玉米赤霉烯酮荧光定量检测卡
——检测使用说明书
【产品简介】
玉米赤霉烯酮（ZEN）具有雌激素作用，主要作用于生殖系统，可使家畜，家禽和实验小鼠产生雌性激素亢进症。妊娠期的动物(包括人)食用含玉米赤霉烯酮的食物可引起流产、死胎和畸胎。食用含赤霉病麦面粉制作的各种面食也可引起中枢神经系统的中毒症状，如恶心、发冷、头痛、神智抑郁和共济失调等。
【检测范围】
谷物粮食、饲料等
【产品组成】
1、 玉米赤霉烯酮检测卡（内附干燥剂）
2、 10X样本稀释液 50ml/瓶 1瓶
3、 使用说明书 1份∕盒
【样本处理】
样本稀释液配制：用去离子水将10X样本稀释液按1 : 9体积比进行稀释，即1份10X
样本稀释液加9份去离子水。
样本提取液配制：70%（体积分数）甲醇溶液。
取有代表性的样品500g，用粉碎机粉碎至全部通过20目筛，混匀。
准确称取10．0g均匀粉碎后的样品（或者量取10ml液态样品）于50ml离心管中，再准确加入30ml样本提取液，将离心管盖盖紧密封，用漩涡振荡器振荡1min～2min，静置或于4000rpm离心2min，得上清液（若样品为食用油取下层液）；将上清液（或者下层液）用移液器吸出100ul,于1.5ml离心管中，再加入900ul的样本稀释液混匀，待检。如样品为小麦，需将稀释后的混合提取液用针头式滤器过滤，即为待测溶液。
【操作步骤】
1、 使用前请仔细阅读本产品说明书以及荧光免疫层析检测仪操作说明。
2、打开荧光免疫层析检测仪，在主界面点击“系统设置”“检测项目管理”后选择要检测的产品名称，进入待检状态。
3、将检测卡和荧光微孔、样本稀释液恢复至室温。
4、 用移液器准确吸取80ul待检样本，（取样时注意不要吸入气泡）垂直缓慢滴加于检测卡加样孔（S）中，加样后开始计时，加样后10分钟读取结果。
6、 将检测试剂卡插入荧光免疫层析检测仪的承载器中，按快捷测试键，仪器将自动对测试卡进行扫描，从免疫层析检测仪的显示屏幕上读取/打印检测结果。
·197·农 技 推 广农业开发与装备 2018年第10期
摘要：温暖潮湿季节，玉米及其他饲料极易发霉变质并产生霉菌毒素，猪的玉米赤霉烯酮中毒（ZEN毒素）主要是由于猪采食感染了禾谷镰刀菌的玉米、小麦等饲料或饲料原料引起的。临床可引起猪生长发育缓慢、繁殖性能下降以及饲料报酬降低，给养殖场造成严重的经济损失。霉菌毒素的污染不仅给动物带来危害，而且会通过食物链直接或间接传入人体，对人类健康造成了潜在的威胁。通过对其致病机理、流行病学调查情况、临床症状的研究，提出治疗方法和防治措施。关键词：玉米赤霉烯酮；中毒机理；临床症状；防治措施0 引言霉菌毒素是某些霉菌产生的有毒次级代谢产物，普遍存在于粮食中，引起粮食腐败变质从而降低其营养价值，霉菌毒素可在谷物田间生长、收获、加工、仓储及运输过程产生。据国际粮农组织（FAO）预测，全球约有25%的粮食作物会不同程度地受到霉菌产生的霉菌毒素的影响，从而降低或丧失其使用价值。截止目前，已鉴定出来的霉菌毒素有300多种，受其危害程度的影响，目前的研究主要集中在以下6种：黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素、玉米赤霉烯酮毒素、呕吐毒素、T-2毒素及伏马毒素。玉米赤霉烯酮毒素（Zearalenone，以下简称ZEN）由于有类似雌激素的作用，从而其污染状况和对动物的危害程度备受国内外科研工作者的关注。1 玉米赤霉烯酮的定义及性质ZEN是由镰刀菌产生的一种类雌激素样霉菌毒素，通常由禾谷镰刀菌产生，三线镰刀菌、木贼镰刀菌、雪腐镰刀菌、粉红镰刀菌等真菌也能产生。主要污染玉米、大麦、高粱、大米和小米等，大豆及其制品中也可以被检测到，但以玉米的检出率和含量最高。纯ZEN是一种白色的结晶，不溶于水，能溶于碱性溶液、乙醚、乙醇、甲苯等，熔点为164～165℃。耐热性较强，120℃下加热未见分解。因此在对被污染的农产品进行进一步的加工过程中，很难随着加工工艺的改变而受到降解，从而会在动物和动物制品中一直存在下去。在动物体内，ZEN代谢为玉米赤霉烯醇（ZEL），ZEL有α-ZEL和β-ZEL两种异构体，后者雌激素活性是前者的3倍，和ZEN相比，其代谢产物的雌激素作用更强，对动物和人的危害也更大。ZEN主要作用于生殖系统，可使家畜、家禽和实验小鼠产生雌激素亢进症。妊娠期的动物采食含ZEN的饲料可引起流产、死胎和畸胎。2 致病机理由于ZEN对动物具有与雌激素相同的作用，会导致机体出现雌激素过多的症状，通常也被称为子宫毒素。在家畜中，猪对该毒素的敏感性最高，尤其是母猪最为易感，兽医临床上ZEN是导致母猪出现假发情的一个重要病因。动物发生急性中毒时，由于体内含有过高水平的雌激素，导致神经系统过于亢奋，从而引起实质脏器（如心脏、肝脏、肾脏以及肺等）中形成大量出血点，导致动物突然发生死亡。3 流行病学调查情况本病有明显的季节性，多见于4—8月份温暖潮湿季节和阴雨连绵的9—11月，多发于生长快速、体重60 kg以下的保育猪，其中以15～40 kg最为常见，且症状最为严重；由于病因明确，如在临床发现有临床症状相似，呈地区性发病或饲喂相同饲料的猪发病，且有用发霉的玉米面或霉变玉米芯或混有霉烂玉米饲喂史时需重点考虑本病。4 临床症状病猪精神沉郁，食欲减少或拒食，大多会有腹泻症状，仔猪中毒后会引起生长发育缓慢。中毒5～7 d后，母猪陆续出现会阴部潮红和水肿、乳房、乳头肿大等症状，病程进一步发展后，出现阴户肿胀及炎症、阴道发炎、泌乳量减少的情况。小公猪可出现睾丸炎、包皮水肿的症状。本病可使母猪发情周期紊乱或初产母猪丧失受孕能力。怀孕母猪中毒后通常会出现流产，长时间饲喂霉变玉米可在临床表现出三脱（子宫、阴道、直肠）现象。多数患猪体温正常（个别猪体温可升高到40～41℃），粪便呈暗黑色、水样或稀糊状。种公猪中毒后会导致睾丸萎缩，性欲降低，乳腺发生程度不同的增大，从而影响其生产性能。5 诊断根据主要临床症状表现、发病季节、易感动物种类及饲料有无霉变等情况，结合实验室诊断结果，可确诊是否为猪玉米赤霉烯酮中毒。5.1 病原学检查将表面经无菌处理的霉玉米或饲料无菌接种于普通琼脂培养基上，每个培养皿可接种10粒左右，置22～28℃温箱中培养，如在第3天长出白色绒毛样菌落，基质呈深肉色到红色即可对培养物进行初步鉴定。5.2 玉米赤霉烯酮毒素测定将饲喂了病猪的霉变玉米或霉变饲料送实验室进行检测，采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）和气相色谱-质谱仪（GC-MS）对ZEN的含量进行定性和定量检测。6 治疗目前，猪发生ZEN中毒后没有特效治疗药物，临床上主要采取停喂现有饲料的方法来对本病进行控制。急性中毒时可同时给予病猪口服补液盐，促进肠道蠕动，加速毒素排泄。慢性中毒时，可肌肉注射维生素Ａ、维生素Ｄ、维生素Ｅ以及黄体酮用以缓解症状。7 预防措施7.1 加强饲料管理玉米等饲料或饲料原料存储方法不当是产生赤霉烯酮的一个主要因素。因此，在收获饲料原料后，要及时进行干燥，确保储藏时含有较低的水分，从而降低霉变的几率。7.2 发生轻微霉变的玉米随着科技的发达，对于已经发生轻微霉变的玉米，可以通过脱毒的方式进行处理后再利用。现在市场上常用的脱毒方法有以下两种：1）浸泡法：1份玉米加3份水，浸泡12 h后更换清水，如此浸泡2～3次后，大部分毒素能被浸出来，将玉米晒干后即可另做他用。2）吸附法：目前市面上有多种品牌的脱霉剂可供使用，经实验室检测后发现脱毒效果显著，可根据脱霉剂的种类和脱毒方法的不同，按一定比例将脱霉剂均匀添加入霉变玉米或饲料中，待脱霉剂发生作用、大部分毒素被吸附后后即可另做他用。8 结语受气候和储存条件的影响，我国饲料及饲料原料受霉菌毒素污染的状况普遍存在，其中污染最严重的便是（下转第202页）玉米赤霉烯酮的毒性作用及防治樊彦敏（郑州市郑东新区食品药品监督管理局，河南郑州 450018）
品质调控Ｑｕａｌｉｔｙ Ｃｏｎｔｒｏｌ
玉米赤霉烯酮对猪的影响及防治
黄 凯，朱凤华，朱祖贤，宋明明，朱连勤
（青岛农业大学动物科技学院，山东青岛２６６１０９）
摘要：玉米赤霉烯酮作为一种真菌次级代谢产物广泛存在于谷物和饲料中，严重影响人和动物的健康，文 章就玉米赤霉烯酮对猪的影响及防治进行综述。 关键词：玉米赤霉烯酮；猪；影响；防治 中图分类号：￥５１３；￥８２８文献标志码：Ａ文章编号：１００１—００８４（２０１４）０３—００４４—０４
Ｉ ｍｐａｃｔ ａｎｄ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ｏｆ Ｚｅａｒａｌｅｎｏｎｅ Ｏｎ Ｓｗｉ ｎｅ
ＨＵＡＮＧ Ｋａｉ，ＺＨＵ ＦｅｎｇｈＨａ，ＺＨＵ Ｚｕｘｉａｎ，ＳＯＮＧ Ｍｉｎｇｍｉｎｇ，ＺＨＵ Ｌｉａｎｑｉｎ
（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｑｉｎｇｄａｏ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｑｉｎｇｄａｏ ２６６１０９，Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｓ ａ ｆｕｎｇａｌ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ，ｚｅａｒａｌｅｎｏｎｅ ｗａｓ ｗｉｄｅｓｐｒｅａｄ ｅｘｉｓｔ ｉｎ ｇｒａｉｎ ａｎｄ ｆｅｅｄ，ｓｅｒｉｏｕｓｌｙ ａｆ－
ｆｅｃｔｉｎｇ ｔｈｅ ｈｅａｌｔｈ ｏｆ ｈｕｍａｎ ａｎｄ ａｎｉｍａ１．Ｔｈｅ ｉｍｐａｃｔ ｏｆ ＺＥＮ ｏｎ ｓｗｉｎｅ ａｎｄ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ｒｅｖｉｅｗｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ａｒｔｉｃｌｅ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｚｅａｒａｌｅｎｏｎｅ；ｓｗｉｎｅ；ｉｍｐａｃｔ；ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ
霉菌毒素是霉菌生长过程中产生的次级代谢
产物，广泛存在于谷物和饲料中。全球范围内，
每年约有２５％的谷物和饲料受到霉菌毒素污染，直 接经济损失达数千亿美元。玉米赤霉烯酮（ＺＥＮ）作
为霉菌毒素的一种，是由多种镰刀菌产生的类雌
钠蠲广萄２０１０年第２期 ｌ３３ 科技视野 Ｓｃ／ｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏ１。ｇＹ Ｏｕｔ 。
镳乃菌毒素污染的玉米日粮添加脱毒荆
时蛋鸡生产性雒及玉米赤霉烯酮残冒的影响
窦文洁译姚宝强杨在宾校
通常认为．蛋鸡和肉鸡对镰刀霉菌属霉菌
毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇（ＤＯＮ）和玉米赤霉烯 酮（ＺＯＮ）有很强的耐受力。Ｌｕｎ等（１９８６）研究表 明．镰刀霉菌污染的玉米１３粮（含有８２．８ｍｇ ＤＯＮ／ｋｇ）饲喂蛋鸡２７ｄ对其产蛋性能没有影响。 Ｋｕｂｅｎａ等（１９８７）用ＤＯＮ污染的小麦日粮（含 １８ｍｇ ＤＯＮ／ｋｇ）饲喂产蛋期来航鸡１６８ｄ，体增
重、产蛋量、鸡蛋品质及生产力都没有受到不良 影响 另外．单端孢霉烯霉菌毒素主要通过阻断 ６０Ｓ一核糖体亚单位的肽基转移酶．抑制蛋白质 合成．影响免疫细胞快速增殖（Ｆｅｉｎｂｅｒｇ和 ＭｃＬａｕｇｈｌｉｎ，１９８９） Ｎｉｃｋｅ等（１９９９）用０、７．５、
１５ｍｇ ＤＯＮ／ｋｇ日粮饲喂肉鸡，随着日粮ＤＯＮ增 加，血清中新城疫病毒抗体滴度逐渐下降。这些 试验虽然对肉鸡生产性能未产生影响．但这种 免疫反应的变化应该是ＤＯＮ影响家禽健康的 表现。 谷物经常会同时污染ＺＯＮ和ＤＯＮ．与ＤＯＮ
相比，ＺＯＮ对蛋鸡毒性相对小。Ａｌｌｅｎ（１９８１）等研 究证明．蛋鸡日粮中添加８００ ｍｇ ＺＯＮ／ｋｇ．对产蛋 性能、孵化率及子代生长没有任何不利影响。同 时．Ｄａｉｌｅｙ（１９８０）等试验证明，１４Ｃ标记ＺＯＮ污染 的日粮饲喂蛋鸡．蛋黄中检测出放射性．说明蛋 黄中有毒素的残留．ＺＯＮ的类雌激素作用会影响
人类健康。另外，Ｂｅｒｇｓｊ（１９９３）等研究发现，使用 这些霉菌毒素污染的日粮饲喂蛋鸡．尽管孵化率 与出壳死亡率没有受到影响．但雏鸡发育异常率
增加．说明ＤＯＮ和ＺＯＮ能够沉积到鸡蛋并进而 影响鸡胚发育
窦文洁：山东农业大学动物营养与饲料科学．硕士研 究生。 姚宝强、杨在宾：单位同第一作者。 １材料与方法 １．１试验设计与饲养管理 试验分４个日粮处理：（１）对照组饲喂未被 污染的玉米日粮（ＵＣＭ）：（２）试验组饲喂霉菌毒
