钾离子测定的标准操作程序

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钾离子(K+)测定的标准操作程序

【应用范围】

体外检测血清、血浆及尿液中钾离子浓度测定。

【适用仪器】

Olympus AU-27全自动生化分析仪。

【程序改变】

严格遵循仪器、试剂说明书及校准品使用说明。

【方法学原理】

K+

PEP+ADP> Pyruvate+ATP

PK

Pyruvate+NADH+H+ TDH tate + NAD+

根据o-nitrophenol在340nm的吸光度的改变测定待测样本中的K +浓度。

【试剂】

1. 成份:R1 Buffer、1a Enzyme; R2 Diluent、2a Substrate。试剂保存:未开封时2- 8°C保存至效期,配制后的应用试剂2- 8C保存2Weeks。试剂准备:将酶试剂1a溶于缓冲液R1中作为R1,

2a底物溶于R2稀释液中作为R2,将两试试剂轻轻混匀待其完全溶解备用。

2. 校准品:Diasys TruCal U。

3. 质控品:Randox Assayed Multiseral Level 2 and Level 3 。

【标本收集与准备】

1. 血清或血浆标本

根据实验室标准采集程序采集标本,适用标本为血清或肝素抗凝血浆(肝素钠抗凝结果高0.5mmol/l),不可从正在静脉滴注手臂上采血,上机标本不能有凝块,样品采集后2天内离心标本,分离血清,血清或血浆标本室温保存4天,冷藏7天,冷冻保存6个月。血清或血浆钠结果高于线性不建议稀释。

2. 尿液标本

定时或随机尿标本,不可加防腐剂,根据实验室标准采集程序采集标本,室温保存24小时,冷藏7天,冷冻保存6个月。尿钠高于线性可用双蒸水对倍稀

【操作步骤】

1. 仪器测定参数设置 Test Name: I K

Sample: Volume 7.0 LR1 Volume

I 250| LR2 Volume I 1I

L

Pri^ (340 I I

Method:[RATE I

Reaction Slope: I - I I

2. 试剂准备:将准备好的试剂置仪器试剂盘中(8C)。

3. 校准

校准物的准备:将校准物从冰箱取出,冻干校准物按说明书加入蒸馏水复溶,轻轻颠倒混匀3次,不可用力震摇,室温放置30分钟至完全溶解;液体校准物从冰箱取出,室温放置15分钟以平衡至室温。校准物的选择尽可能选择配套仪器厂家校准品。亦可将校准液复溶后分装保存于-20C冰箱中,每周校准一次或更换试剂批次后进行校准。

上机校准程序: [1] 选择用户菜单USERCalibrationStart Entry进入输入界面。

[2] 用光标键选欲校准项目,。确认后按Entry

[3] 将校准品按屏幕显示放入绿色校准架相应位置,将校准架置入进样轨道,按▲开始。

【参考范围】

1. 血清/血浆钾

2. 尿钾:25-1mmol/l。

【临床意义】

血清钾升高主要见于:(1)钾摄入过多;(2)肾脏排钾减少;(3)严重溶血或组织损伤、炎症坏死、化疗时肿瘤细胞破坏、大量输入陈旧库血、挤压综合征、灼伤、运动过度,均可使红细胞或肌肉组织内的钾大量放入细胞外液导致血钾升高。

(4)组织缺氧:呼吸或循环功能不全、手术麻醉时间过长、休克,均可导致组织缺氧,此进大量细胞内钾转移至细胞外液,发生高血钾。(5)其他:含钾药物及潴钾利尿剂过度使用,如注射大剂量青霉素钾盐或长期应用安体舒通、甲氨蝶吟等,尤其在合并肾功能受损时可发生高钾血症。 Dilutiol 0| L Pre-Dilution」

Dilutiol 0| L Min ODMax OD

Dilutio 0LL 10.H 2. 5

Measuring FirstI 13

Measuring First _____

Linearity ____ %

No-Lag-Time: 1 NO II Type Serum Operatio Yes

Sec. 410 I Reagent OD

First L First

27 Last

Last 血清钾降低见于:(1)钾盐摄入不足:长期禁食、低钾饮食、厌食等;(2)钾丢失过多:严重呕吐、腹泻或胃肠减压等;大量应用排钾利尿剂及肾上腺皮质激素等;肾上腺皮质功能亢进或醛固酮增多症;某些慢性消耗性疾病,由于细胞分解过多,大量钾从尿中排出;代谢性碱中毒时肾脏排钾增多;烧伤,腹腔引流,血液及腹膜透析使钾丢失过多;某些药物影响:如大量注射青霉素钠盐时,肾小管会大量失钾。(3)钾在体内的分布异常:心功能不全、肾性水肿或大量输入无钾盐的液体,使细胞外液稀释,血清钾降低;大量应用胰岛素细胞外钾大量移入细胞内以保持细胞内外相对平衡,促使血钾下降;急性碱中毒时细胞外液的钾急剧转入细胞内,引起低血钾;家族性周期性低钾麻痹患者发作时细胞外钾可转入细胞内发生低血钾症,可低至2.5mmol/L,但间歇周期可正常。

注意事项:标本推荐用血清,血清在室温或冰箱至少可稳定1周,冰冻至少可稳定1年。轻度溶血即会导致K+测定结果偏高,中到显著溶血的标本就拒绝接受或在报告单上注明。

【方法学特性】

1. 分析范围:血清/血浆钾:75-250mmol/l,尿钾:5-250mmol/l。

2. 精密度:

[1]血清钾

单位(mmol/l) 室间CV% n 天数

平均值 天间SD 室间SD

3.4

0.07 1.96

20

0.08

20

4.5

0.09 3.4

20

0.15

20

[2]尿钾

单位(mmol/l) 室间CV% n 天数

平均值 天间SD 室间SD

121 0.4 0.8 1.7 89 23

132 0.5 1.1 1.6 90 23

3. 特异性

3mg/dl 维生素 C、20mg/dl 胆红素、4mmol/l 钙、10mg/dl 葡聚糖、150mg/dl乙醇、0.4mg/dl 异烟肼、1mmol/l 锂、1.85mmol/l 镁、1.5mg/dl6-巯基嘌吟、4mg/dl 卵磷脂、8mmol/1

钾、10g/dl 总蛋白、8mg/dl 甘油三酯、1mg/dl尿素氮无干扰(偏差<4.3mmol/l )。