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分光光度计培训课件共35页PPT资料

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紫外可见分光光度计的使用课件PPT

紫外可见分光光度计的使用课件PPT

定义与工作原理
定义
紫外可见分光光度计是一种基于 物质对紫外可见光的吸收特性进 行物质定量和定性分析的仪器。
工作原理
通过测量物质在特定波长下的吸光 度，利用朗伯-比尔定律（A=εbc） 计算物质的浓度。
类型与特点
类型
单光束分光光度计、双光束分光光度 计和双波长分光光度计。
特点
具有较高的测量精度和稳定性，广泛 应用于化学、生物学、医学、环境监 测等领域。
每次使用后记录仪器使用 情况，包括测试样品、测 试波长、测试结果等，以 便后续分析。
常见故障排除
波长不准确
检查仪器是否正确设置波长，并 确保仪器没有受到强烈震动或磁
场干扰。
读数不稳定
检查样品是否均匀，仪器是否处于 稳定状态，以及是否有外界干扰。
仪器无响应
检查电源是否正常，仪器是否处于 正常工作状态，以及是否有硬件故 障。
THANKS
开始测量
点击开始按钮，仪器自动扫描并记录 数据。
数据处理
将测量数据导入计算机进行进一步处 理和分析。
实验操作技巧
保持样品池清洁
定期清洗样品池，避免残留物对测量结果的 影响。
选择合适的标准物质
选择与待测样品性质相近的标准物质进行校 准，提高测量准确性。
控制环境因素
确保实验室内温度、湿度和光照等环境因素 稳定，以减小误差。
多次测量求平均值
为减小误差，可以对同一样品进行多次测量， 取平均值作为最终结果。
常见问题及解决方案
波长校准不准确
可能是由于仪器内部棱镜或光路不干 净导致。解决方法是清洁仪器内部并 重新进行波长校准。
测量数据不稳定
数据处理软件崩溃
可能是由于计算机内存不足或软件 bug导致。解决方法是关闭不必要的 程序，释放计算机内存，或更新数据 处理软件。

紫外可见分光光度计课件ppt

紫外可见分光光度计课件ppt

/moban
3、朗伯-比尔定律 比吸光系数
比吸光系数是指百分含量为1%， l为1cm时的 吸光度值，用 E
1% 1cm表示。
0.1M r E
1% 1cm
/moban
3、朗伯-比尔定律
四 偏离朗伯-比耳定律的因素
（1）入射光为非单色光
（2）溶液的不均性。
实际样品的混浊，加入的保护胶体，蒸 馏水中的微生物，存在散射以及共振发射等， 均可吸光质点的吸光特性变化大。 （3）光程的不一致性。 光源不是点光源，比色皿光径长度不一 致，光学元件的缺陷引起的多次反射等，均造 成光径不一致，从而与定律偏离。
/moban
4、紫外-可见分光光度计
一
主要部件的性能与作用
基本结构:
光源→单色器→吸收池→检测器→信号显示系统 样品
/moban
4、紫外-可见分光光度计 1 光源
在紫外可见分光光度计中，常用的光源有 两类：热辐射光源和气体放电光源 热辐射光源用于可见光区，如钨灯和卤钨 灯；气体放电光源用于紫外光区，如氢灯和 氘灯。
pH值
3、朗伯-比尔定律 一 吸光度和透光度
设入射光强度为I0，吸收光强度为Ia,透射光 强度为 It，反射光强度为Ir，则 I 0= I a+ I t+ I r
由于反射光强度很弱，其影响很小，上式可简化 为：
I 0= I a+ I t
/moban
3、朗伯-比尔定律
吸光度: 为透光度倒数的对数，用A表示， 即 A=lg1/T=ห้องสมุดไป่ตู้gI0/It
生物化学，医学卫生，临床检验，食品卫生，药品
检验，农业化学等领域的生产。
恳请各位老师批评指正
/moban

分光光度计的发展及趋势课件

分光光度计的发展及趋势课件

多功能集成
除了基本的物质检测和分析，还集成 了多种功能，如光谱解析、化学计量 学等。
微型化阶段
微型化设计
分光光度计的体积逐渐减小，便 于携带和使用。
集成化传感器
集成化传感器的发展，提高了分光 光度计的测量精度和响应速度。
应用领域
在现场快速检测、野外调查等领域 得到广泛应用。
CHAPTER
03
分光光度计的未来趋势
工业生产中的分光光度计需要具备高 稳定性、可靠性和易用性，以满足工 业生产的特殊要求。
随着工业4.0和智能制造的推进，分光 光度计在工业生产中的应用将更加广 泛和深入，能够实现实时监测、智能 控制和优化生产等目标。
医疗诊断的进步
分光光度计在医疗诊断中主要用 于生化分析和免疫分析等领域， 能够对患者的血液、尿液和其他
随着科技的不断进步，分光光度 计面临技术更新换代迅速、技术 门槛高的挑战。
对策
加大研发投入，持续推进技术创 新，提高产品的技术含量和附加 值，保持竞争优势。
市场需求的挑战与对策
挑战
市场需求多样化，不同领域和行业对 分光光度计的性能、规格和功能要求 各异，导致产品定制化程度高，生产 成本增加。
对策
加强市场调研，了解客户需求，制定 差异化产品策略，提高产品适应性和 竞争力。
它利用光的吸收、反射、散射等特性，通过测量特定波长的光强衰减程度，从而确 定目标物质的浓度。
分光光度计广泛应用于化学、生物、环境监测等领域，是实验室中常用的分析仪器 之一。
分光光度计的原理
分光光度计的原理基于朗伯-比 尔定律，即物质对光的吸收程度 与物质浓度、光路长度以及光的
波长成正比。
当一束特定波长的光通过溶液时 ，一部分光被吸收，一部分光被 散射，只有小部分光能够透过溶

超微量分光光度计ppt课件.ppt

超微量分光光度计ppt课件.ppt

仪器应用范围
K5500型微量分光光度计可用于测量： 核酸：核酸样品的浓度和纯度，包括双链DNA，单链
DNA和RNA。 蛋白质：①A280测蛋白质样品浓度，包括1Abs =
1mg/mL，BSA，IgG，Lysozyme；②试剂盒法 （Lowry法、BCA法、Bradford法）测定蛋白质浓度， 软件自动绘制标准曲线，直接给出浓度值。 常规紫外/可见全波长扫描：可进行紫外/可见全波长 （200～850nm）扫描。 细胞溶液：细胞溶液密度的测定。
样品需要稀释，测量浓 电磁阀调节)，样品无需稀释，测量
度范围小Βιβλιοθήκη 范围可达到常规分光光度计的50倍
与传统分光光度计的区别与优势
传统分光光度计
●灯源一般由氘灯（紫外） 和钨灯（可见）组成 寿命短 ●需要预热半个小时以上
K5500微量分光光度计
●氙气闪光灯为灯源 寿命长,性能稳定
●不需要预热，可随时检测
●显示吸光度值，不显示浓 度值
仪器特点
样品用量少（1～2µL）！ 无需比色皿！ 紫外-可见全波长扫描（200～850nm）！ 无需预热，可随时检测！ 检测速度快！ 直接显示浓度值！ 样品无需稀释，可测样品的浓度范围是常规紫外-
可见分光光度计的50倍！ 数据统计软件方便容易掌握！
与传统分光光度计的区别与优势
传统分光光度计
样品测量
（1） 以移液枪吸取样品（1～2µL）滴加到检测平台上。 （2 ）放下取样臂。 （3） 点击软件界面上的“Measure”按钮，即可得出样品参
数（吸光度和浓度）和图表。 （4 ）以干净的吸水纸擦去上下检测平台上的空白对照用溶
剂。
（5） 如需保存图表，可点击“Save Graph”按钮。

《分光光度计培训》课件

《分光光度计培训》课件

准备待测的样品，确保样品适用于分光光度计测量。
2
2. 校准和基线
校准仪器并进行基线校正，确保准确的测量结果。
3
3. 光程、波长设置
设置适当的光程和测量波长，以获得准确的吸光度。
4
4. 测量和记录
将样品放入进样系统，测量吸光度并记录结果。
VI. 分光光度计的原理
分光光度计原理基于比较样品吸收的光线强度与参考样品或空白试验的光线强度的差异。这样可 以确定样品中特定物质的浓度。
VII. 分光光度计的应用领域
生物化学
用于测量酶活性、细胞浓度等。
环境科学
用于水质、大气等环境参数测量。
药学
用于药物配方和质量控制。
食品科学
用于食品成分和质量分析。
VIII. 分光光度计的精度和灵敏度
分光光度计具有高精度和灵敏度，可以测量微量物质的浓度和变化，从而在科学研究和质量控制 方面发挥重要作用。
II. 分光光度计的分类
紫外可见分光光度计
用于测量UV和可见光范 围内的吸光度。
红外分光光度计
用于测量红外光范围内 的吸光度。
紫外可见红外分光 光度计
同时覆盖紫外、可见和 红外光范围。
III. 常见的分光光度计
台式分光光度计
适用于实验室和教学环境，具有较高的精度和 灵敏度。
手持式分光光度计
便携、易于携带，适用于野外研究和快速测量。
《分光光度计培训》PPT 课件
这个PPT课件将向您介绍分光光度计的各个方面，包括原理、分类、工作原理 以及应用领域。让我们来一起探索这个精密仪器的世界。
I. 什么是分光光度计
分光光度计是一种用于测量物质溶液中吸光度的仪器。它可以通过分析样品对特定波长的光线的 吸收情况，来确定样品中特定物质的浓度。

分光光度计的使用课件

分光光度计的使用课件
数据分析
根据实验数据，进行数据的整理、分析和处理。利用图表、统计软件等方法 ，对数据进行趋势分析、差异显著性检验等，以得出实验结果并进行结论。
03
分光光度计的实验数据分析
数据分析的基本原则
1 2
实验数据的完整性
要确保实验数据的完整性，避免数据缺失或遗 漏。
数据分析的可靠性
对实验数据进行可靠性的评估，以保证数据的 准确性和可信度。
在食品检测方面的应用
食品安全
01
分光光度计可以检测食品中的有害物质和添加剂，如甲醛、亚
硝酸盐、重金属等，保障食品安全。
营养成分分析
02
分光光度计可以检测食品中的营养成分，如蛋白质、脂肪、维
生素等，为营养学研究提供数据支持。
产地和真伪鉴别
03
通过检测食品中的特定元素或化合物，分光光度计可以鉴别食
品的产地、真伪和品种等。
用拟合方法将实验数据与理论公式相比较， 以获得更好的结果。
平滑处理可去除数据中的噪声，使数据更接 近真实值。
数据的分离
数据的归一化
将不同类型的数据进行分离，以更好地分析 各数据的特征。
将数据进行归一化处理，以便更好地比较各 数据的特征。
04
分光光度计的实验技术
标准曲线法
总结词
标准曲线法是一种通过对比已知浓度标准品与待测样品吸光度的差异，推算待测 样品浓度的定量方法。
对同一份样品进行 多次测量，并取平 均值，以减小误差 。
选择合适的测量波 长和带宽，以减少 误差。
选择合适的实验条件
了解样品的基本性质和特点，选择适合的测量条 件。
选择合适的溶剂和稀释比例，使样品的浓度在分 光光度计的线性范围内。
选择合适的测量时间，因为某些化学反应会随着 时间的推移而发生变化。

分光光度计的使用课件

分光光度计的使用课件
光的衍射
当光通过障碍物或狭缝时，光线会发生衍射现象。衍射现象会导致光线的方向发 生变化，形成类似于干涉的明暗相间的条纹。分光光度计中的衍射光栅利用光的 衍射原理来分离不同波长的光线。
光的偏振与极化
光的偏振
当光通过某些介质时，其电矢量会相对于传播方向以一定角 度振荡，导致光的偏振现象。偏振现象可用于分析物质的晶 体结构和光学性质。
分光光度计的使用课件
汇报人：
日期:
• 分光光度计基本原理 • 分光光度计基本构造 • 分光光度计使用方法 • 分光光度计实验技术 • 分光光度计应用实例 • 分光光度计维护保养与安全防护
01 分光光度计基本原理
光的吸收与散射
光的吸收
当光通过介质时，介质中的分子或原 子会吸收特定波长的光，导致光的强 度减弱。这种吸收现象可用于分析物 质中的特定成分。
药物代谢研究
通过测量药物在人体内的 吸收和代谢过程，可以研 究其动力学。
医学诊断
某些疾病可以通过测量人 体组织在特定波长下的透 射或反射光谱来进行诊断 。
06 分光光度计维护保养与安全防护
仪器维护与保养
01
02
03
04
仪器表面清洁
保持仪器表面清洁，避免使用 腐蚀性液体擦拭，以免对仪器
造成损害。
光学元件清洁
信号处理器
信号处理器是将检测器输出的电信号进行放大、处理和转换的装置，以便进行后续的数据处理和分析 。
03 分光光度计使用方法
样品制备与测量前的准备
01 02
样品制备
在开始测量之前，需要将待测样品进行适当处理，以适应分光光度计的 测量需求。例如，对于液体样品，可能需要摇匀、稀释或过滤以消除误 差。
误差来源 1. 比色皿不干净，导致吸光度测量值不准确。

紫外可见分光光度计ppt课件

紫外可见分光光度计ppt课件
的有光电管、光电倍增管、光电二极管、光电摄像管等。 要求灵敏度高、响应时间短、噪声水平低、稳定性好的优点。
5. 显示器 将监测器输出的信号放大并显示
出来的装置。 常用的液晶数字指示窗口和计算
控制显示。
篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
3.吸收池 用于盛装试液的装置。吸收材料必须能够透过所测光谱范
围的光。一般可见光区使用玻璃吸收池，紫外光区使用石英 吸收池。 规格有0.5、1.0、2.0、5.0cm 等。
一、基本原理:光的选择性吸收
分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后， 发生了电子能级跃迁，而产生了相应的吸收光谱。 属分子吸收光谱。
紫外-可见吸收光谱分析是研究物质在紫外-可 见光波下的分子吸收光谱的分析方法。 紫外-可见区可细分为： （1）10-200nm；远紫外光区 （2）200-400nm；近紫外光区 （3）400-800nm；可见光区
篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
在进行定性鉴定时，需要注意： 1.测试溶剂：应当对标准物和待测物有良好的溶解度，本身在测
定的波长内无光的吸收，有良好的稳定性。 2.测试的条件：标准物和待测物测试条件要完全相同，如溶剂、
第三部分 紫外-可见吸收光谱法的应用
篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
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工作环境
本页仅供参考，具体需详细查阅相应仪器说明书
1、该仪器应安放在干燥的房间内，使用温度为5℃~35 ℃ 。 2、该仪器应放置在坚固平稳的工作台上，且避免强烈震动或持 续震动。
3、室内照明不宜太强，且避免日光直射。 4、电风扇不宜直接吹向仪器，以免影响仪器的正常使用。 5、尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。 6、供给仪器的电源为220V±10%，49.5-50Hz，并须装有良好的 接地线。宜使用100W以上的稳压器，以加强仪器的抗干扰性能。 7、避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐蚀性气体的场所使用。
本页仅供参考，具体需详细查阅相应仪器说明书
5、吸收池：(比色皿)用于盛待测及参比溶液。
a 可见光区：光学玻璃池
b 紫外区：石英池
6、检测器：利用光电效应，将光能转换成电流信号。
光电池，光电管，光电倍增管
7、指示器：
a 低档仪器：刻度显示
b 中高档仪器：数字显示，自动扫描记录
本页仅供参考，具体需详细查阅相应仪器说明书
注意事项
1、该仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作 台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防 止灯泡灯丝发亮不稳定。 2、为了防止光电管疲劳，不测定时必须将试样室盖打开，使光 路切断，以延长光电管的使用寿命。 3、取拿比色皿时，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，而不能碰 比色皿的光学表面。 4、比色皿不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗涤，也不能用毛 刷清洗。比色皿外壁附着的水或溶液应用擦镜纸或细而软的吸水纸 吸干，不要擦拭，以免损伤它的光学表面。
722分光光度计
本页仅供参考，具体需详细查阅相应仪器说明书
简介：该仪器适用于对可见光谱区域内物质的含量进行定 量分析，可广泛应用于工厂、学校、冶金、农业、食品、生 化、环保、石油化工、医疗卫生等单位的基础实验室。
用途：在近紫外和可见光谱区域内对样品物质作定性和定 量的分析，是理化实验室常用分析仪器之一。
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722型分光光度计的使用操作方法
5、调节T=100% 将盛蒸馏水（或空白溶液，或纯溶剂）的比 色皿放入比色皿座架中的第一格内，并对准光路，把试样室盖子轻 轻盖上，调节透过率“100%”旋钮，使数字显示正好为“100.0”。
6、吸光度的测定 将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处， 用擦镜纸擦清外壁，放入样品室内，将选择开关置于“A”，盖上 试样室盖子，将空白液置于光路中，调节吸光度调节旋钮，使数字 显 示 为 “ 0.000”。将盛有待测溶液的比色皿放入比色皿，此时数字显示值即为该待测溶液的吸光度值。读数后，打开 试样室盖，切断光路。
分类-按波长
1、可见光分光光度计：测定波长范围为400～760nm的可见光区； 2、紫外分光光度计：测定波长范围为200～400nm的紫外光区； 3、红外分光光度计：测定波长范围为大于760nm的红外光区； 4、荧光分光光度计：用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光 谱； 5、原子吸收分光光度计：光源发出被测的特征光谱辐射，被经 过原子化器后的样品蒸气中的待测元素基态原子所吸收，通过测定 特征辐射被吸收的大小，来求出被测元素的含量。
9、透过率测量范围：0-100% （T）。 10、吸光度测量范围：0-1.999 （A）。 11、浓度直读范围：0-2000。 12、光度精度：
a 透过率线性精度±0.5% （T）。
b 吸光度精度±0.004A(在 0.5A处)。 13、透过率重现性：0.5%（T）。
本页仅供参考，具体需详细查阅相应仪器说明书
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722型分光光度计的使用操作方法
重复上述测定操作1-2次，读取相应的吸光度值，取平均值 （吸光度值尽可能在0.2-0.8之间）。 7、浓度的测定 选择开关由“A”旋置“C”，将已标定浓度 的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测 样品放入光路，此时数字显示值即为该待测溶液的浓度值。 8、关机 比色完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比 色皿座架用用软布或软纸擦净。
722型分光光度计的使用操作方法
1、预热仪器 打开电源开关，使仪器预热30分钟（为了防止 光电管疲劳，不要连续光照，预热仪器时和不测定时应将试样室 盖打开，使光路切断）。 2、选定波长 转动波长手轮，调至所需要的单色波长。 3、固定灵敏度档 在能使空白溶液很好地调到“100%”的情 况下，尽可能采用灵敏度较低的档，使用时，首先调到“1”挡， 灵敏度不够时再逐渐升高。但换挡改变灵敏度后，须重新校正“0%” 和“100%”。选好的灵敏度，实验过程中不要再变动。 4、调节T=0% 轻轻旋动“0%”旋钮，使数字显示为“00.0”， （此时试样室是打开的）。
722型分光光度计结构方框图
光 分光 源 系统
吸收池
检测系统
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分光光度计的主要部件
1、光源：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够的光强度。 a 可见光区：钨灯，碘钨灯(320～2500nm) b 紫外区：氢灯，氘灯(180～375nm) 2、单色器：将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。 3、棱镜:玻璃350～3200nm,石英185～4000nm。 4、光栅:波长范围宽,色散均匀,分辨性能好,使用方便。
本页仅供参考，具体需详细查阅相应仪器说明书
主要技术性能及规格：
1、光学系统：单光束、衍射光 栅。 2、波长范围：330~800nm.。 3、光源：钨卤素灯12V30W。 4、接收元件：端窗式G1030光电 管。
5、波长精度：±2nm。 6、波长重现性：0.5nm。 7、光谱带宽：6nm。 8、杂散光：1%（T）（在360nm 处）。
目录
A
简介
B
722分光光度计
C
仪器故障及解决
D
拓展
简介
分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长 范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。
分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下， 产生了对光吸收的效应，物质对光的吸收是具有选择性的， 各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光 通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度 和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理---比 耳定律。