临床基因扩增检验实验室的设置及技术验收(下)

临床基因扩增检验实验室的设置及技术验收(下) 李金明 卫生部临床检验中心 100730二． 设施和环境本章包括五条。

要求实验室具备良好的工作环境，即在照明、工作空间、能 源、温控、通风等方面必须能满足检测要求，配备温湿度计和稳压电源等。

要求实验室建立实验室管理制度和措施，对实验室的进入、使用、清洁、管理、废弃血清处理和生物防护等方面作出明确规定。

本章的重点是实验室的设施和环境条件能否满足临床基因扩增检验的要求。

2.1主要是检查实验室的空间、照明、空调系统以及通风系统，各区都应有足够的空间，良好的照明，有符合要求的空调设备以及良好的通风。

2.2较为简单，就是看实验室各区是否配备有温湿度计及是否有温湿度记录本，在扩增区，扩增仪是否配备有稳压电源。

2.3是检查实验室是否有明确的标识对人员进入进行限制和控制，如人员进入控制标识、生物传染危险性标识等。

2.4则看实验室是否有实验室管理制度、实验室清洁程序以及相应的设施，即是否每一个实验区内都有其专用的清洁用具如拖把、抹布等，以及是否规定实验室的清洁亦应遵循试剂准备区→标本制备区→扩增区→产物分析区的单一流向。

2.5检查是否有生物污染物处理的程序及设施和生物防护的程序及设施等，对于设施即看是否有用于生物污染物处理的垃圾袋、消毒桶或高压锅（如果程序规定需要高压的话）；生物防护设施即为口罩、防护衣、手套、眼罩、消毒液、75%乙醇、自来水或生物安全柜等。

曾有同道问，临床基因扩增检验实验室到底需要多大面积？具体多少面积不太好界定，因为实验室可大可小，原则只有一个，就是要能满足自己的工作要求，应为实验操作人员提供一个良好舒适的工作环境，试想如果一个工作环境给你的感觉是一塌糊涂，能做好临床标本的检验吗？三．人员本章包括三条。

要求在临床基因扩增检验实验室工作的实验操作人员必须经过培训并取得上岗证，此外，实验室还应有自己的年度培训计划，保证实验室人员能不断得到培训。

实验室应保存其全部工作人员的技术业绩档案。

3.1检查实验室人员的数量是否足够其开展日常工作，以及看其是否有经过卫生部临床检验中心或其授权机构培训后颁发的上岗证，通常为保证日常检测工作的开展，至少应有2人。

3.2则看实验室是否有对室内技术人员的年度培训计划，即参加国内外高水平相关学术会议、培训班、室内相应培训的安排，室内培训可以是新方法新进展的讲座，也可是室内标准操作程序（SOP）的学习，室内质量控制的评价，检测结果的讨论等。

3.3检查实验室是否有本室人员的技术档案，档案除了个人简历外，还应有其学历、学位、任职资格、培训证明、上岗证等的复印件。

有同道问，是不是每一个人都要有上岗证？回答：是。

参与临床实验操作及发报告者都必须具有培训上岗证。

如果在首次技术验收时，只有1～2人有上岗证，则实验室必须有一个对其它人员的培训计划，保证在一定的时间内获得培训。

在以后的实验室监督检查中如果没有按计划完成培训，且无外界原因所致，则将受到公告处罚。

四．设备管理本章包括四条。

要求实验室对所有的设备有维护程序文件及相应的维护记录、对加样器、温度计、扩增仪和酶标仪等应有明显的标识表明其校准状态，此外，实验室应保存每一台仪器设备的档案材料，对档案材料的具体内容作了详细规定。

4.1查实验室对其主要的仪器设备如加样器、离心机、水浴箱、干浴仪、超净工作台、扩增仪、酶标仪和洗板机等都应有相应的维护程序文件，以及是否做过维护和维护记录等。

4.2看是否对有问题的设备停止使用及是否有明显标识。

4.3则是看实验室内的加样器、温度计、扩增仪和酶标仪等是否有校准程序、校准及是否有校准标签表明已做过校准的日期及下次校准的日期，以及是否尚处在校准的有效期内。

4.4是检查实验室是否有主要仪器设备的档案，每台主要仪器应有一张纸列出4.4中所具有的各项内容（详见本书有关章节），后附仪器的操作说明书、保修证明、合格证等，仪器的操作说明书可为原件，最好有一份复印件，以便于取用，原件一般不动，以防止丢失。

有同道说，仪器档案不都是在医院器材科吗？实验室有必要保存吗？其实并非如此，器材科通常所保存的只是仪器的简单内容，作为固定资产证明，而实验室的仪器档案是一个技术档案，其不但能表明仪器的生产厂家、型号、序列号、目前放置地点、何时购置、购置时的状态等仪器基本资料，而且具有仪器的校准状态、维护修理的历史记录等技术资料，是实验室管理好仪器设备所不可少的一环。

五．检测方法本章包括三条，主要是有关程序文件。

要求实验室必须制定仪器设备操作、校准程序文件、扩增检测的程序文件以及仪器、试剂、消耗品的选购、验收、贮存和质检程序文件等。

5.1检查的是实验室是否有各主要仪器设备操作的SOP文件；是否有有关检测的仪器设备操作的SOP文件；是否有临床标本的提取制备和扩增检测的SOP 文件等。

5.2看这些文件是否已有主管负责人签字批准在用，以及是否放在相应的工作区内，是否便于工作人员的取用等。

5.3则检查实验室是否有仪器、检测试剂、消耗品（包括离心管、带滤心吸头等）的选购、验收、贮存和质检的SOP 文件等。

有一点很重要的就是要审查这些SOP文件的可操作性如何。

有同道问，加样器、温度计、扩增仪和酶标仪等四种仪器的校准，如果由技术监督或计量部门或厂家进行，是否就不需要校准的SOP文件？回答：否。

仍需有校准的SOP，在此SOP中，校准的具体过程可写可不写，但需写明由谁来校准、校准的内容、校准合格的判断标准以及多长时间校准一次。

此外，象温度计的校准，没有必要将每一支温度计拿到计量部门去校准，只需要拿常温低温温度计各拿一支去计量部门校准，其余选择三个温度与已校准温度计做比对校准即可，但具体如何比对，需写出SOP文件。

又有同道问，消耗品如核酸提取用离心管、带滤心吸头等也需要质检SOP吗？当然需要。

离心管和带滤心吸头并非完全就符合核酸提取的要求，有些来源的离心管或吸头常含有扩增抑制物，或含有RNase 和（或）DNase，其对扩增检测肯定会有很大的影响。

此外，带滤心吸头的密封性如何，也是一个很重要的方面，亦需要采用一定的方法进行质检。

具体可参考培训教材。

六．标本管理本章包括五条。

要求实验室必须建立对检测标本的唯一识别系统；制定标本收集、处理、贮存和安全处置的程序，并应对标本贮存的条件加以维持、监控和记录。

6.1检查实验室是否有对临床标本的唯一编号识别系统，要看所制定的唯一编号识别系统是否真正具有唯一性并是否有实用性。

6.2是看实验室是否有各项目临床标本的收集、运送和保存的SOP文件，并看实验室是否有措施来保证标本不致丢失或调换，即是否有专人管理、保存用冰箱是否有锁或在一个安全的地方，以及一旦发生丢失或调换的确认识别方法等。

6.3则是看实验室在接收标本时是否有标本状态的描述记录，是正常还是异常，以及异常的程度。

6.4是查实验室在接受临床标本时，如果对标本是否适用于检测有疑问，或者标本与所要求的不符，或检测的要求规定不完全，实验室是否有一个询问相关临床科室，要求进一步予以说明的程序，从而确定标本是否已经完成了所有必要的准备。

6.5是看用于临床标本保存的冰箱内是否有经过校准的温度计监控温度，并是否有日常记录。

七．记录本章包括三条。

要求实验室必须制定符合自身实际情况记录管理制度，要求对记录进行归档保存，每份记录均有相关人员的签字。

7.1查的是实验室是否制定有符合自身实际情况记录管理制度，记录的管理应说明由谁来管、在何处保存以及保存多长时间，还有就是记录要针对书面记录和电子记录要区别对待。

7.2查实验室是否归档并保存有所有的原始检测记录、计算和导出数据，以及每次校准和检测的记录和记录信息的充分性，此外，要求所有的记录必须有相关人员的签字。

7.3则是检查所有记录和报告是否有妥善的保管，以及是否能做到保密性，具体说就是是否有保存记录的柜子，并是否上锁。

八．报告本章包括四条，主要是对检测报告的内容和方式做出明确要求。

要求定性测定报告“阴性”或“阳性”；定量测定则以“拷贝数/ml”或“IU/ ml”报告，报告单上应有以下基本内容：唯一性标识、标本特性和状态、标本接收时间和检测时间、检测方法、检测者和校验者签字及签发日期、参考结果或范围等。

此外，对于要求用电话、传真、电子邮件等方式报告结果时，应有相应程序文件，以保证结果的不泄密。

8.1检查实验室对临床检测的结果报告是否按《工作规范》的要求明确表达。

8.2则按表中所列各项逐项核对其检验报告上的内容是否与之相符。

8.3是看实验室当发现其检验结果报告的有效性有问题时，实验室是否有一套立即通知临床相关科室予以改正的程序。

8.4则是检查实验室是否有一个检验报告的发放程序，并看该程序中是否有对要求用电话、传真、电子邮件等方式报告结果的规定。

有同道问，在制定检验报告的发放程序时，是否可以规定“拒绝以电话、传真、电子邮件等方式报告结果”，这是充许的，可以自己根据实际情况来确定。

但如果规定可以电话、传真、电子邮件等方式报告结果，则需有相应的措施来保证检验结果的保密性。

九．质量控制本章共二条，即对室内质控要求有程序文件，对室间质评要求是必须参加。

9.1是查实验室是否有一个室内质量控制的程序文件。

一个较完整的具有可操作性的室内质控SOP至少应包含以下内容：（1）质控物的来源及浓度，以及阴性质控物的设置。

（2）选择什么样的统计质控方法。

要注意均值和标准差（SD）是怎样得来的，以及20次前所应用的质控措施。

（3）失控的判断标准。

（4）失控后应该怎么办。

9.2则是看实验室是否参加了室间质评。

有同道问，质量控制对于保证临床基因扩增检验质量来说是一项很重要的工作，为何规定这么简单？其实条目少并不等于简单。

室内质控是一个内涵非常丰富的工作，质控方法并不是一个确定的模式，多种多样，并且仍在不断发展，作为一个具体的实验室，应根据自己实验室的具体情况，制定一个室内质控程序文件，并按其进行室内质控。

具体质控方法可以按照培训教材中的内容及《工作规范》的相关内容进行。

十．抱怨本章共二条。

要求实验室制定抱怨及其处理的标准操作程序，并将有关资料归档保存。

10.1检查的是实验室是否有针对抱怨及其处理的SOP文件，是否有相应的记录表格或记录本并归档保存。

10.2则检查实验室在抱怨或其它任何事项对实验室是否符合其现行程序、是否符合《管理办法》和《工作规范》以及对其它有关实验室校准或检测质量提出疑问时，实验室是否立即对这些范围的工作和有关职责进行了审核。

十一.其它有关技术验收的内容除了按照上述技术验收表的内容对实验室逐项验收外，技术验收还有考试和实验测试等有关内容。

考试包括笔试和/或口试，内容主要是有关实验室实际检测工作中应该知道的，重点是对实验室所制定的SOP文件的熟悉程度及是否能根据实际工作中遇到的情况加以运用。