基础。
近年来,研究人员对紫花苜蓿的生理生化特性进行了深入研究,取得了许多新的发现。
研究人员通过对紫花苜蓿的生长发育过程进行解剖和生化分析,揭示了其植物体内的营养物质代谢和激素调控网络。
研究人员对紫花苜蓿的逆境胁迫响应机制进行了系统研究,揭示了其在干旱、高温、盐碱等胁迫条件下的生理生化变化及适应机制。
这些研究不仅丰富了植物适应性和抗逆性的基础知识,还为进一步改良紫花苜蓿品种提供了重要的理论基础。
三、分子生物学研究分子生物学研究为揭示紫花苜蓿的遗传特性和生长发育调控机制提供了重要手段。
近年来,随着高通量测序技术的快速发展,研究人员对紫花苜蓿的基因组结构和功能基因进行了广泛的研究。
研究人员对紫花苜蓿的基因组进行了测序和组装,获得了其基因组序列和结构信息。
研究人员利用转录组学和蛋白组学技术,揭示了紫花苜蓿在不同生长发育阶段和胁迫条件下的基因表达谱和蛋白质组成。
研究人员通过功能基因组学和基因编辑技术,对紫花苜蓿的重要性状和逆境响应相关基因进行了深入研究,取得了许多重要的成果。
《利用转基因技术创建紫花苜蓿耐盐新种质的研究》篇一一、引言随着全球气候的变化和人类活动的加剧,土壤盐渍化问题日益严重,对农业生产造成了巨大的威胁。
紫花苜蓿作为一种重要的牧草和绿肥作物,其耐盐性的提高对于提高农田生产力和改善生态环境具有重要意义。
近年来,转基因技术的发展为紫花苜蓿耐盐新种质的创建提供了新的途径。
本文旨在探讨利用转基因技术创建紫花苜蓿耐盐新种质的研究进展、方法及前景。
二、研究背景及意义紫花苜蓿是一种适应性强的作物,但在盐碱土壤中生长受限。
因此,提高紫花苜蓿的耐盐性,对于提高其产量和品质,促进农业生产具有重要意义。
转基因技术作为一种新兴的生物工程技术,在作物改良中发挥了重要作用。
通过转基因技术,我们可以将耐盐基因导入紫花苜蓿中,从而提高其耐盐性,为农业生产提供新的种质资源。
三、研究方法1. 基因来源与筛选:从已知的耐盐植物中筛选出具有耐盐性的基因,并对其进行克隆和测序。
2. 载体构建:将筛选到的耐盐基因与表达载体连接,构建转基因表达载体。
3. 紫花苜蓿的遗传转化:利用农杆菌介导法将转基因表达载体导入紫花苜蓿中,获得转基因紫花苜蓿。
4. 转基因紫花苜蓿的筛选与鉴定:通过PCR、RT-PCR等方法对转基因紫花苜蓿进行筛选和鉴定,验证耐盐基因是否成功导入并表达。
5. 耐盐性检测:在含有不同浓度的盐溶液条件下,对转基因紫花苜蓿进行生长试验,检测其耐盐性。
四、研究结果1. 成功克隆了耐盐基因,并构建了转基因表达载体。
2. 通过农杆菌介导法成功将耐盐基因导入紫花苜蓿中,获得了转基因紫花苜蓿。
3. 通过PCR、RT-PCR等方法验证了耐盐基因的成功导入和表达。
4. 在含有不同浓度的盐溶液条件下,转基因紫花苜蓿的耐盐性得到了显著提高。
五、讨论本研究利用转基因技术成功创建了紫花苜蓿耐盐新种质,提高了紫花苜蓿的耐盐性。
然而,仍需进一步研究其在不同地区、不同土壤条件下的表现及对环境的适应性。
此外,对于转基因作物的安全性问题也需要进行深入探讨。
《利用转基因技术创建紫花苜蓿耐盐新种质的研究》篇一一、引言随着全球气候的变化和人类活动的加剧,土壤盐渍化问题日益严重,对农业生产产生了重大影响。
紫花苜蓿作为一种重要的牧草作物,其生长受盐分胁迫的制约问题日益突出。
为了应对这一问题,研究人员开始探索利用转基因技术来提高紫花苜蓿的耐盐性。
本文旨在介绍利用转基因技术创建紫花苜蓿耐盐新种质的研究过程、方法和取得的成果。
二、研究背景及意义紫花苜蓿是一种具有高营养价值的牧草作物,对土壤改良和生态环境的维护具有重要作用。
然而,土壤盐渍化问题严重影响了紫花苜蓿的生长和产量,给农业生产带来了巨大损失。
因此,研究如何提高紫花苜蓿的耐盐性,对于保障农业生产、提高牧草品质、维护生态环境具有重要意义。
三、研究方法本研究采用转基因技术,通过将耐盐相关基因导入紫花苜蓿的基因组中,以创建耐盐新种质。
具体步骤包括:1. 筛选耐盐相关基因:从其他耐盐植物中筛选出与耐盐相关的基因,进行克隆和序列分析。
2. 构建转基因载体:将筛选到的耐盐基因与适当的表达载体连接,构建转基因载体。
3. 转化紫花苜蓿:采用农杆菌介导法将转基因载体导入紫花苜蓿的细胞中,获得转基因植株。
4. 鉴定和筛选:对获得的转基因植株进行PCR鉴定和耐盐性筛选,筛选出耐盐性较强的新种质。
四、实验结果1. 耐盐相关基因的筛选与克隆:成功从其他耐盐植物中筛选出与耐盐相关的基因,并进行了克隆和序列分析。
2. 转基因载体的构建:成功将耐盐基因与表达载体连接,构建了转基因载体。
3. 转基因紫花苜蓿的获得:采用农杆菌介导法将转基因载体导入紫花苜蓿的细胞中,获得了转基因紫花苜蓿植株。
4. 鉴定和筛选:通过PCR鉴定和耐盐性筛选,成功筛选出耐盐性较强的新种质。
五、分析讨论本研究通过转基因技术成功创建了紫花苜蓿耐盐新种质。
在实验过程中,我们发现在基因的选择、载体的构建、转化方法的优化等方面都需要精细的操作和严格的控制。
此外,新种质的耐盐性还需要在更多的盐渍化环境下进行验证,以确认其在实际应用中的效果。
《利用转基因技术创建紫花苜蓿耐盐新种质的研究》篇一一、引言紫花苜蓿是一种具有重要经济价值的作物,因其富含营养且能够改良土壤而被广泛种植。
然而,盐碱土壤对紫花苜蓿的生长造成了严重的影响,这直接制约了其种植范围和产量。
因此,如何提高紫花苜蓿的耐盐性,成为了一个亟待解决的问题。
近年来,随着转基因技术的不断发展,利用该技术创建耐盐新种质为解决这一问题提供了新的途径。
本文旨在探讨利用转基因技术创建紫花苜蓿耐盐新种质的研究。
二、研究目的和意义本研究的主要目的是通过转基因技术,将耐盐基因导入紫花苜蓿中,创建耐盐新种质。
这将有助于提高紫花苜蓿在盐碱土壤中的生长和产量,从而扩大其种植范围,提高农业生产的效益。
此外,这一研究也将为其他作物的耐盐性改良提供参考和借鉴,具有重要的理论和实践意义。
三、研究内容和方法1. 材料和试剂本研究所用材料为紫花苜蓿的基因组DNA和耐盐基因。
试剂包括各种限制性内切酶、连接酶、转染试剂等。
2. 实验方法(1)耐盐基因的获取和鉴定:从已知耐盐植物中获取耐盐基因,并通过PCR等技术进行鉴定。
(2)构建转基因载体:将耐盐基因与载体连接,构建转基因载体。
(3)紫花苜蓿的基因组DNA提取及转染:提取紫花苜蓿的基因组DNA,将其与转基因载体一起转染到紫花苜蓿的细胞中。
(4)转基因紫花苜蓿的筛选和鉴定:通过PCR等技术筛选出成功转染的紫花苜蓿,并进一步鉴定其耐盐性。
3. 实验设计本实验设计包括预实验、正式实验和验证实验三个阶段。
在预实验阶段,我们将探索最佳的转基因条件和耐盐基因的来源;在正式实验阶段,我们将进行大量的转基因操作,并筛选出成功的转基因紫花苜蓿;在验证实验阶段,我们将对成功转染的紫花苜蓿进行耐盐性鉴定。
四、结果与讨论1. 结果通过本研究的实验,我们成功地将耐盐基因导入紫花苜蓿中,并筛选出了一批成功的转基因紫花苜蓿。
这些转基因紫花苜蓿在盐碱土壤中的生长和产量均有所提高,且其耐盐性得到了显著改善。
《利用转基因技术创建紫花苜蓿耐盐新种质的研究》篇一一、引言随着全球气候的变化和人类活动的加剧,土壤盐渍化已成为影响农业生产的重要因素。
而紫花苜蓿作为世界上重要的牧草作物,对土壤环境的适应性是确保其产量和质量的关键。
面对盐渍化的土壤环境,如何通过技术手段提升紫花苜蓿的耐盐性,已经成为科研工作者们研究的重点。
本文将详细介绍利用转基因技术创建紫花苜蓿耐盐新种质的研究。
二、研究背景与意义紫花苜蓿的耐盐性研究对于提高其种植效率和产量,保障畜牧业的发展具有重要意义。
然而,传统的育种方法在提升紫花苜蓿耐盐性方面具有很大的局限性。
近年来,随着转基因技术的发展和应用,越来越多的科研工作者开始尝试利用此技术来提高作物的耐盐性。
通过转基因技术,我们可以对植物进行基因改造,增强其耐盐、抗旱等特性,为农业生产提供更好的作物品种。
三、研究方法本研究以紫花苜蓿为研究对象,采用转基因技术进行耐盐新种质的研究。
首先,我们筛选出与耐盐性相关的基因片段;其次,通过基因工程手段将这些基因片段导入紫花苜蓿的基因组中;最后,通过实验室和田间试验,验证转基因紫花苜蓿的耐盐性。
四、实验过程与结果1. 基因筛选与改造:我们通过生物信息学手段,筛选出与耐盐性相关的基因片段。
然后,利用基因工程手段进行基因改造,使其具备更高的耐盐性。
2. 转基因紫花苜蓿的培育:将改造后的基因片段导入紫花苜蓿的细胞中,通过组织培养和再生技术,培育出转基因紫花苜蓿植株。
3. 实验室验证:在实验室条件下,对转基因紫花苜蓿进行耐盐性试验。
通过比较转基因紫花苜蓿与野生型紫花苜蓿在盐胁迫下的生长情况、生理指标等,验证其耐盐性的提高。
4. 田间试验:将转基因紫花苜蓿种植在盐渍化土壤中,进行田间试验。
通过观察其生长情况、产量、品质等指标,进一步验证其耐盐性的提高。
实验结果表明,通过转基因技术培育出的紫花苜蓿新种质在盐胁迫下表现出更高的生长活力和产量。
其生理指标也显示出更强的耐盐性。
《MfERF028基因提高转基因紫花苜蓿耐寒性的研究》篇一一、引言紫花苜蓿作为一种重要的牧草作物,在农业生产中具有广泛的应用价值。
然而,由于气候变化和季节性低温的影响,紫花苜蓿的生长发育常常受到限制。
为了提高紫花苜蓿的耐寒性,科学家们一直在寻找有效的基因改良方法。
本研究通过将MfERF028基因导入紫花苜蓿中,旨在提高其耐寒性,为农业生产提供更优质的牧草品种。
二、材料与方法1. 材料本实验选用的材料为紫花苜蓿及其转基因株系。
转基因株系通过将MfERF028基因导入紫花苜蓿获得。
2. 方法(1)基因克隆与表达分析:首先,通过PCR技术克隆MfERF028基因,并构建表达载体。
然后,将表达载体导入紫花苜蓿中,观察其表达情况。
(2)转基因紫花苜蓿的培育与鉴定:将表达载体通过农杆菌介导法导入紫花苜蓿中,筛选出转基因株系。
通过PCR和Southern blot等方法鉴定转基因株系,确保其基因成功整合。
(3)耐寒性试验:在低温条件下,对转基因紫花苜蓿与野生型紫花苜蓿进行生长试验,观察其生长状况和耐寒性变化。
三、结果与分析1. 基因克隆与表达分析结果通过PCR技术成功克隆了MfERF028基因,并构建了表达载体。
将表达载体导入紫花苜蓿后,观察到转基因株系中MfERF028基因的表达水平明显提高。
2. 转基因紫花苜蓿的培育与鉴定结果通过农杆菌介导法成功将表达载体导入紫花苜蓿中,筛选出转基因株系。
PCR和Southern blot鉴定结果表明,转基因株系中成功整合了MfERF028基因。
3. 耐寒性试验结果在低温条件下,转基因紫花苜蓿的生长状况明显优于野生型紫花苜蓿。
转基因紫花苜蓿的叶片颜色更绿,生长速度更快,且抗寒能力更强。
这表明MfERF028基因的导入成功提高了紫花苜蓿的耐寒性。
四、讨论本研究通过将MfERF028基因导入紫花苜蓿中,成功提高了其耐寒性。
这为农业生产提供了更优质的牧草品种,有助于提高农业生产效益和农民收入。
紫花苜蓿转基因的研究进展分析
作者:蔡璐张瑜李世歌莫本田李小冬
来源:《农业与技术》2016年第10期
摘要:本文主要结合紫花苜蓿转基因研究进展,从紫花苜蓿转基因技术方法对前人研究结果进行详细综述,本综述为日后开展紫花苜蓿遗传转化以及在其他豆科牧草中开展相关研究提供有效借鉴和参考。
关键词:紫花苜蓿;转基因;进展;研究
中图分类号:S551+.7 文献标识码:A DOI:10.11974/nyyjs.20160532018
紫花苜蓿属于一种豆科多年生牧草,具备高产量、高营养、适应力强、适口性好等特点,具有悠久的栽培历史,得到广泛的应用[1-2]。
紫花苜蓿不单单是一种饲料作物,它还具有保持水土、改良土壤、保护生态环境的作用。
传统的栽培方法具有时间长,产量低,成本高的局限性,无法满足现今社会对于育种多元化的需求。
随着转基因技术的不断发展,植物转基因技术在紫花苜蓿的遗传改良中具有极高的应用价值,从根本上加大育种进程,提高生产产量以及质量。
1 电击法
该方法主要是通过对植物物原生质体具有整合以及表达外源 DNA 的能力的有效利用,对植物细胞进行脱壁,借助电机所释放出来的电脉冲,对植物细胞进行刺激而产生原生质体细胞膜出现微孔,促使分布在原生质体四周位置的外源 DNA可以进入到原生质体内。
此外,电击法还可以把GUS 基因向紫花苜蓿根原生质体直接导入以此获得转基因植株。
有相关关于GUS 酶活性检测报告指出,在转化的紫花苜蓿细胞内,GUS基因不但转化的紫花苜蓿细胞内,还在其内进行表达,转化的频率大约为6.5%。
但是该方法在应用过程中却受到很多局限,例如:在重新建立植物原生质体再生系统不仅仅难度很大,且转化率很低。
2 农杆菌介导法
农杆菌介导法是使用最早、最广泛以及效果最好的一种转化方法。
通过使用农杆菌介导法对受体进行转化,整个操作过程简单便捷、经济实惠。
该方法在基因组上的外源基因进行整合,不但拷贝数少,且重排程度较低,转化效率高,是当前对紫花苜蓿改良过程中最长使用的一种有效方法。
该方法之所以可以建立起稳定的遗传转化,其主要的作用原理是:双子叶植物以及单子叶植物均受到土壤农杆菌的侵染,当植物受到来自农杆菌侵染的时候,植物则会释放出酚类物质诱导进行诱导,质粒上 Vir区基因表达,可以把粒上 T-DNA向植物的基因组中进行整合,使其在植物体内进行表达,以此达到改变植物的遗传性状的最终目的。
因为农杆菌自身具备天然转移 DNA这一特性,所以在植物基因工程中得到了广泛的应用。
3 基因枪法
基因枪法属于一种基因导入方法,操作过程简单,它主要是把RNA 和外源 DNA在直径大约为1~2mm的金粉或钨粉颗粒表面上进行包裹,借助动力加速对植物外植体的靶组织进行轰击,促使其能够穿过转化受体细胞膜以及细胞壁,最终达到把外源基因整向植物基因组整合的目的。
该方法不存在太明显的宿主限制,受到器官、受体组织范围都比较广,可促使外源基因直接向再生细胞团中直接进入,只要栽培技术优良就能够获取再生植株。
该方法对于设备也有着比较特殊的要求,同时对植物组织的损害性也比较大,国外对于该方法的运用较多,我国在此方面的报道比较少。
4 显微注射法
显微注射法操作简单,属于一种物理转化方法,不存在任何局限性,适用在任何材料中。
因为该方法在整个操作过程中不会对受体细胞产生任何的毒害作用,所以非常有利于对细胞的生长发育进行转化,在整个栽培过程中也无需对系统进行特殊选择,在卵细胞、动物细胞基因转化中得到较为广泛的应用。
通过使用该方法可以把Ti 质粒向紫花苜蓿原生质体直接导入进而获取转化的愈伤组织,转化率一般为15%~26%。
但需要特别说明的是,显微注射低于栽培环境、设备、技术等方面有着比较高的要求,应根据实际情况进行合理选择。
5 结束语
随着植物技术的不断发展,转基因技术在紫花苜蓿遗传改良中得到了广泛的应用,在很大程度上极大了育种的进程,使得培育的品种更加丰富多,满足了现今社会对于育种多元化的需求。
通过转基因技术提高紫花苜蓿遗培育的质量同时也产生了巨大的经济效益,具备良好的商业发展前景。
我国对于蓿转基因研究起步时间比较晚,很多研究都停留在实验性的基础阶段。
为此,需要进一步加强对紫花苜蓿转基因的深入研究,从根本上来提高紫花苜蓿转化率,进一步降低转基因对紫花苜蓿所造成的破坏,对转基因的生物安全问题进行正确评估,促使各种转基因技术真正应用于实践并发挥出其真正应用价值。
参考文献
[1]赵桂琴,慕平,张勃.紫花苜蓿基因工程研究进展[J].草业学报,2014,23(06):888-890.
[2]包爱科,王强龙,张金林,等.苜蓿基因工程研究进展[J].分子植物育种,2014,12
(S1):333-335.。