RNase A溶液说明书

北京市海淀区上地信息路26号北京市留学人员海淀创业园中关村创业大厦506网址：；电话：400-6765278；电邮：****************产品及特点固相RNase清除剂(Surface RNase Erasol)是天泽基因独家开发的特殊的RNase灭活剂。

它含有多种成分，能高效灭活固体表面的RNase污染，保障RNA工作环境的清洁。

1.高效。

本产品原液能在5分钟内将固体表面的多达100ug的RNase彻底灭活，效力和速度远远高于常用的DEPC。

2.此外还能灭活RNase T1、RNase H、BAL31、S1、Mung bean nuclease等RNase和DNase。

3.无毒。

跟强致癌的DEPC不同，本产品对人体没有任何毒害。

4.使用简单。

处理后不需要高压灭菌。

规格及成分成份编号塑料袋包装本产品309010mL喷壶3090B-使用手册1份3090sc运输及保存常温运输和保存，有效期两年自备试剂蒸馏水使用方法水的处理直接将固相RNase清除剂原液按1:1000的比例加入到需要处理的水中，混合均匀后室温放置24小时即可直接使用，得到的水可以配制电泳溶液和裂解液。

但如果需要溶解RNA，建议使用液相RNase清除剂（CAT#：3091）。

工作平台的清洁：直接将固相RNase清除剂原液或10倍的新鲜稀释液喷于台面，5分钟后用普通吸水纸擦净，最后用沾有固相RNase清除剂1000倍新鲜稀释液的吸水纸擦净，晾干。

注意：由于一般的工作平台RNase污染都很严重，天泽基因建议使用固相RNase清除剂原液或十倍的新鲜稀释液（新鲜稀释液的存放时间不要超过一天），不要使用稀释度大于十倍的稀释液。

实验仪器的清洁：用浸有固相RNase清除剂原液或10倍的新鲜稀释液的纸擦拭仪器表面，再用吸水纸擦净，最后用沾有固相RNase清除剂1000倍新鲜稀释液的吸水纸擦净，晾干。

用固相RNase清除剂原液处理金属器械的时间不能超过5分钟。

ManualRNase IFor Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.Contents1. Introduction (3)2. Product designations and kit components (3)3. Product specifications (3)4. Protocol for removing RNA from DNA preparations (4)5. References (4)6. Further support (4)1. IntroductionRNase I preferentially degrades single-stranded RNA to individual nucleoside 3′ monophosphates by cleaving every phosphodiester bond.1 By comparison, other ribonucleases cleave only after specific residues (e.g., RNase A cleaves 3′ to pyrimidine residues). Thus, RNase I is useful for removing RNA from DNA preparations,2 detecting mismatches in RNA:RNA and RNA:DNA hybrids 2,3 and analysing and quantifying RNA in ribonuclease protection assays (RPA).4,5 The enzyme is completely inactivated by heating at 70 °C for 20 minutes in the presence of 5 mM dithiothreitol (DTT), eliminating the requirement to remove the enzyme prior to many subsequent procedures. 2. Product designations and kit components3. Product specificationsStorage: Store only at -20 °C in a freezer without a defrost cycle.Storage buffer: RNase I is supplied in a 50% glycerol solution containing 50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 M NaCl and 0.1 mM EDTA.RNase I Dilution Buffer: A 50% glycerol solution containing 50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 M NaCl and 0.1 mM EDTA.10X TNE Buffer: 100 mM Tris-HCl (pH 7.5), 1 M NaCl and 10 mM EDTA.Unit definition: One unit degrades 100 ng of E. coli ribosomal RNA per second into acid-soluble nucleotides at 37 °C.Quality control: RNase I is function-tested in a reaction containing 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 100 mM NaCl, 1 mM EDTA and 60 μg of E. coli ribosomal RNA with varying amounts of enzyme.6Contaminating activity assays: RNase I is free of detectable exo- and endodeoxyribonucleaseactivities as judged by incubation of 1 μg of various DNA substrates with 4 x 106 U of enzyme at 37 °C for 16 hours.ProductKit sizeReagent descriptionCatalog numberPart numberVolume4. Protocol for removing RNA from DNA preparationsRNase I can be used in place of RNase A for removing RNA from DNA preparations. In contrast to RNase A, RNase I effectively degrades contaminating RNA to mono- and dinucleotides that will not interfere with visualisation of small DNA molecules. After RNA removal, the enzyme can be inactivated by heating at 70 °C for 20 minutes in the presence of 5 mM DTT.Protocol1. Isolate DNA from 1-2 mL of overnight bacterial culture using a standard alkaline lysis procedure.52. After ethanol precipitation, suspend the DNA in 1X TNE buffer (page 3) at a concentrationappropriate for subsequent applications (see Notes below).3. Dilute RNase I enzyme 10-fold with RNase I Dilution Buffer and add 1.5-2 U to the DNApreparation.4. Incubate at 37 °C for 30 minutes to degrade contaminating RNA.5. Add DTT to a final concentration of 5-10 mM.6. Incubate at 70 °C for 20 minutes to inactivate the enzyme.NotesReaction buffer: Incubation with RNase I can be performed simultaneously with the digestion of plasmid DNA by restriction endonucleases. RNase I maintains ≥90% activity in buffers containing between 100 mM to 200 mM salt (either NaCl or KOAc). The activity of the enzyme is also relatively constant over a pH range of 7.0-8.8. Therefore, if the restriction endonuclease buffer is within these parameters, RNase I digestion can be performed in the restriction endonuclease buffer.Enzyme dilution: Diluted enzyme may be stored for up to two months at -20 °C in a freezer without a defrost cycle.5. References1. Shen, V. and Schlessinger, D. (1982) The Enzymes XV (Part B), 501.2. Winter, E. et al., (1985) Proc. Natl. Acad. Sci. USA82, 7575.3. Myers, R.M. et al., (1985) Science230, 1242.4. Sambrook, J. et al., (1989) in: Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2nd ed.), Cold SpringHarbor Laboratory Press, New York.5. Saccomanno, C.F. et al., (1992) BioTechniques13, 847.6. Corbishley, T.P. et al., (1984) Meth. Enzymatic Anal. 4, 134.6. Further supportIf you require any further support, please do not hesitate to contact our Technical Support Team:************************Integrated tools. Accelerated science.All trademarks and registered trademarks mentioned herein are the property of their respective owners. All other trademarks and registered trademarks are the property of LGC and its subsidiaries. Specifications, terms and pricing are subject to change. Not all products are available in all countries. Please consult your local sales representative for details. No part of this publication may be reproduced or transmitted in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, recording or any retrieval system, without the written permission of the copyright holder. © LGC Limited, 2021. All rights reserved. GEN/889/EK/0121@LGCBiosearch。

快速参考手册TaqMan MicroRNA Assays简要操作说明（Rev.A.0）本操作说明提供了TaqMan MicroRNA Assays的简要操作指南。

更详细信息，请至赛默飞世尔官方网站下载英文版说明书：https:///content/sfs/manuals/cms_042167.pdf一．配制反转录体系1.准备总RNA（1）注意：应选择适当的提取方法，避免提取过程中丢失microRNA（2）RNA定量2.准备反转录预混液（1）将Taqman MicroRNA反转录试剂盒中的组分放在冰上融化后涡旋混匀。

（2）准备一支无RNA酶的离心管，参照下表，在冰上配制反转录预混液。

组成成分反应体系100mM dNTPs(with dTTP)0.15µl反转录酶 1.00µl10X反转录buffer 1.50µlRNase抑制剂0.19µl无核酸酶H2O 4.16µl总体积7.00µl（3）涡旋混匀，离心。

（4）将反转录预混液放置在冰上备用。

3.配制反转录体系（1）在冰上将5x反转录引物和RNA模板融化。

涡旋混匀。

（2）15µl的反转录体系中，加入1-10ng RNA（5µl），7µl反转录预混液，3µl反转录引物，涡旋混匀，离心。

（3）将反应管放在冰上放置5分钟，然后进行反转录实验。

4.设置反转录步骤将反应管放入PCR仪内，按照下列的反应程序进行设置：模式：标准模式，反应体积：15µl阶段时间温度退火30分钟16°C延伸30分钟42°C失活5分钟85°C∞4°C2二．定量PCR 扩增1.准备定量PCR 反应体系（1）将反应用到的组分放在冰上融化，混匀后放置冰上备用。

（2）按照20µl 反应体系计算所需要的试剂量。

将各组分加入离心管中，涡旋混匀，离心。

DNase I stock solution 配置：请勿打开DNase I管盖，用针头吸550 μL RNase-free water (1.5 mL管装中提供)，注射入DNase I，并正反倒置混匀溶液。

切勿涡旋震荡！视试验习惯和计划，将配置好的DNase I stock solution 分装至大小合适的离心管或PCR管。

保存于-20℃，可保证效期9个月。

可在2-8℃保持效期6周。

不可反复冻融。

因此建议分装后-20℃保存，尽量一次用完，如果不能一次用完，请即保存于2-8℃，6周内用完一．在溶液中进行DNA消化的方法：E1.将下列东西加入离心管中混合：≤87.5 μl的RNA溶液10 μl Buffer RDD2.5 μl DNase I stock solution用RNase-free water将最终体积调节到100uL，如果觉得需要也可以将所有反应体系加倍（共200uL）E2.在工作台上(20–25°C)孵育10分钟。

E3. RNA Cleanup（注意：可处理的RNA量不超过100ug）1. 将350uL Buffer RLT加入到上述100uL溶液中，混合均匀。

2. 再加入250 μl 乙醇(96–100%) ，用吹打的方式进行混匀，不要离心，立即进行第三步。

3. 将这700uL溶液转移至一个RNeasy Mini spin column中，下面放置 2ml 收集管(试剂盒提供)。

盖紧盖子，≥8000 x g (≥10,000 rpm) 离心15 s ，弃废液。

收集管可以在第4步中重新使用。

注意：离心后要将柱子小心的从收集管中取出，不要碰到下面的废液。

并且确保收集管完全风干。

4. 将500 μl Buffer R PE 加到 RNeasy spin column上。

盖紧盖子，≥8000 xg (≥10,000 rpm) 离心15 s以洗涤柱膜。

弃废液。

收集管可以留着在第5步重新使用。

瀚海新酶生物科技有限公司DNASE/RNASEDNase/RNase检测试剂盒（荧光探针法）FLUORESCENT PROBE METHODC ONTENTS 目 录图一 荧光探针法原理示意图图二 DNase/RNase检测试剂盒反应曲线示意图产品图片精密度高：批内CV≤10%，批间CV≤15%用于检测科研和生产过程中环境、物料等的DNase污染情况。

HH DNase检测试剂盒与核酸水解-凝胶电泳法对比，测定相同的低浓度酶样本，如图所示：HH DNase检测试剂盒的精密度与稳定性产品特点灵敏度优于凝胶电泳法 -6与某进口品牌（荧光探针法）相比，HH DNase检测试剂盒检测下限低至其1/8。

灵敏度优于进口品牌HH DNase检测试剂盒测定3x10 U/μL DNase I，与0浓度可明显区分样本浓度为6.25×10 U/μL时，电泳法测定DNase I，9/10通道(3x10 U/μL)与1~8通道(≤3x10 U/μL)、17通道阴性对照不能明显区分-5-6-5荧光酶标仪(含 ex/em=485/525nm 波长) 无DNase无RNase 移液器与吸头无DNase无RNase EP管无DNase无RNase 黑色不透明底96孔板1、HH DNase检测试剂盒取出，室温放置适当时间，各组分充分混匀、离心。

2、配制DNA探针工作溶液并分装，未使用的置于-25~-15℃避光储存，避免反复冻融。

3、设置仪器参数：37℃，终点模式，Ex/Em波长为485/525nm，检测前振板10-15s。

4、调节合适的增益值，并设定，如酶标仪支持动力学检测，推荐采用动力学检测模式。

实验前需要您准备的设备与耗材实验操作（详见说明书）注：标准品为DNase I ，其活性单位定义为：在DNase I反应缓冲液中，37℃条件下10分钟内能够完全降解1µg pBR322 DNA所需的酶量[1]，一个DNase I活性单位相当于0.3 Kunitz单位[2]。

小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA试剂盒使用说明书本本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中α甘露糖苷酶(α Manase)的含量。

试验原理：αManase试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知αManase浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。

先将αManase和生物素标记的抗体同时温育。

小鼠α甘露糖苷酶ELISA试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。

再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。

产生颜色。

颜色的深浅和样品中αManase的浓度呈比例关系。

试剂盒组成：自备材料蒸馏水。

加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

振荡器及磁力搅拌器等。

安全性避免直接接触终止液和底物A、B。

一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作注意事项试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

不用的其它试剂应包装好或盖好。

不同批号的试剂不要混用。

保质前使用。

使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

使用干净的塑料容器配置洗涤液。

使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

底物A应挥发，避免长时间打开盖子。

底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

避免用手接触，有毒。

实验完成后应立即读取OD值。

加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。

使用不含热原和内毒素的试管。

Allprep组织/细胞RNA/DNA分提试剂盒目录号：RN29适用范围：适用于快速从同一个动物细胞或者组织样品中同时提取分离基因组DNA和总RNA，不需要使用DNase消化，RNA可直接用于反转录PCR，荧光定量PCR.。

试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次(RN2902)裂解液RLT Plus 室温50 ml去蛋白液RW1 室温40 ml漂洗液RW 室温10ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 ml70%乙醇室温9ml RNase-free H2O第一次使用前按说明加指定量乙醇抑制物去除液IR 室温25 ml漂洗液WB 室温15ml第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温10 ml 基因组DNA吸附柱DA和收集管室温50套RNA吸附柱RA和收集管室温50套本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。

储存事项：1.所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。

2.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。

3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。

注意事项1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。

2.样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱DA和和RNA吸附柱RA处理能力，否则造成DNA残留或者产量降低。

不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大，例如胸腺脾脏DNA含量丰富，超过5mg就会超过柱子处理能力。

COS细胞RNA含量丰富，超过3x106细胞就会超过柱子吸附能力。

所以开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，如细胞不超过3-4x106，组织不超过10mg。

……………………………………………………………………………………………………………………………………… 宝日医生物技术（北京）有限公司 技术咨询电话网址：https://4006518761 4006518769Recombinant DNase I （RNase-free ）Code No. 2270A 包装量： 1,000 U 浓度: 5 U/μl附带试剂：10X DNase I Buffer 1 ml制品说明：本酶是将单链或双链DNA 同等程度的随机分解，生成具有5′-P 末端寡核苷酸的脱氧核糖核酸内切酶。

由于本酶已除去了蛋白酶和核酸酶，从而提高了在pH 中性区域的稳定性，适用于RNA 的制备。

酶贮存溶液：20 mM Tris-HCl, pH7.5 (4℃) 50 mM NaCl 0.1 mM CaCl 250% Glycerol保 存：-20℃起 源：Recombinant enzyme derived from non-animal host.活性定义：以小牛胸腺DNA 为底物，在25℃、pH5.0的条件下，1分钟内使反应液的260 nm 吸光度增加0.001所需要的酶量定义为1个活性单位（Kunitz Unit ）1)。

活性定义反应液：100 mM Sodium acetate, pH5.0(25℃) 5 mM MgSO 440 μg/ml calf thymus DNA质量控制：请查阅各批次Certificates of Analysis （CoA ）。

产品CoA 请在Takara Bio Inc.网站中下载：https://catalog.takara-bio.co.jp/search/doc_index.php 。

用 途：1. 用T7或SP6 RNA Polymerase 进行体外转录（In vitrotranscription ）时，合成RNA 后，不必更换Buffer ，使用Recombinant DNase I （RNase-free ）即可将模板DNA 降解5)。

RNAsafety TM组织RNA保存液使用说明书1．产品性能简介RNAsafety TM组织RNA保存液是一种液态、无毒的组织保存试剂，能迅速稳定组织，保护非冷冻、新鲜组织的RNA于原始状态，而不会引起RNA的降解。

尤其适用于不能立即进行RNA分离的地点收集样品，方便的进行样本的转送和运输。

（1）RNAsafety溶液不影响组织结构，保存后组织可在室温下切割和称量。

（2）RNAsafety可与大多数RNA提取方法兼容，如常用的TRIzol试剂。

（3）保存在RNAsafy溶液中的组织材料可以从RNAsafety溶液中取出，切割使用后，重新放回溶液中继续保存，而不影响组织RNA的质量。

（4）RNAsafety溶液可保存在室温下，保质期至少6个月。

2．产品用途（1）RNAsafety溶液可广泛应用于多种脊椎动物样品，如脂肪、胃脏、膀胱组织、小肠组织、肌肉、软骨、肾脏、心脏、睾丸、皮肤、脾脏、肺脏等，但不能用于胰腺样品的RNA保存。

（2）RNAsafety还可以用于细菌、真菌、组织培养细胞和一些植物的RNA 保存。

（3）RNAsafety可填充入动物腔，或者将器官浸没在RNAsafety溶液中，在长时间、冗长的解剖中稳定RNA。

（4）用RNAsafety溶液保存的样本，可在常温保存一周而样本的RNA 保持稳定，实现样本在常温条件下转送和运输，省去使用干冰运输的麻烦。

3．使用RNAsafety的方法RNAsafety只能用于新鲜组织，在浸入RNAsafety之前不能冷冻组织。

获取组织样品后，简单切碎组织样品（建议任何一边的最大厚度不大于0.5cm），迅速将组织碎块浸泡到5-10倍体积的RNAsafety中保存。

动物组织：RNAsafety不会溶解或破坏组织样品的结构，可将已经平衡在RNAsafety溶液中的组织取出并分割成更小的块再重新放入到RNAsafety中。

小器官如鼠肝、肾和脾可以完整地保存在RNAsafety中。

RNaseAway高效固体表面RNase清除剂目录号：HXR 2101目录编号包装单位HXR2101 100ml实验室使用，仅用于体外产品介绍：RNaseAway主要用来清除实验器具表面RNA酶。

它含有数种抑制RNA酶成份，可以有效的清除包括操作台，玻璃表面，塑料表面等处的RNA酶污染。

产品储存：室温12个月。

注意事项：1.RNaseAway环境温度低时可能会析出浑浊或者沉淀，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。

2.污染不严重的情况下可以稀释10-100倍使用。

避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化影响使用效果，各溶液使用后应及时盖紧盖子。

3.RNaseAway有腐蚀性，操作时候应该戴手套，并且避免用于某些易腐蚀的金属表面。

使用方法：1.塑料和玻璃容器加入足够RNaseAway到容器中，使所有的待处理容器表面都充分接触到RNaseAway（可以倾斜，颠倒或者抓着容器打旋转来帮助待处理表面都接触到RNaseAway，如果是离心管，可以涡旋振荡1分钟），10分钟后，弃去RNaseAway，用高压灭菌水/DEPC处理水充分淋洗后晾干（注意避免使用RNase污染的水淋洗或者操作不慎引入二次污染）。

2.工作台面直接将RNaseAway喷洒在工作台面并用纸巾擦拭均匀，10分钟后用干净纸巾擦去表面RNaseAway，然后用高压灭菌水淋洗后，用新的干净纸巾擦干。

3.实验设备将RNaseAway小心倒在纸巾上，用润湿了RNaseAway的纸巾擦洗实验设备表面（小的实验设备部件可以短暂浸泡在RNaseAway），10分钟后用干净纸巾擦去表面RNaseAway，然后用高压灭菌水淋洗后，自然风干或者用新的干净纸巾擦干。