3种方法对尿标本中红细胞与白细胞检测结果比较

２结果
式细胞分析仪、配套试剂、配套质控液；长春迪瑞实业公司生产 的Ｈ一３００尿液分析仪、配套试剂、配套质控液；Ｏｌｙｍｐｕｓ普通光 学显微镜；河北保定白洋离心机厂生产的白洋离心机。 １．２标本来源随机留取本院门诊患者１ １０９份尿液标本，其 中男４８６份，女６２３份，收到后２ ｈ内检测完毕。 １．３质控Ｓｙｓｍｅｘ公司提供的原装质控液，每天对ＵＦ一１０００ｉ 尿流式细胞分析仪进行质控，长春迪瑞公司提供的原装质控 液，每天对Ｈ－３００尿液分析仪进行质控，结果均在控。 １．４方法将门诊患者采集的尿液标本分别倒人２支洁净干 燥的离心管，各１０ ｍｌ。一管用于ＵＦ一１０００ｉ法检测；另一管用于 尿干化学法检测，完毕后，用白洋离心机４００ ｇ离心５ ｍｉｎ，离心
万方数据
１
输血传染【２ Ｊ。感染与社会经济、卫生条件有关，经济不发达、卫 生条件差的地区感染率高。大多数的初次感染发生在幼儿时 期，且多数感染后无明显症状，或引起轻症咽炎和上呼吸道感 染，但终生携带病毒。ＥＢＶ感染后，在口咽部和涎腺的上皮细 胞内增殖，然后感染Ｂ淋巴细胞，Ｂ淋巴细胞大量进人血液循 环而至全身症状，并可终生潜伏在人体淋巴组织中。当机体免 疫功能低下时，这些潜伏在淋巴组织中的ＥＢＶ再度活跃而形 成复发感染‘３ Ｊ。临床症状以发热、咽喉痛、肝脾和淋巴结肿大、 外周血淋巴细胞增多并出现单核样异型淋巴细胞等为其特征。 由于其症状、体征的多样化和不典型病例在临床上逐渐增多， 给诊断治疗带来一定困难Ｉ ３ｌ。因此，准确的检测ＥＢＶ感染，以 区别其它感染原因（巨细胞病毒、腺病毒、肺炎支原体、风疹病 毒均可有类似症状）所致疾病，就显得非常重要。临床上检测 ＥＢＶ的方法有病毒分离、血清学试验、抗体检测、荧光定量ＰＣＲ 等。对于ＥＢＶ急性感染如传染性单核细胞增多症，最早出现
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２—７３８６．２０１１．０８．０８３
・临床检验・
３种方法对尿标本中红细胞与白细胞检测结果比较
杨雪梅齐红梅赵景李宝琴 【关键词】
ＵＦ一１０００ｉ尿流式细胞分析法；５－４ｅ．学试带法；显微镜镜检法；红细胞；白细胞
Ｒ ４４６．１２
【中图分类号】
【文献标识码】
Ａ
【文章编号】
１２５４
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于临床标本中的是病原体本身，采用高灵敏度高特异性的实时 荧光ＰＣＲ进行检测，可以在感染的早期明确病因旧１。用于检 测ＥＢＶ—ＤＮＡ可有鼻咽分泌物（咽拭子）、血液、尿液等。但ＥＢ 病毒大量存在于唾液腺及唾液中‘３ ｏ，且早于血液等其它体液， 因此，咽拭子标本（鼻咽分泌物）更好，阳性率更高，且标本采集 方便，易被患儿及家长接受。本文的检测结果就证明了这一 点。另外，对既往有ＥＢ病毒感染史者，出现类似症状时，要排 除ＥＢ病毒感染复发。 参考文献
１
丛玉隆．尿液沉渣检查标准化的建议．中华检验医学杂志，２００２，２５：
２４９－２５０．
２杨晓春，郝维敏，刘杰．尿沉渣分析系统与干化学检测尿红细胞白细 胞的临床应用评价．临床和实验医学杂志，２００９，８：８２－８３． ３马金群，张爱民，张春和，等．一种尿液有形成分检验的新方案．河北 医药，２００９，３１：２１５３－２１５４． ４饶沃，冯泰宝，陈振宇，等．鳞状上皮细胞对尿液分析仪检测白细胞 结果的影响．现代临床医学生物工程学杂志．２００４，１０：６１－６４． （收稿日期：２０１０—１１—０７）
作者单位：０５００３１ 石家庄市，河北医科大学第一医院检验科（杨
对尿红、白细胞的检测，ＵＦ—１０００ｉ法与镜检法对红、白细胞 的检测差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），而二者与干化学法差异 均有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。见表ｌ。 ３讨论 以镜检法检测结果为参照标准，ＵＦ・ｌＯＯＯｉ法和干化学法均 存在假阳性与假阴性结果。 ３．１红细胞本实验中，ＵＦ．１０００ｉ法假阳性１７份，假阳性率 １．９６％，其中尿中存在草酸钙结晶１０份，尿中存在酵母菌孢子 ４份，尿中存在大量细菌２份，原因不明ｌ份。虽然ＵＦ一１０００ｉ 尿流式细胞分析仪经过３５％加温防止尿液中结晶的干扰，但是 并不能完全避免结晶对尿红细胞的干扰，部分草酸钙结晶呈椭
１００２—７３８６（２０１ １）０８—１２５４—０２
尿液检查对泌尿系统疾病的诊治和疗效观察具有很高的 临床应用价值。但是各种仪器和检测方法都有自身的优点和 局限性，常出现检测结果不完全一致的现象，给临床医生判读 带来困难。为此，本文对１ １０９份门诊尿液标本用ＵＦ一１０００ｉ尿 流式细胞分析仪法（ＵＦ—１０００ｉ法）、Ｈ．３００尿液分析仪（尿干化 学法）、显微镜检法（镜检法）３种方法同时检测，并将结果进行 比较，报告如下。 １资料与方法 １．１仪器与试纸带 日本Ｓｙｓｍｅｘ公司生产的ＵＦ一１０００ｉ尿流
圆形，其形态、大小和红细胞相似，ＵＦ－１０００ｉ法不能通过染色等 手段加以区分，需显微镜法观察二者折光性的差异，进而将尿 中红细胞与草酸钙结晶加以区分；酵母菌孢子和红细胞大小、 形态均相似，其前向散射光强度接近，故易被误认为红细胞；尿 中存在大量细菌时，若细菌以分散状态存在，ＵＦ－１０００ｉ尿流式 细胞分析仪可以通过细菌染色，在细菌计数通道计数，不会干 扰尿中红细胞的检测，若细菌成堆存在于尿液时，有时会被误 认为红细胞。ＵＦ—１０００ｉ尿流式细胞分析仪的假阴性７份，假阴 性率２．８９％，主要是由于该方法是对经过染色的标本进行检 测，当尿液放置时间过长，红细胞破坏，释放血红蛋白而不易着 色，致使结果出现假阴性。干化学法假阳性９ｌ份，假阳性率 １０．５０％，对此９１份尿液进行肌红蛋白、不耐热酶、过氧化物酶 检测，其中为含有过氧化物酶的菌尿４５份，尿中含有不耐热酯 酶１８份，尿中含有肌红蛋白１５份，其余原因不明。尿干化学 法检测红细胞是通过红细胞内的过氧化物酶样活性的物质与 试纸带发生化学反应显色，以颜色的深浅进行半定量分析，以 上这些物质均具有类似过氧化物酶的氧化特性，可与试纸模块 发生反应，产生颜色变化，导致假阳性。尿干化学法检测红细 胞的假阴性１７份，假阴性率７．０２％，主要是由于高浓度ＶｉｔＣ 所引起，ＶｉｔＣ为还原性物质，可以竞争性的与红细胞内的过氧 化物酶发生氧化还原反应，导致假阴性结果¨Ｊ。 ３．２白细胞ＵＦ—１０００ｉ法假阳性１５份，假阳性率１．８９％，镜 检可见小圆上皮细胞１０份，尿中可见阴道毛滴虫２份，原因不 明３份。小圆上皮细胞和阴道毛滴虫经过染色后，形态、大小 及散射光强度和荧光强度和白细胞均相似，不易区分，故易被 误认为白细胞。ＵＦ．１０００ｉ法检测白细胞假阴性为１０份，假阴 性率３．１８％，主要由于白细胞聚集或附着于粘液丝所致。尿干 化学法检测白细胞假阳性８份，假阳性率Ｉ．０ｌ％，主要因为尿 中混入阴道分泌物，含有大量鳞状上皮细胞，上皮细胞中含有 硫酸脂酶和磷酸脂酶，与中性粒细胞酯酶化学性质相似Ｈ』，可 造成千化学假阳性结果，其次ｐＨ值＞８或高胆红素尿也会出 现假阳性结果。尿干化学法检测白细胞的假阴性率较高，达 ３４．０８％，主要是由于干化学试纸带存在方法学的局限性，只能 检测含有粒细胞酯酶的中性粒细胞，而不能检测不含该酶的淋 巴细胞和单核细胞，其次有些尿液留取时间可能过长，中性粒 细胞酯酶失活，干化学法未能测出，再次当尿中存在先锋霉素、
庆大霉素或高蛋白尿时，也可导致假阴性结果。 式细胞
技术与核酸染色技术相结合，通过测定前向散射光强度，侧向 散射光强度，侧向荧光强度等参数来检测尿液有形成分的大 小、长度、胞内物质，从而区分各种有形成分，如红细胞，白细 胞，上皮细胞等。尿液无需离心，避免细胞因受力过大而破碎， 操作简单，结果重复性好。干化学试带法检测红细胞的原理是 细胞内的过氧化物酶样活性的物质可与试纸带发生化学反应 显色，以颜色的深浅度换算出红细胞个数，为半定量分析，干化 学试带法检测白细胞的原理是吡咯酚酯在中性粒细胞酯酶的 水解作用下，产生游离酚，游离酚与苯基重氮盐偶联，生成紫色 偶氮，以颜色的深浅换算出白细胞个数。该法具有操作简单， 快速的优点。显微镜镜检法具有直观准确的特点。但是，目前 没有任何一种尿液检测方法是没有缺陷的，ＵＦ一１０００ｉ尿流式细 胞分析仪对红、白细胞检测易受有形成分如结晶、细菌、类酵母 细胞等的干扰；干化学试带法易受多种酶类的干扰；虽然显微 镜镜检法被认为是金标准，但是也可能由于尿液在膀胱停留时 间过长或放置时间过长，细胞破裂；或者细胞在肾脏及泌尿道 被破坏，造成镜检假阴性。故我们应该结合临床综合分析，３种 方法联合应用以减少尿中红、白细胞假阳性率和假阴性率，为 临床提供快速准确的尿液检测结果。 综上所述，ＵＦ．１０００ｉ法、干化学法与镜检法，三者检测尿液 红、白细胞时各有优缺点，可以利用干化学法的简便快速性进 行筛选，当干化学法与应用ＵＦ．１０００ｉ分析仪结果一致阴性时， 可以不做显微镜镜检，减少检验人员的劳动强度，当二者不符 或者出现阳性结果时，需显微镜镜检做最后确认，三者联合对 尿液标本进行分析，给临床提供最可靠的信息，提高临床的诊 治水平。 参考文献
后倒出上清液，残留０．２ ｍｌ尿沉渣…，混匀，进行尿沉渣并记 录结果。 １．５检测标准ＵＦ一１０００ｉ法：以红细胞＜２５／卜１为阴性，白细 胞＜３０／ｐ．１为阴性，超出参考范围上限为阳性；镜检法：以红细 胞＜１／ＨＰ为阴性，白细胞＜３／ＨＰ为阴性，超出参考范围上限 为阳性；尿干化学法：以干化学仪判定的阴、阳性为准。３种方 法均以镜检法为参照标准。２ Ｊ，ＵＦ．１０００ｉ法结果阳性或干化学结 果阳性而镜检法结果阴性为假阳性，ＵＦ一１０００ｉ法结果阴性或干 化学结果阴性而镜检法结果阳性为假阴性。 １．６统计学分析应用ＳＰＳＳ １１．０统计软件，计数资料采用 ｘ２检验，Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。
雪梅、赵景、李宝琴），精卫科（齐红梅）
万方数据
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表ｌ ３种方法对尿中红细胞、白细胞的检测结果
ｎ＝１
１２５５
１０９
注：阳性率＝（阳性数／总数）Ｘ１００％；假阳性率＝（诊断假阳性敬／金标准真阴性数）×１００％；假阴性率＝（诊断假阴性数／金标准真阳性数）Ｘ１００％；与干化学法比 较．‘Ｐ＜０．０５