蛇床子提取物

蛇床子素提取原理
蛇床子（学名：Semen Caesalpiniae）素是从蛇床子种子中提取的一种活性成分，通常被用于中医药和草药学中。

蛇床子素的提取原理涉及到化学、药理学等多个方面。

一般来说，蛇床子素的提取过程可以包括以下几个步骤：
1.采集与干燥：蛇床子成熟后的种子被采集，并经过适当的清理和干燥处理，以保留其活性成分。

2.粉碎：干燥后的蛇床子种子被粉碎成粉末，以增加提取效率。

3.溶剂提取：将蛇床子粉末与合适的有机溶剂（如醇、醚等）混合，进行提取。

溶剂的选择通常取决于目标成分的化学性质。

4.过滤和浓缩：将提取液通过过滤，去除残渣，然后利用蒸发或其他浓缩方法，得到蛇床子素的浓缩液。

5.结晶与纯化：通过结晶或其他分离纯化技术，将蛇床子素从其他成分中分离出来，提高其纯度。

6.干燥：最后，得到的蛇床子素纯品经过干燥处理，制备成可用于制剂的粉末或其他形式。

蛇床子素主要包括一些具有药理活性的成分，如皂苷、黄酮类化合物等。

这些成分被认为具有一定的抗炎、抗氧化、抗菌等生物活性，因此在传统中医药中有一定的药用价值。

需要注意的是，提取方法可能因研究目的、设备条件和溶剂选择而有所不同，且蛇床子及其提取物在使用过程中应当根据医学专业指导谨慎使用。

关于蛇床子的化学成分研究关于蛇床子的化学成分研究蛇床的化学成分据文献报道，蛇床子含有的香豆素类化合物为蛇床子素（osthol）、佛手柑内酯（bergapten）、异虎耳草素（isopimpinellin）、哥伦比亚内酯（columbianadin）、拱当归素（archangelicin）、爱得尔庭（edultin）、O-乙酰哥伦比亚贰元（O-acetylcolumbianetin）、O-异戊酰哥伦比亚贰元（O-isovalerycolumbianetin）、O-乙酰异蛇床素（cniforin）等。

近年来，又从蛇床子的醇提取物中分离并鉴定出6个香豆素成分，其中花椒毒酚（xanthotoxol）、花椒毒素（xanthotoxin）、欧芹属素乙（imperatorin）系首次从中发现的香豆素类化合物。

蛇床子所含的香豆素类化合物，依其结构可分为线型呋喃香豆素与角型呋喃香豆素两类，其生物活性也有区别。

另外蛇床子还含有大量的油酸（28.85%）、亚油酸（10.95%）和较高的挥发油（1.3%）主要成分为L一蒎烯、L一莰烯、异戊酸龙脑酯（Bornylisovalerate），异龙脑（Isoborneol），又含甲氧基欧芹酚、蛇床明素(Cuidimine）异虎耳草素、佛手柑内酯、哥伦比亚甙元、二氢山芹醇（Columbianetin）吸其乙酸酯（O－Acetylcolumbianetin）、异戊酸酯、蛇床定（Cnidiadin）、异丁酸氧基二氢山芹酯醇乙酸酯。

根含蛇床明素（Cnidimine）、异虎耳草素、别欧芹属素乙（Alloimperatorine）、花椒毒酚（Xanthotoxol）、欧芹属素乙（Imperatorine）。

王海波等首次发现蛇床子含有二甲乙烯酮、顺香芹醇等17个化学成分。

此外，向仁德等首次从蛇床子中分离并鉴定出棕榈酸、谷甾醇、5-甲基尿嘧啶、6-氧嘌呤、尿嘧啶、L-（+）缬氨酸与苯丙氨酸。

最近，张巧艳等还发现不同产地蛇床子中含有无机成分Cu、Fe、Zn、Mn、Sr、Ca、Mg等微量元素。

蛇床子挥发油中药提取物蛇床子挥发油【提取来源】本品为伞形科植物蛇床Cnzdium monnieri(L.) Cuss.的果实提取的挥发油类成分，总挥发油含量≥80%。

【主要成分】蛇床子素Osthol，含量：30%【随属成分】顺香芹醇Cis-Carveol橙花醇Nerol金合欢烯Farnesene乙酸龙脑酯Bornyl acetate含量：50%【性状】本品为淡黄色至橙黄色澄清、透明液体，可混溶于乙醚、氯仿、乙醇、丙酮、乙酸乙酯。

【鉴别】取本品加乙酸乙酯制成0.5%溶液作供试液。

取标准品蛇床子素、顺香芹醇、橙花醇、金合欢烯等加乙酸乙酯制成各含1mg/ml溶液作对照液。

取蛇床子标准对照药材2g加乙醚40ml，超声提取30分钟，滤液吹去乙醚，残渣加乙酸乙酯1ml溶解作对照液。

取上述三液各5μl，分别点于同一硅胶G板，以甲苯-乙酸乙酯-正己烷(3：3：2)展开，紫外灯365nm检视。

标品斑点对应位置显相同颜色荧光斑点，比对标准药材斑点，对应率≥50%。

【检查】脂肪油：取本品1g加乙醇10ml，摇匀放置，不得有油滴析出。

重金属：不得过10pprn(附录Ⅸ E)。

【含量测定】照高效液相色谱法(附录Ⅵ D)测定。

色谱条件C18柱。

流动相：乙腈水(65：35)。

检测波长：322nm。

理论板数≥3000。

对照液：取蛇床子素标品加乙醇制成45μg/ml溶液备用。

供试液：取本品加乙醇制成135μg/ml溶液备用。

测定法：取上述二液各10μl注入液相色谱仪测定。

【挥发油测定】照挥发油测定法(附录XD)测定。

【功能主治】壮阳，促智，扩张血管，止痒，抗过敏，镇静，解痉，免疫抑制，化痰，平喘，抗菌。

用于骨质疏松、肿瘤。

【贮藏】密闭，阴凉，干燥。

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810632937.9(22)申请日 2018.06.20(71)申请人 中国中医科学院中医基础理论研究所地址 100007 北京市东城区东直门内南小街16号(72)发明人 赵红霞　杨桢　汪文来　陶旭光　刘珍洪　马少丹　(74)专利代理机构 北京汉之知识产权代理事务所(普通合伙) 11479代理人 许骅(51)Int.Cl.A61K 36/234(2006.01)A61P 17/04(2006.01)A61P 29/00(2006.01)(54)发明名称蛇床子提取物及其制备与应用(57)摘要本发明属于中医药领域，具体涉及蛇床子提取物及其制备与应用。

本研究以蛇床子提取物(水提和醇提)为研究对象，结合电生理膜片钳技术，在瞬转了人TRPV1的HEK293细胞上测试它能否活化或抑制TRPV1，以探讨蛇床子发挥药效作用的分子靶点。

首次发现：蛇床子的水提物和醇提物都激活TRPV1通道，产生跨膜电流。

因此，蛇床子的辛温之性很可能是TRPV1活化的结果，其部分药效可能是通过TRPV1通道发挥，TRPV1是蛇床子产生温肾壮阳，杀虫止痒作用的分子靶点之一。

权利要求书1页 说明书8页 附图2页CN 108619187 A 2018.10.09C N 108619187A1.一种蛇床子提取物用于制备TRPV1激动剂的用途。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述TRPV1激动剂至少具有以下功效之一：(1)激活TRPV1通道、(2)诱导产生跨膜电流。

3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述蛇床子提取物为所述TRPV1激动剂的唯一有效成分或有效成分之一。

4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述蛇床子提取物，为以蛇床子为原料提取有效成分制得。

5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述蛇床子提取物为蛇床子水提物或蛇床子醇提物。

蛇床子提取物蛇床子为伞科植物蛇床Cnidium monnieri(L.)Cuss 的干燥成熟果实。

产品功效，温肾壮阳，燥湿，祛风，杀虫。

用于阳痿宫冷，寒湿带下，湿痹腰痛；外治外阴湿疹，妇人阴痒，滴虫性阴道炎。

产品基本信息【中文名称】：蛇床子提取物【拉丁名称】：Fructus Cnidii【英文名称】：Cnidium monnieri(L.)Cuss【提取来源】：为伞形科植物蛇床子的种子【产品性状】：棕黄色粉末，高纯度为白色结晶体溶于碱溶液、甲醇、乙醇、氯仿、丙酮、醋酸乙酯和沸石油醚等，不溶于水和石油醚,mp.83℃～84℃,bp.145℃～150℃.【规格】：蛇床子素10-98% HPLC【植物形态】：多年生草本。

茎多数，自根茎生出，高可达60厘米，基部匍匐生根，简单或分枝，四稜形，具浅槽，常染紫红色，极密被白色平展刚毛，下部较疏，节间伸长，比叶片长很多。

叶三角状卵圆形，长1.2-2厘米，宽1-1.7厘米，先端钝或锐尖，基部圆形或近浅心形，边缘为圆齿状锯齿，上面榄绿色，被白色纤毛，近边缘较密，下面较淡，主沿各级脉上被白色纤毛，余部有不明显小凹腺点，侧脉4-5对，与中脉在上面微凹陷或近平坦，下面带紫红色，明显隆起；叶柄极短，长1-3毫米，常带紫红色，密被白色平展刚毛。

轮伞花序多花密集，半球形，花时连花冠径达3.5厘米，生于茎、枝顶部，向上聚集；苞叶叶状，下部的略超出花萼，向上渐变小，呈苞片状，苞片针状，具肋，与花萼等长或略短，被白色平展缘毛及微小腺点，先端染紫红色。

花萼圆筒状，开花时长约9毫米，13脉，外面主要沿脉上被白色刚毛，余部满布微小腺点，内面在喉部以上被白色疏柔毛，果时基部稍一边膨胀，上唇3齿，齿长三角形，多少外反，先端短芒尖，下唇2齿，齿与上唇近等长，三角形，先端长芒尖。

花冠粉红色，较大，长1.5-2厘米，内面在下唇下方具二列柔毛，冠筒十分伸出，基部宽1.5毫米，自伸出部分向上渐扩大，至喉部宽达5毫米，冠檐二唇形，上唇直伸，先端微缺，下唇3裂，中裂片较大。

收稿日期：2021-10-08基金项目：陕西省自然科学基础研究计划项目（2021JQ-842）；商洛学院博士人才引进项目（18SKY004）作者简介：吴永玲（1988-），女，陕西宝鸡人，讲师，博士，主要从事植物源农药研究，（电话）************（电子信箱）********************。

吴永玲，魏景，孟银凤，等.蛇床子中总黄酮最佳提取工艺优化及杀虫抑菌活性研究［J ］.湖北农业科学，2022，61（21）：73-78.蛇床子［Cnidium monnieri （L.）Cuss.］为伞形科植物蛇床成熟后的干燥果实，主要分布于中国华东、中南、西南、西北等地［1］。

现代研究表明，蛇床子中含有多种活性成分，其中以蛇床子素、香豆素及黄酮类成分为主，具有杀虫抑菌、止痒、抗心律失常、抗血栓、抗肿瘤和骨质疏松等药理作用，成为国际上天然药物开发利用的热点［2，3］。

但目前蛇床子中的主要成分及药理研究集中在蛇床子素上［4-6］，对其中的黄酮类化合物研究报道较少。

如果能进一步开发利用蛇床子中的黄酮类物质，这对蛇床子植物的发展将蛇床子中总黄酮最佳提取工艺优化及杀虫抑菌活性研究吴永玲1，2，魏景1，2，孟银凤1，2，李俊伟1（1.商洛学院生物医药与食品工程学院，陕西商洛726000；2.陕西秦岭特色生物资源产业技术研究院，陕西商洛726000）摘要：通过浸提法，结合单因素、响应面法优化蛇床子［Cnidium monnieri （L.）Cuss.］中总黄酮的提取工艺条件，并进行杀虫抑菌活性测试。

结果表明，蛇床子总黄酮的最优提取条件是蛇床子粉末10g ，乙醇体积分数为64%，提取时间为23min ，溶剂体积为85mL ，黄酮实测得率为7.83%；杀虫活性测定试验中1.0mg/mL 蛇床子提取物对苹果黄蚜（Hyalopterus amygdali ）和朱砂叶螨（Tetranychina harti ）的48h 校正死亡率均大于50%，且2种试虫的校正死亡率存在显著差异，LC 50分别为0.041、0.086mg/mL ；抑菌活性表明蛇床子提取物对番茄灰霉病菌的抑制活性最好，EC 50为21.29mg/L ，对苹果腐烂病菌和油菜菌核病菌也具有较强的抑菌活性。

蛇床子的药理作用及临床应用近年来，国内外加强了对蛇床子有效成分的药理研究，研究最多的是有效成分蛇床子总香豆素（TCCM），发现其作用广泛。

标签：蛇床子；药理作用；蛇床子素蛇床子为伞形科植物蛇床的干燥成熟果实，辛苦，温，归肾经，有温肾助阳、祛风、燥湿、杀虫之功效。

治男子阳痿，阴囊湿痒，女子带下阴痒，子宫寒冷不孕，肾虚哮喘、风湿病痛，疥癣湿疮等。

一、化学成分含挥发油 1.3%，主要成分为蒎烯、莰烯、异成酸龙脑酯、异龙脑。

此外，尚含有白色结晶性香豆精类成分甲氧基欧芹酚约1%，以及二氢欧山芹醇、佛手柑内酯、蛇床子素、异茴芹素、欧山芹素及食用白芷素等。

二、药理作用（一）对心血管系统作用：1、扩张血管，蛇床子素能使去甲肾上腺素、CaCl2和高K+除极化所致的家兔主动脉条收缩抑制，量效曲线右移，最大反应降低。

蛇床子素的松弛血管平滑肌作用与非竞争性Ca2+拮抗有关，由于其化学结构上带有较强的脂溶性基团，可直接进入细胞内，通过抑制细胞膜依赖性钙离子通道（PDC）和钙贮库中Ca2+释放而发挥钙拮抗作用，这可能是它扩血管作用的重要机制。

2、抗心律失常，TCCM可降低氯仿诱发的小鼠和CaCl2诱发的大鼠室颤发生率。

一次静脉注射蛇床子水提取物8.75g/Kg，可明显对抗大鼠室性纤颤。

在这一剂量下对乌头碱诱发的心律失常亦有预防和治疗作用，但对肾上腺素（家兔）和氯化钡（大鼠）诱发的心律失常无效。

蛇床子素是通过抑制心肌细胞膜上的Na+、Ca2+内流起作用，而与阻断β受体无关，这可能是蛇床子抗心律失常的机理之一。

（二）对中枢神经系统作用1、镇静作用，香豆素类对实验动物有麻醉和催眠效果。

研究表明，给小鼠腹腔注射100毫克/千克总香豆素，能显著增强阈下催眠剂量戊巴比妥钠诱导的睡眠，并能明显提高咖啡因小鼠半数致死量（LD50）。

2、镇痛、局麻作用，蛇床子素能抑制醋酸所致的小鼠扭体反应，对小鼠化学刺激性疼痛有明显的镇痛作用，效果比四氢巴马汀好。

从热敏通道TRPV1探讨蛇床子提取物的作用机制安致君;吴丹桐;赵凯维;Michael Xi Zhu;赵红霞;杨桢;刘珍洪;于峥;汪文来;陶旭光;高蔚;郭蓉;殷茵;韩雪珍【期刊名称】《中国中医基础医学杂志》【年(卷),期】2018(24)12【摘要】目的:从热敏通道TRPV1探讨蛇床子提取物的作用机制.方法:本研究以蛇床子水提物和醇提物为研究对象,采用全细胞膜片钳技术,在转染了人TRPV1的HEK293细胞上测试、观察蛇床子辛温作用的分子靶点.结果:蛇床子的水提物和醇提物都激活TRPV1通道,产生跨膜电流.结论:蛇床子的辛温之性很可能是TRPV1活化的结果,其部分药效可能是通过TRPV1通道发挥,TRPV1是蛇床子产生温肾壮阳、杀虫止痒作用的分子靶点之一.【总页数】4页(P1786-1789)【作者】安致君;吴丹桐;赵凯维;Michael Xi Zhu;赵红霞;杨桢;刘珍洪;于峥;汪文来;陶旭光;高蔚;郭蓉;殷茵;韩雪珍【作者单位】北京中医药大学,北京 100029;北京中医药大学,北京 100029;中国中医科学院中医基础理论研究所,北京 100700;美国德克萨斯大学健康科学中心综合生物学及药理学系,休斯顿;中国中医科学院中医基础理论研究所,北京 100700;北京中医药大学,北京 100029;北京中医药大学,北京 100029;中国中医科学院中医基础理论研究所,北京 100700;中国中医科学院中医基础理论研究所,北京 100700;中国中医科学院中医基础理论研究所,北京 100700;北京中医药大学,北京 100029;北京中医药大学,北京 100029;北京中医药大学,北京 100029;北京中医药大学,北京100029【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.羌活提取物对热敏通道TRPV1的影响 [J], 刘珍洪;杨桢;高琳;汪文来;赵红霞;高蔚;安致君;郭蓉;吴丹桐;Michael Xi Zhu2.艾叶醇提物对热敏通道TRPV1的影响 [J], 郭蓉;Michael Xi Zhu;杨桢;赵红霞;刘珍洪;汪文来;高蔚;陶旭光;佟海英;安致君;殷茵;韩雪珍3.基于TRPV1通道探究正天丸治疗偏头痛的作用机制 [J], 白方会;张保朝;徐茜;贾东佩;胡科;陈宝田;李慧4.基于热敏通道TRPV1探讨吴茱萸汤对醋酸内脏痛模型小鼠的止痛作用 [J], 刘珍洪;高琳;汪文来;赵红霞;高蔚;安致君;郭蓉;吴丹桐;杨桢5.基于降钙素基因相关肽/p-环磷腺苷效应元件结合蛋白信号通路探讨癌痛方乙醇提取物的分子作用机制 [J], 黄贺达;徐慧因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

附14
原料安全相关信息
【原料商品名、原料基本信息、原料生产工艺简述】
【质量控制要求】
1.鉴别方法
取本品，照含量测定项下的方法试验，供试品色谱中应呈现与对照品蛇床子素色谱峰保留时间相同的色谱峰。

2.定量控制指标/特征性指标检验方法：
蛇床子素含量测定：采用高效液相色谱法（中国药典四部通则0512）
测定蛇床子素含量。

干燥失重：干燥失重测定法（中国药典四部通则0831）。

炽灼残渣：不得过12%（中国药典四部通则0841）。

微生物：非无菌产品微生物限度检查法：微生物计数法（中国药典四部通则1105）
3.微生物指标（如适用）
菌落总数/(CFU/g)≦1000，霉菌及酵母菌≦100，大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌不得检出。

【国际权威机构评估结论】
无
【其他行业使用要求简述】
无
【风险物质限量要求】（如有）
重金属指标（如适用）：含重金属不得超过20mg/kg（取炽灼残渣项下残留的残渣，依法检查（中国药典通则0821第二法）。

农药残留风险：无
微生物污染控制情况：无
宿主致病性、毒性成分控制情况：无
【其他需要说明的问题】：
保质期：36个月
贮藏条件：遮光，密闭，置阴凉干燥处。

编号:FZD0164 蛇床子提取物中蛇床子素（Osthol）含量测定方法
一、色谱条件
色谱柱：Inertsil ODS-3 150mm×4.6mm 5μm
流动相：甲醇：乙腈：水(35：30：35，V/V）
流速：1mL/min
检测波长：320nm
柱温：25℃
进样量：10μL
二、溶液制备
1.对照品溶液制备精密称取蛇床子素对照品约5mg于50ml容量瓶中，加入无水乙醇溶解定容。

2.样品溶液制备精密称取蛇床子提取物样品适量(相当于蛇床子素5mg)，于50mL容量瓶中，加入40mL无水乙醇超声振荡20min 后，冷却至室温定容，用0.45μm微孔滤膜过滤即得。

3.原料样品制备称取经粉碎过20目的原料约800mg于50mL 容量瓶中，加入40mL甲醇：水（90：10，v/v），超声振荡60min后，冷却至室温定容。

三、样品测定
在上述色谱条件下，待仪器稳定基线平稳后进样测定，蛇床子素保留时间约为12min，用外标法分别计算含量。