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生物显微技术 第三章 细胞化学和组织化学

生物显微技术 第三章 细胞化学和组织化学
❖ 显示脂类的基本原理 ：用易溶于脂类的染料, 使之溶于所检的脂质(如脂滴)中,使组织内的 脂类着色.
❖ 常用方法： 苏丹黑B法、油红O法、硫酸尼 罗蓝法 、苏丹Ⅲ染色法等
❖ 基本要求 ⑴ 不用石蜡切片. ⑵ 固定剂一般用Formalin保存磷脂较好. ⑶ 方法: ① 物理法:脂溶性染料,不溶于水,属 偶 氮染料.常用苏丹Ⅲ,Ⅳ,苏 丹黑 ,油红O等. ② 化学方法:硫酸尼罗蓝显示脂肪酸. ③ 选择 性提取法(对照)
❖ 差不多与此同时(1900-1935年)，发现疾病组织中出 现的物质变化，更促进了化学技术在病理学染色方法 中的应用，也丰富了在显微镜下显示无机物、色素、 脂类、糖类、蛋白质、核酸等物质的组织化学内容， 此后又出现了酶的组织化学等。由此可见，“组织化 学”一词的含意是随时代而变化的，由定位趋向于与 定量相结合的研究。
❖ 3、灌注固定法：从心血管途径将固定剂灌注到全 身或某一个器官，使细胞保持生活时的状态而不发 生移位，固定后再迅速取材。
三、制 片
❖ 涂片法、石蜡切片法、冰冻切片法 ❖ 最常使用的为恒冷箱冰冻切片法。
四、注意事项
❖ 1、实验所用的器械、器皿都必须清洁无污染。 ❖ 2、配制试剂时应使用双蒸馏水。 ❖ 3、固定、取材都应在冷的环境下进行。 ❖ 4、各种试剂的pH值都要调准，否则影响反应结果。 ❖ 5、所用试剂要纯，都必须达到分析纯(A·R级)。 ❖ 6、同时、同条件情况下做阴性和阳性对照。 ❖ 7、了解和掌握被检组织中所要测定的化学物质或
❖ 以下介绍McGee-Ruseell核固红法。 ❖ 1、操作步骤 ❖ (1) 石蜡切片常规脱蜡至水。 ❖ (2)核固红染液染色2一10分钟。 ❖ 核固红染液的配制：核固红2g，蒸馏水100ml洗涤2次，剩

组织化学及免疫组织化学.(DOC)

组织化学及免疫组织化学.(DOC)

临床病理学特殊技术第1节组织与细胞化学（histochemistry and cytochemistry）【概念】运用物理和化学的技术方法显示组织细胞结构中的各种化学成分，并对这些化学物质进行定性、定位、定量，从而分析研究生物在生理或病理状态下细胞组织的代谢、机能及形态变化规律。

细胞化学是研究细胞的化学成分及其在细胞活动中的变化和定位的学科。

对细胞中的不同组分进行区别着色是细胞化学中最基础的工作。

组织化学是指利用细胞或组织中的某些化学成分生成有色沉淀物，对细胞组织中的这些化学成分进行定性、定位和定量分析的特殊技术方法。

细胞化学和组织化学的发展是分不开的，都是建立在细胞学、组织学以及生物化学的基础上。

【基本原理】用于组织与细胞化学研究的染料可以是碱性的也可以是酸性的。

酸性染料的生色基团是硝基和醌基；碱性染料的生色基团，包括着偶氮基吲胺基。

染色的原理是基于在酸性染料中具有染色作用的阴离子和细胞内的碱性物质相结合，而碱性染料中的阳离子和细胞内的酸性物质相结合，所以酸性的细胞成分被碱性染料所染色，而碱性的细胞组分则被酸性染料染色。

组织与细胞中的化学成分和其相应的底物呈一系列的化学反应，形成于显微镜下可见到的反应产物呈色。

常见的细胞化学物质成分染色方法见表2-1，组织化学物质成分染色方法见表2-2。

表2-1 细胞化学物质成分的鉴定* 黏多糖类是蛋白多糖分子中的糖链部分，是黏液（人体的粘膜上皮分泌出来的湿滑液体）的主要化学成分。

由于含酸基的不同，而又分为中性黏多糖（中性黏液）、酸性黏多糖（酸性黏液）和混合性黏多糖（混合性黏液）。

多糖是由多个单糖分子缩合、失水而成，是一类分子机构复杂且庞大的糖类物质。

表2-2 组织化学物质成分的鉴定色素分为人为色素和自生性色素。

人为色素是由于固定剂与组织中某些成分相作用而产生，例如福尔马林色素等。

在某些病理情况下，细胞代谢所产生的沉着的色素，如脂褐素、黑色素、含铁血黄素、嗜银颗粒及组织内的微量金属离子等，需要一些特殊染色加以证明（表2-3）。

细胞化学术ppt课件

细胞化学术ppt课件
免疫细胞化学术
应用抗原与抗体结合的免疫学原理，检测细胞内的多肽、蛋白质及膜抗原和受 体等大分子物质的存在与分布。 其特点是特异性强、敏感性高、进展迅速，应用广泛。 程 序： ﹙1﹚抗原（提取动物某些肽类或蛋白质）→注入另一动物体内
→产生抗体（Ig）→血清分离提取抗体 ﹙2﹚抗体标记
抗体+荧光素（异硫氰酸荧光素）→与相应抗原结合呈黄绿色荧光 抗体+辣根过氧化物酶（HRP）→与相应抗原结合呈棕红色荧光
组织培养术 :
体外研究活细胞或组织的有价值的手段 无菌条件下，取活组织、活细胞（或传代培养的细胞 株）→培养液（天然或人工合成），在一定温度、 O2 、CO2、 、Ph→培养（加某种受试因素）→倒 置显微镜下观察：细胞活组织的增殖、分化、运动、 吞噬等。可连续录像观察。
正常培养细胞
中药组细胞
（4）图像分析术 图像分析术是把计算机、电视和数字图像 处理等结合在一起的一种新技术，可快速 准确地测量组织切片或电镜照片中的微细 结构，通过软件程序获得各项数据。也可 测量组织化学染色切片，根据染色深浅而 提供该物质含量的相对数值。还可以根据 连续的组织切片应用计算机进行三维重建， 该仪器使用面广泛，所得数据迅速、准确。 避免人为因素。
5．形态计量术 形态计量术 是研究组织和细胞内各种有形成分的数量、
体积、表面积等项的绝对或相对值的方法。研究机体某些 结构的立体数值的科学，称为体视学数值以“量”的概念 进一步阐述了结构与功能关系及其病理状态下发生的变化。 目前常用的精密定量方法有以下几种： （1）显微分光光度术 显微分光光度术是显微镜技术与分光光度技术的结合，可 测出细胞内各种化学成分的含量，如测定蛋白质、酶、脂 类、糖及DNA与RNA等含量。
Plastic Reconstr Surg,1977,100:297

细胞化学与组织化学

细胞化学与组织化学
激光扫描共聚焦显微技术，相似于对单个细 胞进行细胞“CT”分析，并能研究活细胞和定量 分析细胞内的遗传物质DNA、RNA、细胞器的 酶含量，细胞内各种荧光标记物(包括分子和离 子的浓度及其分布，如Ca2+和pH值等)，
二、组织化学技术的基本要求
1．尽可能地保持组织和细胞生前的形态结构、化 学成分和酶的活性。必须选择适当的固定液和 恰当的处理方法。
60ml 30ml 10ml
此固定液渗透速度快，2mm以下小块组织固定时 间2～4小时，它是细胞核极好的固定液，适合于细胞 分裂、RNA、DNA及糖元等固定。固定后直接入纯酒精 脱水。
(4) PLP固定液：过碘酸-赖氨酸-多聚甲醛固定液。该固 定剂较适合于富含糖类组织，对超微结构及许多抗 原的抗原性保存较好。
二）偶氮偶联法原理
用人工合成的酶底物，在酶的作用下产生分解
产物，后者与重氮盐结合，引起偶氮偶联反应，而 形成不溶性的偶氮色素。
碱性磷酸酶＋水
α萘基磷酸钠
磷酸氢二钠＋α萘酚
α萘酚＋FAST BLUE
偶氮染料↓
三）过碘酸Schiff氏剂反应法原理
利用细胞中多糖放出的醛基可将Schiff氏剂中的无色品 红转变为紫红色化合物，可于显微镜下观察到。
三、细胞化学技术显示的化学成分：
蛋白质：显示某些特定蛋白、某些氨基酸或功能基； RNA和DNA； 糖类：如糖原、粘多糖和糖脂等； 脂类：如中性脂肪、磷脂和胆固醇等； 酶： 包括水解酶(如磷酸酶、酯酶、肽酶)、氧化酶(琥珀
酸脱氢酶、过氧化酶、细胞色素氧化酶)和激酶、转移酶 等； 生物胺：5-羟色胺、肾上腺素类、组织胺等； 特异抗原：其化学本质可能是多肽、蛋白、糖蛋白等； 无机盐和微量元素：如铁、铜、锌、钴、镁等。

生物显微技术：有关于免疫细胞化学和免疫组织化学

生物显微技术：有关于免疫细胞化学和免疫组织化学
• 3、APES (3-氨丙基-乙氧基甲硅烷)
• 切片必须保持切片刀锐利，切片要薄而平整、无皱摺、无刀 痕，如有上述问题的切片在进行免疫组化染色都将出现假阳 性现象，切片厚度一般为3~4μm，切好的切片在60℃温箱中 过夜，注意烤片的温度不宜过高，否则易使组织细胞结构破 坏，而产生抗原标记定位弥漫现象。
• （三）切片
• 组织得到很好处理后在进行切片之前还应对玻璃片 进行处理，由于我们检测抗原是多种多样的，因染 色操作程序复杂，时间较长，有些抗原要进行各种 抗原修复处理，如微波、高压、水溶酶等，玻片如 果得不到很好的处理，将易造成脱片，为保证免疫 组化实验的正常进行，要求在贴片前对载玻片作适 当处理，必须在清洗干净的玻片上进行粘合剂的处 理以防脱片。
第四章 免疫细胞化学和免疫组织化学
第一节 免疫组织化学概述
• 应用免疫学及组织化学原理，对细胞标本或 组织切片中的某些化学成分进行原位的定性、 定位或定量研究，这种技术称为免疫细胞化 学技术(immunocytochemistry)或免疫组织化 学技术(immunohistochemistry) 。
• 现实市场销售的一抗多为即用型，对抗体的滴度无 须摸索，但对于浓缩型一抗，则应摸索出最佳的工 作滴度。
• 灵敏度高而极易控制背景的检测系统试剂盒是最为 理想也是免疫组化染色优劣的关键，根据免疫组化 技术发展至今第三代SP试剂盒更优于其它试剂盒 (ABC、PAP等)。
• 但应注意检测系统应与一抗来源相匹配，否则检不 出目的物。
• 对于固定液的选择，原则上讲，应根据抗原的耐受 性来选择相应的固定液，但很难做到这一点，10%的 中性缓冲福尔马林或4%缓冲多聚甲醛4倍于组织体积 进行组织固定，但组织固定时间最好在l2h内，一般 固定时间不应超过24h。

血液细胞组织化学

血液细胞组织化学
❖ 研究正常血液细胞的活动与生理功能 ❖ 提高血液病的诊断和鉴别诊断水平
确定急性白血病的类型 有助于某些血液病的鉴别诊断 观察疗效和估计预后 ❖ 探索某些血液病的发病原理及治疗机制
标本的选择
❖ BM片、血片、淋巴结印片、脾印片等均可作 组化染色。
❖ 用于酶染色的标本应尽可能新鲜。 ❖ 用于非酶染色的标本可在室温下放置1个月，
❖ 其他细胞：淋巴细胞、巨核细胞、血小板、 幼红细胞、浆细胞和组织细胞均呈阴性反应。 有的吞噬细胞可呈阳性反应
试剂配制
❖ 0.3%联苯胺酒精溶液： 联苯胺0.3g+95%乙醇全溶后，加入亚硝 基
铁氰化钠饱和水溶液1ml。可保存1-2年。
❖ 过氧化氢溶液配制： 3%过氧化氢1滴+蒸馏水5ml，须每次用时
糖原染色
（Periodic acid-Schiff reaction, PAS）
目的
❖ 红白血病（++++）与巨幼红细胞贫血（- ） 的鉴别诊断
❖ MDS与巨幼红细胞贫血（- ）的鉴别诊断 ❖ 单核细胞白血病（+）与组织细胞病（MH）
的鉴别诊断 ❖ 淋巴肉瘤、何杰金病与急性淋巴细胞白血病
的鉴别诊断 ❖ 高歇病与尼曼- 匹克病的鉴别诊断
如PAS标本。
固定的目的及方法
❖ 目的 保持细胞生前的结构与化学成分，并使血膜在 染色、冲洗过程中不易脱落损坏。
❖ 常用化学固定方法 甲醛蒸汽固定：将滤纸平铺于染色缸底部，加入少 许40%甲醛溶液。将涂片标本放入缸内，加盖使甲 醛蒸汽固定血膜5-10分钟，水洗后晾干。 液体固定：常用的固定液为乙醇、丙酮、甲醇、甲 醛等，也可用两种或两种以上成分组成混合固定液。
血液细胞化学染色检测方法 与应用

常规病理组织学和组织化学ppt课件

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4. 丙酮 acetone 丙酮能使蛋白质沉淀，其渗透力强但对 组织收缩严重；对细胞核的固定欠佳。 目前在组织化学中，特别是酶的保存方 面多采用冷丙酮固定法，主要用于磷酸酶及 氧化酶的固定，有时也用于混合固定液中。
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5. 多聚甲醛缓冲固定液 paraformaldehyde
多聚甲醛 4g，加入0.1mol/L磷酸缓冲液 pH7.2 100ml中，加热60～80℃溶解。
薄切片的小组织块标本的初固定。
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常用混合固定液：
种类很多。
可根据检查目的不同选择不同的固定液。
1. Zenker固定液：
重铬酸钾
2.5 g
升汞 （氯化高汞，HgCl2） 5 g
蒸馏水
100 ml
冰醋酸（临用时加入）
5 ml
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配制方法：首先将重铬酸钾、升汞和蒸馏水混合 后加温溶解，冷却后过滤，置于棕色玻璃瓶中避光保 存，这种配制的液体一般称为Zenker氏干液（储存液、 底液）。此液较为稳定，即使配制1～2年后仍有固定 作用，待组织取材时则在Zenker干液100ml中加入5ml 冰醋酸即可使用，但加入冰醋酸后必须立即使用，否 则失去固定作用。
实用组织化学技术
1
细胞化学和组织化学
cytochemistry and histochemistry 是以细胞学、组织学为基础，运用物理 的和化学的技术方法显示细胞组织结构中各 种化学成分，并对这些化学物质进行定性、 定位、定量（半定量），从而分析研究生物 在生理或病理状态下细胞组织的代谢、机能 及形态变化规律。 其在医学研究中具有广泛的应用价值。
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除掉福尔马林色素颗粒的办法：
① Schridde氏法
2 5％氨水 lml

组化 1


现代组织化学的发展： 原位杂交；原位PCR; 定量组织细胞化学；等
组织学已发展到亚微结构水平，组化定位也发展到 电镜组化水平，如：SDH分布在线粒体，ACP分布 于溶酶体上，为标志酶。 组化技术要求：
1.保存生活形态结构：选择固定方法及种类
2.保存化学成分：了解被检测物特性。 3.保存定位：使反应产物在原位沉淀、色深、不溶， 调整反应条件。 4.有高度特异性：需对照实验，识别假阳性。
2.前处理
3.入孵育液 4.蒸馏水----复染----蒸馏水 5.干燥----脱水----透明----封片
石蜡切片技术;冻结切片技术;细胞培养技术 徕卡CM1900是应用于组织学和临床组织病理学 的一种快速低温恒冷切片机，它是将切片机置于 冷冻室以外的低温恒冷切片机。
CM1900的特色之一是具有大型冷冻室，可冷却 到 -35 ℃。该仪器还可提供一个分隔式的样品冷 却系统，温度调节范围是-10℃～-50℃；可进行 不同样品的切片，每一样品托有各自独立的温度 并可在很短的时间内达到所需温度。快速冷冻站 可同时存放多达10个样品，并和一个可持续冷却 的吸热器相连，以保证样品托上的样品快速冷却。 高质量，无焊接缝的不锈钢冷冻室表面光滑利于 清洁和防止污染。切片机推进系统运作平稳、 流畅。切片厚度为0～60μm,切片精度可达1μm。 其中标本头大小为40mm。此外还可进行电动修 块，有利于更好地进行样品切片。
固定（fix) 目的：除了保存组织细胞的基本形态结构，还必 须尽量保持组织细胞中的化学物质较少丢失。以 至完全无丢失。 方法：浸泡；灌流；蒸汽 注意：1.迅速杀死细胞，用灌流法或骤冷法 2.温度，对酶活性的影响。3.时间，种类。
此外有的是固定后切片，有的则先切片孵育后 再固定，还有些酶不要求用固定剂。

组织化学与细胞化学技术


（一）直接法
是以荧光标记抗体直接与被检标本内的抗原反应。 依据荧光出现的位置及强弱对被检细胞做出判别。该法的 优点为简单特异。但其缺点也很明显即敏感性较低另需制 备大量特异性的荧光抗体。
（二）间接法
间接法采用抗球蛋白试验原理，先制成荧光素标记抗抗 体。检测中先将特异性抗体与被检标本作用一定的时间 后，充分洗去未结合的游离特异性抗体，然后添加荧光素 标记抗抗体使之形成被检抗原－抗体－荧光素标记抗抗体 复合物，由此显示特异荧光并因复合物上带有较多荧光 标志物，所以其敏感性比直接法要高。
neutrophil alkaline phosphatase ,(NAP)
1.原理
细胞内碱性磷酸酶在碱性环境下水解磷酸萘酚，使 之释放出萘酚，后者与重氮盐偶联形成有色沉淀物。 定位于酶活性所在处。
2.参考范围 ：
中性粒细胞碱性磷酸酶活力正常范围2%～56%, 积分 4～80 分 /100个中性粒细胞
组织化学技术: 应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物
学的原理和技术与组织学相结合而产生的技术，能在 组织切片定性、定位地显示某种物质的存在与否以及 分布状态。还可进一步用显微分光光度计或图象分析 仪测定光镜切片中该物质反应的强度，获得定量的信 息。
细胞化学技术: 应用组织化学技术于游离细胞的样品(如细胞涂 片)，则称细胞化学技术。
一 组织细胞化学染色
组织细胞化学染色是将形态和功能相结合的细胞科 学。它是在保持完整的细胞形态和细胞结构的前提下, 运用化学反应将被检细胞内的各类化学成分和细胞结构 及生理活性物质原位地显示。因而对于探索化学成分、 生理功能、新陈代谢及细胞生理和病理改变有着重要的 意义。
组织细胞染色的范围一般可分为：蛋白质类（氨基 酸)、核酸类、多糖类、脂类、盐类或金属类，采用的 方法通常为化学结合物理溶解显示及酶-底物反应。
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解剖盘，注射器，载玻片，显微镜,水浴锅等。
四、实验方法

1．将鲫鱼放入盘中，尾静脉取血,滴一滴血在干净载玻 片一端，推片，按此法制备二张血涂片，室温晾干。 2. 将涂片作好标记放在现配制的Carnoy固定液中固定10 分钟，室温晾干。 3．放入现配制的5％三氯醋酸中90℃(10-15分钟)，抽提 出核酸。 4. 将玻片放在70%乙醇中5-10分钟．清水冲洗多次（3分 钟以上），以冲去痕迹的三氯醋酸。 5．滤纸吸干玻片上水分。 6. 一张片放入0.1％碱性固绿(pH8.0～8.1)中染色15～20分 钟。 7．清水冲洗（3分钟），盖上盖片镜检。
5．实验废弃物、毒害性实验材料应倾倒在指定地 点，统一处置。 6．实验时一律穿工作服，不允许穿拖鞋进实验室， 以免溅落的腐蚀性药品或掉下的玻璃器皿伤 及裸露的皮肤。 7．节约水、电、气，燃气灯应随用随关。最后离 开实验室时，要将室内检查一遍，关好水、电、 气，锁好门窗。 8．实验室内一切物品，未经本室负责教师批准， 严禁携出室外。借物必须办登记手续。 9．实验结束，将实验记录交指导教师审阅并做好 室内清洁工作。
对照片

不进入5％三氯醋酸中抽提出核酸。其他步骤同 上。.
五、实验中注意事项


(1)用5%TCA提取DNA是该实验中的关键。 DNA必须 被提取，以使染色质的负电荷下降，用热TCA提取核 酸后，酸性染料（固绿）在碱性pH下，碱性蛋白可以 选择性地被染色，如未被提取，不能染色，或整个切 片染成蓝绿色，水洗或进入酒精即褪色。 (2)染液pH必须高（ pH8.0~8.1），从而使其他蛋白质 染色极微。

二、实验原理

由于不同的蛋白质分子所带的碱性和酸性基团的数目 不同，在pH值不同的溶液中，蛋白质分子所带的净电 荷多少不同。如在生理条件下，整个蛋白质所带负电 荷多，则为酸性蛋白质；带正电荷多，则为碱性蛋白 质。据此，可将标本经三氯醋酸处理提出核酸后用不 同pH值的固绿染液分别染色，细胞内的酸性蛋白和碱 性蛋白质显示出来。
九、思考题

1.细胞内碱性蛋白显示的基本原理?
2.制作一张好的血涂片应掌握什么技巧? 3.家禽,家畜及鱼类的血细胞有何区别?


十、 实验报告要求
1.绘制自制血涂片中的各种血细胞。 2.示意出细胞中的碱性蛋白（组蛋白）的分布。 3.在每类细胞正下方标注该细胞名称及放大倍率， 并注明细胞膜，细胞质，核膜，用实心小圆点示 意碱性蛋白的分布。颜色用文字说明，禁用彩笔 描绘 。
２）中性粒细胞，又称嗜性粒细胞，圆形，有2～5个分叶核．
３）凝血细胞，又称血栓细胞，相当于其他家畜的血小板；凝血细 胞具有典型细胞形态和结构，比红细胞稍小，两端钝圆，核呈椭圆 形．染色质致密．其他细胞与家畜的血细胞相似．
人 血 涂 片
3.鱼类血涂片
１）红细胞，呈椭圆形，中央有一椭圆形的细胞核．
２）中性粒细胞，又称嗜性粒细胞，圆形，有2～5个分叶核．
三、实验用品

1．材料
鲫鱼
2．试剂
1)carnoy固定液(无水乙醇：氯仿：冰醋酸按6：3：1配制) 一次配制1L. 2)0.1%碱性坚牢绿染液：取0.1 g坚牢绿加入100毫升蒸馏 水，再加少量0.1M NaoH 调节pH至8.0-8.1. 3)5% 三氯醋酸 4)70%乙醇 5)香柏油

3．器材
人 血 涂 片
七、相关理论知识

１．家畜血涂片。低倍镜下观察可见大量圆形而细小的红
细胞。白细胞很少，稀疏地散布于红细胞之间，选白细胞较多 的部位（一般在血膜边缘和血膜尾部，因体积大的细胞常在此 出现） 。 红细胞:呈圆盘状,边缘厚,中间薄,无核。 中性粒细胞:是白细胞中较多的一种,体积比红细胞大,核呈杆状 (为幼稚型,胞核细长,弯曲盘绕成马蹄形,S形,W形或U形等多种 形态)或分叶状,一般分3~5叶或更多，跟该细胞年龄有关。 淋巴细胞：有大中小三种类型，其中小淋巴细胞最多，血膜上 很易看到，体积与红细胞相近．具核，核大而圆．大淋巴细胞 在正常细胞中不常见到，体积与单核细胞相近或略小，胞核圆 形，胞质较小淋巴细胞多。


嗜酸性粒细胞：比中性粒细胞略大，数量少，胞核常分两叶． 嗜碱性粒细胞：数量很少体积与嗜酸性粒细胞相近或略小．胞核呈 Ｓ形或双叶状． 单核细胞：是白细胞中体积最大的一种，胞核呈肾形，马蹄形或不 规则形．细胞质丰富． 血小板：体积小，常三五成群散布在红细胞中． ２．家禽血涂片．鸡血的有形成分与其他家畜比较有以下不同: １）红细胞，呈椭圆形，中央有一椭圆形的细胞核．

实验二、 细胞中酸性磷酸酶的定位
六、血涂片的制作


１.取一滴鲫鱼新鲜的血液，置于玻片的一端，以左手 拿该片的两端，迅速用右手拿住另一载玻片的一端， 在左手载玻片上由前向后接触血滴，使两载玻片约成 ４５°角，轻轻移动，使血滴成一直线，然后由前向 后推为一均匀的薄片。 ２.室温下自然晾干。待晾干后进入到Ｃａｒｎｏｙ固 定液中进行固定。 注意：在制作血涂片的过程中要用力均匀，避免来回 推拉及刮片．好的血涂片在显微镜下观察到的细胞应 成单层均匀排列。
实 验
报
告
格
式
实验(编号)(实验名称) 1.实验目的和要求 2.实验内容 3.实验原理 4.实验操作方法(或步骤) 5.实验结果与分析
实验一 细胞内碱性蛋白的显示 - 组蛋白的显示
南昌大学生命科学学院
主讲: 范 丽 华
一 、实验目的
掌握细胞内碱性蛋白的鉴别方法并了解碱性 蛋白在细胞内的分布。 学会制作血涂片并掌握制作技巧。
３）凝血细胞，又称血栓细胞，相当于其他家畜的血小板；凝血细 胞具有典型细胞形态和结构，比红细胞稍小，两端钝圆，核呈椭圆 形．染色质致密．其他细胞与家畜的血细胞相似．
血栓细胞
成熟红细胞
鱼血细胞图
小淋巴细胞
大淋巴细胞
淋巴细胞
嗜 中 性 粒 细 胞
单 核 细 胞
八、实验结果

经碱性固绿染色片中，胞质、核仁不着色,细胞核大 部分被染成绿色，是为碱性蛋白质存在处。经酸性 固绿染色片中，因胞质和核仁中有酸性蛋白，被染 成绿色。