免疫损伤模型制备药物

急性脊髓损伤动物模型制备

材 料 与 方 法

1.实验仪器及试剂

1.1实验仪器及耗材：

BL－420E+生物机能实验系统 成都泰盟科技有限公司

生物信号导联电极（三向） 成都泰盟科技有限公司

CZF/BZF SZC/SZB型非接触式电涡流传感器 杭州华瑞仪器有限公司

信号采集针

ATZ-4,8型弹簧度盘秤 永康市华鹰仪器有限公司

数字式脊髓损伤动物模型制备仪 成都医学院基础医学实验技术中心

一次性注射器（1ml, 5ml, 10ml） 上海双鸽实业有限公司

一次性使用无菌注射器（2ml） 浙江欧健医用器材有限公司

金属骨针（克式针） 上海浦东金环医疗用品有限公司

Argox Amigo 系列条形码打印机 立象科技股份有限公司

常规手术器械 上海医疗器械（集团）有限公司手术器械厂

缝合用针线 上海医用缝合线厂、江苏省淮阴医疗器械厂

温度计 江苏省无锡县标准计量管理所

棉签 成都市华辉医疗器械有限公司

大鼠营养饲料 华西医科大学动物供应中心

1.2 试剂

酒精 75%：自行配制

・３７６・　

文章编号：１００９—４２３７（２００８）０４—０３７６—０３　创伤外科杂志２００８年第１０卷第４期ＪＴｒａｕｍａ　Ｓｕ垡　！　．　

颅脑损伤动物模型的制备及评价　・综　述・　

梁楠　，王仙凤。，张晓　

（１．成都医学院实验技术中心，四川成都６１００８３；２．成都医学院０４级临床本科班，四川成都６１００８３）　

摘要：　颅脑损伤是医学界面临的难题和研究热点之一。颅脑损伤动物模型的制备对颅脑损伤相关基　

础研究具有重要意义。笔者就目前国内外常用的颅脑损伤动物模型的制备及评价的方法作一综述。　

关键词：颅脑损伤；动物模型；功能评价　

中图分类号：Ｒ　６５１．１５　文献标识码：Ａ　

Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ　ｏｆ　ｂｒａｉｎ　ｉｎｊｕｒｙ　ｍｏｄｅｌｓ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ａｆｔｅｒ　ｂｒａｉｎ　ｉｎｊｕｒｙ　

ＬＩＡＮＧＮａｎ，ＷＡＮＧＸｉａｎ－ｆｅｎｇ，ＺＨＡＮＧＸｉａｏ　

（Ｃｈｅｎｇｄｕ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｃｈｅｎｇｄｕ　６１００８３，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：　Ｂｒａｉｎ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｓ　ｏｎｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｏｓｔ　ｄｉｆｆｉｃｕｌｔ　ｐｒｏｂｌｅｍｓ　ａｓ　ｗｅｌｌ　ａｓ　ｔｈｅ　ｈｏｔ　ｔｏｐｉｃｓ　ｉｎ　ｍｅｄｉｃａｌ　ｒｅｓｅａｒｃｈｅｓ　ａｔ　

ｐｒｅｓｅｎｔ．Ｔｈｅ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ　ｏｆ　ａｎｉｍａｌ　ｍｏｄｅｌｓ　ｏｆ　ｂｒａｉｎ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｓ　ｏｆ　ｇｒｅａｔ　ｉｍｐｏ￣ａｎｃｅ　ｔｏ　ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ　ｒｅｓｅａｒｃｈｅｓ　ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｆｉｅｌｄ．Ｔｈｅ　ａｕｔｈｏｒ　ｎｏｗ　ｇｉｖｅｓ　ａ　ｇｅｎｅｒａｌ　ｒｅｖｉｅｗ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｌａｔｅｓｔ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ　ｏｆ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇ　ａｎｉｍａｌ　ｍｏｄｅｌｓ　ｏｆ　

ｂｒａｉｎ　ｉｎｊｕｒｙ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｏｆ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ａｆｔｅｒ　ｂｒａｉｎ　ｉｎｊｕｒｙ　ｂｏｔｈ　ａｔ　ｈｏｍｅ　ａｎｄ　ａｂｒｏａｄ．　

96内蒙古中医

药

弓户

口

吞且讨勺

岁丈刁以

田夕

大鼠烟雾

吸入

性损伤模型的

制备

陈

兴刘

群”

摘要泪的

建立稳

定可靠的烟雾吸

入性损伤大

鼠动物模型为

实验性治

疗研究

打下基

拙。方法

将大

鼠随机分为

组一正常对照

组吸

入性损伤

后、、、、、

活杀组每组只。于

各

个时相点

活杀后取

标本检测肺系数大体及

病理观察

支气管肺泡灌

洗液

八中细月包

总数、

巨噬细胞、

中性粒细胞例、

淋巴细胞

乃了、

红细胞、

上皮细胞分类

计数

和蛋白

浓度等

指标观察致伤

效果。结

果致伤

后肺系数

和中蛋白

浓度

时间

增加呈

上升趋势中

随时间的

增加、、例、、

均呈

上升趋势而于伤

后时明

显增加。结

论本模型可

导致肺水肿、气

道炎

性浸润、

上皮细胞破

坏致伤

效果稳

定达到重度

致伤

程度适合用于

对吸入性损伤

早期发

病机

制及

实验性治

疗的研究。

关键词二烟雾吸

入性损伤

动物模型

支气管肺泡灌

洗液

中图分类号文献标

识码文章编号一一一

烟雾是临床烧伤合并

吸入性损伤病人的常

见致伤因素。

由病理学观察二

取右肺下叶固定常规石蜡切片洲〔

染色后

于对烟雾吸入性损伤的发病机制尚不完全清楚因而国内外学置光镜下观察。

者建立

了多种动物模

型如兔、

犬、

羊等力图模拟自然条件下中细胞的分类计数二

左肺

用生理盐水进行灌洗每次

的致伤情况为深入研究烟雾吸入性损伤打下基础但小动物的刚洪次

回收的离心后细胞

悬液

用细胞计数板在光

模型并

不完善且模

型陈

旧致伤不稳定。

因此我们以大鼠为研镜下计数细胞总数细胞

悬液涂片常规日〔

染色进行巨

噬细胞、

究对象设计、

制作并建立

了稳定有效的吸入性损伤模

型。

中性粒细胞、

淋巴

细胞、

红细胞、

上皮细胞的分类计数以倍

材料和方法

设备和材料

致伤设备

油烟雾发生器与致伤室组成二者之间由燃气

软管相连。

烟雾发生器油直径不锈钢压力锅与

电炉组成。

压力锅出气阀与燃气软管一

端相连

旧致伤室二

为特

制双拉板式密闭木箱内径为。

顶部中心为

。

一报警控制器探头设置报警浓度为距顶部

处为开槽式拉板前后方向拉动左侧内部安装一

风扇

月右侧为玻璃面安装一

温度计前面距顶部

距右侧处为金非气口

距顶部处为开槽式拉板

左右方向拉动后面距顶部距左侧处为进气口。

９６　内蒙古中医药　

大鼠烟雾吸入性损伤模型的制备　

陈兴　刘群“　

摘要：目的：建立稳定可靠的烟雾吸入性损伤大鼠动物模型，为实验性治疗研究打下基础。方法：将大鼠随机分为７组一正常对照组，吸　

入性损伤后１ｈ、６ｈ、１２ｈ、２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ活杀组，每组６只。于各个时相点活杀后取标本，检测肺系数，大体及病理观察，支气管肺泡灌洗液　

（ＢＡＬＦ）中细胞总数（Ｔｃ）、巨噬细胞（ＭＡＣ）、中性粒细胞（ＮＥＵ）、淋巴细胞（ＬＹＭ）、红细胞（Ｒ　ｃ）、上皮细胞（ＥＰ）分类计数和蛋白浓度等　指标，观察致伤效果。结果：致伤后，肺系数和ＢＡＬＦ中蛋白浓度时间增加呈上升趋势；ＢＡＬＦ中：随时间的增加ＴＣ、ＭＡＣ、ＮＥＵ、ＬＹＭ、　

ＲＢＣ均呈上升趋势，而Ｅｐ于伤后４８ｈ时明显增加。结论：本模型可导致肺水肿、气道炎性漫润、上皮细胞破坏，致伤效果稳定，达到重度　

致伤程度。适合用于对吸入性损伤早期发病机制及实验性治疗的研究。　关键词：烟雾吸入性损伤；动物模型；支气管肺泡灌洗液　

中图分类号：Ｒ６　文献标识码：Ｂ　文章编号：１００６—０９７９（２０１３）３３—００９６—０２　

烟雾是临床烧伤合并吸人性损伤病人的常见致伤因素。由　于对烟雾吸人性损伤的发病机制尚不完全清楚，因而国内外学　者建立了多种动物模型，如兔、犬、羊等Ⅲ，力图模拟自然条件下　的致伤情况，为深人研究烟雾吸人性损伤打下基础，但小动物的　模型并不完善，且模型陈旧，致伤不稳定。因此，我们以大鼠为研　究对象，设计、制作并建立了稳定有效的吸人性损伤模型。　１　材料和方法　１．１设备和材料　１．１．１致伤设备：由烟雾发生器与致伤室组成，二者之间由燃气　软管相连。Ａ烟雾发生器：由直径２２ｅｒａ不锈钢压力锅与１０００ｗ　电炉组成。压力锅出气阀与燃气软管一端相连；Ｂ致伤室：为特　制双拉板式密闭木箱，内径为２０ｅｍ×２０ｅｍ×３５ｃｍ。顶部中心为　ＤＲＢ—ＣＯ报警控制器探头（设置报警浓度为８４０ｐｐｍ）；距顶部　２５ｃｍ处为开槽式拉板Ａ（前后方向拉动）；左侧内部安装一风扇　（２２０Ｖ，３００Ｏｒ／ｍｉｎ）；右侧为玻璃面安装一温度计；前面距顶部　５ｃｍ距右侧５ｃｍ处为排气口，距顶部２７ｅｍ处为开槽式拉板Ｂ　（左右方向拉动）；后面距顶部２０ｅｒａ距左侧５ｅｍ处为进气口。进　气口与排气口均安装阀门，进气口阀门与燃气软管另一端相连。　１．１．２发烟材料：采用白松木屑做发烟材料，试验前将木屑６０００ｇ　置于８０℃电热恒温干燥箱烤箱烘烤８ｈ，在瓷盆中混匀，并凉至　常温，每袋ｌＯＯｇ密封分装，备用。　１．２动物分组及致伤前准备：雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，４２只，体重１６０—　２００ｇ，等级：ＳＰＦ级，由中国人民解放军军事医学科学院实验动物　中心提供。采用随机数字表法将其分为７组：正常对照组．吸人性　损伤后１ｈ、６ｈ、１２ｈ、２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ活杀组，每组６只。致伤前，腹　腔注射２％戊巴比妥钠５０ｍｇ／ｋｇ，麻醉后仰卧位固定，３０ｒａｉｎ后在　特制装置中烟雾致伤。　ｌ３致伤过程：每次３只大鼠：Ａ烟雾发生器内放入木屑，打开电　炉电源，发烟１５ｍｉｎ；Ｂ打开进气口阀门和风扇，当报警器报警后　关闭阀门；Ｃ拉开开槽式拉板Ｂ，将大鼠放人致伤室下层，关闭　开槽式拉板Ｂ；Ｄ拉开开槽式拉板Ａ，将大鼠致伤１５ｒａｉｎ；Ｅ致伤　后取出观察，待麻醉清醒后回笼饲养，自由摄食饮水；Ｆ对照组不