下载文档原格式
定量检验的分析性能验证解读定量检验是一种用于评估分析方法性能的常见方法。
它可以通过比较分析结果与已知参考值或者其他分析方法的结果来评估分析方法的准确性、精确性、灵敏度和特异性等性能指标。
该方法可应用于各种领域，如医学诊断、环境监测和药物研究等。
在进行定量检验之前，首先要确定所需评估的指标。
常见的指标包括准确性、精确性、线性度、回归分析、检出限、可测限、准确度和灵敏度等。
准确性是指分析结果与真实值之间的关系，可以通过比较结果与标准物质的浓度来评估。
精确性是指同一样本的多次分析结果之间的一致性，可以通过重复分析多个样本来进行评估。
线性度是指分析方法在一定浓度范围内是否具有良好的线性关系。
回归分析可以用来评估分析结果与已知浓度之间的关系。
检出限是指分析方法能够检测到的最低浓度。
可测限是指分析方法能够可靠测定的最低浓度。
准确度是指分析结果与真实值之间的偏差，可以通过比较结果与已知浓度的平均偏差来评估。
灵敏度是指分析方法对样品中低浓度物质的检测能力。
在进行定量检验时，首先要选择合适的参考标准或者与之比较的分析方法。
参考标准可以是已知浓度的标准物质，也可以是其他公认准确、精确的分析方法。
然后，使用待测试的分析方法来分析一组样本，并将结果与参考标准或者其他分析方法的结果进行比较。
根据比较结果，可以评估分析方法的性能，并判断其是否符合要求。
在解读定量检验的结果时，需要综合考虑各种指标的评估结果。
如果分析结果与参考标准或者其他分析方法的结果非常接近，那么可以认为该分析方法具有较高的精确性和准确性。
如果分析结果在一定浓度范围内具有良好的线性关系，且与已知浓度之间有较高的相关性，那么可以认为该分析方法具有较好的线性度和回归分析能力。
如果分析方法能够可靠地检测到低浓度的物质，并具有较高的灵敏度，那么可以认为该分析方法具有较好的检出限和可测限。
如果分析结果与真实值之间的偏差较小，那么可以认为该分析方法具有较好的准确度。
总之，定量检验是一种评估分析方法性能的重要方法。
《药物分析》教学大纲课程编号：课程名称：药物分析/Analysis of Pharmaceutical学时/学分：56/3.5先修课程：有机化学、分析化学、药物化学、药剂学适用专业：制药工程开课学院（部）、系(教研室)：化学工程学院制药工程系（三） 课程的性质与任务药物分析是制药工程专业的学科基础必修课。
是运用各种有效方法和技术来研究和探索药物及其制剂质量控制的一般规律，阐述化学合成药物或化学结构明确的天然药物及其制剂的质量问题（不包括有关毒理学，生物学及微生物学等分析内容）的一门课程。
本课程要求学生明确药物分析在药学科学领域中的地位，建立全面的药品质量管理概念。
掌握药物及其制剂分析技术的基本原理与基本方法，掌握我国药典收载的常见类型药物及其制剂的质量标准，能对药物的化学结构、理化特性与分析方法间的关系进行阐述；常见检测技术在药物分析工作中的应用。
熟悉主要国外药典中有关药品的质量标准。
了解某些检测技术在药物分析中的动向与进展。
通过实验，掌握药典常用的分析方法和实验技术，包括药物鉴别、杂质检查、含量测定等基本原理和常用仪器的操作技术。
能综合运用所学知识评价比较各分析方法之间的优劣和具备制订药品质量标准的初步能力。
二、课程的教学内容、基本要求及学时分配（一）教学内容1．绪论药物分析学科的性质与任务，药物分析与药品质量标准，全面控制药品质量的科学管理，药物分析所用测定方法的效能指标及其评价。
2．药物分析工作的基本程序取样原则及其方法，样品的预处理方法，药物的鉴别、检查和含量测定意义及其常用方法，药品检查原始记录及检验报告的正确书写。
3．药物的纯度及其检查法药物纯度的概念，杂质的概念、性质及其来源途径，药物中杂质检查的一般要求与方法，杂质限度的表示及计算方法，药物中氯化物、硫酸盐、硒、氟、铁盐、重金属、砷盐、酸碱度、干燥失重、水分、炽灼残渣、溶液澄清度与颜色、有机溶剂残留量检查法。
4．定量分析样品前处理与效能指标定量分析样品的前处理方法；测定方法的效能指标5．巴比妥类药物分析巴比妥，苯巴比妥，硫代巴比妥，司可巴比妥，戊巴比妥药物的化学结构与性质、鉴别试验、含量测定。
药分专业词汇药物分析专业词汇绪论释药系统（drug delivery system，DDS）中国药典（Chinese Pharmacopoeia,ChP）美国药典（The United States Pharmacopoeia,USP）美国国家处方集（The National Formulary,NF）英国药典（British Pharmacopoeia,BP）欧洲药典（European Pharmacopoeia,Ph.Eup）国际药典（The International Pharmacopoeia,Ph.Int）良好药品实验研究规范（Good Laboratory Practice,GLP）良好药品生产规范(Good Manufacture Practice,GMP)良好药品供应规范(Good Supply Practice,GSP)良好药品临床试验规范(Good Clinical Practice,GCP)分析质量管理(Analytical Quality Control,AQC)第1章药物的鉴别试验药物的鉴别试验identification test一般鉴别试验general identification test专属鉴别试验specific identification test灵敏度sensitivity最低检出量minimum detectable quantity最低检出浓度minimum detectable concentration第2章药物的杂质检查巯基醋酸mercaptoacetic acid古蔡Gutzeit二乙基二硫代氨基甲酸银siliver diethyldithio-carbamate 硫酸灰分sulphated ash炽灼残渣residue on ignition热重分析法thermogravimetric analysis,TGA差示热分析法differential thermal analysis,DTA差示扫描量热法differential scanning calorimetry,DSC碱性酒石酸铜试验Fehling’s reagent异红紫酸盐isopurpurate2，3-二氨基萘2,3-diaminonaphthalene4，5-苯并苯硒二唑4，5-benzopiazselenol第三章定量分析样品前处理与测定方法的效能指标汞齐化法amalgamation method氧瓶燃烧法oxygen flask combustion method葡萄糖醛酸甙glucuronides硫酸酯sulphates血浆plasma血清serum全血whole blood治疗药物浓度监测therapeutic drug monitoring,TDM结合bound游离free缀合物conjugate液-液提取法liquid-liquid extraction,LLE离子对试剂ion pair reagent离子对提取法ion pair extraction method反离子counter液-固提取法liquid-solid extraction LSE半自动样品制备系统advanced automated sample processor,AASP烷基化alkylations酰基化acylations硅烷化silylations精密度precision标准差standard deviation,SD orS相对标准差relative standard deviation,RSD变异系数coefficient of variation,CV批内精密度within-run precision日内精密度within-day precision批间精密度between-run precision日间精密度day to day precision准确度accuracy定量限limit of quantitation,LOQ检测限limit of detection,LOD选择性selectivity专属性specificity线性与范围linearity and range重现性ruggedness耐用性robustness散布图scatter diagram荧光偏振免疫测定法fluorescence polarization immunoassay，FPIA第4章巴比妥类药物的分析溴化十六烷基三甲基苄铵cetyltrimethylbenzylammonium bromide，CTMA 氯化四癸基二甲基苄铵Tetradacyldimethybenzylammonium chloride，TDBA 第5章芳酸及其酯类药物的分析苯甲酸及其钠盐benzoic acid and sodium benzoate布美他尼bumetanide羟苯乙酯ethylparoben丙磺舒probenecid酚黄乙胺etamsylate第6章胺类药物的分析第七章杂环类药物的分析二硝基氯苯反应Vongerichten反应戊烯二醛反应K?nig反应第8章生物碱类药物的分析生物碱alkaloids阿片gum opium扫尾剂tailing-suppressing reagent蒂巴因thebaine诺司卡品noscapine竞争离子competing ions亲脂性lipophicity拖尾因子tailing factor金刚烷adamantane第9章维生素类药物的分析维生素vitamin去氢维生素A dehydroretinol去水维生素A anhydroretinol鲸醇kitol三氯化锑反应Carr-Price反应维生素B1 thiamine hydrochloride；盐酸硫胺2，3，5-三苯基氯化四氮唑2，3，5-triphenyltetrazolium chlorid，TTC红四氮唑red tetrazoline，RT蓝四氮唑blue tetrazoline，BT3，3’-二甲基氧苯基-双-4，4’-（3，5-二苯基）氯化四氮唑{3，3’-dianisole-bis[4，4’-（3，5-dipheny）tetrazolium chloride]}有色甲……formazan铁-酚试剂iron-phenol reagent铁-柯柏试剂iron-Kober reagent第十一章抗生素类药物的分析6-氨基青霉烷酸6-aminopenicillanic acid，6-APA7-氨基头孢菌烷酸7-aminocephalosporanic acid，7-ACA氨苄西林ampicillin5-甲基-3-邻氯苯基-4-异……唑青霉素钠cloxacillin sodium羟氨苄青霉素amoxicillin氨基糖甙类抗生素aminoglycosides antibiotics链霉素streptomycin麦芽酚maltolN-甲基葡萄糖胺反应Elson-Morgan反应坂口反应Sakaguchi反应庆大霉素gentamycin四环素类tetracyclines4-差向脱水四环素4-ejpianhydrotetracycline，EATC第十二章药物制剂分析含量均匀度content uniformity溶出度dissulution离子对高效液相色谱法ion-pair，HPLC第十三章生化药物分析概论第十四章中药制剂分析概论超临界流体萃取supercritical fluid extraction，SFE过弗罗里Florisil第十五章药品质量标准的制定国际非专利药名International Names for Pharmaceutical Substances，INN去氧麻黄碱Metamfetaminum国际理论和应用化学联合会International Union of Pure and Applied Chemistry，IUPAC有机化学命名原则Nomenclature of Organic Chemistry可待因Codeinum地塞米松Dexamethasonum氯……Chloroquinum青蒿素Artemisininum吗啡Morphinum苯扎溴铵Benzalkonii Bromidum1-（3，4-二羟苯基）-2-氨基乙醇重酒石酸盐一水合物[1-（3，4-Dihydroxyphenyl）-2-Aminoethanol Bitartrate mono-hydrate] 第十六章药品质量控制中的新方法与新技术填充柱packed column开管柱open tubular column空心柱capillary column熔融石英开管柱fused silica open tubular column，FSOT高分辨率气相色谱法high resolution gas chromatography，HRGC壁涂开管柱wall-coated open tubular column，WCOT柱固定化相开管柱immobilized phase open tubular column ，IPOT柱交联柱crosslinking column键合相柱bonding phase column不可提取相开管柱nonextractable phase open tubular column，NPOT柱多孔层开管柱porous-layer open tubular column，PLOT柱担体涂渍开管柱support-coated open tubular column，SCOT柱分流进样split injection不分流进样splitless injection柱头进样on-column injection直接进样direct injection手性分离色谱chiral separation chromatography，CSC普萘洛尔propranolol沙粒度胺thalidomide测定对映体enantiomer手性固定化chiralstationary phase，CSP手性衍生试剂chiral derivatization reagent，CDR非对映异构体diastereoisomer，DSTM配基交换型手性添加剂chiral ligand-exchange complexes，CLEC手性离子对络合剂chiralion pair complex，CIPC环糊精cyclodextrins，CD葡聚糖sephadex配基交换剂ligand exchanger手性传荷charge transfer（R）-N-3，5-二硝基苯甲酰苯基苷氨酸dimitrobenzyl phenylglycin；DNBPG三点手性识别模式three-point chiral recognition model噻吗洛尔thimolol曲洛磷胺trofosfamide乙酰葡萄糖异硫氰酸酯（2，3，4，6-tetra-O-acetyl-β-D-glucopyranosylisothiocyanate，GITC 左旋比喹酮L-praziquantel比喹胺praziquanamine苯丙胺phenylpropamine异氰酸-α-萘酯（α-naphthylisocyanae，NI美西律mexiletine氯胺酮ketamine本芴醇benflumelol苯丙醇phenyl propanol烯丙洛尔alprenolol普萘洛尔propranolol氧烯洛尔oxyprenolol麻黄碱ephedrine毛细管电泳capillary electrophoresis，CE毛细管区带电泳capillary zone electrophoresis，CZE胶束动电毛细管色谱mcellar electrokinetic capillary chromatography，MECC胶束动电色谱miccellar electrokinetic chromatography，MEKC环糊精动电色谱cyclodextrins electrokinetic chromatography，CDEKC离子交换动电色谱ion-exchange electrokinetic chromatography，IEEKC微滴乳状液动电色谱microemulsion electrokinetic chromatography，MEEKC毛细管凝胶电泳capillary gel electrophoresis，CGE毛细管等电聚焦capillary isoelectric focusing，CIEF毛细管等速电泳capillary isotachorphoresis，CITP毛细管电色谱capillary electrochromatography ，CEC色谱响应函数chromatographic response function，CRF色谱优化函数chromatographic optimization function，COF等级色谱响应函数hierarchical chromatographic response function，HCRF 差示分光光度法difference spectrophotometry近红外光谱near infra-red spectrum，NIRS中红外光谱mid infra-red spectrum，MIRS合谱combinations光谱匹配法spectral matching匹配指数match index，M.I.主成分分析法principal component regression，PCR人工神经网络方法artificial neural networks，ANN核磁共振nuclear magnetic resonance，NMR二维NMR two dimensional NMR六甲基三硅氧烷hexam ethylcyclotrisiloxane吡嗪pyrazine普鲁卡因procaine色谱联用技术hyphenated techniques chromatography，HTC接口interface重建色谱图reconstructive chromatogram命中质量系数hit quality index，HQI最小二乘方程序least squares algothm导数绝对值程序absolute derivative algothm导数平方程序square derivative algothm空心柱open tubular column，OTC总离子流total ion carrent，TIC选择性离子监测xelected ion monitoring，SIM多离子检测multiple ion detection，MID质量碎片图谱法mass fragmentography冰片borneal川芎嗪tetram ethyloyrazine，TMP电子轰击离子化electron impact ionization，EI化学离子化chemical ionization，CI场解吸field desorption，EI快原子轰击fast atom bombardment，FAB热喷雾thermospray，TSP电喷雾electrospray，ESP大气压离子化atmospheric pressure ionization，API粒子束接口partical beam动态快原子轰击法FAB离子喷雾接口ISP电子喷雾法ESP大气压离子化接口API大气压化学电离APCI串联质谱MS-MS丽江山慈姑Iphigenia indica Kunth et Benth托非索泮tofisopam。
临床定量检验程序的分析性能指标临床定量检验程序是医学领域中非常重要的工具，用于评估患者的健康状况及诊断疾病。
它的分析性能指标直接影响了检验结果的准确性和可靠性，因此在临床实践中需要对其进行全面评估和监控。
一、准确性准确性是临床定量检验程序的核心指标之一。
它反映了测定结果与真实值之间的接近程度。
通常可以通过校准和质控来评估准确性。
校准是指通过使用已知浓度的样品进行比对，调整仪器或方法的测定结果，使其接近真实值。
校准的过程需要严格控制，包括校准品的选择、校准曲线的绘制和校准系数的计算。
质控是指使用稳定的样品测量，用于监控仪器或方法的稳定性和长期可靠性。
质控样品应具有一定的浓度范围，以覆盖临床检验中常见的结果值。
监控质检的过程包括样品的选择、测试频率的确定以及质控图的绘制和分析等。
二、精密度精密度是指临床定量检验程序在重复性和中间精密度方面的指标。
重复性是指在相同条件下，对同一样本的测量结果间的一致性。
中间精密度是指在不同实验室、不同操作者或不同仪器上对同一样本的测量结果的一致性。
评估精密度可以通过重复测量同一样本，计算测量结果的变异系数或标准偏差。
此外，还可以通过参加外部质量评价和与其他实验室的对比试验来评估临床定量检验程序的精密度。
三、灵敏度灵敏度是指临床定量检验程序对待测分析物的检测能力。
当被测指标浓度较低时，灵敏度高的检验程序可以提供准确可靠的测量结果，从而提高疾病的早期诊断和治疗。
评估灵敏度可以通过限制性检测下限（LLD）和功能性检测下限（LLOQ）来进行。
LLD是指检验程序能够识别并测量出待测分析物的最低浓度。
LLOQ是指检验程序能够正确测量出待测分析物的最低浓度，且结果具有可以接受的准确性和精密度。
四、特异性特异性是指临床定量检验程序对待测分析物的特异性反应。
它反映了检验程序不受其他干扰物质的影响，能够准确测量出待测分析物的浓度。
评估特异性需要对具有类似结构或类似代谢产物的其他物质进行干扰试验。
释药系统(drug delivery system , DDS )中国药典(Chinese Pharmacopoeia,ChP )美国药典(The United States Pharmacopoeia,USP )美国国家处方集(The National Formulary,NF )英国药典(British Pharmacopoeia,BP )欧洲药典(European Pharmacopoeia,Ph.Eup )国际药典(The International Pharmacopoeia,Ph.Int)良好药品实验研究规范(Good Laboratory Practice,GLP )良好药品生产规范(Good Manufacture Practice,GMP)良好药品供应规范(Good Supply Practice,GSP)良好药品临床试验规范(Good Clinical Practice,GCP)分析质量管理(Analytical Quality Control,AQC)第1章药物的鉴别试验药物的鉴别试验identification test一般鉴别试验general identification test专属鉴别试验specific identification test灵敏度sensitivity最低检出量minimum detectable quantity最低检出浓度minimum detectable concentration第2章药物的杂质检查筑基醋酸mercaptoacetic acid古蔡Gutzeit二乙基二硫代氨基甲酸银siliver diethyldithio-carbamate硫酸灰分sulphated ash炽灼残渣residue on ignition热重分析法thermogravimetric analysis,TGA差示热分析法differential thermal analysis,DTA差示扫描量热法differential scanning calorimetry,DSC碱性酒石酸铜试验Fehling' s reagent异红紫酸盐isopurpurate2 , 3-二氨基蔡2,3-diaminonaphthalene4,5-苯并苯硒二嘤4,5-benzopiazselenol第三章定量分析样品前处理与测定方法的效能指标汞齐化;去 amalgamation method氧瓶燃烧法oxygen flask combustion method葡萄糖醛酸式glucuronides硫酸酯sulphates血浆plasma血清serum全血whole blood治疗药物浓度监测therapeutic drug monitoring,TDM结合bound游离free 缀创勿conjugate液-液提取法liquid-liquid extraction,LLE离子对试剂ion pair reagent离子对提取法ion pair extraction method反离子counter液-固提取法liquid-solid extraction LSE半自动样品制备系统advanced automated sample processor,AASP烷基化alkylations酰基化acylations硅烷化silylations精密度precision标准差standard deviation,SD orS相对标准差relative standard deviation,RSD变异系数coefficient of variation,CV批内精密度within-run precision日内精密度within-day precision批间精密度between-run precision日间精密度day to day precision准确度accuracy定量限limit of quantitation,LOQ检测限limit of detection,LOD选择性selectivity专属性specificity线性与范围linearity and range重现性ruggedness耐用性robustness散布图scatter diagram荧光偏振免疫测定法fluorescence polarization immunoassay , FPIA第4章巴比妥类药物的分析溪化十六烷基三甲基莘镇cetyltrimethylbenzylammonium bromide , CTMA氯化四癸基二甲基茉筱Tetradacyldimethybenzylammonium chloride , TDBA第5章芳酸及其酯类药物的分析苯甲酸及其钠盐 benzoic acid and sodium benzoate布美他尼bumetanide羟苯乙酯ethylparoben丙石MS? probenecid酚黄乙胺etamsylate第6章胺类药物的分析第七章杂环类药物的分析二硝基氯苯反响Vongerichten反响戊烯二醛反响K?nig反响第8章生物碱类药物的分析生物碱alkaloids阿片gum opium扫尾剂tailing-suppressing reagent蒂巴因thebaine诺司卡品noscapine竞争离子competing ions亲脂性lipophicity拖尾因子tailing factor金冈U 烷adamantane第9章维生素类药物的分析维生素vitamin去氢维生素A dehydroretinol去水维生素A anhydroretinol鲸醇kitol三氯化锅反响Carr-Price反响维生素Bl thiamine hydrochloride ;盐酸硫胺2,3, 5-三苯基氯化四氮唾2,3, 5-triphenyltetrazolium chlorid , TTC红四氮嘎red tetrazoline , RT蓝四氮嘤blue tetrazoline , BT3,3'•二甲基氧苯基■双-4,4・(3,5-二苯基)氯化四氮嗖{3,3' -dianisole-bis[4 ,41 - ( 3 , 5-dipheny ) tetrazolium chloride]}有色甲formazan铁-酚试剂iron-phenol reagent铁-柯柏试剂iron-Kober reagent。
定量检验程序的分析性能指标检验的最终目的是为临床提供准确可靠的检验结果，而检验结果的误差是由于检验程序的误差引起，检验程序误差的大小与该检验程序的分析性能直接相关。
检验程序分析性能的指标在检验医学相关文献中存在指标术语和定义上的差异，不同专业之间分析性能指标也有不同，同一分析性能指标也存在评估方法的差异。
在本书中我们引用国内外权威部门发布的技术规范或标准中对检验程序分析性能指标的定义，同时阐述国内外权威部门提出的分析性能标准或允许范围。
一、精密度（一）测量精密度（measurement precision）或精密度（precision）：JF1001-2011，5.10-在规定条件下，对同一或类似被测对象重复测量所得示值或测得值间的一致程度。
测量精密度通常用不精密度以数字形式表示，如在规定测量条件下的标准偏差、标准方差或变异系数；规定条件下可以是重复性测量条件、期间精密度测量条件或复现性测量条件。
（二）测量重复性（measurement repeatability）或重复性（repeatability）精密度：1、重复性测量条件（measurement repeatability condition of measurement）（VIM2.20）重复性条件（repeatability condition）:在一组测量条件下的测量精密度，包括相同测量程序、相同操作者、相同测量系统、相同操作条件和相同地点，并且在短时间段内对同一或相似被测对象重复测量。
注1：在临床化学上，术语批内或序列内精密度有时用于表示此概念。
注2：在评估体外诊断医疗器械时，通常选择重复性条件来代表基本不变的测量条件（被称为重复性条件），此条件产生测量结果的最小变异。
重复性信息可对故障排除目的有用处。
注3：重复性可以用结果分散性特征术语定量表达，如重复性标准差、重复性方差和重复性变异系数。
相关统计术语在GB/T 6379.2/ISO 5725-2中给出。
第二章定量分析样品前处理与测定方法的效能指标（6）来源:河南仪器网作者:屈凌波发表时间:2005-04-16 浏览: 172测定方法的效能指标任何一种分析测定方法，根据其使用的对象和要求，都应有相应的效能指标。
一般，常用的分析效能评价指标包括：精密度、准确度、检测限、定量限、选择性、线性与范围、重现性、耐用性等；对于生物样品中药物分析方法评价的标准与上述的评价指标相比较，有共同之点也有特殊的要求。
测定方法的效能指标可以作为对分析测定方法的评价尺度，也可以作为建立新的测定方法的实验研究依据。
下面分别作简要、介绍：一、精密度精密度（precision）系指用该法测定同一匀质样品的一组测量值彼此符合的程度。
它们越接近就越精密。
在药物分析中，常用标准差（S）或相对标准差（RSD）表示：1．标准（偏）差（standard deviation，SD或S）2．相对标准（偏）差（rdative standard deviation，RSD），也称变异系数（coefficient of variation，CV）。
生物样品分析时，常用RSD表示精密度，并可细分为批内（或日内）精密度及批间（或日间）精密度。
批内精密度（within－run precision）：是同一次测定的精密度。
通常采用高、中、低三种浓度的同一样品各7～10份，每种浓度的样品按所拟定的分析方法操作，一次开机后，一一测定。
计算每种浓度样品的SD值及RSD值。
批内精密度也可视为日内精密度（with－in－day precisiｏn）。
所得RSD应争取达到5％以内［17－181，但不能超过10％。
批间精密度（between-run precision）：是不同次测定的精密度。
通常采用高、中、低三种浓度的同一样品，每种浓度配制7～10份，置冰箱冷冻。
自配制样品之日开始，按所拟定的分析方法操作，每天取出一份测定，计算每种浓度样品的SD值及RSD值。
批间精密度也可视为日间精密度（day to day precision）。
所得RSD应控制在15％以内。
二、准确度准确度（Ａccuracy）是指测得结果与真实值接近的程度，表示分析方法测量的正确性。
由于“其实值”无法准确知道，因此，通常采用回收率试验来裴示。
生物药物分析中，常用标准添加法来计算回收率，即取已准确测定药物含量P（present）的真实样品（如人血浆样品等），再加入药物标准品已知量A（added），混合物作为测定液，其测定值为M（meａｓuｒed）。
测定液要配制成高、中、低三种浓度，每个浓度测定3～5次，求出每种浓度的平均测定值Ｍ，且RSD应符合要求。
由于预先要准确测定样品中原含有的药物量P，因此也应测定3～5次，求其平均值Ｐ，且RSD应符合要求。
按上式计算出的回收率，其结果越接近100％表明分析方法准确度越高。
生物样品分析时，一般控制回收率范围应为85％～115％（样品药浓≥200μg／L〉及80％～120％（样品药浓<200μg／L）。
制剂的含量测定时，采用在空白辅料中加入原料药对照品的方法作回收试验及计算RSD，还应作单独辅料的空白测定。
每份均应自配制模拟制剂开始，要求至少测定高、中、低三个浓度，每个浓度测定三次，共提供9个数据进行评价。
回收率的RSD一般应为2％以内［18］三、检测限检测限（limit of detection, LOD）是指分析方法能够从背景信号中区分出药物时，所需样品中．药物的最低浓度,无需定量测定.LOD是一种限度检验效能指标，它既反映方法与仪器的灵敏度和噪音的大小，也表明样品经处理后空白（本底）值的高低。
要根据采用的方法来确定检测限。
当用仪器分析方法时，可用已知浓度的样品与空白试验对照，记录测得的被测药物信号强度S与噪音（或背景信号）强度N，以能达到S／N＝2或S／N=3时的样品最低药浓为LOD；也可通过多次空白试验，求得其背景响应的标准差，将三倍空白标准差（即38空或3S空）作为检测限的估计值口。
为使计算得到的LOD值与实际测得的LOD值一致，可应用校正系数（ｆ）来校正，然后依之制备相应检测限浓度的样品，反复测试来确定ωD。
如荧光光谱法测定时，检测限＝f·38f，根据此式计算出的LOD，再通过制备相应检测限浓度的标准品溶液的测定，以验证实际测得的LOD与上式计算结果相符。
如用非仪器分析方法时，即通过已知浓度的样品分析来确定可检出的最低水平作为检测限。
四、定量限定量限（limit of quantitation, LOQ）是指在保证具有一定可靠性（一定准确度和精密度）的前提下，分析方法能够测定出的样品中药物的最低浓度。
它反映了分析方法测定低药物浓度样品时具有的可靠性。
它与上述的检测限的差别在于定量限要定量测定某一药物在样品介质中的最低浓度，且定量限规定的最低浓度应该符合一定的精密度和准确度的要求。
确定定量限的方法也因所用方法不同而异。
当用非仪器分析方法时，与上述检测限的确定方法相同；如用仪器分析方法时，则往往将多次空白试验测得的背景响应的标准差（即空白标准差）乘以10，作为定量限的估计值，继之，再通过分析适当数量已知接近定量限或以定量限制备的样品来验证。
五、选择性选择性（selectivity）是指在样品介质中有其他组分共存时该分析方法对供试物质准确而专属的测定能力。
它与专属性（specificity）的含义稍有不同。
专属性是指一种方法仅对一种分析成分产生唯一信号：选择性则可对多种化学成分产生不同响应，而主要成分的响应可与其它响应区分。
因此，选择性是指该法用于复杂样品分析时相互干扰程度的量度。
在药物分析中，考察一个分析方法的选择性时，应着重考虑杂质、降解产物、相关化合物以及制剂辅料等其他组分是否对被测药物的测定有干扰。
一般，通过添加上述物质的样品与未曾添加的样品所得分析结果进行比较而确定。
在生物药物分析时，考察一个方法的选择性应着重考虑：（1）内源性物质的干扰：可取空白样品（如空白血浆）试验。
色谱分析时，要求药物和内标峰附近无干扰峰；光谱分析时，要求药物的测定波长处应无杂质吸收或荧光。
（2）代谢产物是否会干扰原药的测定响应值，可用给药数次后病人的尿液（含代谢物）来进行试验［2］。
若药物在体内代谢情况为已知，且可获得代谢物标准品，则可将其加入空白样品以及加入实际样品中，验证是否有干扰。
（3）在临床药物监测时要考虑同时服用药物的干扰。
将同时服用的药物加入空白样品中以及加入含药物的实际祥品中J观察得到的色谱图和比较测定结果，判断是否对药物测定有干扰。
色谱分析除可用色谱图表明同时服用药物不干扰外，还可以分别列出这些药物的保留时间，显示有无干扰。
六、线性与范围分析方法的线性是在给定范围内获取与样品中供试物法度成主比试验结果的能力。
换句话说，就是供试物浓度的变化与试验结果（或测得的响应倍号：成线性关系。
所谓线性范围是指利用一种方法取得精密度、准确度均符合要求的试验结果，而正成线性的供试物浓壁的变化范围，其最大量与最小量之间的间隔，可用mg／L～mg／Ｌ，μg ／ml～μg／ml等表示。
线性与范围（linearity and range）的确定可用作图法（响应值Y／浓度x）或计算回归方程（Y＝a＋bX）来研究建立。
测定样品时所有生物药物分析方法都必须同时作标准曲线。
每次作标准曲线时，方法应与分析方法考核时完全一致。
标准浓度应包括一定梯度的5～8个浓度（非线性者如免疫分析可适当增加），每个浓度只需测定一次（免疫分析可测定两次并取均值）；标准曲线应覆盖样品可能的浓度范围，对于含量测定要求一般浓度上限为样品最高浓度的120％，下限为样品最低浓度的80％（但应高于LOQ）；目前仍广泛采用相关系数（r）表示标准曲线的线性度，并控制ｒ≥０.９９００。
对照品的LOQ必须包括在线性范围内。
七、重现性分析方法的重现性（ruggedness）是指利用相同的方法在各种正常实验条件下对同一样品进行分析所得结果的重现程度。
所谓各种正常实验条件，包括不同的实验室、不同的分析人员、不同的仪器、不同批号的试剂、不同的测试耗用时间、不同的分析温度、不同的测定日期等等。
分析方法重现性的测定是通过在不同实验室由不同的实验者（操作和环境条件虽有差别但仍在规定的分析参数内）对同一样品的分别测试而获得的。
重现性即是指在不同实验室中使用此种分析方法的精密度。
八、耐用性分析方法的耐用性（robustness）是评价其保持不受参数微小变差影响的能力，并可作为正常使用的一个可靠性指标。
九、与参比方法测得结果的相关程度的比较由于生物样品中含有许多干扰测定的杂质，特别是与原型药物相似的代谢物常对药物的测定有影响。
因此，除考察选择性外，有时还用参比方法对实际生物样品同时测定并进行比较。
比较试验时，取若干份实际样品（如病人服药后采取的血样），用一个已证明有相当专属性和可靠性的方法与新建立的方法同时进行测定，以参比方法测得的药浓为横坐标（Ｘ），以新建立方法测得的药浓为纵坐标（Ｙ）作成散布图（scatter diagram）,并求出直线回归方程（ｙ＝ａ+ｂｘ）及相关系数（ｒ）ｒ最大值为1，表示两法完全相关（结果完全吻合）；r＝0时，表示两法完全不相关。
一般要求两法的相关系数r≥0.95，而相关直线的斜率（b）应接近于1。
下面以HPLC法测定血清中链霉素浓度为例新方法测定血清中链霉素，是在碱性条件下与茚三酮柱后衍生产生荧光，用离子对－HPLC法、荧光检测器检测；并用荧光偏振免疫测定法（fluorescence polarization immunoassay, FPIA）作为参比方法对照，结果表明两法相关性良好，如图3－7。
评价一种分析方法的效能，并不一定对上述各项指标都有要求。
一般，根据方法的使用对象有所区别。
大体上有以下四种情况：1.用于原料药中主要组分或制剂中有效组分含量测定的方法：除了检测限和定量限二项指标外，对精密度、准确度、选择性、线性与范围、耐用性等均应有所要求；２.用于原料药中杂质测定或制剂中降解产物测定的方法又可分为两种：①用于含量测定：②用于限度检查。
对于①法的要求是：除检测限和精密度指标不必要求外，对准确度、选择性、线性与范围、定量限、耐用性等均应有所要求；对于②法的要求是：只对检测限、选择性和耐用性三项指标有所要求，其余均无需要求。
3.用于溶出度测定的方法及药物释放度测定的方法，只有精密度和耐用性有所要求，其余项目均不作要求。
４.用于生物样品中药物测定的方法，对精密度、准确度、检测限、选择性、可测线形范围、定量限、对生物样品的耐用性以及与参比方法测得结果的相关程度的比较等指标应有所要求。
