专题2 微生物的培养与应用课题2.3 分解纤维素的微生物的分离一、【课题目标】（一）知识与技能简述纤维素酶的种类及作用，从土壤中分离出分解纤维素的微生物；掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术（二）过程与方法分析分离分解纤维素的微生物的实验流程，弄懂实验操作的原理（三）情感、态度与价值观领悟科学探究的方法，发展科学思维和创新能力二、【课题重点】从土壤中分离分解纤维素的微生物三、【课题难点】从土壤中分离分解纤维素的微生物四、【教学方法】启发式教学五、【教学工具】多媒体课件六、【教学过程】（一）引入新课上节课我们探讨学习了土壤中尿素分解菌的分离与计数，这节课我们以纤维素分解菌的分离与纯化为例，巩固加深对这方面技术的理解和掌握。
（二）进行新课1．基础知识活动1：阅读“纤维素与纤维素酶”，回答下列问题：1．1纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。
纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶。
延伸：草食性动物是怎样消化食物中纤维素的？肠胃中的共生物生物。
1．2棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。
纤维素的分解需要在纤维素酶的催化作用下完成，请完成下列过程：〖思考1〗实验分析：P27的小实验是如何构成对照的？在一支试管中添加纤维素酶，另一支试管不添加纤维素酶；尽管醋酸－醋酸钠缓冲液用量不同，但都能维持相同的pH。
〖思考2〗1个酶活力单位是指在温度为 25 ℃，其它反应条件最适宜情况下，在 1 min内转化 1mmol 的底物所需要的酶量。
活动2：阅读“纤维素分解菌的筛选”，回答下列问题：1．3筛选纤维素分解菌的方法是刚果红染色法。
该方法可以通过颜色反应直接筛选。
2．4其原理是：刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
2．实验设计活动3：完成实验方案流程图，讨论回答问题：〖思考3〗实验流程中“选择培养”的培养基类型是什么？该培养的目的是什么？液体选择培养基。
微生物模块一、微生物的实验室：1.培养基(1)概念：人们按照微生物对的不同需求,配制出供其的营养基质。
(2)营养组成：一般都含有和。
此外，还需要满足微生物生长对、氧气以及的要求。
（3）分类培养基(含凝固剂); 培养基(不含凝固剂)（凝固剂是 : 中提取到物质，在下凝固，下熔化）2.无菌技术获得纯净培养物的关键：3.大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤：计算→称量→→→→问题：①.培养基灭菌后，需要冷却到左右时，才能用来倒平板。
你用什么办法来估计培养基的温度？②.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？③.为什么将平板倒置？(2)纯化大肠杆菌的方法①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到的肉眼可见的，即可获得较纯的菌种。
②纯化大肠杆菌的关键步骤：，接种时要在旁，原因是。
③常用的微生物接种方法有两种a. 法：是通过在琼脂固体培养基表面的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
b. 法：是将菌液进行一系列的，然后将的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
问题：①在这两种接种方法中，计数时只能选哪种接种方法？②两种接种方法的目的是：问题①.划线时为什么要从上一次划线的末端开始？②.划线时不能划破培养基，如果划破了会怎样？③.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？④.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？(3)菌种的保存方法①对于频繁使用的菌种，可以采用的方法，接种在试管的培养基上，将试管放入保藏②对于需要长期保存的菌种，可以采用的方法。
4.实验室中筛选微生物的原理是。
二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1.实验原理：(1)能合成的细菌才能分解尿素(2)配制以为唯一的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌，还要涂布一个牛肉膏蛋白胨培养基，以此说明。
⑶可以用加了的培养基进行鉴别，培养基变2.实验流程：土壤取样→配制土壤溶液和制备培养基→→涂布平板与培养→菌落计数3.统计菌落数目的方法方法一：（活菌计数法）；至少要涂布个平板，最后求取值，还要设置一个平板作为对照，以说明一般选择菌落数在的平板进行计数。
