电场化学仪表第二节光电比色计与分光光度计的主要部件
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第三章分光光度计分光光度计和光电比色计的工作原理相同,都是利用物质对不同波长的光选择性吸收的现象,对物质进行定量及定性分析的仪器。
第一节分光光度计的类型分光光度计也有多种分类方法。
按工作波长范围不同来划分,分光光度计分为红外分光光度计、紫外分光光度计和可见(光)光分光光度计三类。
其中的紫外分光光度计均兼有可见光分光光度计的功能。
按待分析物质对光的吸收性质不同,可分为分子吸收光分光光度计和原子吸收分光分光光度计两类。
上述的红外、紫外和可见分光光度计均属于分子吸收分光光度计。
按待分析物质对光的作用效果来分,可分为发射光谱类分光分光光度计和吸收光谱类分光光度计两大类。
在医学上应用的发射光谱类分光光度计主要有荧光(分光)光度计和火焰(分光)光度计两类。
分子吸收光分光光度计和原子吸收分光分光光度计都属于吸收类分光光度计。
本节主要介绍基层医院最常用的721及722型两种可见(光)光分光光度计。
第二节可见分光光度计的原理及结构一、工作原理吸收式分光光度计都是根据物质对不同波长的光具有选择性地吸收的特点而进行工作的,它们都以朗伯-比尔定律作为定量依据。
当一束平行的、特定波长的单色光照射到有色溶液后,该有色溶液就会对光产生吸收。
溶液的浓度越大,对光的吸收越多。
其吸收程度符合朗伯-比尔定律。
即T=(It/I0)100%A=-lgIt/I0=KCL式中:T为透射比。
It为透过光的强度。
I0入射光的强度。
A为吸光度。
也叫消光度或光密度。
K为吸收系数。
C为溶液的浓度L为溶液的厚度。
朗伯-比尔定律(A=KCL)说明:当一束光通过有色溶液后,溶液的吸光度A与溶液的浓度C及液层厚度L成正比。
吸光度A与溶液的透射比T成负对数关系。
比色分析时,溶液的透射比T很容易测量出来。
通过对透射进行负对数计算,可以得到吸光度值。
再将吸光度除以相应的系数,便可求出待测溶液的浓度。
二、基本结构一般的可见分光光度计由光源、单色器、比色皿、光电转换器、前置放大器、对数放大器、显示部件及电源电路组成。
分光光度计第三章分光光度计分光光度计和光电比色计的工作原理相同,都是利用物质对不同波长的光选择性吸收的现象,对物质进行定量及定性分析的仪器。
第一节分光光度计的类型分光光度计也有多种分类方法。
按工作波长范围不同来划分,分光光度计分为红外分光光度计、紫外分光光度计和可见(光)光分光光度计三类。
其中的紫外分光光度计均兼有可见光分光光度计的功能。
按待分析物质对光的吸收性质不同,可分为分子吸收光分光光度计和原子吸收分光分光光度计两类。
上述的红外、紫外和可见分光光度计均属于分子吸收分光光度计。
按待分析物质对光的作用效果来分,可分为发射光谱类分光分光光度计和吸收光谱类分光光度计两大类。
在医学上应用的发射光谱类分光光度计主要有荧光(分光)光度计和火焰(分光)光度计两类。
分子吸收光分光光度计和原子吸收分光分光光度计都属于吸收类分光光度计。
本节主要介绍基层医院最常用的721及722型两种可见(光)光分光光度计。
第二节可见分光光度计的原理及结构一、工作原理吸收式分光光度计都是根据物质对不同波长的光具有选择性地吸收的特点而进行工作的,它们都以朗伯-比尔定律作为定量依据。
当一束平行的、特定波长的单色光照射到有色溶液后,该有色溶液就会对光产生吸收。
溶液的浓度越大,对光的吸收越多。
其吸收程度符合朗伯-比尔定律。
即T,(,,,)100% t0,,,lg,,,,,,, t0式中:,为透射比。
,为透过光的强度。
t,入射光的强度。
0,为吸光度。
也叫消光度或光密度。
,为吸收系数。
,为溶液的浓度,为溶液的厚度。
朗伯-比尔定律(,,,,,)说明:当一束光通过有色溶液后,溶液的吸光度A与溶液的浓度C及液层厚度L成正比。
吸光度A与溶液的透射比T成负对数关系。
比色分析时,溶液的透射比T很容易测量出来。
通过对透射进行负对数计算,可以得到吸光度值。
再将吸光度除以相应的系数,便可求出待测溶液的浓度。
二、基本结构一般的可见分光光度计由光源、单色器、比色皿、光电转换器、前置放大器、对数放大器、显示部件及电源电路组成。
第二章 光电比色计第一节 比色分析比色分析是基于溶液对光的选择性吸收而建立起来的一种分析方法,又称吸光光度法。
有色物质溶液的颜色与其浓度有关。
溶液的浓度越大,颜色越深。
利用光学比较溶液颜色的深度,可以测定溶液的浓度。
根据吸收光的波长范围不同以及所使用的仪器精密程度,可分为光电比色法和分光光度法等。
比色分析具有简单、快速、灵敏度高等特点,广泛应用于微量组分的测定。
通常测定含量在6-1~6-4mg/l 的痕量组分。
比色分析如同其他仪器分析一样,也具有相对误差较大(一般为1%~5%)的缺点。
但对于微量组分测定来说,由于绝对误差很小,测定结果也是令人满意的。
在现代仪器分析中,有60%左右采用或部分采用了这种分析方法。
在医学学科中,比色分析也被广泛应用于药物分析、卫生分析、生化分析等方面。
一、朗伯-比尔(Lambert-Beer )定律溶液颜色的深浅与浓度之间的数量关系可以用朗伯-比耳定律来描述。
当一束平行单色光(只有一种波长的光)照射有色溶液时,光的一部分被吸收,一部分透过溶液(图2-1-1)。
设入射光的强度为I 0,溶液的浓度为c ,液层的厚度为b ,透射光强度为I ,则II 0lg =Kcb 式中II 0lg 表示光线透过溶液时被吸收的程度,一般称为吸光度(A )或消光度(E )。
因此,上式又可写为:A=Kcb上式为朗伯-比尔定律的数学表示式。
它表示一束单色光通过溶液时,溶液的吸光度与溶液的浓度和液层厚度的乘积成正比。
式中,K 为吸光系数,当溶液浓度c 和液层厚度b 的数值均为1时,A=K ,即吸光系数在数值上等于c 和b 均为1时溶液的吸光度。
对于同一物质和一定波长的入射光而言,它是一个常数。
比色法中常把0I I 称为透光度,用T 表示,透光度和吸光度的关系如下: A =II 0lg =T 1lg =-lg T 当c 以mol·L -1为单位时,吸光系数称为摩尔吸光系数,用ε表示,其单位是L·mol -1·cm -1。