实验：绿叶中色素的提取和分离
1、实验原理
（1）、提取：相似相溶（色素可以溶解在无水乙醇中）
（2）、分离：溶解度不同（色素在层析液中的溶解度不同）
2、材料用具
（1）、叶片要新鲜，颜色要深绿
（2）、无水乙醇（或95%乙醇加入无水碳酸钠去水），
层析液（可用93号汽油代替），二氧化硅SiO2，碳酸钙CaCO3。
2、步骤：
（1）、提取：
剪碎 + SiO2 + CaCO3 + 无水乙醇 过滤
加SiO2的目的：使研磨充分。
加CaCO3的目的：防止色素被破坏。
研磨要迅速、充分：迅速是为了防止无水乙醇挥发。
充分时使叶绿体充分被破坏，使色素完全释放出来。
过滤时要用单层尼龙布而不用滤纸的原因：
①、色素分子较大，不易通过滤纸
②、滤纸有较强的吸附能力而使色素吸附在滤纸上，从而降低色素浓度影响实验效果。
（2）、制备滤纸条
在滤纸条的一端减去两角的目的： 防止边缘效应
用铅笔画一细线的目的：其标记作用（以便每次重复画的滤液细线在同一位置）
（3）、画滤液细线
① 细、齐、直（色素在同一起跑线出发）
② 重复2~3次
（4）、分离
将有滤液细线的一段朝下
不能让滤液细线直接接触到层析液：防止色素溶解在层析液中，影响实验效果
（5）、结果
顺序（由上到下）：胡叶a b
宽度：代表色素含量
1 专题 绿叶中色素的提取和分离
下列有关绿叶中色素的提取和分离实验的说法正确的是
A．研磨时加入CaCO3可使叶片研磨更充分
B．用纸层析法分离绿叶中的色素时，在滤纸上相距最远的两条色素带是胡萝卜素和叶绿素b
C．用体积分数为75%的酒精作为溶剂提取绿叶中的色素
D．叶绿体中色素的提取和分离实验主要证明了色素分布在叶绿体片层结构的类囊体膜上
【参考答案】B
色素在提取的过程中会破坏类囊体膜，无法验证色素分布在叶绿体类囊体膜上，D错误。
绿叶中色素提取和分离实验的异常现象分析
（1）收集到的滤液绿色过浅的原因分析
①未加石英砂(二氧化硅)，研磨不充分。
②使用放置数天的叶片，滤液色素(叶绿素)太少。
③一次加入大量的无水乙醇(正确做法：分次加入少量无水乙醇提取色素)。
④未加碳酸钙或加入过少，色素分子被破坏。
（2）滤纸条色素带重叠：滤纸条上的滤液细线接触到层析液。
（3）滤纸条看不见色素带
①忘记画滤液细线或没有提取出色素。
②滤液细线接触到层析液，且时间较长，色素全部溶解到层析液中。
1．下列关于光合色素的叙述中，正确的是
A．构成叶绿素的镁可由植物的根从土壤中吸收
B．光合色素分布于叶绿体内膜和细胞质基质中 2 C．光合色素只吸收红光和蓝紫光用于水的光解
D．植物叶片黄化，叶绿体对红光的吸收会增加
2．在a、b、c 3个研钵中分别加入2 g剪碎的新鲜菠菜绿叶，并用3种不同方法按下表所示添加试剂，经过研磨、提取、过滤得到了3种不同颜色的溶液，有深绿色、黄绿色和几乎无色3种情况，下列选项中说法错误的是
组别
试剂 a b
c
二氧化硅 加入 加入 加入
碳酸钙 不加 加入 加入
乙醇(3 mL) 加入 不加 加入
蒸馏水(3 mL) 不加 加入 不加
A．a组处理会造成滤液呈黄绿色，因为部分叶绿素会被破坏
B．b组处理会造成滤液几乎呈无色，因为叶绿素不会溶解于蒸馏水中
C．c组处理会造成滤液呈深绿色，经分离会得到4条色素带，其中第三条的颜色为蓝绿色
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绿叶中色素的提取和分离：
1．原理 (1)各种色素能溶解在有机溶剂（无水乙醇等）中形成溶液，使色素从生物组织中脱离出来。
(2)各种色素都能溶解在层析液中，但在层析液中的溶解度不同。溶解度大的色素分子随层析液在滤纸上扩散得快，反之则慢，因而不同色素可以在滤纸上通过扩散分开，各种色素分子在滤纸上可形成不同的色素带。
2．实验过程
观察结果：滤纸条上色素带有四条，由上到下分别是胡萝卜素、黄色的叶黄素、蓝绿色的叶绿素、黄色的叶黄素、蓝绿色的叶绿素a、黄绿色的叶绿素b，
第2页 共4页 如图
• 实验要点及注意事项：
1、实验中几种化学药品的作用
①加入少量SiO2，可破坏细胞结构，使研磨更充分，便于色素完全释放。
②加入少量CaCO3，，可以中和细胞内的有机酸，防止有机酸夺取叶绿素中的镁离子使叶绿素破坏，从而起到保护色素的作用。但SiO2.和CaCO3的加入量要少，否则滤液杂质多、混浊、颜色浅，实验效果差。 2、实验成功的关键
①叶片要新鲜，颜色要深绿，保证色素的含量。
②研磨要迅速充分。叶绿素不稳定，易被破坏，时间过长或研磨不充分都会导致色素的量太少而使实验失败。
③滤液细线不仅要求细、直、均匀，而且要求含有较多的色素（可以重复画二至三次）。
④滤液细线不能触及层析液，否则色素溶解到层析液中，将得不到清晰的色素带。
3、注意事项
①制备滤纸条时，要剪去两角，这样可以减小边缘效应，使色素在滤纸上扩散均匀，便于观察实验结果。 ②收集滤液后，要及时用棉塞将试管口塞紧，防止滤液挥发。
4、滤纸条上的滤液细线，不能触及层析液的原因：滤纸条上的滤液细线如触及层析液，
第3页 共4页 滤纸上的叶绿体色素就会溶解在层析液中，实验就会失败。
5、提取和分离叶绿体色素的关键：
（1）提取叶绿体色素的关键是：①叶片要新鲜、浓绿；②研磨要迅速、充分；③滤液收集后，要及时用棉塞将试管口塞紧，以免滤液挥发。
绿叶中色素的提取和分离高中生物实验知识点归纳2021
各种色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，反之则慢，从而使各种色素相互分离。下面是小偏整理的绿叶中色素的提取和分离高中生物实验知识点归纳2021，感谢您的每一次阅读。
绿叶中色素的提取和分离高中生物实验知识点归纳2021
1.实验原理
(1)提取：绿叶中的色素能够溶于有机溶剂而不溶于水，可用无水乙醇等有机溶剂提取色素。
(2)分离：各种色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，反之则慢，从而使各种色素相互分离。
2.实验步骤
提取色素：称取5g的绿叶，剪碎，放入研钵中→加入少量SiO2、CaCO3和10mL无水乙醇
↓→研磨→过滤→将滤液收集到试管内并塞严试管口
制备滤纸条：将干燥的定性滤纸剪成略小于试管长和直径的滤纸条，将滤纸条一端剪去两角，
↓在距离剪角一端1cm处用铅笔画一条细的横线
画滤液细线：用毛细吸管吸取少量的滤液，沿铅笔线均匀地画出一条细线，待滤液干后，
↓再画一两次
分离色素：将适量的层析液倒入试管中，将滤纸条轻轻插入层析液中→
↓用棉塞塞紧试管口，装置如图所示
观察结果：滤纸条上呈现四条颜色、宽度不同的色素带
[深度思考]
(1)为什么需要选用新鲜绿色的叶片做实验材料?
提示新鲜绿色的叶片中色素含量高，从而使滤液中色素含量较高，实验效果明显。 (2)为什么研磨时要迅速?为什么研磨时要加入少量的CaCO3和SiO2?
提示叶绿素不稳定，易被破坏，因此研磨要迅速、充分，以保证提取较多的色素。二氧化硅破坏细胞结构，使研磨充分。碳酸钙可防止研磨过程中色素被破坏。
(3)为什么盛放滤液的试管管口加棉塞?
提示防止乙醇挥发和色素氧化。
(4)滤纸为什么需预先干燥处理?在制备滤纸条时，为什么将一端的两个角剪掉?
提示干燥处理的目的是使层析液在滤纸上快速扩散;剪掉两角的目的是防止层析液沿滤纸边缘扩散过快，从而保证色素带分离整齐。
