香豆素提取

香豆素提取: 香豆素的原药材----不同浓度的乙醇-----醇的提取液====回收溶剂,加水-----水溶液-----有机溶剂萃取(石油醚,苯,乙醚,乙酸乙酯) 附:游离香豆素难溶与水,,易溶于乙醇,用不同的有机试剂,是为了获得不同极性部位的浸膏.香豆素的分离: 1.酸碱分离:内酯遇碱皂化,加酸恢复. 2.层析分离:吸附剂:硅胶,中性氧化铝.洗脱剂:己烷和乙醚,己烷和乙酸乙酯. 可观察其荧光.香豆素的氢谱特征:当C3、C4位未取代时当C3或C4取代时：当C7-OR 时：C3-H ~6.23 d, J 3, 4=9.5 HzC4-H ~7.64 d, J 3, 4=9.5 HzC5-H 7.38 d, J =9 HzC6-H C8-H 6.87 2H, m 峰当C5 , C7二氧代： C6-H d, J =2 HzC8-H d, J =2 Hz C6-H 尖峰 区别C8-H 与C4-H 有远程偶合 当C7-OR 、C8或C6烷基取代时：成分生物合成途径真菌的特点:1、具有细胞核，核物质由DNA和蛋白质组成，外被核膜，上有核孔。

进行有丝分裂；2、细胞质中含有线粒体、内质网、高尔基体等细胞器，但没有叶绿体，不进行光合作用，无根、茎、叶的分化；3、以产生有性孢子和无性孢子二种形式进行繁殖；4、营养方式为化能有机营养（异养）、好氧；5、不运动（仅少数种类的游动孢子有1~2根鞭毛）；6、种类繁多，形态各异、大小悬殊，细胞结构多样。

真菌的分类（Smith系统）:（一）藻状菌纲(Phycomycetes)：菌丝无隔，单细胞，有性孢子为卵孢子、合子和接合孢子；（二）子囊菌纲(Ascomycetes)：菌丝有隔，少数单细胞，有性孢子为子囊孢子；（四）担子菌纲(Basidiomycetes)：菌丝有隔，多细胞，有性孢子为担孢子；（五）半知菌类(fungi imperfecti)：菌丝有隔，多细胞，有性阶段尚不了解。

真菌的分类（Ainsworth系统）（一）鞭毛菌亚门(Mastigomycotina)：无性孢子为游动孢子，有性孢子为卵孢子；（二）接合菌亚门(Zygomycotina)：无性孢子为孢囊孢子，有性孢子为接合孢子；（三）子囊菌亚门(Ascomycotina)：无性孢子为分生孢子，有性孢子为子囊孢子；（四）担子菌亚门(Basidiomycotina)：无性孢子尚不清楚，有性孢子为担孢子；（五）半知菌亚门(Deuteromycotina)：无性孢子为分生孢子，有性阶段尚不了解。

真菌的几个俗名霉菌（mold）：是一些“丝状真菌”的统称，分类上属于子囊菌、担子菌和半知菌。

酵母菌（yeast）：“单细胞真菌”的总称。

分类上属于接合菌、子囊菌和半知菌。

蕈类（mashroom）：大型真菌的总称，早年指蘑菇一类的具有菌伞结构的真菌。

菌物系统（myceteae）：早先放在霉菌中，后独立，特指卵菌、粘菌等。

现在又泛指所有真菌。

1 酵母菌的形态与大小酵母菌的形状一般为圆形、卵圆形或椭圆形，大小为3～5μm ×5～30 μm，其细胞直径一般比细菌粗10倍左右。

有的酵母菌子代细胞连在一起成为链状，称为假丝酵母。

不少的假丝酵母能利用正烷烃为碳源进行石油发酵脱蜡，并产生有价值的产品。

其中氧化正烷烃能力较强的假丝酵母多是解脂假丝酵母（C.lipolytica）或热带假丝酵母（C.tropicalis）。

有些种类可用作饲料酵母。

2 酵母菌的结构1、典型的真核细胞结构。

核物质由蛋白质和DNA组成。

染色体有多条，如酿酒酵母有7条染色体。

2、细胞壁酵母菌细胞壁主要成分是葡聚糖，甘露聚糖和蛋白质，呈三明治结构。

3、含有多种细胞器，如线粒体、内质网、高尔基体等。

4、细胞膜含有甾醇类物质（麦角固醇）。

5、液泡有一个或多个，由一层膜包裹，含水解酶、浓缩的盐、氨基酸、糖类和脂类物质，是酵母菌的贮存仓库。

也可以起调节渗透压的作用。

3 霉菌的形态结构霉菌菌体均由分枝或不分枝的菌丝（hypha）构成。

许多菌丝交织在一起，称为菌丝体（mycelium）。

霉菌菌丝分有隔菌丝（多细胞）和无隔菌丝（单细胞），直径2~10微米，按着生部位分为营养菌丝（vegetative mycelium）、气生菌丝（aerial mycelium ）和繁殖菌丝（reproductive mycelium）。

孢子（spore）：是真菌的主要繁殖器官。

分有性孢子和无性孢子2种。

4 菌丝的分类按菌丝功能营养菌丝, 气生菌丝繁殖菌丝. 按菌丝结构有隔菌丝无隔菌丝5霉菌细胞的基本结构1、细胞核：典型的真核细胞结构。

具有真正的细胞核，核上有核孔（Ø40 ~ 70nm），核内有核仁（进行mRNA合成，折光率较强的球形体）。

2、核物质：由蛋白质和DNA组成。

分裂间期称染色质，分裂期称染色体，染色体有多条（单倍体）。

3、细胞壁：霉菌细胞壁主要成分是几丁质，卵菌由纤维素构成。

4、含有多种细胞器，如线粒体、内质网、高尔基体等。

5、细胞膜含有甾醇类物质。

特征：膜边体二、真菌的人工培养（一）真菌的培养条件糖：真菌喜糖，基本上逢糖就长；酸：真菌的最适生长pH在4 ~ 6；温：真菌的生长最适温度在22 ~ 28℃；湿：真菌生长需要较高的湿度；氧：真菌大多数好氧；慢：真菌生长极慢，1 ~ 4周才形成菌落。

（二）真菌的菌落特征1 酵母菌的菌落特征与细菌菌落类似，但一般较细菌菌落大且厚，表面湿润，粘稠，易被挑起，多为乳白色，少数呈红色。

2 霉菌菌落由粗而长的分枝状菌丝组成，菌落疏松，呈绒毛状、絮状或蜘蛛网状，比细菌菌落大几倍到几十倍，有的没有固定大小。

各种霉菌，在一定培养基上形成的菌落大小、形状、颜色等相对稳定，所以菌落特征也为分类依据之一。

3 类酵母型菌落双相性真菌（dimorphic fungus）？•双相性（双形态）真菌（diphasic fungi）则指一些既有酵母细胞形态也有菌丝形态的真菌，两种形态可相互转化，如白念珠菌、马拉色菌等，多为机会性致病菌，致病时多为菌丝相，寄居时多为酵母相。

•双相型真菌（dimorphic fungi）在医学真菌学领域是专指那些在组织内或37℃培养时呈酵母相，于室温中培养时则呈菌丝相的致病真菌，包括孢子丝菌、马内菲青霉、组织胞浆菌、球孢子菌、副球孢子菌和皮炎芽生菌等。

三、真菌的繁殖方式（一）无性繁殖不经两性细胞配合，只是营养细胞的分裂或营养菌丝的分化（切割）而形成新个体的过程。

1 菌丝断裂2 裂殖少数酵母菌可以象细菌一样借细胞横隔分裂而繁殖，例如裂殖酵母（Schizosaccharomyces）。

3 无性孢子无性孢子有：厚壁（垣）孢子、关节孢子、分生孢子、孢囊孢子、（芽生孢子）等。

4 芽殖酵母菌主要的无性繁殖方式，成熟细胞长出一个小芽，到一定程度后脱离母体继续长成新个体。

真菌的无性孢子及其特征（二）有性繁殖（Sexual reproduction）两个“性细胞”结合产生新个体的过程，常见于自然界，人工培养基中不常出现。

有性繁殖一般包括3个阶段：a）质配（plasmogamy）：两个性细胞结合，细胞质融合，成为双核细胞，每个核均含单倍染色体（n＋n）。

b）核配（karyogamy）：两个核融合，成为二倍体接合子核，此时核的染色体数是二倍体（2n）。

c）减数分裂（meiosis）：具有双倍体的细胞核经过减数分裂，核中的染色体数目又恢复到单倍体状态（n）。

真菌的有性孢子及其特征酵母菌有性繁殖酵母菌以形成子囊和子囊孢子的形式进行有性繁殖：①两个性别不同的单倍体细胞靠近，相互接触；②接触处细胞壁消失，质配；③核配，形成二倍体核的接合子：A、以二倍体方式进行营养细胞生长繁殖，独立生活，下次有性繁殖前进行减数分裂。

B、进行减数分裂，形成4个或8个子囊孢子，而原有的营养细胞就成为子囊。

子囊孢子萌发形成单倍体营养细胞。

（三）真菌的生活史无性繁殖阶段：菌丝体（营养体）在适宜的条件下产生无性孢子，无性孢子萌发形成新的菌丝体，多次重复。

有性繁殖阶段：在发育后期，在一定条件下，在菌丝体上分化出特殊性器官（细胞），质配、核配、减数分裂后形成单倍体孢子，再萌发形成新的菌丝体。

有一些霉菌，至尽尚未发现其生活史中有有性繁殖阶段，这类真菌称为半知菌。

常见与常用霉菌简介有性孢子无性孢子菌丝典型特征应用代表毛霉Mucor 接合孢子孢囊孢子无隔球状孢子囊豆豉、腐乳、糖化总状毛霉根霉Rhizopus 接合孢子孢囊孢子无隔假根、匍匐菌丝淀粉酶、糖化酶、甾体转化黑根霉犁头霉Absidia 接合孢子孢囊孢子无隔犁状孢子囊豆豉、豆腐乳、糖化蓝色犁头霉曲霉Aspergillus 未发现分生孢子有隔足细胞糖化菌、酿酒、有机酸黑曲霉、米曲霉、黄曲霉青霉菌Penicillium 未发现分生孢子有隔帚状孢子有机酸、青霉素、酶制剂产黄青霉、点青霉头孢霉Cephalosporium 未发现分生孢子有隔头状分生孢子头孢菌素顶孢头孢霉霉菌和酵母菌的比较大型真菌（例：担子菌（Basidiomycetes））一、菌丝体的结构担子菌的菌丝发育良好，有分隔，往往扩展为扇性。

有头状、笔状、伞状、花朵状等。

担子菌的菌丝具有3个明显的发育阶段：初级菌丝（primary mycelium）、次级菌丝（secondary mycelium ）和三级菌丝（tertiary mycelium ）。

次级菌丝可独立营养并占据了生活史的大部分。

菌丝往往有两个核，称为双核菌丝（dikaryotic hyphal）。

1、初级菌丝（primary mycelium）由担孢子（basidospore）萌发而成，初期是多核，而后产生分隔，成为由单倍体的单核细胞（monokaryotic cell）构成的菌丝。

2、次级菌丝（secondary mycelium ）两个初级菌丝的单核细胞融合，或两个担孢子融合而成的双核体（n+n），双核细胞迅速分裂而成次级菌丝。

次级菌丝以“锁状联合”方式增殖细胞，占据生活史的大部分。

3、三级菌丝（tertiary mycelium ）由次级菌丝发育而来，也是双核菌丝。

特化菌丝形成各种子实体（fruitbody）二、锁状联合（clamp connection）1、双核间出现钩状分枝；2、细胞内一个核进入钩中；3、双核分裂成4个核；4、新分裂的2个核进入细胞一段，一个核仍留在钩中；5、钩向下弯曲，与原细胞壁接触。

壁融合，钩的基部产生隔膜；6、钩中核下移，钩的垂直方向产生隔膜；7、新细胞形成。

三、担子菌的繁殖方式及生活史（一）无性繁殖方式有芽殖、菌丝断裂、分生孢子、粉孢子等。

自然条件下较少出现。

（二）有性繁殖就是产生担孢子，担孢子的解离爆发式解离（三）生活史三、常见担子菌1、香菇（Lentinula edodes属于口蘑科，微香菇属，又名香蕈、香菌、厚菇、花菇等。