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急性出血性结膜炎（红眼病）第一篇：急性出血性结膜炎(红眼病)急性出血性结膜炎(红眼病)防治知识急性出血性结膜炎俗称“红眼病”，是一种急性病毒性眼病，本病起病急骤，传染性极强，通过直接或间接接触病人泪液和眼分泌物传播，接触传染源后2～48小时内双眼同时或先后发病，主要症状:眼睛刺痛、砂砾样异物感、烧灼感、畏光、流泪，眼睑水肿，睑结膜和球结膜高度充血,无全身症状，少数人有发热、咽痛等上感症状。
该病病程短1～2周，无特殊有效疗法，但预后良好, 无视力损害，一般无后遗症。
一、传播途径本病全年均可发生，以春夏季节多见。
本病主要通过接触传染，常使“一人得病，全家受累，一处传染，四方蔓延”之势。
二、预防措施1、“红眼病”人最好在家休息一周以上，不要进入公共场所或参加各种集会，避免传染其他人。
2、家庭成员、密切接触者，接触患者后用75%酒精消毒双手。
3、病人的洗脸用具单独使用，病人的泪水及分泌物中含有大量细菌和病毒，通过接触带有病人眼分泌物的物件使健康人得病。
4、禁止一支眼药水多人使用。
5、养成个人爱眼卫生，不擦眼、勤洗手、毛巾和面盆分开使用的卫生习惯。
三、治疗原则得了红眼病后要积极治疗，一般要求要及时、彻底、坚持。
一经发现，立即治疗，不要中断，症状完全消失后仍要继续治疗1周时间，以防复发。
1、4%吗啉双胍、0.1%三氮唑核苷滴眼剂、0.5%利福平膏进行治疗。
2、眼分泌物多时可用温生理盐水或2%硼酸液清洗。
3、中药金银花、野菊花、板蓝根、桑叶、薄荷等热薰敷或提取液滴眼，对缓解症状有一定疗效。
4、抗生素和磺胺类药物无治疗效果，但可作为预防混合感染或继发细菌感染用药。
厦门市海沧职业中专学校医务室2007年9月第二篇：急性出血性结膜炎(红眼病)防控知识急性出血性结膜炎（红眼病）防控知识中华人民共和国卫生部2010-09-1715:03:21急性出血性结膜炎，俗称红眼病，是世界范围内的流行性传染性眼病，为我国法定丙类传染病。
急性出血性结膜炎应急处置预案急性出血性结膜炎又称流行性出血性结膜炎（俗称红眼病）是近30年来世界暴发流行的一种新型急性病毒性眼病。
它是主要由肠道病毒引起的，以结膜高度充血，常见结膜下出血及角膜上皮点状剥脱为主要临床特征的传染病。
一般可在2～3周痊愈，属于自限性疾病，预后良好。
该病全年均可发病，多见于夏秋季，各年龄组人群均可发病。
主要通过接触传播，传染性极强，传播速度快，人群普遍易感，易导致流行或暴发。
为做好急性出血性结膜炎暴发疫情的应急处置工作，根据《中华人民共和国传染病防治法》、《突发公共卫生事件应急条例》、《国家突发公共事件总体应急预案》、《突发公共卫生事件与传染病疫情监测信息报告管理办法》等有关规定，结合玉溪市实际，特制定本预案。
一、目的确保在发生急性出血性结膜炎疫情时，能够及时、有效地开展调查处置工作，防止疫情扩散和蔓延，最大程度地保护公众的身体健康，促进经济发展和维护社会稳定。
二、预警分级根据急性出血性结膜炎散发、暴发或流行的发展进程及特点，将预警分为四级：Ⅳ级预警、Ⅲ级预警、Ⅱ级预警和Ⅰ级预警。
（一）Ⅳ级预警：急性出血性结膜炎病例呈散发状态，发病水平超过3年同期平均水平2倍以上，或1周内1个州（市）的1个县发生暴发，病例数100～499例。
（二）Ⅲ级预警：1周内1个州（市）的1个县发生暴发，病例数500～1000例；或1个州（市）的2个或2个以上县发生暴发，每个县的病例数均大于100例。
（三）Ⅱ级预警：1周内1个州（市）的1个县发生暴发，病例数大于1000例；或1个州（市）的2个或2个以上县发生暴发，每个县的病例数均大于500例。
（四）Ⅰ级预警：1周内2个或2个以上州（市）发生1000例以上的暴发流行。
三、应急组织及职责（一）组织机构视疫情的预警分级和相应反应，各级卫生行政部门应成立相应的领导小组及技术处置小组，技术处置小组下设疫情组、流调组、临床诊疗组、检验组、消杀组和后勤保障组，开展疫情控制和医疗救治工作。
公卫：急性出血性结膜炎的流行病学特征及处置原则李忠山东省疾病预防控制中心病毒病防制所副所长，副主任技师裴耀文山东省疾病预防控制中心病毒病防制所技师急性出血性结膜炎(AHC)也称为流行性出血性结膜炎，是主要由肠道病毒引起的，以结膜高度充血，常见结膜下出血及角膜上皮点状剥脱为主要临床特征的传染病。
一般可在2～3周痊愈，属于自限性疾病，预后良好。
AHC全年均可发病，多见于夏秋季。
传染性极强，人群普遍易感，发病率高，发病集中。
大流行期间曾造成一些城市停课、停产、停市，给人民生活、工作和社会生产造成严重危害，为我国法定丙类传染病。
一、AHC的病学特征引起AHC的主要为肠道病毒70型(EV70)和柯萨奇病毒A组24型变种（CA24v）。
少数情况下腺病毒11型也可引起该病。
EV70属微小核糖核酸病毒科，具有肠道病毒的理化及生物学特性。
病毒呈球形，直径22～30nm，基因组为单链RNA，蛋白外壳呈对称排列的20面体，无包膜。
病毒在敏感细胞胞浆内繁殖。
CA24v也属微小RNA病毒科，生物学特性基本同EV70，可用HeLa细胞等多种传代细胞培养，易分离。
曾引起亚洲、中南美等地区大流行。
不同流行期病毒基因常有变异，可引起世界范围大流行，世界范围急性出血性结膜炎流行地区分离出的病毒常为EV70。
亚洲地区急性出血性结膜炎流行分离的病毒以CA24v为多。
我国历次急性出血性结膜炎流行中各地区都分离出CA24v或EV70，也以CA24v感染为多，有时可发生两种病毒同时流行感染。
CA24v和EV70适合在温暖、潮湿的环境中生存与传播，均耐酸、耐乙醚，对一般常用消毒剂、脂溶剂抵抗，对紫外线、氧化剂、高温干燥敏感。
二、AHC的流行病学特征(一)流行概况急性出血性结膜炎曾在世界范围内发生多次大流行。
CA24v是1970年AHC在新加坡流行时首次被分离出来的，直到上个世纪八十年代才有CA24v在东南亚国家和印度群岛以外地区爆发的报道。
二十世纪七十年代早期，EV70与CA24v几乎同时被报道，此后在全球迅速蔓延。
急性出血性结膜炎急性出血性结膜炎（简称AHC）是非功过969年新发现的一种眼病，系有肠道病毒70型所引起，现已波及世界各地，成为目前人类最常见的眼病之一。
本病具有发病快、传染性强并可并有结膜下出血和角膜上皮损害等特点。
本病多发生于夏秋季节，主要通过水或直接接触传染。
人类对本病普遍易感，无性别差异。
多数病例在发病时可有耳前颌下淋巴结肿大，并有压痛。
该症状随结膜炎的消退而消失。
极少数病例尚可出现虹膜炎的改变。
急性出血性结膜炎-简介急性出血性结膜炎急性出血性结膜炎（acute hemorrhagic conjunctivitis, AHC）又称流行性出血性结膜炎（俗称“红眼病”），为中国法定丙类传染病，是近30年来世界暴发流行的一种新型急性病毒性眼病。
1971年我国首次暴发流行本病，除边远地区外遍及中国各省市，包括香港、台湾。
此后80年代、90年代世界很多国家和地区及我国均有多次地区性小规模流行。
本病特点为潜伏期很短，起病急骤、眼刺激症状重，结膜高度充血，常见结膜下出血及角膜上皮点状剥脱。
[1]急性出血性结膜炎-病原本病病原为微小核糖核酸病毒科中的新型肠道病毒70型（enterovirus 70, EV70）或柯萨奇病毒A24型变种（Coxsakie virus A24 ，CA24v）。
两种病毒形态相同，皆为球形，直径20～30nm。
蛋白质衣壳呈立体对称二十面体，有32个子粒，无外膜。
基因组为单股正链RNA，在宿主细胞胞浆内繁殖复制。
病毒耐酸、耐乙醚，对一般常用消毒剂、脂溶剂抵抗，对紫外线、氧化剂、高温干燥敏感。
世界范围急性出血性结膜炎流行地区分离出的病毒常为EV70，亚洲地区急性出血性结膜炎流行分离的病毒以CA24v为多。
EV70和CA24v两种病毒引起的急性出血性结膜炎临床表现基本相同，两者不能区别。
病因世界各国在本病流行时，都分离出一种新型的微小核糖酸病毒。
该病毒直径约20～30毫微米，球形、RNA单股病毒。
急性出血性结膜炎基本知识急性出血性结膜炎(acｕte heｒrhａgiｃ coｎjuｎcｔｉvitiｓ)也称为流行性出血性结膜炎,是主要由肠道病毒引起的。
起病急，潜伏期短。
一般在数小时至２4小时内发病,双眼可同时起病或先后起病.刺激症状重。
患者迅速出现异物感,眼磨痛，流泪，畏光，以及水样分泌物增多.少数患者可有全身发热,乏力，咽痛及肌肉酸痛等症状。
传染源：患者是本病的主要传染源,其眼部分泌物及泪液均含有病毒.传播途径:该病主要是通过接触被患者眼部分泌物污染的手、物品或水等而发病,部分患者的咽部或便中也存在病毒.人群易感性:人群普遍易感,各年龄组均可感染发病。
可以由不同型别病毒单独感染发病，也可发生两种病毒混合感染。
病后免疫持久性差，患者病愈后，可以被不同病毒感染而再次发病，亦可能在间隔数年后被同一种病毒再次感染而发病。
潜伏期：发病后2周内传染性最强。
该病潜伏期一般为12—48小时,最长可达6天。
诊断:急性出血性结膜炎临床符合病例:在夏秋季，有直接或间接接触史、２－3小时或1—2天潜伏期,急剧发病或爆发流行性、传播快的急性结膜炎或角结膜炎,具有结膜高度充血、水样分泌物增多、耳前淋巴结肿大,部分伴有角膜上皮性病变等特征，可以作出临床诊断。
另外，对结膜囊的分泌物进行病毒分离鉴定，有助于病毒肠道病毒７0型、柯萨奇病毒A24变种的确定。
治疗：临床上可用抗病毒眼液如０。
5％病毒灵眼液,０．１％疱疹净眼液,5%吗啉双胍眼液,干扰素眼液或0.2％阿糖胞苷眼液，开始时每小时一次，3天后逐渐减少次数,晚间涂环胞苷眼膏或抗生素眼膏。
有角膜上皮病变的患者加用表皮生长因子眼液或眼表面润滑剂或人工泪液促进上皮修复及保护上皮。
有前房炎症时加用散瞳剂或非甾体抗炎药．隔离:患者应进行隔离，尤其在学校、幼儿园等集体单位,患者的洗漱用品应消毒，患者禁止进入公共浴池及游泳场。
发现该病应及时向主管卫生、防疫部门作传染病报告.。
急性结膜炎诊疗指南正常情况下，结膜具有一定防御能力，但当防御能力减弱或外界致病因素增加时，将引起结膜组织炎症发生，这种炎症统称为结膜炎。
按病程可分为超急性、急性、亚急性、慢性结膜炎。
一、病因1.外源性急性结膜炎：由于大部分结膜与外界直接接触，因此容易受到周围环境中感染性（如细菌、病毒、及衣原体、霉菌性、变态反应性等）和非感染性因素（外伤、化学物质及物理因素等）的刺激，而且结膜的血管和淋巴组织丰富，自身及外界的抗原容易使其致敏。
2.内源性急性结膜炎：致病菌通过血行或淋巴使结膜感染，或对全身他处感染物发生过敏反应。
3.局部组织病变蔓延：邻近组织如角膜、巩膜、眼睑、鼻窦泪器等部位的炎症蔓延而来。
二、临床表现自觉症状常有眼部异物感、烧灼感、发痒和流泪等。
三、体征1.结膜充血和水肿；2.分泌物增多；3.结膜下出血；4.乳头增生；5.滤泡形成；6.膜或假膜形成；7.耳前淋巴结肿大和压痛等。
四、检查1.取结膜囊分泌物涂片或睑结膜刮片检查及细菌培养：发病早期进行，可确定致病菌和敏感药物，指导治疗。
对于一般的细菌性结膜炎，细菌学检查并非常规。
2.血常规检查：对于严重的、伴有上呼吸道感染的患者可进行血常规检查，明确感染的程度和性质。
五、诊断可根据其临床症状和体征诊断，同时也依靠实验室检查，包括细胞学、病原体培养、免疫学和血清学检查等。
六、治疗1．局部治疗1）冲洗结膜囊：可用生理盐水，冲洗时要翻转眼睑，同时用手指推动上、下睑，以彻底冲去分泌物。
2）局部用药：①滴眼剂：可选用含抗生素和磺胺药的眼药水。
药物的选择应根据致病菌对其是否敏感而定，重症者在药敏结果报告出来前可行几种抗生素合用。
②眼膏：在结膜囊内停留时间较久，适用于睡前。
3）全身治疗：严重的结膜炎病人需全身使用抗生素、磺胺药物、抗病毒药物或其他药物。
七、预防传染性结膜炎可造成流行性感染，因此必须做好隔离和预防。
防止交叉感染。
八、随访开始每2-3天复查一次，之后每5-7天复查一次，直至恢复。
十、急性出血性结膜炎（一）概述急性出血性结膜炎（acute hemorrhagic conjunctivitis,AHC）又称流行性出血性结膜炎。
是1969年以来世界范围暴发流行的新型急性传染性眼病，病原为微小核糖核酸病毒科中的肠道病毒70型（enterovirus 70,EV70）或柯萨奇病毒A24型变种（Coxsakie virus,CA24v）[1]。
该病的潜伏期很短,起病急。
1～２h内眼部即眼红、刺痛、沙砾样异物感、畏光、流泪等刺激症状明显，双眼同时患病或一只眼发病后很快波及另一只眼，也可出现眼睑水肿，睑结膜、球结膜高度充血，常见点状、片状结膜下出血。
早期分泌物为水样(浆液性) ,如有继发细菌感染则可变为黏液脓性。
该病的自然病程为1～3周，一般预后良好，不造成视力损害。
但偶有出现神经系统并发症者。
广州市在学校中传播该病的主要传染源是急性患者。
日常学习生活的密切接触是主要传播方式，最常见的是污染粘有眼分泌物的手,在人群之间直接接触传播,经毛巾、课桌、公共用品等间接传播。
人群普遍易感，病后对本病具有一定免疫力,但不同类型病毒之间无交叉免疫。
全年均可发病，在我市以夏秋季为常见。
本病接触传染性极强，一旦流行，传播快、波及面广，对人民生活、工作和社会生产造成很大影响[1]。
广州于1971年、1981年、1988年分别发生过该病流行。
2007年8月底至10月，广州市急性出血性结膜炎疫情活跃，大多数暴发疫情集中在学校和托幼机构，所以学校及托幼机构应足够重视，加强对该病的预防与控制。
（二）疫情发生前学校预防工作1、开展健康教育是基础利用墙报、校内广播、讲座、健康教育课和主题班会等多种形式进行预防知识宣传教育，让学生及其家庭了解急性出血性结膜炎的预防知识；教育学生要勤洗手，保持良好的个人用眼卫生习惯，避免用未洗净的手触摸眼睛，触摸眼睛后要彻底洗手；不要与别人共用毛巾、脸盆等用品，用流动水洗脸和手；不要与他人共用眼药水等可能接触眼部的用品；在疾病流行期间避免进入公共洗浴场所；出现相关症状时，应主动到医疗机构就诊。
急性出血性结膜炎诊断标准（Acute hemorrhagic conjunctivitis）【WS 217-2008】(2008-02-28发布，2008-09-01实施)2 诊断依据2.1 流行病学史2.1.1 本病易导致流行或暴发流行，以夏秋季常见，流行期间无季节性。
2.1.2 患者多有明显的接触感染史.通过眼→手、物、水→眼的途径接触传染。
2.2 临床表现2.2.1 临床症状潜伏期短.起病急剧，自觉症状明显，双眼先后或同时患病；有剧烈的异物感、眼红、眼刺痛、畏光、流泪等刺激症状；早期分泌物为水性，重者带淡红色，继而为黏液性(参见附录A)。
2.2.2 体征眼睑红肿，睑、球结膜中、高度充血，多伴结膜下点、片状出血。
早期角膜上皮点状剥脱，荧光素染色后裂隙灯检查可见角膜弥漫散在细小点状着染。
2.3 实验室检测2.3.1 结膜细胞学检查见单个核细胞反应为主。
2.3.2 结膜拭子涂擦或结膜刮取物培养分离出病毒，并应用微量中和实验鉴定为EV70或CA24v(见B.1)。
2.3.3 结膜细胞涂片或细胞培养物涂片间接免疫荧光技术检测，查见EV70或CA24v抗原(见B.2)。
2.3.4 双相血清学检查。
患者恢复期血清抗EV70或抗CA24v 抗体比急性期血清抗体滴度升高≥4倍(见B.3)。
3 诊断原则根据流行病学史、临床症状、体征，结合结膜细胞学检查作出临床诊断。
临床诊断结合病原学检查或血清学检查作出确诊。
4 诊断4.1 疑似病例同时符合2.1、2.2者；4.2 临床诊断病例同时符合2.1、2.2和2.3.1项者，4.3 确诊病例同时符合2.1、2.2以及2.3.2、2.3.3、2.3.4中任何一项者。
急性出血性结膜炎诊断标准及处理原则
急性出血性结膜炎诊断标准及处理原则
急性出血性结膜炎诊断标准及处理原则
中华人民共和国卫生行业标准
2001-11-23发布 2002-05-01实施
中华人民共和国卫生部发布
前言
急性出血性结膜炎（acute hemorrhagic conjunctivitis，AHC）又称流行性出血性结膜炎，是1969年以来世界范围暴发流行的新型急性传染性眼病，病原为微小核糖核酸病毒科中的肠道病毒70型（enterovirus 70，EV70）或柯萨奇病毒A24型变种（Coxsakie virus A24，CA24v）。
本病接触传染性极强，人群普遍易感，一旦流行，传播快、波及面广，对人民生活、工作和社会生产造成很大影响。
本病属丙类传染病，依据《中华人民共和国传染病防治法》及《中华人民共和国传染病防治实施法》，特制定本标准。
本标准的附录A、附录B是标准的附录，附录C是提示的附录。
本标准由卫生部疾病控制司提出。
本标准负责起草单位：北京市眼科研究所。
本标准主要起草人：金秀英。
本标准由卫生部委托卫生部传染病防治监督管理办公室负责解释。
中华人民共和国卫生行业标准
急性出血性结膜炎诊断标准及处理原则
Diagnostic criteria and principles of management of acute hemorrhagic conjunctivitis
1 范围
本标准规定了急性出血性结膜炎的诊断标准及处理原则。
本标准适用于全国各级各类医疗、卫生、防疫机构和人员对急性出血性结膜炎
的诊断、报告和处理。
2 诊断原则
根据流行病学、病史、临床症状、体征，结合一般实验室检查对急性出血性结膜炎作出临床诊断。
根据病原学检查，分离病毒阳性或病人恢复期血清特异性中和抗体滴度较急性期血清特异性中和抗体滴度增高≥4倍或ELISA检测EV70或CA24vIgM抗体阳性，结合临床诊断进行确诊。
3 诊断标准
3．1 流行病学史
急性出血性结膜炎传染性强，一旦出现病人，往往导致流行或暴发流行。
此病全年均可发病，在我国以夏秋季为常见。
病人多有明显的直接或间接接触史。
3．2 临床症状及体征
3．2．1 潜伏期短，起病急。
1～2h内眼部即眼红、刺痛、砂砾样异物感、畏光、流泪、刺激症状明显。
双眼同时患病或一只眼发病后很快波及另一只眼。
3．2．2 眼睑水肿，睑结膜、球结膜高度充血，常见点状、片状结膜下出血。
早期分泌物为水性，重者带淡红色，继而为粘液性。
3．2．3 裸眼检查角膜不易发现异常。
荧光素钠染色后裂隙灯显微镜检查角膜上皮层见多发点状剥脱。
3．2．4 睑结膜、穹窿部结膜滤泡增生。
3．2．5 耳前淋巴结常肿大，有压痛。
3．2．6 本病自然病程为1～3周，一般预后良好，但偶有出现神经系统并发症者。
3．3 实验室检查
3．3．1 结膜细胞学检查呈单个核细胞反应。
结膜囊普通细菌培养阴性。
3．3．2 结膜拭子涂擦或结膜刮取物培养分离出EV70或CA24v（见附录A）。
3．3．3 双相血清学检查。
病人恢复期血清抗EV70或抗CA24v抗体比急性期血清抗体滴度升高4倍或4倍以上（见附录B）。
3．3．4 结膜刮片间接免疫荧光技术检测，荧光显微镜下可见病毒抗原。
3．4 病例分类
3．4．1 疑似病例：具备3．1、3．2．1。
3．4．2 临床诊断：具备3．1、3．2。
3．4．3 确诊病例：具备3．1、3．2，同时具备3．3．2、3．3．3或3．3．4三项中任何一项即可确诊。
4 处理原则
4．1 传染病报告与调查
4．1．1 眼科门诊出现急性出血性结膜炎临床诊断病例时，医务售货员应向行政科室报告。
医疗单位负责及时报告当地主管卫生、防疫部门，即要做出疫情控制的对策，密切观察疫情，确诊病原，采取措施控制蔓延。
4．1．2 临床典型病例进行个案调查，在发病1～3日内用结膜拭子在结膜囊、结膜表面涂擦取材，在冷藏条件下（冰瓶4℃以下）送有条件的实验室作病毒分离。
收集双相血清备血清学检查。
4．2 病人的隔离与消毒
患眼泪液、眼分泌物含大量病毒，通过眼-手、物-眼途径直接、间接接触传染性极强，人群普遍易感。
早期发现病人，对病人采取隔离，防止家庭成员间、群体间接触传播是极其重要的。
隔离期7～10日。
4．2．1 病人洗脸用品分巾、分盆，煮沸消毒或开水浇烫。
病人接触过的物品应擦拭消毒。
污染物煮沸消毒。
4．2．2 家庭成员、密切接触者，接触后消毒双手。
4．2．3 医务工作者检治病人后必须认真消毒双手及接触患眼用物以后再接触其他病人。
使用的仪器、物品清拭消毒，严防医源性传播。
4．2．4 本病流行期间，医院设专台门诊，避免交叉感染。
4．3 预防
4．3．1 开展卫生教育，宣传个人爱眼卫生，养成勤洗手，不揉眼，分巾、分盆的卫生习惯。
4．3．2 注意公共卫生，加强对游泳池、浴池、理发室、旅馆的卫生管理与监督。
阻止“红眼病”患者进入公共场所或参与社交活动。
暴发流行期间根据疫情，由有关部门责令游泳池、浴池等场所停止开放。
4．3．3 不宜采用集体滴眼药预防眼病。
4．4 治疗原则
4．4．1 病期休息有利于隔离与康复。
4．4．2 对症治疗，防止继发感染（见附录C）。
附录 A
（标准的附录）
病毒的分离与鉴定
A1 标本的采集、运送和保存
A1.1 患眼结膜囊泪液、分泌物是分离EV70、CA24v的主要标本。
起病1～5日内排毒，以1～3日为高峰期，随时间延长分离阳性率下降。
标本采集应在起起1～3日以内。
A1.2 用灭菌棉拭子涂擦翻转的上、下睑结膜并拭取泪液立即投入装有灭菌生理盐水或Eagle液或0.5%水解乳蛋白Hanks液1.5mL的小试管中。
贴好标签，置冰壶内携至实验室或低温（-20℃～-70℃）冻存。
A2 病毒分离
A2.1 取出标本，无菌条件下揉洗棉拭子，挤压出标本液，加10%青霉毒、链霉素（原浓度青霉毒、链霉素各1万u/mL），置4℃作用2h后用作病毒分离。
A2.2 细胞培养用生长单层的HeLa细胞或人胚肺二倍体细胞或其他敏感细胞，生长液为10%牛血清Eagle液，含青霉素100u/mL，链霉素100u/mL，pH7.2。
A2.3 倾去细胞管内生长液。
每细胞管接种标本液0.2mL。
每份标本液接种4个细胞管。
加维持液2%胎牛血清Eagle液1mL/管。
余标本液置-70℃冻存。
细胞对照管4管，每管加2%胎牛血清Eagle液1.2mL。
37℃温箱静置培养。
每日光学显微镜下观察细胞形态。
3～4天更换维持液一次，连续观察7日。
A2.4 细胞管出现细胞病变，表现为细胞圆缩、分散、胞浆内颗粒增加，最后细胞自管壁脱落，为分离阳性结果。
细胞病变达“+++”时，将细胞收留冻存于-70℃备TCID50滴定及病毒鉴定。
第1代培养见可疑细胞病变时继续传代，待细胞病变稳定出现后-70℃冻存。
第1代培养7日不出现细胞病变时连续盲传3代，如仍无细胞病变则为分离阴性结果。
A3 病毒TCID50滴定
阳性细胞管冻融3次。
2000r/min离心沉淀10min，吸取上清，加Eagle液10倍
系列稀释为10-1至10-8病毒液，各加入细胞管内，每管0.1mL。
每稀释度4管细胞。
每管加维持液0.9mL，37℃培养7天观察细胞病变。
按Reed-Muench法计算出分离病毒株的TCID50。
A4 病毒鉴定
用标准抗EV70免疫血清、抗CA24v免疫血清与分离的病毒株，以100个TCID50病毒，20单位标准血清做中和试验。
以抑制细胞病变的免疫血清型别为待鉴定病毒的型别。
附录 B
（标准的附录）
血清学检查
B1 发病1～3日内采取患者急性期血清，发病2～4周采取恢复期血清分别冻存备检。
B2 双相血清56℃，30min灭活后同时与标准病毒株、自患者分离出来的病毒株或本次流行期分离出的病毒株做中和试验、检测血清特异中和抗体滴度增长情况。
固定病毒用量100TCID50与等量系列稀释的血清混合作用后接种细胞板每日观察细胞病变。
中和抗体滴度的判定是以不产生细胞病变的血清最高稀释度的倒数为终点效价。
B3 恢复期血清中和抗体滴度比急性期血清中和抗体滴度升高4倍或4倍以上有诊断意义，也表明分离出的病毒是本次流行的结膜炎的病原。
附录 C
（提示的附录）
治疗
C1 抗生素、磺胺药无治疗效果，可以作为预防混合感染或继发细菌感染用药。
C2 基因工程干扰素滴眼剂有广谱抗病毒作用。
C3 4%吗啉双胍（biguanine hydrochloride，ABOB）、0.1%羟苄苯并咪唑（hydroxybenzyl benzimida-zole，HBB）、0.1%三氮唑核苷（virazole）滴眼剂、0.5%利福平膏对有些病毒株有抑毒作用。
