常用培养基和抗生素的配制方法

试剂配制(1)液体LB培养基(-) 1000ml蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g去离子水溶解并定容至1000ml高压灭菌，4℃保存。

(2)氨苄青霉素溶液(100mg/ml) 10ml氨苄青霉素1g去离子水溶解并定容至10ml过滤除菌，-20℃分装保存。

(3)卡那霉素溶液(100mg/ml) 10ml卡那霉素1g去离子水溶解并定容至10ml过滤除菌，-20℃分装保存。

(4)固体LB培养基(-) 1000ml蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g琼脂糖粉15g去离子水溶解并定容至1000ml高压灭菌后铺平板(6cm培养皿)，冷却后4℃保存。

(5)含抗生素LB固体培养基1000ml固体LB培养基溶液1000ml高压灭菌，当培养基降温至50℃左右，加入终浓度为100Rg/ml的氨苄青霉素或100Rg/ml卡那霉素，并铺平板(6cm培养皿)，冷却后，4℃保存。

(6)0.1M CaCl2溶液一制备感受态1000ml氯化钙11.099g去离子水溶解，定容至1000ml高压灭菌后4℃保存。

(7)0.1M MgCl2溶液一制备感受态1000ml氯化镁9.521g去离子水溶解，定容至1000ml高压灭菌后4℃保存。

(8)0.1M CaCl2-15%甘油溶液---制备感受态1000ml氯化钙9.521g50%甘油300ml去离子水溶解，定容至1000ml高压灭菌后4℃保存。

(9)50％甘油溶液100ml甘油50ml去离子水50ml(10)0.5M EDTA 溶液(PH=8.0) 500mlEDTA 93.05g去离子水溶解，NaOH调PH至8.0,定容至500ml。

(11)10%SDS 溶液100mlSDS 10g去离子水溶解，定容至100ml。

(12)5M乙酸钾溶液100ml5M乙酸钾49.07g去离子水溶解，定容至100ml，室温保存。

(13)1MTris-HCl 溶液(pH=8.0) 100mlTris 碱12.1g去离子水溶解，定容至100ml，浓盐酸调pH值至8.0，室温保存。

常用培养基配方汇总1. 营养琼脂培养基 (Nutrient Agar)- 夏洛特奥康纳 (Charlote A. O'Connor) 配方:-蛋白胨:5克-麦芽提取物:3克-胰蛋白酶胨:1.5克-硫酸镁:0.2克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。

2. 肉蔗糖琼脂培养基 (Tryptic Soy Agar, TSA)- 条件反射琼脂 (孟德尔和赛尼·特鲁斯 ('Sneath and Tres') 配方):-牛肉蛋白胨:17克-大豆酪蛋白胨:3克-肉汤提取物:5克-葡萄糖:2.5克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。

3. MAC琼脂培养基 (MacConkey Agar)- 麦康奈 (MacConkey) 配方:-紫胆杆菌胨:17克-葡萄糖:1.5克-硫酸盐:1.5克-中性红:0.03克-石蕊:0.3克-氯化钠:5克-地膜:10克-pH值调整到7.1-7.5-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。

4. LB琼脂培养基 (Luria-Bertani Agar)- 古斯塔夫·诺维斯 ('Gustaf Novis') 配方:-研磨大豆饼粉:10克-酵母提取物:5克-部分脱脂酪蛋白:5克-氯化钠:1克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。

5. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 (Potato Dextrose Agar, PDA)- 林登麦卡蒂 ('Lindenmuth and McCarty') 配方:-马铃薯提取物:4克-葡萄糖:20克-地膜:15克-pH值调整到5.6-5.8-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。

这些是一些常用的培养基配方，适用于细菌和真菌的培养。

细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法、常用培养基1、LB 培养基将下列组分溶解在0.9L 水中：蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用INNaOH （〜1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。

注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。

2 、SOB 培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1mol/L 氯化钾2.5ml用水补足体积到1L。

分成100ml的小份，高压灭菌。

培养基冷却到室温后，再在每100ml 的小份中加1ml 灭过菌的1mol/L 氯化镁。

3、SOC培养基成分、方法同SOB培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后，除了在每100ml的小份中加1ml 灭过菌的1mol/L 氯化镁外，再加2ml 灭菌的1mol/L 葡萄糖（18g 葡萄糖溶于足够水中，再用水补足到100ml，用0.22um的滤膜过滤除菌）。

4 、TB 培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨12g酵母提取物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。

冷却到60 C , 再加100ml灭菌的170mmol/LKH2PO4/0.72mol/LK2HPO4 的溶液（2.31g 的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中，使终体积为100ml。

高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌）。

5、2X Y培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨16g酵母提取物10g氯化钠4ml如果需要用INNaOH (〜1ml )调整pH 至7.0，再补足水至1L 。

注：琼脂平板需添加琼脂粉 12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉 7g/L 。

6、YPD 培 养基将下列组分溶解在 0.9L 水中： 蛋白胨 20g 酵母提取物 10g 葡萄糖 20g用水补足体积为 1L 后，高压灭菌。

建议在高压灭菌之前，对色氨酸营养缺陷型每升培养基 添加1.6g 色氨酸，因为 YPD 培养基是色氨酸限制型培养基。

常用培养基参考文献1.Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks,L.C., CRC Press, N.Y., 1997.2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.常用储存液参考文献1.Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks,L.C., CRC Press, N.Y., 1997.2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.常用缓冲液10X 磷酸盐缓冲液(储存液) (PBS) /升终1 X浓度NaCl 80.0 g 137 mMKCl 2.0 g 2.7 mMNa2HPO414.4 g 100 mMKH2PO42.7 g 2 mMH2O 至800 mlHCl 至pH 7.4H2O 至1升20X SSC /升终1 X浓度NaCl 175.3 g 150 mMNa3citrate x H2O 88.2 g 15 mMH2O 至800 ml 1M HCl调节pH值至7.0Tricine 179.2 g 0.1 MSDS 10.0 g 0.1% (w/v) O 至1升H2稀释溶液的pH至8.350X TAE (Tris-醋酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri 碱242.0 g 40 mM冰醋酸57.1 ml 20 mM0.5 M EDTA (pH 8.0) 100 ml 2% mMO 至1升H2稀释溶液的pH大约为~8.510X TBE (Tris-硼酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri 碱108.0 g 90 mM硼酸55.0 g 90 mM0.5 M EDTA (pH 8.0) 40 ml 2% mMHO 至1升210X TPE (Tris-磷酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri 碱108.0 g 90 mM磷酸(85%) 15.5 ml 23 mM0.5 M EDTA (pH 8.0) 40 ml 2% mMO 至1升H2TE (Tris-EDTA) 缓冲液pH 7.4, 7.6或8.0 /升终1 X浓度参考文献1.Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks,L.C., CRC Press, N.Y., 1997.2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.常用缩写下面红色字体为赠送的个人总结模板，不需要的朋友下载后可以编辑删除xx年电气工程师个人年终总结模板根据防止人身事故和电气误操作事故专项整治工作要求，我班针对现阶段安全生产工作的特点和重点，为进一步加强落实安全工作，特制定了防止人身事故和防电气误操作事故的(两防)实施细则。

培养基配方及配置
一般来说，培养基的配方包含基础培养基、添加剂和调节剂。

基础培养基是指提供生物体基本生长必需的基本成分，包括能源物质、有机和无机原料、氮源、矿质元素和缓冲物质等。

常用的基础培养基有
LB培养基、MS培养基等。

添加剂是指用于满足特定实验需求的成分，如抗生素、抗菌剂、激素、维生素等。

添加剂的种类和浓度根据实验目的的不同而有所差异。

调节剂是指用于调节培养基pH值、渗透压、表面张力等物理化学性
质的成分，如缓冲液、pH调节剂等。

以下是一个常用的细菌培养基LB的配方及配置：
1.基础培养基成分：
- 水：900ml
-蛋白胨：10g
-酵母提取物：5g
-NaCl：5g
2.添加剂：（可根据实验需求进行必要的添加）
- 抗生素（如氨苄青霉素）：100μg/ml
- 抗菌剂（如氯霉素）：25μg/ml
3.配制方法：
-将蛋白胨、酵母提取物和NaCl加入水中，并搅拌混合均匀。

- 将培养基溶液倒入容量瓶中，加水至1000ml，并混合均匀。

-调节pH值至7.0-7.2（一般使用缓冲液进行调节）。

-用自制滤纸过滤器滤过，将溶液分装至培养皿或试管中。

-如需添加抗生素或抗菌剂，将相应的药物加入培养基中，并充分溶解。

-培养基装瓶后可以高温高压灭菌，或使用滤器过滤进行无菌处理。

以上是一个简单的LB培养基的配方和配置流程，不同实验需要可能
会有所调整和变化。

在设计培养基配方时，需要结合具体实验目的和生物
体的特性来确定合适的成分和浓度，并注意配制和保管过程中的无菌操作，以确保培养基的质量和有效性。

培养基配方及配置培养基是一种提供养分和条件给细胞、组织或微生物生长和繁殖的人工环境。

不同种类的细胞或微生物，需要不同的培养基来满足其生长和繁殖的需求。

下面将介绍细胞和微生物培养基的配方及配置方法。

1.培养基配方：不同细胞或微生物的培养基配方各有不同，下面是常用的细胞培养基的配方示例：-DMEM培养基配方：Dulbecco’s Modified Eagle Medium（DMEM）是一种广泛应用于动物细胞培养的基础培养基。

其主要成分包括：- 无铁媒介物（Iron Medium）：DMEM中通常包含高浓度的铁盐，例如铁氯化物。

- 糖类（Glucose）：DMEM中通常包含葡萄糖，用于提供能量供细胞代谢。

- 氨基酸（Amino acids）：DMEM中包含多种氨基酸，用于蛋白质的合成。

- 维生素（Vitamins）：DMEM中通常添加B族维生素和其他必需维生素。

- 盐类（Salts）：DMEM中含有多种无机盐，例如氯化钠、磷酸盐等。

- 缓冲液（Buffer）：DMEM中的缓冲液用于维持培养基的pH值。

- 补充物（Supplements）：DMEM中可添加血清、激素和生长因子等提供细胞生长所需的物质。

-LB培养基配方：大肠杆菌（Escherichia coli）的最常用培养基是Luria-Bertani （LB）培养基。

其主要成分包括：- 蛋白质源（Protein source）：LB培养基中通常添加琼脂和酵母提取物作为蛋白质源。

- 碳源（Carbon source）：LB培养基中添加葡萄糖等碳源供菌落生长所需。

- 盐类（Salts）：LB培养基中含有多种无机盐，例如氯化钠、磷酸盐等。

- 缓冲液（Buffer）：LB培养基的缓冲液用于维持培养基的pH值。

- 抗生素（Antibiotics）：LB培养基中添加抗生素，用于选择性培养目标菌株。

- 补充物（Supplements）：在LB培养基中还可以添加亲水胶体、氧化还原剂等。

牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）121℃灭菌20min。

2、高氏（Gause）1号培养基（培养放线菌用）配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至1000mL。

121℃灭菌20min。

3、查氏（Czapek）培养基（培养霉菌用）121℃灭菌20min。

4、马丁氏（Martin）琼脂培养基（分离真菌用）112℃灭菌30min。

临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30μg。

5、马铃薯培养基（简称PDA）（培养真菌用）培养基的配制：马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，熔化后补足水至1000mL。

121℃灭菌30min。

6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制：(1)、取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，至15℃阴暗处发芽，上面盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。

(2)、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。

加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

(4)、将滤液稀释到5—6波美度，pH约6.4，加入2%琼脂即成。

121℃灭菌30min。

7、无氮培养基（自生固氮菌、钾细菌）113℃灭菌30min。

8、半固体肉膏蛋白胨培养基121℃灭菌20min。

9、合成培养基加12 mL0.04%的溴钾酚紫（pH5.2—6.8，颜色由黄变紫，作指示剂）。

121℃灭菌20min。

10、豆芽汁蔗糖（或葡萄糖）培养基培养基的配制：称新鲜豆芽100g，放入烧杯中，加入水1000mL，煮沸约30min，用纱布过滤。

用水补足原量，再加入蔗糖（或葡萄糖）50g，煮沸熔化。

常用抗生素配制方法1. 青霉素配制方法* 材料：青霉素粉末、溶剂、注射用水、注射器、温度计* 步骤：1. 在无菌条件下，将青霉素粉末倒入干净的中。

2. 加入适量的溶剂，根据青霉素粉末的说明书确定比例。

3. 用注射器将注射用水逐渐加入溶剂中，同时搅拌均匀，直至完全溶解。

4. 使用温度计检查溶液的温度，确保温度适宜。

5. 将配制好的青霉素溶液用无菌滤器过滤，以去除杂质。

6. 将过滤后的溶液倒入无菌中，盖上盖子，密封保存。

2. 氨基糖苷类抗生素配制方法* 材料：氨基糖苷类抗生素粉末、溶剂、注射用水、注射器、温度计* 步骤：1. 在无菌条件下，将氨基糖苷类抗生素粉末倒入干净的中。

2. 加入适量的溶剂，根据氨基糖苷类抗生素粉末的说明书确定比例。

3. 用注射器将注射用水逐渐加入溶剂中，同时搅拌均匀，直至完全溶解。

4. 使用温度计检查溶液的温度，确保温度适宜。

5. 将配制好的氨基糖苷类抗生素溶液用无菌滤器过滤，以去除杂质。

6. 将过滤后的溶液倒入无菌中，盖上盖子，密封保存。

3. 头孢菌素类抗生素配制方法* 材料：头孢菌素类抗生素粉末、溶剂、注射用水、注射器、温度计* 步骤：1. 在无菌条件下，将头孢菌素类抗生素粉末倒入干净的中。

2. 加入适量的溶剂，根据头孢菌素类抗生素粉末的说明书确定比例。

3. 用注射器将注射用水逐渐加入溶剂中，同时搅拌均匀，直至完全溶解。

4. 使用温度计检查溶液的温度，确保温度适宜。

5. 将配制好的头孢菌素类抗生素溶液用无菌滤器过滤，以去除杂质。

6. 将过滤后的溶液倒入无菌中，盖上盖子，密封保存。

以上是常用抗生素的配制方法，需要在无菌环境下进行，确保配制过程中的卫生和安全。

请参照药品的说明书选择适当的溶剂和比例，并严格按照步骤操作，以确保配制出的抗生素溶液的质量和纯度。

配制好的抗生素溶液应及时使用或密封保存，避免污染和损失。

MS 培养基一、大量元素母液1：大量A母液2：大量B母液3：Fe盐注：配制顺序如下1。

称取3。

73 g Na2—EDTA•2H2O溶解于200 ml去离子水中,并置于70℃预热(A）；2. 称取2.78 g FeSO4•7H2O溶解于200 ml去离子水中（B）;3. 将B缓慢倒入A中混合，边倒边搅动,置于70 ℃水浴锅中螯合2 h；4. 冷却后定容至1 L。

二、微量元素母液4：微量三、有机物质母液5：有机（不含肌醇）℃注:配固体培养基可在调pH后加适量Agar或Phytagel；肌醇也可加入有机母液。

四、抗生素和激素母液试剂名称配制方法母液浓度Amp（氨苄青霉素) 双蒸水溶解，定容，过滤灭菌50 mg/ ml Km(卡那霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌50 mg/ ml Str（链霉素）双蒸水溶解,定容，过滤灭菌50 mg/ ml Cb（羧苄青霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌250 mg/ ml 6-BA (6-苄基嘌呤) 1M NaOH或盐酸溶解，双蒸水定容，高压灭菌 1 mg/ ml NAA（萘乙酸) 1M NaOH溶解，双蒸水定容，高压灭菌 1 mg/ ml IAA 95% 乙醇溶解,双蒸水定容，过滤灭菌 1 mg/ ml五、乙酰丁香酮(Acetone—syringone，AS）称取196。

2 mg AS用10 ml DMSO溶解，母液浓度100 mM，-20℃避光保存,工作浓度100 ～200 μM六、MS溶液的混合5种母液分别依次加入到800 ml蒸馏水中,混匀后加入肌醇、蔗糖和能高压灭菌的激素（6-BA和NAA）,定溶至1000 ml，用1M NaOH调pH至5.8。

最后加Phytagel （Sigma)4.4g或Agar 10g。

灭菌完后，在培养基凝固前加入AS或抗生素及不能高压灭菌的激素(IAA）.。

实验室36种微生物培养基配制方法实验室养菌基是为微生物的培养和研究提供合适营养和条件的培养基质。

不同微生物对培养基的要求各不相同，因此实验室通常需要配制多种不同的培养基。

下面是36种常用的微生物培养基的配制方法。

一、通用培养基1. 营养琼脂培养基（Nutrient Agar）营养琼脂培养基是一种通用的培养基，适用于大多数微生物的培养。

其配方为：蛋白胨10克、葡萄糖5克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。

将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，加入琼脂，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。

2. 营养肉膏培养基（Nutrient Broth）营养肉膏培养基是一种通用的液体培养基，适用于大多数微生物的培养。

其配方为：蛋白胨10克、牛肉提取物5克、葡萄糖5克、蒸馏水1000毫升。

将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，高压灭菌，分装，即可使用。

3. 大肠杆菌选择性培养基（MacConkey Agar）大肠杆菌选择性培养基是一种常用的培养基，用于选择和鉴定大肠杆菌。

其配方为：蛋白胨17克、葡萄糖1.5克、恶瓜胆汁5克、硼酸紫0.5克、亮矾0.09克、蒸馏水1000毫升。

将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，加入琼脂，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。

4. Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基（Sabouraud Dextrose Agar）Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基是用于真菌的培养和鉴定。

其配方为：脱氧胆汁10克、蔗糖40克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。

将以上成分溶解、调节pH至5.6-6.4，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。

二、选择性培养基1. VC菌属选择性平皿培养基（Vogel-Johnson Agar）VC菌属选择性平皿培养基是用于选择和鉴定Voges-Proskauer菌属（如克雷伯菌）的培养基。

其配方为：葡萄糖1克、琼脂15克、盐酸75克、蒸馏水1000毫升。

将以上成分溶解、加热煮沸，冷却至55-60°C，加入胆盐酯高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。

抗生素敏感实验操作方法
抗生素敏感实验是一种常用的实验方法，以下是其操作方法的大致步骤：
1. 准备培养基：根据实验要求选择合适的培养基（如米勒尔等培养基），加入适量的琼脂或明胶，用适量的蒸馏水溶解并加热至沸腾，然后冷却至约45-50摄氏度。

2. 配制菌液：从培养基中提取待测细菌株的菌液。

可以选择直接研磨菌落并加入生理盐水或培养基中，或者刷取菌落并悬浮于生理盐水或培养基中。

3. 能均匀涂布于琼脂培养平板上：取一块无菌玻璃棒，浸入菌液中，然后均匀涂布于琼脂培养平板表面。

4. 形成细菌草，培养：待液体被吸收后，将平板倒立于37摄氏度的培养箱中，静置一段时间以让细菌草在琼脂上形成。

5. 在琼脂上滴加抗生素：选择合适的抗生素（如青霉素、链霉素等），制备不同浓度的抗生素溶液。

将适量的抗生素溶液（通常是10μl）滴在琼脂培养平板上，注意不要穿透琼脂。

6. 培养：将含有抗生素的琼脂培养平板置于37摄氏度的培养箱中，培养一段时间（通常为24小时）。

7. 结果观察：观察不同浓度的抗生素溶液对细菌草的影响，记录抗生素浓度与细菌生长情况的关系。

根据细菌生长情况，可以判断该细菌对抗生素的敏感性。

LB培养基配方
液态培养基
根据《分子克隆实验指南》（J.萨姆布鲁克 D.W.拉塞尔著）配制每升培养基,应该在950 ml去离子水中加入:
胰化蛋白胨10g
酵母提取物5g
NaCl 10g
摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌20min.（1.05kg/cm3）
LB培养基是一种培养基的名称,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求.培养的菌种一般是经过改造的无法在外界环境单独存活和扩增的工程菌.通过培养工程菌,我们可以表达大量的外源蛋白,也可以拿到带有外源基因的质粒,工程菌的有效扩增是生化分子实验的基础.
LB培养基的配方如下:
胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L
酵母提取物(Yeast extract) 5g/L
氯化钠(NaCl) 10g/L
另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH,使其达到7.4(该pH适合目前使用最广的原核表达菌种E.coli的生长)
固态培养基
LB固体培养基1L和液体一样，加15g琼脂粉，一定要在温度降下之前加好抗生素，并且倒好板。

LB固体培养基倒板
1.配制：100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉
2.抗生素的加入：高压灭菌后，将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中，待培养基温度降到55℃时（手可触摸）加入抗生素，以免温度过高导致抗生素失效，并充分摇匀。

3.倒板：一般10ml倒1个板子。

培养基倒入培养皿后，打开盖子，在紫外下照10-15分钟。

4.保存：用封口胶封边，并倒置放于4℃保存，一个月内使用。

抗生素终浓度Amp 100ug/ml,Kan 50ug/ml.。

常用培养基配方范文培养基配方是微生物学研究的基础，它们提供了养分和条件，促进微生物的生长和繁殖。

常用培养基配方有多种，以下是几个常用的配方范文。

一、莱文斯坦－鲍德尔培养基（Luria-Bertani agar）配方：成分：1.蛋白胨：10克2.酵母提取物：5克3.食盐：10克4.琼脂：15克5.蒸馏水：1000毫升6.高氯酸钠（0.1M）：2毫升（pH7.2）制备方法：1.将蛋白胨、酵母提取物和食盐加入蒸馏水中，加热至溶解。

2.加入琼脂并搅拌均匀，再加入高氯酸钠调节pH值。

3.煮沸1~2分钟，然后分装入培养皿中。

注意事项：1.注意消毒操作，以防止污染。

2.琼脂的煮沸时间通常为15~20分钟。

二、营养琼脂培养基（Nutrient agar）配方：成分：1.蛋白胨：5克2.细胞色素：1克3.维生素B1：0.1克4.卵黄：10克5.食盐：5克6.琼脂：15克7.蒸馏水：1000毫升制备方法：1.将蛋白胨、细胞色素、维生素B1、卵黄和食盐加入蒸馏水中并加热溶解。

2.加入琼脂并搅拌均匀。

3.煮沸1~2分钟，然后分装入培养皿中。

注意事项：1.注意消毒操作，以防止污染。

2.煮沸时间可根据需要适当延长，但不要超过20分钟。

三、马尿素琼脂培养基（MacConkey agar）配方：成分：1.蛋白胨：17克2.硼砂：1.5克3.细胞色素：2.5克4.氯化钠：5克5.水合甲基红：0.03克6.钴绿：0.015克7.红绿二色砂：0.15克8.琼脂：13.5克9.蒸馏水：1000毫升制备方法：1.将蛋白胨、硼砂、细胞色素、氯化钠、水合甲基红、钴绿和红绿二色砂加入蒸馏水中并加热溶解。

2.加入琼脂并搅拌均匀。

3.煮沸1~2分钟，然后分装入培养皿中。

注意事项：1.注意消毒操作，以防止污染。

2.此培养基适用于选择肠道革兰氏阴性杆菌。

以上是常用的几个培养基配方范文，供参考使用。

在制备培养基时，需要注意消毒操作，以防止污染。

另外，不同微生物对培养基的要求也有所不同，可以根据实际需要进行配方的修改和优化。

常见实验用溶液的配制方法默认分类 2008-07-04 14:10:54 阅读4 评论0 字号：大中小一、常用溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）：溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。

分装成小份，贮存于-20℃。

1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。

分装成小份，贮存于-20℃。

10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。

10mg/ml牛血清蛋白(BSA)：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。

不要涡旋混合。

加水定容到10ml，然后分装成小份，贮存于-20℃。

1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。

或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。

8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。

1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。

3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。

0.5mol/L EDTA：配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。

或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。

1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH（6.8-8.2），然后用水定容至100ml。

实验室36种微生物培养基配制方法1.牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，水1000mL，pH7.4～7.6。

2.高氏1号培养基(用于放线菌培养)可溶性淀粉20g，KNO₃ 1g，NaCl 0.5g，K2HPO4•3H2O 0.5g，MgSO4•7H2O0.5g，FeSO4•7H2O0.01g•水1000mL•pH7.4～7.6。

配制时注意：可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。

3.马丁氏（Martin）培养基（用于从土壤中分离真菌）K2HPO 41g，MgSO4•7H2O 0.5g，蛋白胨 5g，葡萄糖 10g，1/3000孟加拉红水溶液100mL，水900mL，自然pH，121℃湿热灭菌30min。

待培养基融化后冷却55～60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL)。

4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯(去皮) 200g，蔗糖(或葡萄糖)20g，水1000mL，配制方法如下：将马铃署去皮，切成约2cm²的小块，放入1500mL的烧杯中煮沸30min，注意用玻棒搅拌以防糊底，然后用双层纱布过滤，取其滤液加糖，再补足至1000mL，自然pH，霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。

5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)蔗糖 30g，NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO4•7H2O 0.5g，KCl 0.5g，FeSO4•7H2O 0.1g，水1000mL，pH7.0～7.2。

6.Hayflik培养基(用于支原体培养)牛心消化液(或浸出液) 1000mL，蛋白胨 10g，NaCl 5g，琼脂15g，pH7.8～8.0，分装每瓶 70mL，121℃湿热灭菌15min，待冷却至80℃左右，每70mL中加入马血清20mL，25%鲜酵母浸出液10mL，15醋酸铊水溶液2.5mL，青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上) 0.5mL，以上混合后倾注平板。