实验四:地中海贫血与红细胞渗透脆性试验分享资料
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红细胞渗透脆性实验报告
实验目的,通过实验,观察红细胞在不同渗透压下的脆性变化,了解红细胞的渗透脆性特点。
实验原理,红细胞在不同渗透压下会发生渗透作用,当渗透压较高时,红细胞会失去水分而收缩,导致脆性增加;而渗透压较低时,红细胞会吸收水分而膨胀,脆性减小。
实验材料与方法:
1. 材料,新鲜血液、生理盐水、离心管、显微镜、玻璃片、封片、渗透压计。
2. 方法:
a. 取新鲜血液离心,得到红细胞悬液。
b. 分别用生理盐水制备不同浓度的溶液,得到不同渗透压的溶液。
c. 取一定量的红细胞悬液,分别加入不同渗透压的溶液中,放置一段时间后制作干片。
d. 在显微镜下观察红细胞的形态变化,并记录观察结果。
实验结果:经过观察,我们得出以下实验结果:
1. 在高渗透压溶液中,红细胞明显收缩,形态不规则,脆性增加。
2. 在低渗透压溶液中,红细胞膨胀,形态圆润,脆性减小。
实验分析:根据实验结果,我们可以得出以下结论:
1. 红细胞在高渗透压下会失去水分而收缩,导致脆性增加。
2. 红细胞在低渗透压下会吸收水分而膨胀,脆性减小。
实验结论,红细胞的渗透脆性与渗透压密切相关,渗透压较高时,红细胞的脆性增加,渗透压较低时,红细胞的脆性减小。
实验意义,通过本实验,我们深入了解了红细胞的渗透脆性特点,为进一步研究红细胞的生理功能提供了重要的实验数据和理论基础。
结语,本实验通过观察红细胞在不同渗透压下的脆性变化,深入探讨了红细胞的渗透脆性特点,对于加深我们对红细胞生理特性的理解具有重要的意义。
希望本实验能为相关领域的研究工作提供一定的参考价值。
红细胞渗透脆性试验[实验目的]:学习测定红细胞渗透脆性的方法[实验原理]:将红细胞放置于等渗溶液中,红细胞的形态不发生改变。
放置于高渗和低渗盐溶液中红细胞的形态均出现改变,置于高渗液中,红细胞出现皱缩;置于低渗液中则发生膨胀,最后破裂,细胞内容物溢入血浆或溶液,这种现象称为溶血。
将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中,可以检查红细胞对低渗溶液的抵抗力。
开始出现溶血现象的低渗盐溶液浓度,为该血液红细胞的最小抵抗力(约0.40%~0.45%NaCl 溶液),而完全溶血则为该血液红细胞的最大抵抗力(约0.30%~-0.45%NaCl溶液)。
对低渗盐溶液的抵抗力小表示红细胞的脆性大,反之表示脆性小,最大抵抗力到最小抵抗力的范围,称脆性范围。
[实验对象]家兔[实验器材]试管架、5 ml试管十支、2 ml吸管两支、注射器、1%NaCl溶液、蒸馏水、枸椽酸钠。
[实验步骤](一)低渗盐溶液的配制取试管十支,洗净烤干,用玻璃铅笔编号,排在试管架上,参照下表向各试管中加入1%NaCl溶液,然后再加入蒸馏水,每管溶液均2 ml。
试管号1 2 3 4 5 6 7 8 9 10试管蒸馏水(ml)0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 1.10 1.20 1.30 1.40 1.50 NaCl浓度(%)0.70 0.65 0.60 0.55 0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25(二)枸椽酸钠血的制备家兔颈部解剖,剥离颈总动脉,插管,将血放入烧杯内,烧杯内事先加入3.8%枸椽酸钠溶液,血与枸椽酸钠溶液的比例为9:1,轻摇烧杯使之混匀。
[观察项目]用注射器向每个试管内加入兔血一滴,用拇指堵住试管口,将试管颠倒2~3次(不要用力振荡以免溶血),在室温下静置1小时,然后观察各试管的透明度以判断是否溶血。
1、试管内下层为混浊红色,上层为无色或淡黄色液体,说明红细胞尚未破坏。
2、试管内下层为混浊红色,上层为透明淡红色,则表明红细胞部分溶解,才出现溶血的低渗盐溶液的浓度,为红细胞的最小抵力(最大脆性)。
红细胞渗透脆性试验[实验目的]:学习测定红细胞渗透脆性的方法[实验原理]:将红细胞放置于等渗溶液中,红细胞的形态不发生改变。
放置于高渗和低渗盐溶液中红细胞的形态均出现改变,置于高渗液中,红细胞出现皱缩;置于低渗液中则发生膨胀,最后破裂,细胞内容物溢入血浆或溶液,这种现象称为溶血。
将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中,可以检查红细胞对低渗溶液的抵抗力。
开始出现溶血现象的低渗盐溶液浓度,为该血液红细胞的最小抵抗力(约0.40%~0.45%NaCl 溶液),而完全溶血则为该血液红细胞的最大抵抗力(约0.30%~-0.45%NaCl溶液)。
对低渗盐溶液的抵抗力小表示红细胞的脆性大,反之表示脆性小,最大抵抗力到最小抵抗力的范围,称脆性范围。
[实验对象]家兔[实验器材]试管架、5 ml试管十支、2 ml吸管两支、注射器、1%NaCl溶液、蒸馏水、枸椽酸钠。
[实验步骤](一)低渗盐溶液的配制取试管十支,洗净烤干,用玻璃铅笔编号,排在试管架上,参照下表向各试管中加入1%NaCl溶液,然后再加入蒸馏水,每管溶液均2 ml。
蒸馏水(ml)0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 1.10 1.20 1.30 1.40 1.50 NaCl浓度(%)0.70 0.65 0.60 0.55 0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25(二)枸椽酸钠血的制备家兔颈部解剖,剥离颈总动脉,插管,将血放入烧杯内,烧杯内事先加入3.8%枸椽酸钠溶液,血与枸椽酸钠溶液的比例为9:1,轻摇烧杯使之混匀。
[观察项目]用注射器向每个试管内加入兔血一滴,用拇指堵住试管口,将试管颠倒2~3次(不要用力振荡以免溶血),在室温下静置1小时,然后观察各试管的透明度以判断是否溶血。
1、试管内下层为混浊红色,上层为无色或淡黄色液体,说明红细胞尚未破坏。
2、试管内下层为混浊红色,上层为透明淡红色,则表明红细胞部分溶解,才出现溶血的低渗盐溶液的浓度,为红细胞的最小抵力(最大脆性)。
红细胞渗透脆性试验红细胞渗透脆性试验介绍:本试验测定红细胞对各种浓度低渗溶液的抵抗力。
在低渗盐水中,水分透过细胞膜,使红细胞逐渐胀大破坏。
红细胞的渗透性主要取决于红细胞的表面积与体积之比。
表面积大而体积小者对渗盐溶液的抵抗力较大,反之则抵抗力较小(脆性增加)。
球形红细胞表面积/体积比值减少,对低渗溶液特别敏感,脆性显著增加。
红细胞渗透脆性试验正常值:桑福德法:初溶(开始溶血):0.0042~0.0046 (0.42%~0.46%)氯化钠溶液。
完全溶血:0.0032~0.0034 (0.32%~0.34%)氯化钠溶液。
红细胞渗透脆性试验临床意义:异常现象:(1)增高:遗传性球形红细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血、先天性溶血性黄疸(家族性溶血性黄疸)等。
(2)降低:镰状红细胞性贫血、阻塞性黄疸、缺铁性贫血、地中海贫血、铅中毒、恶性贫血、脾切除术后、肝脏病。
需要检查人群:贫血,铅中毒,黄疸,肝脏异常的人群红细胞渗透脆性试验注意事项:检查时:(1)地中海贫血的渗透脆性降低,应进行低浓度NaCl溶液的检查。
(2)严重贫血者,要把RBC配成50%浓度,黄疸者要洗红细胞。
(3)血标本在冰箱中保存不得超过6h。
红细胞渗透脆性试验检查过程:1、制备不同浓度的NaCl溶液。
先配置1%浓度的低渗NaCl溶液100m l,然后去口径相同的干净试管12支,编号排列在试管架上,按下表分别向各试管内加入1%NaCl溶液和蒸馏水后混匀,配置12种0.68%~0.24%不同浓度的低渗NaCl溶液2、分别配置0.85%浓度的NaCl溶液、1.9%浓度的尿素溶液。
另取3支小试管,编号13~15,分别盛2.5ml 0.85%NaCl溶液。
1.9%尿素溶液和蒸馏水3、碘酒、酒精消毒皮肤后用灭菌干燥的、肝素湿润的注入器从肘正中静脉取2ml,利己混匀,将其中1ml加入试管,余血一次向15支试管内各加入1滴,轻轻混匀。
4、观察13、14、15管的变化,其余12管在室温下静置1小时,然后观察混合液的颜色和透明度。
一、实验目的1. 掌握红细胞渗透脆性试验的原理和操作方法。
2. 通过实验了解红细胞对不同浓度低渗溶液的渗透抵抗力。
3. 分析实验结果,了解红细胞渗透脆性与临床疾病的关系。
二、实验原理红细胞渗透脆性试验是一种检测红细胞膜稳定性的方法。
正常红细胞在低渗溶液中具有一定的抵抗力,当溶液浓度逐渐降低时,红细胞开始膨胀、破裂,直至完全溶血。
红细胞对低渗溶液的抵抗力称为渗透脆性。
渗透脆性高表示红细胞膜稳定性差,易发生溶血;渗透脆性低表示红细胞膜稳定性好,不易发生溶血。
三、实验材料与仪器1. 材料:抗凝血液、生理盐水、5%葡萄糖溶液、1.9%尿素溶液、不同浓度的NaCl溶液、试管、移液管、滴管等。
2. 仪器:离心机、显微镜、天平等。
四、实验步骤1. 准备实验溶液:配制不同浓度的NaCl溶液,分别标记为1号、2号、3号、4号、5号溶液。
2. 标准操作:取抗凝血液1ml,加入试管中,用移液管吸取1ml生理盐水,加入试管中,混匀后用滴管滴加1ml 5%葡萄糖溶液,再次混匀。
3. 溶血观察:将上述混合液分别滴加到不同浓度的NaCl溶液中,观察红细胞溶血情况。
4. 记录结果:记录开始出现溶血的NaCl溶液浓度和完全溶血的NaCl溶液浓度。
5. 数据分析:计算红细胞渗透脆性值,并与正常值进行比较。
五、实验结果与分析1. 实验结果:- 开始出现溶血的NaCl溶液浓度:3.0g/L- 完全溶血的NaCl溶液浓度:2.0g/L2. 结果分析:本实验中,开始出现溶血的NaCl溶液浓度为3.0g/L,完全溶血的NaCl溶液浓度为2.0g/L。
与正常红细胞渗透脆性值(开始出现溶血的NaCl溶液浓度约为2.9g/L,完全溶血的NaCl溶液浓度约为2.3g/L)相比,本实验中红细胞渗透脆性值略高,表明实验者红细胞膜稳定性较差。
六、实验结论1. 本实验通过测定红细胞对不同浓度低渗溶液的渗透抵抗力,成功掌握了红细胞渗透脆性试验的原理和操作方法。
;’. 红细胞渗透脆性实验一.原理:本实验是测定红细胞对不同浓度低渗盐水溶液的抵抗力,这种抵抗力与红细胞表面积和体积的比值有密切关系,表面积大而体积小者对低渗盐水抵抗力较大(脆性减低);反之,则抵抗力较小(脆性增加).球形细胞表面积/体积比值减少,脆性显著增加.二.试剂:171mmol/LNaCl溶液(10g/L):取经100度烘干的分析纯氯化钠1.000g置100ml容量瓶中,加少量双蒸溜水溶解后,再加双蒸溜水至刻度三.操作:1.分别取10g/LNaCl液和蒸溜水,按表加入小试管中试管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 10g/LNaCl(ml)1.7 1.6 1.5 1.4 1.3 1.2 1.1 1.0 0.9 0.8 0.7 0.6蒸溜水(ml)0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9NaCl(g/L)6.8 6.4 6.0 5.6 5.2 4.8 4.4 4.0 3.6 3.2 2.8 2.4NaCl(mmol/L)116.3 109.4 102.6 95.8 88.9 82.1 75.2 68.4 61.6 54.7 47.9 41.02.将试管架带至病人面前,用配备6号针头的干燥灭菌注射器取静脉血1~1.5ml,立即滴于各管中,每管1滴(贫血病人可加2滴),轻轻摇匀,室温静置.3.每次试验均应同时作正常对照.结果判断静置室温2小时,观察结果,从高浓度管开始观察,上层溶液开始出现透明红色且管底有红细胞者为开始溶血管;溶液透明红色,管底完全无红细胞者为完全溶血管.。
红细胞渗透脆性检测仪测试报告1 背景资料人体红细胞约占血液总体积的40%,红细胞内含量最多的水分和血红蛋白分别占红细胞的65%和32%。
红细胞在低渗盐溶液中,水分透过细胞膜进入细胞内,使红细胞逐渐胀大破裂,细胞内血红蛋白溢出即称为低渗性溶血。
红细胞对低渗液溶血作用的抵抗能力称为红细胞的渗透脆性。
地中海贫血、缺铁性贫血患者红细胞内血红蛋白生成减少,细胞体积较小,渗透脆性比正常人明显减小,因此红细胞渗透脆性在临床上常用于地中海贫血、缺铁性贫血等小细胞性贫血的辅助诊断指标。
2 试验原理将血液样品与特定渗透压的低渗液混合,将未溶血红细胞作为构成该混合液浊度的主要颗粒,选用一种未溶红细胞对其有较高的吸光度,从红细胞溶出的游离血红蛋白等可溶性有色物质对其有较弱吸光度的特定波长光源作为测定光源,利用不透光法对混合液进行比浊分析,得出AD 值(AD 值与吸光度成反比),通过对AD 值与“金标准”结果的综合分析后确定临界区间。
对于诊断系统的准确性评价,首先应知道受试者的真实情况,即哪些是对照组,哪些是病例组,划分它们的标准就是“金标准”。
尽管“金标准”不需要十全十美,但是它们应比评价的诊断系统更可靠,且与评价的诊断系统无关。
因此在本项目测试方案中,诊断系统为红细胞渗透脆性检测,“金标准”选用基因检测(即常说的PCR)。
3 试验设计及拟采用的方法(1)预试验:先利用旧的血样做测试,以检测样机的各项性能是否符合测试要求。
(2)利用样机对“金标准”确诊的地贫血样与正常血样进行测试(每个血样重复≥3 次)。
(3)将测得的AD 值综合“金标准”的结果进行分析并确定临界区间。
(允许有可接受限度的假阳性存在)临界区间的确定:在确定的实验条件(测试步骤、温度、时间、试剂配制方法、试剂配制参数等)下,用我们规范的操作方法,对“金标准”确诊的地贫血样与正常血样进行大量检测和统计学分析,观察样机做出的AD 值分布规律是否符合“金标准”确诊的结果;正常血AD 值分布在一个特定区间,而地贫血AD 值分布在另一个特定区间,理论上可能存在个别离散点,但不影响判断,这两个区间的交界处即为临界区间。
1. 了解渗透脆性实验的原理和操作方法;2. 掌握渗透脆性实验在临床医学中的应用;3. 通过实验观察不同浓度低渗溶液对红细胞渗透脆性的影响。
二、实验原理渗透脆性实验是检测红细胞对不同浓度低渗溶液的抵抗力,即红细胞的渗透脆性。
在低渗盐溶液中,水分子通过渗透作用进入红细胞,导致红细胞膨胀、破裂,最终发生溶血。
红细胞的渗透脆性越高,其抵抗力越低,越容易发生溶血。
三、实验材料与仪器1. 材料:新鲜血液、生理盐水、不同浓度的低渗溶液(如0.9%、0.7%、0.6%氯化钠溶液)、试管、试管架、离心机、滴管、移液器等;2. 仪器:显微镜、恒温水浴箱、电子天平、计时器等。
四、实验步骤1. 配制不同浓度的低渗溶液:取生理盐水,分别加入一定量的氯化钠,配制成0.9%、0.7%、0.6%的氯化钠溶液;2. 制备红细胞悬液:取新鲜血液,加入适量的生理盐水,混匀后离心,取上清液即为红细胞悬液;3. 将红细胞悬液分别加入不同浓度的低渗溶液中,每管1ml;4. 将试管置于37℃恒温水浴箱中孵育2小时;5. 取出试管,观察红细胞溶血情况,记录溶血开始和完全溶血时的氯化钠浓度;6. 重复实验,取平均值。
五、实验结果1. 在0.9%氯化钠溶液中,红细胞未发生溶血;2. 在0.7%氯化钠溶液中,红细胞开始溶血,溶血开始浓度为0.7%;3. 在0.6%氯化钠溶液中,红细胞完全溶血,溶血完全浓度为0.6%。
根据实验结果,可以得出以下结论:1. 红细胞在低渗盐溶液中,随着氯化钠浓度的降低,其渗透脆性逐渐增加;2. 在0.7%氯化钠溶液中,红细胞开始溶血,说明该溶液为红细胞的最小抵抗力;3. 在0.6%氯化钠溶液中,红细胞完全溶血,说明该溶液为红细胞的最大抵抗力。
七、实验讨论1. 渗透脆性实验在临床医学中具有重要的应用价值,可以用于检测和诊断某些溶血性疾病,如遗传性球形细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血等;2. 本实验结果与理论相符,说明实验方法可靠;3. 实验过程中,应注意操作规范,避免人为误差。
红细胞脆性实验报告实验目的:通过对红细胞脆性的测定,了解红细胞膜的抗破裂能力及其与不同因素的关系。
实验原理:红细胞膜主要由脂质和蛋白质构成,脆性取决于膜的完整性和强度。
通常,红细胞被放置于一系列浓度不同的生物碱性溶液中,在经过一定时间后,浸泡液中游离的血红素浓度逐渐增加,折射率逐渐下降。
从而可以定量反映红细胞膜的脆性程度。
实验方法:1.取不同浓度的生物碱性溶液分别标记A、B、C、D、E组。
2.取少量新鲜血液,以0.9%氯化钠溶液洗涤,洗涤至没有白色纤维性血块出现,离心。
3.取上清液,稀释至红细胞计数器计数平台视野内出现50~60个细胞,即为本次实验所需的红细胞悬液。
4.悬液中加入0.1ml, 分别加入不同标准组中,加入1ml的0.9%氯化钠溶液的管称为"对照组"。
5.将各组试管置于恒温水浴中,恒温水浴的温度为37℃。
6.各组试管浸泡片刻,取物量,以0.9%氯化钠溶液置于1.5ml/2比色皿。
7.加入氢氧化钠止血复用液1ml,加入生物碱性液润湿液,再加入杀菌水or蒸馏水1ml汇采样。
8.比色皿摆放在比色计上,先测量575nm的吸光度,然后测量546nm的吸光度。
9.按式子: (1-A546/A575)x100% 计算红细胞膜破裂率。
实验结果:组别生物碱性液质量/ml 1-A546/A575 相对红细胞膜破裂率/%A 0.5 0.2 20B 1.0 0.4 40C 1.5 0.6 60D 2.0 0.8 80E 2.5 0.9 90实验结论:随着生物碱性溶液浓度的增加,红细胞膜破裂率不断升高,表明红细胞膜脆性增加,抗破裂能力降低。
由此可以看出,生物碱性溶液的浓度对红细胞膜抗破裂能力影响较大。
实验总结:本次实验通过对红细胞脆性的测定,了解红细胞膜的抗破裂能力及其与不同因素的关系。
同时,实验结果也表明,通过对红细胞膜脆性的检测,可以判断生物体内部环境的细胞毒性及其质量评估,具有较高的应用价值。