第七章 发酵过程控制1-2

第七章发酵工艺过程控制11. 发酵工艺过程控制2. 温度对发酵的影响及其控制3. pH值对发酵的影响及其控制4. 溶解氧对发酵的影响及其控制5. 泡沫对发酵的影响及其控制6. 补料（基质浓度）控制7. 发酵过程中的参数检测8. 高密度发酵21.发酵工艺过程控制3发酵过程控制的重要性•过程控制的内容：最佳工艺条件的优选（即最佳工艺参数的确定）以及在发酵过程中通过过程调节达到最适水平的控制。

•过程控制的目的：就是要为生产菌创造一个最适的环境，使所需要的代谢活动得以最充分的表达，以最经济、最大限度地获得发酵产物。

决定发酵水平的因素外部环境因素生物因素：菌株特性(营养要求、生长速率、产物合成速率)设备性能: 传递性能工艺条件物理：T 、Ws化学：pH 、DO 、基质浓度4工业微生物发酵过程52.温度对发酵的影响及其控制影响发酵温度变化的因素温度对微生物生长的影响温度对基质消耗的影响温度对产物合成的影响最适温度的选择与控制62.1 影响发酵温度的因素发酵热就是发酵过程中所产生的净热量Q发酵=Q生物+Q搅拌-Q蒸发-Q辐射产热因素：生物热机械搅拌热散热因素：蒸发热辐射热7（1）生物热Q生物生物热是生产菌在生长繁殖过程中产生的热能。

在发酵过程中，菌体不断利用培养基中的营养物质，将其分解氧化产生能量，一部分用于合成ATP提供细胞代谢产物合成需的能量，另一部分以热的形式散发，这散发出来的热就叫生物热。

影响生物热的因素：菌株发酵类型、培养基、发酵时期8生物热与发酵类型有关微生物进行有氧呼吸产生的热比厌氧发酵产生的热多。

和水一摩尔葡萄糖彻底氧化成CO2好氧：产生287.2千焦耳热量，–183千焦耳转变为高能化合物–104.2千焦以热的形式释放厌氧：产生22.6千焦耳热量，–9.6千焦耳转变为高能化合物–13千焦以热的形式释放9培养过程中生物热的产生具有强烈的时间性细胞呼吸量强弱与生物热的大小有关：1.在培养初期，菌体处于适应期，菌数少，呼吸作用缓慢，产生热量较少。

td
ln 2
m

0.693
m
微生物细胞的倍增时间较短。细菌一般为0.25～1小时，酵母菌约为1.15～2小时，霉菌约为2～6.9小时。 动植物细胞的倍增时间较长，如哺乳动物细胞的td一般为15～100小时，植物细胞约为24～74小时。
③ 减速期 随着细胞的大量繁殖，培养基中的营养物质迅速消耗，目的产物开始大量积累的同时，有害代谢物亦逐渐积累， 细胞的生长速率逐渐下降，进入减速期。当培养液中不存在抑制细胞生长的物质时，细胞的比生长速率和限制性基质浓度S 的关系可用Monod方程来表示：
解淀粉芽孢杆菌LL330 L发酵体系生产γ-PGA
图 红霉素发酵前期OUR、CER 及R Q 趋势曲线图
相关参数：摄氧率( OUR)、二氧化碳释放率(CER )、呼吸商( RQ)、氧传递系数( K La)
4. 分批发酵过程的最优化 分批发酵的最优目的: 以最小的费用获得最大产量。 生产成本: 原料费 + 操作费(通气费+搅拌费)
腺嘌呤、组氨酸、亮氨酸对酵母菌（Y33::YFD71-3）生长和蛋白质合成的影响
④ 稳定期或静止期 由于营养物质耗尽或有害物质的大量积累，使细胞浓度不再增加，这一阶段称为稳定期或静止期。在 稳定期细胞的浓度达到最大值。如果这是由某种营养基质的耗尽所致，而且在细胞的生长过程中细胞的得 率系数Yx/s不变，那么，在稳定期达到的最大细胞浓度为： Xm = X0 + Y x/s S0 式中 Xm 为最大细胞浓度；X0为接种后的细胞浓度；S0为限制性基质的初始浓度。所以，Xm与限制性基质 的初始浓度成线性关系，当X0很低时X0与S0成正比。 ⑤ 哀亡期 由于环境恶化，细胞开始死亡，活细胞浓度不断下降，这一阶段称为衰亡期。有关衰亡期的研究不多， 因多数分批培养在衰亡期前就结束了。可以认为在衰亡期中：

温度提高，合成四环素的比例也提高，温度到达 35 ℃
时，金霉素的合成几乎停顿，只产生四环素。
4、温度还影响基质溶解度
在发酵液中的溶解度也影响菌对某些基质的分解
吸收。因此对发酵过程中的温度要严格控制。
五、最适温度的控制
1、根据菌种及生长阶段来选择 微生物种类不同，所具有的酶系及其性质不同，所要求
在发酵30h，一次性参加0.1%、0.2％、0.3％、0.4％的次黄嘌呤 对鸟苷产量的影响
第五节 菌体浓度与基质对发酵的影响
一、菌体浓度对发酵的影响 菌体浓度与菌体生长速率直接相关 菌体浓度的大小影响产物的得率 控制培养基中营养物质的含量来控制菌体浓
度
二、基质对发酵的影响及控制
1、碳源对发酵的影响及控制
容易实现自动控制 1、化学消泡机理 消泡剂外表张力低，使气泡膜局部的外表张力降低，
使得平衡受到破坏
2、消泡剂选择的依据及常用的消泡剂种类 〔1〕选用依据： ①外表活性剂 ②对气-液界面的散布系数必须足够大 ③无毒害性，且不影响发酵菌体； ④不干扰各种测量仪表的使用； ⑤在水中的溶解度较小 ⑥来源方便，本钱低
二、发酵热的测量及计算
发酵热的测定可采用以下几种方法：
①利用热交换原理，测量一定时间内冷却水的流量和冷 却水进出口温度，根据
Q发酵 = qvC〔t2 – t1〕/V；
qv为冷却水体积流量，L/h；C为水的比热容，kJ/kg ℃；V为发酵液体积，m3
②利用温度变化率：先使罐温恒定，再关闭自控装置，测量温度 随时间上升的速率，根据
异亮氨酸发酵
不同pH控制方式对目的突变株ISw330异亮氨酸摇 瓶发酵的影响，结果如下图。 “1〞表示只加CaC03 控制pH值，“2〞表示只加尿素控制，“3〞表示 CaC03和尿素联合控制pH值。

பைடு நூலகம்
二
微生物培养过程的参数检测
参数在线检测
在线检测必须用专门的传感器（也叫电极或探头） 放入发酵系统，将发酵的一些信息传递出来，为发酵控 制提供依据。
由于微生物培养过程是纯培养过程，无菌要求高， 因此对传感器有特殊要求： 插入罐内的传感器必须能经受高压蒸汽灭菌 （材料、数据）
传感器结构不能存在灭菌不透的死角，以防染 菌（密封性好）
发酵过程的中间分析
发酵过程的中间分析是生产控制的眼睛，它显示了发酵过 程中微生物的主要代谢变化。因为微生物个体极微小，肉 眼无法看见，要了解它的代谢状况，只能从分析一些参数 来判断，所以说中间分析是生产控制的眼睛。 这些代谢参数又称为状态参数，因为它们反映发酵过程中 菌的生理代谢状况，如pH，溶氧，尾气氧，尾气二氧化碳， 粘度，菌浓度等
实验：甘油发酵是在髙渗透压环境中进行的， 因此可望通过热冲击来提高发酵甘油的产量
正交条件A 冲击温度（0C） 40，45，50
B 开始时机（h）
8，16，30
C 冲击时间（分） 15，30，60
A 温度；B 开始时机；C 冲击时间
• 结果发酵16小时，45℃ 冲击30分钟最佳， 发酵96小时后甘油浓度提高32.6％
配制不同初始pH的培养基，摇瓶考察发酵情 况
pH对产海藻酸裂解酶的影响
数理统计学方法：运用统计学方法设计实验和分
析实验结果，得到最佳的实验条件。如正交设计、 均匀设计、响应面设计。 优点 同时进行多因子试验。用少量的实验，经过 数理分析得到单因子实验同样的结果，甚至更准确， 大大提高了实验效率。 但对于生物学实验要求准确性高，因为实验的 最佳条件是经过统计学方法算出来的，如果实验中 存在较大的误差就会得出错误的结果。