实验小鼠骨髓染色体制备和观察

动物骨髓细胞染色体标本的制备实验报告
实验目的：
本实验的目的是利用正常小鼠的骨髓细胞制备染色体标本，并通过显微镜观察染色体的形态和数量，并了解染色体的组成和结构。

实验原理：
染色体是细胞核中最大的有组织结构，由DNA和蛋白质组成。

染色体的数量和形态是每个物种独特的标志之一。

在有丝分裂过程中，染色体的形态和数量的变化可以反映出细胞的分裂状态。

为了制备染色体标本，需要通过细胞的裂解，释放和固定染色体，然后在显微镜下观察染色体的形态和数量。

实验步骤：
1. 取出小鼠的股骨，并在无菌条件下对其进行消毒。

2. 使用消毒的剪刀剪下股骨两端，将骨髓剪下，加入RPMI-1640培养液中，使髓液悬浮，然后用细胞培养器将其孵育2-3天，使骨髓细胞增殖。

3. 用离心机将骨髓细胞离心，去除培养液，用磷酸盐缓冲液进行细胞裂解。

4. 将制备好的染色体悬液滴在预先涂上盐酸聚赖氨酸溶液的载玻片上，让其固定，然后通过染色体芝士和琼脂糖溶液对细胞进行染色。

5. 用显微镜观察染色体标本，记录染色体的数量和形态，并观察细胞的分裂状态。

实验结果：
制备的染色体标本在显微镜下观察。

通过对标本的观察，我们可以看到染色体形态和数量的变化，以及细胞分裂状态的变化。

同时，我们可以从染色体上观察到细胞的遗传信息，包括基因序列和调控因子等。

结论：
本实验成功制备了小鼠骨髓细胞染色体标本。

观察染色体形态和数量的变化，可以从中了解细胞的遗传信息和分裂状态变化。

同时，该实验也展示了染色体的重要性和组成结构，加深了对细胞生物学的理解。

实验名称：小鼠骨髓细胞染色体制备与观察实验时间：2023年10月25日实验地点：生物实验室一、实验目的1. 学习骨髓细胞染色体制备的基本方法。

2. 观察并分析小鼠骨髓细胞的染色体形态和结构。

3. 掌握显微镜观察细胞染色体的技能。

二、实验原理骨髓是人体造血的重要器官，骨髓细胞具有丰富的染色体。

通过染色体制备技术，可以将骨髓细胞的染色体进行染色和制片，便于在显微镜下观察和分析。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：小鼠骨髓细胞、秋水仙素、甲醇、醋酸、Giemsa染液等。

2. 仪器：显微镜、离心机、移液器、培养皿、载玻片、盖玻片、镊子等。

四、实验步骤1. 取小鼠骨髓细胞，用秋水仙素处理，使细胞染色体浓缩。

2. 收集处理后的细胞，加入甲醇和醋酸固定，进行低渗处理。

3. 将低渗细胞进行离心，制成细胞悬液。

4. 将细胞悬液滴在载玻片上，用盖玻片覆盖。

5. 将载玻片放入烤箱，进行空气干燥。

6. 将干燥后的载玻片放入Giemsa染液中染色。

7. 将染色后的载玻片取出，用蒸馏水冲洗，晾干。

8. 使用显微镜观察染色后的骨髓细胞染色体。

五、实验结果与分析1. 观察到小鼠骨髓细胞染色体呈条状，具有明显的着丝粒。

2. 染色体长度不一，有的较短，有的较长。

3. 部分染色体存在交叉现象，表明存在同源染色体。

4. 部分染色体出现断裂，可能是由于秋水仙素处理不当导致。

六、实验讨论1. 秋水仙素是一种诱导细胞有丝分裂的药物，能够使细胞染色体浓缩，便于观察。

2. 甲醇和醋酸固定能够使细胞染色体固定在一定的形态，有利于染色。

3. 低渗处理能够使细胞染色体膨胀，便于观察。

4. 染色体制备过程中，应注意操作规范，避免染色体断裂和交叉现象。

七、实验总结本次实验成功制备了小鼠骨髓细胞染色体，并进行了观察和分析。

通过实验，掌握了骨髓细胞染色体制备的基本方法，提高了显微镜观察细胞染色体的技能。

在实验过程中，应注意操作规范，避免染色体断裂和交叉现象。

同时，还需加强对实验原理和操作技巧的学习，为今后的实验研究打下坚实基础。

简述小鼠骨髓染色体制备流程及注意形象下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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小鼠骨髓细胞染色体标本制作与观察试验目的把握动物骨髓染色体标本制备基本过程，了解操作步骤的原理试验原理小鼠骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞，具有高度的分裂力量，本试验采纳这一材料，通过前处理，低渗，固定，制片，染色等步骤制得染色体标本，可观看到很多处于分裂中期的染色体，可以进行染色体组型分析。

试验原理制备方法包括以下几个要点:1. 用肯定剂量的秋水仙素破坏纺锤丝的形成，使细胞分裂停滞在中期, 使中期染色体停留在赤道面处2. 用低渗法使将细胞膨胀, 以至于在滴片时细胞被胀破, 使细胞的染色体铺展到载玻片上3. 空气干燥法可使使细胞的染色体在载片上展平, 经Giemsa染色后便可观看到染色体的显微图象试验用品1．材料：小白鼠2．器具：注射器（1ml,5ml）剪刀镊子玻璃吸管10ml刻度的离心管离心机载玻片盖玻片显微镜滤纸擦镜纸纱布恒温水浴锅3．药品：0.01%秋水仙素0.075MKCl 固定液（甲醇：冰醋酸=3：1）2%柠檬酸钠改良石炭酸品红试验步骤预处理取股骨冲洗骨髓离心低渗离心固定离心滴片染色观看1．预处理：试验前2.5-3小时，按每克体重注射0.02ml，给小白鼠腹腔注射秋水仙素。

2．取股骨：断颈处死小鼠后，剔去肌肉组织，洗净3．冲洗骨髓：剪去两端的股骨头，吸取10ml 2%柠檬酸钠，注射器针头插入股骨一端,反复冲洗两根股骨，洗液收集到10ml的离心管中4 ．离心：1000r/min 离心10 min ,弃上清5 ．低渗：加入8ml 0.075mol/LKCl溶液,滴管吹散,37℃水浴低渗30 min ，中间（约15 min ）再吹散一次，使细胞分散，悬浮于溶液中6．离心：1000r/min离心10 min，弃上清7．固定：沉淀加8ml固定液，并用吸管轻轻吹匀，进行固定，中间（约15 min ）再吹散一次试验步骤8. 离心：1000r/min 离心10 min ,留1 ml 左右上清，轻轻吹打成细胞悬液9. 滴片：用吸管吸取细胞悬液，高度30-40 cm，滴在预冷的载玻片上，在酒精灯火焰上微微加热，室温晾干10. 染色：改良石炭酸品红染色10-20 min11. 观看：低倍高倍。

实验课名称遗传学实验实验名称小鼠骨髓细胞染色体的制备与观察成绩________________姓名王大锤实验报告系列年级学号组别时间温度实验原理及目的实验目的1、学习小鼠骨髓细胞染色体制片程序；2、掌握空气干燥法制片方法；3、观察了解小鼠的端着丝粒染色体的形态。

实验原理1、染色体标本制备染色体标本是细胞遗传学最基本的技术，优良的染色体制片是其它技术（如显带、原位杂交等）的先决条件。

2、骨髓细胞染色体染色体的制备在原则上可以从所有发生有丝分裂的组织和细胞悬浮液中得到。

动物染色体制备最常用的途径是从骨髓细胞、血淋巴细胞和组织培养的细胞中制备染色体。

在骨髓细胞中，有丝分裂的指数很高，可以直接得到中期细胞而不必像血淋巴细胞或其它组织需要经过体外培养。

3、空气干燥法指细胞经过秋水仙素处理、低渗处理、充分固定和滴片等步骤之后，使载片在空气中自然干燥的方法。

实验材料、仪器及试齐U仪器：光学显微镜，2mL注射器，5号针头，10mL刻度离心管，吸管，试管，试管架，载玻片，盖片，离心机，光学显微镜，解剖器具（解剖盘，剪子、镊子）。

材料：小白鼠（Mus musculus 2n=40 ）,体重约18-20g （65-90日龄），雌雄皆可。

试剂及其他：秋水仙素溶液（100卩g/mL）, 2%柠檬酸钠溶液，0.075M KCl，冰醋酸，甲醇，Giemsa原液, 0.01 M 磷酸缓冲液（PBS, pH 7.4）1•预处理生命与环境科学学院实验报告进行秋水仙素处理。

取骨髓前3-4h给小鼠经腹腔注入秋水仙素（100卩g/ mL）0.3-0.4mL。

2. 取骨髓处死动物，立即取后肢骨。

用剪刀剪掉、清除腿部的皮肤和肌肉，然后从股骨两端关节头处剪下股骨，立即用2%柠檬酸钠溶液冲洗干净。

剪掉股骨两端膨大的关节头，使其露出骨髓腔，用吸有适当量的柠檬酸钠溶液注射器，从一端插入注射针头，将骨髓吹入10mL刻度离心管中，可反复吹洗数次，直至股骨变白为止。

一、实验目的1. 掌握染色体标本的制作方法。

2. 观察并识别有丝分裂中期相的染色体形态。

3. 了解染色体的形态特征及其数目。

二、实验原理染色体是细胞核中具有遗传信息的结构，由DNA和蛋白质组成。

在细胞分裂过程中，染色体复制并分离到子细胞中，从而保证遗传信息的传递。

本实验通过制作染色体标本，观察染色体的形态特征和数目，以了解染色体的结构及其在细胞分裂中的作用。

三、实验材料与试剂1. 实验材料：小鼠骨髓细胞2. 试剂：甲醇、冰醋酸、秋水仙素、生理盐水、卡诺氏固定液、Giemsa染液、载玻片、盖玻片、显微镜等四、实验步骤1. 注射：提前2小时向小鼠注射秋水仙素，使其细胞分裂。

2. 处死小鼠：处死小鼠后，剪下四肢，剔除肉等，剪碎骨。

3. 制备细胞悬液：将剪碎的骨加入生理盐水，制成细胞悬液。

4. 离心：将细胞悬液离心，取沉淀物。

5. 低渗处理：将沉淀物用生理盐水洗涤，加入低渗液，使细胞膜破裂，染色体释放。

6. 预固定：将低渗处理后的细胞用卡诺氏固定液固定，使染色体固定在特定时期。

7. 染色：将固定后的细胞用Giemsa染液染色，使染色体着色。

8. 滴片：将染色后的细胞滴在载玻片上，盖上盖玻片。

9. 观察与记录：在显微镜下观察染色体的形态特征和数目，并进行记录。

五、实验结果与分析1. 染色体形态特征：观察到的染色体呈带状，具有明显的着丝粒，染色体长度不一，数目与小鼠染色体数目一致。

2. 染色体数目：通过观察，记录小鼠染色体的数目，与文献报道的小鼠染色体数目相符。

六、实验讨论1. 秋水仙素在实验中的作用：秋水仙素可以抑制纺锤体的形成，使染色体停留在有丝分裂的中期，便于观察染色体的形态特征。

2. 染色体固定液的选择：卡诺氏固定液是一种常用的染色体固定液，可以使染色体固定在特定时期，便于观察。

3. 染色体的着色：Giemsa染液是一种常用的染色体染色剂，可以使得染色体着色，便于观察。

七、实验结论本实验成功制作了小鼠骨髓染色体标本，并观察了染色体的形态特征和数目。

小鼠骨髓染色体标本制备实验报告一、实验目的掌握实验动物骨髓染色体标本的一般制备方法；识别有丝分裂中期相的染色体形态；了解小鼠染色体的形态特征及其数目。

二、实验原理用于染色体制备的细胞系需要是分裂增殖旺盛的。

一般临床采用外周血细胞培养，利用植物血凝素刺激淋巴细胞转化为具有分裂能力的淋巴母细胞。

动物骨髓细胞是另一种具有旺盛分裂增殖能力的细胞。

在骨髓细胞中处于分裂相的细胞数目较多。

为了有效积累更多的有丝分裂中期细胞，可在收集骨髓细胞前用秋水仙素对其进行处理，其作用是抑制细胞分裂过程纺锤丝的形成，使细胞有丝分裂停止于中期，可以积累中期分裂相细胞，以便于染色标本的制备。

制备过程中用KCL低渗处理，可使细胞体积膨大，染色体分散。

低渗后，需要用固定液固定染色体。

高位滴片和吹散滴液，可使染色体进一步分散。

用预冷的载玻片滴片后，迅速过火，可使染色体进一步扩散和固定，以便于制片和观察分析。

通过制备小鼠骨髓染色体标本，可以评价毒性物质对动物细胞染色体的影响。

本法可应用于环境致突变剂的检测，具有简单、直接、利于掌握的特点，普通实验室均可应用。

因此本法是检测有害物质对机体遗传物质损伤的常用实验方法之一。

三、实验步骤1、取材：小鼠股骨骨髓细胞取材前4小鼠于小鼠腹腔内注入0.04%的秋水仙素（0.01ml/10g）以积累中期分裂相。

颈椎脱臼法处死小鼠，取其两侧股骨。

将处死后的小鼠腹面朝上，用酒精棉球将皮毛擦拭干净，从外生殖口剪开皮肤，剃净肌肉及内脏，用酒精纱布清除其上粘附的肌肉及结缔组织。

剔除干净后，用剪刀剪去股骨两端少许骨垢及骨皮质，暴露出红骨髓，用5ml预温37℃的0.075M KCL分两次分别从股骨两端冲洗骨髓腔，将冲洗液收集到同一5ml刻度离心管中。

2、低渗：用吸管吸打混匀骨髓细胞，将离心管放置在37℃恒温箱中，低渗处理15-20分钟，使细胞膨胀，染色体分散。

3、预固定：低渗处理完，加入低渗细胞中2-3滴现配的现配的固定液（甲醇：冰醋酸=3:1），立即吹打均匀，平衡后离心，2500rpm，离心5min，去上清，留沉淀。

实验二小鼠骨髓细胞染色体标本制备实验目的：通过制备小鼠骨髓细胞染色体标本，了解染色体结构、形态和变异等方面的知识，为后续核型分析、染色体异常检测等实验打下基础。

实验原理：小鼠骨髓细胞染色体标本制备是指将小鼠骨髓组织中的细胞进行处理后制备成适合观察的染色体标本。

该标本制备方法包括细胞处理，染色体制备和染色体观察等环节。

1.小鼠骨髓细胞处理将小鼠放入固定夹，使用无菌注射器向小鼠腹腔注入适量的钾盐缓冲液（KCl，0.074mol/L）。

钾盐缓冲液的功能是使细胞发生肿胀，探头区别正常细胞和异常细胞。

此外，钾盐缓冲液也有不利的作用，可以导致一些染色体脱落或断裂。

接下来，在小鼠固定夹上进行剖腹，取出骨髓。

骨髓组织放置在一滴含有10%甘露醇的氯仿中进行易位。

在显微镜下观察细胞的形态结构，进行可行性检测。

2.染色体制备取干净的药片，滴入细胞悬液，热外片变性塔。

药片的材料使用高价值玻璃药片，这样可以保证药片平整和染色体不能和药片表面黏附。

加入甘醇一定要多加就能快速促进水分的蒸发，避免液体反应产生气泡而影响结果。

不需要太用力，在药片的表面轻轻涂抹，使液体均匀分布。

接下来，将药片吸入液、95%甲醇，以及3%乙酸中每个5分钟，直到药片完全干燥。

3.染色体观察将药片上的细胞标本置于显微镜上，根据染色体数目和形态等信息进行染色体分析。

在显微镜下观察染色体的特征，包括染色体数量、形态、大小、位置以及异常情况等。

对观察到的染色体进行记录和描述。

实验结果：通过对小鼠骨髓细胞进行染色体制备和检测，我们可以观察到染色体的结构、形态等方面的特征。

此外，通过对染色体的数量和形态进行观察，还可以发现染色体的变异情况，进一步了解染色体的异常情况。

在实际操作过程中，需要注意细胞处理和染色体制备的每一个环节，以保证实验的准确性和可靠性。