凝聚胺方法不规则抗体 PPT课件

不规则抗体筛查标准操作规程(一)检验目的检测受血者、孕妇等血清中是否存在抗A、抗B以外的不规则抗体，为交叉配血、ABO血型正确定型(不规则抗体干扰反定型)以及新生儿溶血病产前、产后诊断提供参考依据。

(二)检验原理1.盐水介质法IgM类不规则抗体可以在室温盐水介质中发生凝集反应，使用手工试管法就可以判断受检者血液中是否存在IgM类不规则抗体。

2.凝聚胺法利用多聚季胺盐类——凝聚胺携带很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆性凝集。

无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝集消散，而被不规则抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能消散，以此来判断受检者血液中是否存在不规则抗体。

3.微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。

4.玻璃珠微柱法微柱卡的每一个微管中装填有直径均一的玻璃微珠和抗人球蛋白试剂(抗-IgG和抗补体C3)，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，而未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。

(三)适用范围适用于手工凝聚胺法、手工微柱凝胶法、手工玻璃珠微柱法、全自动微柱凝胶法、全自动玻璃珠微柱法不规则抗体筛查及鉴定试验。

(四)设备性能参数各种用于不规则抗体筛查试验的检测系统性能指标参见相应说明书。

(五)器材与试剂1.器材KA-2200血清学专用离心机、B600-A型低速离心机、WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro Au-toVuelnnova全自动血型配血系统、阅片灯箱、卡式专用离心机、孵育器、塑料软试管、塑料硬质试管(75m m×l2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、移液器、一次性移液枪头。

不规则抗体筛选方法的比较李炜华【摘要】目的探讨筛选血型抗体的最佳方法及意义.方法 11例阳性标本分别用盐水法、凝聚胺法(Polybrene)、抗人球蛋白法、微柱凝胶免疫法进行抗体筛选及特异性鉴定.结果除盐水法外,其它三种方法均能检测出IgG型抗体,阳性符合率为100%.但灵敏度有所差异.结论各种血型血清学试验都有其自身的特点,适用于不同范围及不同情况.随着技术不断的发展,微柱凝胶是抗人球蛋白法很好的替代方法.【期刊名称】《右江民族医学院学报》【年(卷),期】2011(033)004【总页数】2页(P497-498)【关键词】血型;输血;盐水法;凝聚胺法;抗人球蛋白法;微柱凝胶免疫检测法;不规则抗体【作者】李炜华【作者单位】江苏省宿迁市中心血站,江苏,宿迁,223800【正文语种】中文【中图分类】R446.622;R457.13不规则抗体是指除ABO血型系统以外的所有抗体。

对受血者的血浆做常规的抗体筛选试验以发现有临床意义的不规则抗体,从而避免输血的不良反应,保证临床用血的安全,特别是对有输血史和妊娠史的择期手术患者有更为重要的临床意义。

抗体检测还可以协助临床诊断自身溶血性贫血、新生儿溶血病及溶血性输血反应。

由于筛选方法较多,灵敏度、准确性和重复性均有所不同,故各实验室采用的方法不同。

笔者对2009年12月1日～2010年11月30日期间各医院送至本站的需输血患者的血浆进行抗体筛选,并对阳性的标本分别用盐水法、凝聚胺法、抗人球蛋白法、微柱凝胶免疫检测法进行了检测,并对结果、灵敏度、所用时间及所用血浆量进行了比较与分析,现报告如下:1 材料与方法1.1 材料筛选红细胞由上海输血技术有限公司提供;凝聚胺由BASO公司提供;抗人球蛋白试剂由上海血液生物医药有限责任公司提供;微柱凝胶免疫检测卡由长春博迅生物制品有限公司提供;免疫微柱孵育器及血型血清学多用离心机均由长春博研科研仪器有限公司提供。

1.2 标本 2009年 12月 1日～2010年11月30日各医院送至本站的需输血患者的血浆,共计3 020份。

不规则抗体筛查试验（SOP）【产品名称】通用名称：不规则抗体检测试剂（人血红细胞）英文名称：Red Blood Cells Reagent for Irregular Antibody Test【包装规格】每盒有OⅠ、OⅡ、OⅢ红细胞各1瓶，5ml/瓶，浓度4%。

【生产企业】企业名称：长春博迅生物技术有限责任公司【预期用途】有临床意义的不规则抗体会导致溶血性输血反应，破坏输入的红细胞或缩短其寿命，轻则影响治疗效果，重则危及病人生命；对于孕妇而言，不规则抗体会引起新生儿溶血病，影响新生儿脏器及智力发育，严重者则会危及新生儿的生命。

对受血者和献血者进行不规则抗体检测，能够发现有临床意义的抗体，从而减少溶血性输血反应。

本品采用凝聚胺方法检测待检血浆（血清）是否存在不规则抗体，只用于临床检测，不用于血源筛查。

【检验原理】本实验原理为血凝试验。

红细胞上含有D、C、E、c、e、Jk a、Jk b、M、N、s、Fy a、Fy b、k、Le a、Le b、P1，该实验用已知抗原的红细胞与待检血浆（血清）孵育，以发现待检血浆（血清）中是否存在不规则抗体。

【主要组成成份】本品由3人份（单人份/瓶）直接抗人球蛋白试验阴性的O型健康成人红细胞组成，红细胞上含有能引起溶血性输血反应的抗原，抗原谱至少包括Rh系统的D、C、E、c、e抗原，Kidd系统的Jk a、Jk b抗原，MNS系统的M、N、s抗原，Kell系统的k抗原，Duffy系统的Fy a、Fy b抗原，Lewis系统的Le a、Le b抗原，P系统的P1抗原。

每套试剂红细胞中至少有2人份红细胞含有D、C、c、e、s、Fy a、k抗原，至少1人份红细胞含有E、Jk a、Jk b、M、N、Fy b、Le a、Le b、P1抗原。

OⅠ红细胞5ml×1OⅡ红细胞5ml×1OⅢ红细胞5ml×1不同批号的红细胞试剂不可以互换。

【储存条件及有效期】2~8℃保存。

不规则抗体检查不规则抗体检查也称红细胞抗体检查。

不规则抗体是指抗Ａ、抗Ｂ以外的血型抗体。

ＡＢＯ系中的亚型,变异型抗Ａ1或某种抗Ｂ等抗体,也称为不规则抗体。

其多为ＩｇＧ抗体。

主要是经输血或妊娠等免疫刺激产生,在盐水介质中不能凝集而只能致敏相应抗原的红细胞,必须通过特殊介质才能使致敏红细胞出现凝集反应。

临床上通常所称的“同型血”实际上是指ＡＢＯ血型系统和Ｒｈ血型系统相同,其它红细胞血型系统未必相同。

如果交叉配血不仔细，或者只用盐水介质配血,则有可能检查不出ＡＢＯ血型系统之外的不规则抗体，而此抗体与相应抗原发生免疫反应,可导致溶血性输血反应的发生.红细胞血型抗体检查适用于下列情况：1、ABO血型鉴定发现受检者血清中有意外抗体时；2、供血者血清抗体筛检;3、输血前受者血清抗体检查；4、输血后溶血反应疑为由同种抗体引起时；5、孕妇血清的抗体检查；6、新生儿溶液血病婴儿血液中抗体检查；7、直接抗球蛋白试验阳性红细胞上抗体的检查。

1. 原理利用筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）上存在的多种红细胞抗原与被检血清在凝聚胺介质中反应，如果出现凝集表示血清中存在不规则抗体。

2. 试剂2。

1 5％筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)2.2 凝聚胺试剂2.3 直接抗人球试剂外周血或静脉血3. 操作步骤3。

1 取试管三支，标明Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ并往各管加病人血清（血浆)2滴,加5%筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）各1滴。

3.2 各加LIM0。

7ml，混合均匀后，再各加Polybrene 溶液2滴，并混合均匀。

3.3 用BASO专用离心机1000G离心力，离心10秒,然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0。

1ml液体。

3.4 轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重作。

3.5 最后加入Resuspending 2滴，轻轻转动试管混合并同时观察结果。

如果凝集散开，表示是由Polybrene引起的非特异性聚集，抗体筛检结果为阴性；如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，抗体筛检结果为阳性，应进一步作抗体鉴定。

凝聚胺法,微柱凝胶法在输血检验中的应用意义及不完全抗体检出率分析发布时间：2022-12-19T07:02:34.356Z 来源：《中国结合医学杂志》2022年10期作者：严小平曾叶[导读] 分析凝聚胺法和微柱凝胶法在输血检验中的应用意义及不完全抗体检出率分析。

严小平1 曾叶2西南医科大学附属中医医院四川泸州 646000叙永县中医医院四川泸州 646000【摘要】目的：分析凝聚胺法和微柱凝胶法在输血检验中的应用意义及不完全抗体检出率分析。

方法：选取本院临床输血的400例患者为研究对象，时间2021年1月~2022年6月，分别进行凝聚胺法、微柱凝胶法交叉配血实验，筛查患者血清中不完全抗体对比两种检查方式的检出率，并对比检测时间，分析两种检查方法在输血检验中的应用意义。

结果：不完全抗体检检出率微柱凝胶法高于凝聚胺法，检测花费时间凝聚胺法少于微柱凝胶法，差异均具有统计学意义，P<0.05。

结论：在交叉配血实验中，凝聚胺法具有检测花费时间少的优势，而微柱凝胶法检出率更高，结果更稳定。

【关键词】凝聚胺法；微柱凝胶法；输血检验；意义；不完全抗体输血的主要目的是改善患者凝血功能、纠正贫血、改善血液循环、纠正休克等，是临床十分重要的一种治疗手段，其中安全保障工作也受到重视。

通常，输血的安全保障工作需要对受血者、供血者的血液情况进行检测，了解两者抗体、抗原匹配情况，以及鉴定不完全抗体情况，再行输血治疗，尽可能避免受血者出现免疫反应，红细胞遭到损害，保障输血的安全[1~2]。

临床上常见的不完全抗体检测法主要为凝聚胺法和微柱凝胶法，本文就对这两种检测方法的检出率和临床应用意义展开了研究，内容如下。

1资料与方法1.1基线资料选取本院临床输血的400例患者为研究对象，时间2021年1月~2022年6月，其中男患者206例，女患者194例，年龄最小16岁，最大81岁，平均（45.87±4.61）岁。

1.2 方法所有患者分别以凝聚胺法、微柱凝胶法交叉配血实验。