6-BA和NAA对不同甘薯品种茎尖培养的影响
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摘要:以黄檗幼嫩的茎尖和茎段为材料建立外植体,以MS培养基为基本培养基进行黄檗的组培快繁,研究不同培养条件对黄檗快速繁殖的影响。
结果表明:75%的酒精消毒8s+0.1%HgCl2消毒4min对外植体消毒效果最好;以6-BA0.7mg/L+NAA1.0mg/L的MS培养基对黄檗茎段的诱导效果最好;以NAA浓度为0.7mg/L的MS培养基生根效果最好;黄檗组培苗在培养30d后进行转培对黄檗组培苗的生长最好。
关键词:黄檗;培养条件;快速繁殖黄檗(Phellodendron amurense Rupr.)又名黄菠萝,芸香科,落叶乔木,是国家二级珍贵树种,也是我国三大珍贵阔叶树种之一。
黄檗具有深根性、抗风力强、生长快等特点,对气候适应性强,苗期稍能耐荫,成年树喜阳光。
主要分布在我国的黑龙江、吉林、辽宁、河北等省[1]。
黄檗树皮木栓层很发达且其中含有一些生物碱,具有重要的经济和药用价值。
黄檗树叶随季节而变化,也可用于园林[2]。
该树种在新疆各地城市绿化生态园林中得到广泛应用,目前已推广到博乐、奎屯、克拉玛依、乌鲁木齐及和田等地。
目前,黄檗已经被列为国家二级保护植物和重点植物保护资源,在《中国植物红皮书》中,将其列为渐危种。
黄檗种皮坚硬,透水和透气性较差,所以种子发芽率较低。
扦插繁殖,黄檗不易生根,成活率低,繁殖系数低[3]。
组织培养可在短期内得到大量、优质、整齐的组培苗,有可能是解决种苗短缺的有效途径之一。
本项目的研究旨在找寻黄檗快速繁殖的最适条件。
1材料与方法1.1试验材料黄檗的繁殖材料于2019年5月17日至2019年6月7日采自石河子大学农学院实验站黄檗树上的新鲜幼嫩的茎尖和茎段。
1.2试验方法1.2.1外植体的选择与消毒于生长期分别采取黄檗幼嫩的茎尖和茎段(长2cm左右),采用75%的酒精和0.1%的HgCl2进行消毒,经不同时间的消毒灭菌后,建立外植体。
本实验采用75%的酒精(消毒时间:3s、5s和8s)和0.1%的HgCl2(消毒时间:2min、4min和6min)进行消毒,共设9组实验方案。
不同浓度的NAA、6-BA对凤头姜试管苗生长的影响赵卓;舒佳礼;葛台明【摘要】Fengtoujiang is a high quality ginger(Zingier Officinale Roscoe)cultivar only planted in Hubei,and is a National Product of Geographical Indication originated in Laifeng County,Enshi,Hubei.In this report,the virus-free test tube plantlets of Fengtoujiang were proppgated on MS media supplemented with different concentrations of NAA and 6-BA,and the root number,proliferation rate,rhizome growth and plant height were investigated.The main results are as follows: 6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L are most effective for rooting;6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L is best to proliferation;6-BA 2 mg/L alone is most suitable for rhizome growth,and 6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L are favorable to the plant height.%凤头姜是获国家地理标志产品保护的、湖北省特有优质生姜品种.以恩施市来凤县的凤头姜为材料,进行脱毒苗快繁,比较添加了不同浓度的NAA、6-BA的MS培养基对凤头姜试管苗生根、增殖、根状茎发育及株高的影响.结果表明,当6-BA的浓度为2.0 mg/L,NAA的浓度为0.2 mg/L时,对生姜试管苗生根的促进效果最明显;当6-BA 的浓度为4.0 mg/L、NAA的浓度为0.2 mg/L时最利于生姜试管苗的增殖;当MS 培养基中只添加2mg/L的6-BA,不添加NAA时,最有利于生姜根状茎的生长;当NAA浓度为0.5 mg/L、6-BA的浓度为2 mg/L时最有利于生姜株高的增加.【期刊名称】《湖北民族学院学报(自然科学版)》【年(卷),期】2011(029)003【总页数】4页(P278-281)【关键词】生姜;脱毒苗;快繁;植物激素【作者】赵卓;舒佳礼;葛台明【作者单位】湿地演化与生态恢复湖北省重点实验室,中国地质大学武汉,湖北武汉430074;生物地质与环境地质国家重点实验室,中国地质大学武汉,湖北武汉430074;湿地演化与生态恢复湖北省重点实验室,中国地质大学武汉,湖北武汉430074;生物地质与环境地质国家重点实验室,中国地质大学武汉,湖北武汉430074;湿地演化与生态恢复湖北省重点实验室,中国地质大学武汉,湖北武汉430074;生物地质与环境地质国家重点实验室,中国地质大学武汉,湖北武汉430074【正文语种】中文【中图分类】Q813.13姜(Zingier Officinale Roscoe,染色体2n=2x=22)属多年生单子叶草本植物,生产上为一季栽培.植物分类学上属姜科、姜属,能形成地下肉质根状茎的栽培种,又称生姜、鲜姜等.生姜不仅可以食用,还可入药,是我国重要的经济作物之一.生产中,生姜通常是通过无性繁殖,致使病毒在体内大量积累,进而导致产量下降、品质降低、品种退化,制约了生姜的生产发展.脱毒快繁技术可有效地消除姜体内的病毒,从而恢复姜品种的优良种性.种植于湖北省恩施市来凤县的凤头姜是获得国家地理标志产品保护的、湖北省特有优质生姜品种,因其形似凤头而得名.该姜品质优良、风味独特,鲜仔姜无筋脆嫩、富硒多汁、辛辣适中、美味可口,远销东南亚市场,是全国闻名的传统土特产.在进行脱毒快繁时,NAA、6-BA浓度的选择是一个非常关键的因素.本试验研究了NAA、6-BA对凤头姜脱毒试管苗生根、增殖、根状茎发育及株高的影响,为生产提供依据.表1 试验所用培养基的组成Tab.1 The compositions of media used培养基组成部分1MS培养基+琼脂6.0g/L+蔗糖30g/L2MS培养基+琼脂6.0g/L+蔗糖30g/L+BA2mg/L3MS培养基+琼脂6.0g/L+蔗糖30g/L+BA2mg/L+NAA0.1mg/L4MS培养基+琼脂6.0g/L+蔗糖30g/L+BA2mg/L+NAA0.2mg/L5MS培养基+琼脂6.0g/L+蔗糖30g/L+BA2mg/L+NAA0.5mg/L6MS培养基+琼脂6.0g/L+蔗糖30g/L+BA2mg/L+NAA1.0mg/L7MS培养基+琼脂6.0g/L+蔗糖30g/L+NAA0.1mg/L8MS培养基+琼脂6.0g/L+蔗糖30g/L+NAA0.1mg/L+BA0.5mg/L9MS培养基+琼脂6.0g/L+蔗糖30g/L+NAA0.1mg/L+BA1.0mg/L10MS培养基+琼脂6.0g/L+蔗糖30g/L+NAA0.1mg/L+BA2.0mg/L11MS培养基+琼脂6.0g/L+蔗糖30g/L+NAA0.1mg/L+BA4.0mg/L12MS培养基+琼脂6.0g/L+蔗糖30g/L+NAA0.1mg/L+BA8.0mg/L表2 不同浓度的NAA对生姜生根数、分蘖数、根状茎增殖倍数及株高的方差分析Tab.2 Variance analysis between different concentrations of NAA and rooting, proliferation, rhizome growth and plant height平方和df均方F显著性总根数组间125.371431.3434.8860.002组内416.929656.414总数542.30069纤维根数组间82.143420.5363.5450.011组内376.500655.792总数458.64369肉质根数组间31.65747.9143.3580.015组内153.214652.357总数184.87169分蘖数组间23.20045.8003.4540.013组内109.143651.679总数132.34369根状茎增殖倍数组间1.85740.4640.6970.597组内43.286650.666总数45.14369株高组间11.62942.9071.7990.140组内105.018651.616总数116.646691 材料与方法1.1 试验材料试验姜种为凤头姜,采自湖北省恩施市来凤县.1.2 试验方法1.2.1 催芽选用肉质饱满的凤头姜,清洗干净后,室温条件下在土中催芽.1.2.2 茎尖脱毒与脱毒苗的获取萌发后切取1~2 cm的嫩芽,在自来水下冲洗30 min后用滤纸吸干或晾干.在超净工作台上用75%酒精处理30 s,再用0.1%的HgCl2消毒10 min,然后用无菌水洗涤3次.剥取长约0.5 mm、仅带有一个叶原基的茎尖分生组织作为外植体,接种到添加0.2 mg/L的NAA和1.0 mg/L BA的MS培养基中,(25±1)℃暗培.大约30 d后,将形成的愈伤组织转入添加0.2mg/L的NAA和2.0 mg/L BA的MS培养基中诱导植株再生.再生的培养条件为(25±1)℃,组织培养专用荧光灯照明,照明周期16 h光照/8 h黑暗,光强7500lx.1.2.3 脱毒苗的继代培养及不同植物生长调节物质效应研究再生试管苗经30 d左右的培养后,去掉根及老叶,只留取1~2 cm的茎段,将其转入添加不同浓度的NAA和6-BA的MS培养基中,比较不同激素组合对试管苗生长的影响.每一处理至少10支试管,并重复3次.培养基组成见表1,培养条件同植株再生的培养条件.2 结果与分析2.1 NAA对来凤姜生长的影响脱毒苗培养28 d后,对各性状进行调查,并进行方差分析,分析结果见表2.由表2可知NAA对来凤姜生根和分蘖有显著影响,而对根状茎的增殖及株高的影响效果不明显.添加了不同浓度的NAA的MS培养基中,凤头姜脱毒苗的平均生根数、分蘖数、根状茎增殖倍数及株高随着NAA浓度的增加变化趋势是不同的(图1、2).由图1可以看出:随着NAA浓度的增加,总根数及纤维根数是先下降后增加最后又下降的趋势,即在NAA浓度为0.2 mg/L时平均总生根数和纤维根数最多;而肉质根数则是现增加后降低的趋势,即在NAA浓度为0.1 mg/L时平均肉质根的生根数最多.表3 不同浓度的6-BA对生姜生根数、分蘖数、根状茎增殖倍数及株高的方差分析Tab.3 Variance analysis between different concentrations of 6-BA and root, proliferation, rhizome growth and plant height平方和df均方F显著性纤维根数组间123.060524.6125.6860.000组内337.643784.329总数460.70283肉质根数组间43.71458.74311.8750.000组内57.429780.736总数101.14383总根数组间282.679556.53613.2170.000组内333.643784.277总数616.32183分蘖数组间13.48852.6981.8260.117组内115.214781.477总数128.70283根状茎增殖倍数组间3.10750.6211.4720.209组内32.929780.422总数36.03683组间13.66752.7332.5600.034株高组内83.286781.068总数96.95283 图1 不同浓度NAA对凤头姜脱毒苗生根的影响 Fig.1 Effect of different concentrations Fig.2 Effect of different concentrations of NAA of NAA on rooting of test tube plantlets on proliferation,rhizome growth and plant height of ginger cultivar Foutoujiang of test tube plantlets of ginger cultivar Foutoujiang由图2可以看出:随着NAA浓度的增加,分蘖数是逐渐增加的,浓度过高则分蘖数会下降,即当NAA的浓度为0.2 mg/L时平均分蘖数最多;而根状茎增殖倍数则是呈平缓的下降趋势,即NAA浓度为0 mg/L时根状茎平均增殖倍数最多,表明NAA对根状茎的生长不利;株高是随着NAA浓度的增加先下降后升高最后又下降的趋势,即当NAA浓度为0.5 mg/L时平均株高最高.2.2 6-BA对生姜生长的影响脱毒苗培养28 d后,对各性状进行调查,并进行方差分析,分析结果见表3.由表3可知,6-BA对生姜生根及株高有显著的影响,而对分蘖数及根状茎增殖倍数的影响效果不显著.添加不同浓度6-BA的MS培养基中,凤头姜脱毒苗平均生根数、分蘖数、根状茎增殖倍数及株高随着6-BA浓度的增加变化趋势是不同的(图3、4).由图3可以看出:大体上来说,随着6-BA浓度的增加,无论是总根数、肉质根数还是纤维根数都是随着6-BA浓度的增加而下降的.当6-BA浓度小于2 mg/L时,下降趋势不甚明显,一旦浓度大于4 mg/L后,三者均大幅度下降.上述结果表明,6-BA对凤头姜脱毒试管苗的生根具有抑制作用.图3 不同浓度的6-BA对凤头姜脱毒苗生根的影响图4 不同浓度的6-BA对凤头姜脱毒苗增殖、根状茎增殖倍数及株高的影响 Fig.3 Effect of different concentrations of 6-BA on rooting of test tube plantlets proliferation, rhizome growth and plant height of Fig.4 Effect of different concentrations of 6-BA on of ginger cultivar Foutoujiang test tube plantlets of ginger cultivar Foutoujiang由图4可以看出:随着6-BA浓度的增加,分蘖数一直增加,直至6-BA浓度为4 mg/L时平均分蘖数最大,然后才略有下降;根状茎增殖倍数同6-BA浓度的关系也有着同分蘖数类似的趋势,而且也是在6-BA浓度达到4 mg/L时达到最大值,表明4 mg/L 6-BA对于促进凤头姜脱毒试管苗的分蘖和根状茎的生长最为有利.然而,株高与6-BA浓度的变化曲线正好同上述分蘖数、根状茎增殖倍数相反,即不添加6-BA是平均株高最高,以后株高随6-BA浓度的升高而逐步降低,直至当6-BA超过最佳浓度后,由于过高浓度的6-BA导致了分蘖数的下降而使株高略呈上升趋势.这个结果也同时表明,分蘖数、根状茎增殖量同株高具有反向相关.3 讨论不同激素浓度及其组合方式对生姜试管苗生长的影响已有较多的文献报道,如Sharma等[1]对生姜试管苗进行诱导,当6-BA的浓度为3.0 mg/L、NAA的浓度为0.5 mg/L时适于生姜生根.陈传红等[2]报道,当6-BA 5.0 mg/L+NAA 0.1mg/L有利生姜的分蘖,当BA的浓度为0.2 mg/L,NAA的浓度为0.5 mg/L时对生姜的根状茎的生长最为有利.本实验通过改变培养基中6-BA和NAA的浓度,观察对生姜生长的作用,发现这两种激素对生姜的生根、根状茎的增殖、分蘖、株高等都起到了重要的作用.6-BA是一种细胞分裂素,在试管苗的快繁中经常与NAA一起配合使用.我们的研究发现,6-BA对凤头姜脱毒试管苗生根不利.李红梅也认为高浓度的6-BA也不利于生姜根的分化[3].吴家丽等[4]研究了白水生姜的快繁,发现6-BA的浓度及其与NAA的比例是决定生姜试管苗快繁的重要因素.在大范围内研究了不同浓度6-BA和NAA对快繁的影响,发现6-BA在一定浓度范围内可以促进分蘖和根状茎的增殖,但是当浓度过高,则促进作用下降,这一结果同刘文萍[5]的相似.同时,结果还表明,分蘖数、根状茎增殖比例同6-BA浓度变化的趋势与脱毒苗株高与6-BA浓度的关系具有反向相关性,这可能是由于6-BA刺激分蘖增加后,由于过多的分蘖相互竞争,导致了单个孽芽的生长受到了影响的缘故.NAA作为一种生长素类激素,主要促进细胞伸长生长和细胞分裂,促进生根.在本实验中NAA对生姜的生根主要表现为促进作用,但当NAA的浓度超过0.2 mg/L,NAA的促进作用开始减弱.雷开荣[6]得到的数据同样可以说明NAA可以促进生姜的生根,但是浓度过高促进作用下降.NAA属于生长素类激素,而生长素类激素对于芽的生长是低浓度促进高浓度抑制,本实验所得的结果与此结论一致.4 结论在所有添加不同浓度NAA、6-BA的MS培养基中,都可以诱导凤头姜脱毒试管苗根、芽、根状茎的形成及株高的改变.但是不同的培养基组成,诱导效果不同,提示在生产中可以根据需要选择不同的培养基.当NAA浓度为0.2 mg/L,6-BA浓度为2 mg/L时,凤头姜的生根数最多;当NAA浓度为0.1 mg/L,6-BA浓度为4 mg/L时,对凤头姜试管苗的增殖最有利;当NAA的浓度为0 mg/L,6-BA浓度为2 mg/L时最有利于根状茎的增大;当NAA浓度为0.5 mg/L,6-BA浓度为2 mg/L时,最有利于株高的增加.参考文献:[1] Sharma T R,Singh B M.High-frequency in vitro multiplication of disease-free Zingier Officinale Roca[J].Plant Cell Reports,1997,17(1):68-72.[2] 陈传红,金卫根,杨柏云.蔗糖和多效唑对试管生姜形成的影响[J].热带亚热带植物学报,2006,b(2):146-150.[3] 李红梅,张侠,宋莉璐.生姜茎尖的组织培养及试管苗快繁体系的研究[J].山东科学,2008,21(5):36-38.[4] 吴家丽.白水生姜组培脱毒及离体快繁体系建立研究[J].长江蔬菜,2011(4):17-21.[5] 刘文萍.密纹片姜茎尖培养脱毒快繁技术研究[J].中国农学通报,2005,21(6):100-101.[6] 雷开荣.生姜组织培养中增殖与生根同步培养技术研究[J].中国种业,2006(5):33-34.。
玻璃化法超低温保存甘薯茎尖张江丽;贾永红;赵美英;冯庆敏;陈彩娟【摘要】对甘薯离体茎尖玻璃化法保存技术进行了初步探究.结果表明,预培养2 d,100%的PVS2溶液0℃处理30 min,液氮冻存2 d,40℃快速化冻后用附加蔗糖1.2 mol/L的MS液体培养基洗涤20 min,接种在MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA3 0.05 mg/L培养基上的茎尖成活率最高.【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2008(000)001【总页数】3页(P243-245)【关键词】甘薯;离体茎尖;玻璃化法;超低温保存【作者】张江丽;贾永红;赵美英;冯庆敏;陈彩娟【作者单位】廊坊师范学院生命科学学院,河北廊坊,065000;廊坊师范学院生命科学学院,河北廊坊,065000;河北省河间市第一中学,河北河间,062450;河北省馆陶县第一中学,河北馆陶,057750;河北省新河县振堂中学,河北新河,055650【正文语种】中文【中图分类】S531.093甘薯是一种分布广、产量高的块根作物,可用作粮食、饲料和工业原料,在我国年总产量仅次于水稻、小麦和玉米。
目前甘薯采收以后大多采用传统方法储藏,难以控制温度、湿度等条件,易出现褐变腐烂,使甘薯种质资源的保存困难,需年年种、收、储藏,耗费大量人力、物力、财力[1]。
液氮超低温保存是目前植物种质资源长期稳定保存的较好方法。
目前已有100种以上的植物材料进行了超低温保存[2],但其实际操作仍较复杂,尤其对体积较大的由已分化的多种细胞类型组成的组织和器官保存则常常难以奏效。
而近几年发展较快的玻璃化法以其设备要求简单、材料处理步骤简便、效果和重演性好等优点[3-5],备受业界推崇,成为较理想的植物种质资源保存方法。
本试验用玻璃化法进行甘薯茎尖的超低温保存,为长期保存甘薯种质资源提供技术支持。
1 材料与方法1.1 供试材料甘薯品种栗子香。
1.2 方法1.2.1 无菌苗的获得取甘薯茎尖自来水冲洗30 min,70%酒精浸泡30 s,无菌水漂洗3次,0.1%升汞灭菌5 min,无菌水洗4次,无菌滤纸吸干表面水分,分别接种于MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA3 0.05 mg/L,MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA3 0.05 mg/L,MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.1mg/L+GA3 0.05 mg/L的培养基上,每瓶接种5个茎尖,重复3次。
微型马铃薯优质种苗的茎尖脱毒培养李进进【摘要】为了保持马铃薯优良品种的遗传特性,以马铃薯茎尖为外植体,MS为基本培养基,添加不同浓度及其配比的外源激素,对马铃薯茎尖进行诱导、增殖、壮苗和微型薯生产研究.结果表明:MS+6-BA1.5mg/L(以下单位同)+NAA0.2 培养基配方适宜茎尖的诱导增殖.并且在合适的培养基配方前提下,分别在单节茎段、2节茎段、3节茎段中加入不同量的活性炭进行实验,得出加入0.2%的活性碳时,腋芽萌发率最高,平均芽长度最为理想,而且芽的长势最强.【期刊名称】《种子》【年(卷),期】2009(028)003【总页数】2页(P88-89)【关键词】微型马铃薯;茎尖脱毒;遗传种性;激素;活性炭【作者】李进进【作者单位】广东轻工职业技术学院,广州,510300【正文语种】中文【中图分类】S532马铃薯(Solanum tuberosum)原产于拉丁美洲,当被发现可以食用后,很快传到世界各地,成为栽培很广的一种作物。
其适应性广,营养价值高,耐贮藏运输,是重要的粮食作物之一,也是一种调节市场供应的重要蔬菜。
但是,从外地引种栽培1~2个周期后,明显发现其遗传种性降低,产量下降,品质变劣,并有卷叶和花叶等现象发生,这是由于病毒引起的遗传种性退化现象。
马铃薯易感染多种病毒,导致薯块变小、畸形、种薯退化等。
实验证明,利用茎尖组织培养结合病毒检测,进行马铃薯脱毒,进而生产脱毒种薯用于生产,可有效地防止种薯遗传种性退化,大幅度提高马铃薯产量。
因为植物病毒是通过植物的微管系统移动,茎尖部位细胞分裂速度快,暂时还没有形成微管系统;而且茎尖分生组织生长素含量很高,足以抑制病毒的增殖。
因此我们取马铃薯芽段2~3 cm,经过一系列消毒,在无菌条件下用解剖镜小心剥取约0.7 mm的茎尖进行培养,以获得无病毒苗。
1.1 材料将具有优良遗传种性的马铃薯沙藏,取其发芽后的芽段。
1.2 试验方法1.2.1 外植体消毒先将表面光滑无病虫害的马铃薯埋在湿润的沙质基质中催芽,待芽长至2~3 cm 时,切取芽段在自来水下冲洗15 min左右,于超净工作台上进行严格的消毒。
甘薯脱毒苗培育的研究进展卢玲;聂明建;王学华【摘要】The development of sweet potato detoxification technology was reviewed, as well as (he standardization production of meristem culture. The development of detoxification sweet potato and research focus were forecasted, which provides theoretical basis and technique support of sweet potato detoxification extension, and has significant scientific meaning for industrialization production of sweet potato detoxification.%文中综述了近年来甘薯脱毒技术发展的情况及茎尖分生组织培养的标准化生产情况,并对今后脱毒甘薯的发展和研究重点进行了简要展望,为脱毒甘薯的推广提供了重要的理论依据和技术支撑,对脱毒甘薯的工业化生产具有重要的科学意义.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2013(041)004【总页数】3页(P1456-1458)【关键词】脱毒技术;组织培养【作者】卢玲;聂明建;王学华【作者单位】湖南农业大学农学院,湖南长沙410128【正文语种】中文【中图分类】S609长期营养繁殖是导致甘薯病毒蔓延、产量质量降低的主要原因。
甘薯脱毒苗的培育就是采用甘薯茎尖剥离,利用茎尖分生组织离体培养而获取无病毒试管苗的一种技术体系[1-2]。
通过维管输导组织传播的病毒在茎尖分生组织中的传播速度很慢。
利用甘薯顶端分生组织是无病毒区的原理,将茎尖分生组织在无菌条件下和合适培养基上离体培养,诱导再生茎尖苗,茎尖苗再经严格的病毒检测,确认不带病毒后在防虫网条件下进行快速繁殖,最后将这些无病毒的薯苗供给薯农种植,以达到脱除病毒和提高产量的目的[3-4]。
实验室及设备单元复习题1.组培能够进行,其理论依据是____和____-。
2.接种室要求室内____,墙面____,门为____,并设置____,防止出入时带进杂菌。
3.紫外灯灭菌利用_____波长左右的紫外光,它的灭菌强度较弱,须离被灭菌物____。
4.配制培养时,一般先配制母液,其目的在于____-和____-。
5.培养架一般长为____米,宽为-____米。
6.pH值一般调节为____,常用____和____方法来进行。
7.压力单位中1kg/cm2____Mpa,,在0.1 mPa时锅内温度为____。
8.培养基中缺铁会使幼苗____,培养基中以____形式加入。
9.蔗糖使用浓度为____%,它主要起____作用。
二、名词解释20分1.外植体2.愈伤组织3.灭菌4.细胞全能性5.脱分化三选择题10分1.接种工具灭菌常采用()①灼烧②高压③过滤④熏蒸2.具有促进愈伤组织生成的物质是()①VPP②VB1③VB6④甘氨酸3.微量元素母液的配制浓度()①10倍②100倍③1mg/ml④10mg/ml四、问答题40分1 配制培养基时,使用生长调节物质的原则是什么?2. 无菌接种室怎样做好接种前的灭菌工作3. 高压灭菌器的使用程序怎样4MS培养基的名称来源及特点5 为什么要配制母液,配制时要注意什么6 表面灭菌如何操作?培养基章复习题一、填空(20分)1.配制培养时,一般先配制母液,其目的在于_____和______。
2.培养架一般长为_____米,宽为____米。
3.培养基PH值一般调节为_____,常用____和_____方法来进行。
4.培养基中缺铁会使幼苗____,培养基中以_____形式加入铁。
5.磷是构成____的主要成分,这种物质又是细胞膜、细胞核的重要组成部分。
磷也是____的成分、这是一种常见的直接能量物质。
6.琼脂加入浓度大约是___________,蔗糖加入浓度大约是______________ 。
不同激素配比对马铃薯组培苗壮苗生根的影响作者:纪艺红李越罗亚婷尹江王磊来源:《种子科技》2021年第10期摘要:以马铃薯北方002为材料,目前北方002组培苗在实验室适合的培养基为MS+0.1 mg/L IBA+0.5 mg/L 6-BA和MS+0.1 mg/L IBA+1.5 mg/L 6-BA,在此基础上加入不同浓度的GA3,以期筛选出更为适合的培养基。
探究了不同激素配比对马铃薯组培苗壮苗生根的影响,为提高新品种试管苗品质及脱毒种薯规模化生产提供技术基础。
关键词:马铃薯;组培苗;激素配比;壮苗生根;影响文章编号: 1005-2690(2021)10-0032-02 中国图书分类号: S532 文献标志码: B马铃薯属茄科茄属草本植物,在国内外广泛种植,已成为仅次于水稻、小麦和玉米的世界第四大粮食作物,目前我国正在大力推进马铃薯主食化[1]。
马铃薯组织培养在种薯脱毒、种质资源保存等方面具有重要意义[2]。
但在实际操作过程中存在诸多问题,因此,通过优化马铃薯培养基配方、改进培养方式、建立试管苗快速繁殖体系,可培育出高质量的试管苗。
总结出一套生长周期短、操作简便、成本低的新培养技术,对马铃薯生产具有重大的现实意义。
研究人员发现,由于不同马铃薯品种遗传背景存在差异,最适宜的壮苗培养基也存在差异,不同基因型配比对培养基的激素配比要求也不同[3]。
例如早大白[4]最适壮苗培养基是MS+0.01 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA;马铃薯桂农1号最佳茎尖诱导配方为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA[5]。
另外,费乌瑞它、大西洋、夏波蒂、中薯3号、克新12号、克新13号、东农303、皖马铃薯1号、皖马铃薯2号等[6-11]壮苗快繁体系均有报道。
Miler等发现在 MS培养基中加入植物激素GA3后可以显著提高株高;贾长盛等发现,加入植物激素GA3和 NAA后,可使试管苗节数增加;姜英德等发现,加入植物激素GA3、NAA、BAP和泛酸钙后,可以培育壮苗。
一、实验目的1. 掌握马铃薯茎尖组织培养技术,实现马铃薯的无性繁殖。
2. 了解马铃薯脱毒快繁的过程和方法,提高马铃薯的品质和产量。
3. 探究不同培养基、激素配比、培养条件等因素对马铃薯茎尖生长和脱毒效果的影响。
二、实验材料1. 马铃薯品种:克新1号2. 茎尖:选取生长健壮、无病虫害的马铃薯植株,取其茎尖作为实验材料3. 培养基:MS培养基,添加0.1 mg/L NAA、0.1 mg/L 6-BA、0.1 mg/L GA3,pH值5.8~6.04. 灭菌剂:70%酒精、1%氯化汞溶液、无菌水5. 仪器设备:超净工作台、解剖镜、接种针、培养皿、培养箱、温度计、湿度计、光照计等三、实验方法1. 茎尖剥离:在严格的无菌环境中,将茎尖放置在30-40倍解剖镜下,用接种针小心除去茎尖周围的叶片组织,暴露出顶端圆滑的生长点,用接种针细心切取所需的茎尖分生组织(长度0.1-0.2mm,带有一二个叶原基)。
2. 培养基制备:将MS培养基、激素等成分按照要求混合均匀,调整pH值至5.8~6.0。
3. 接种:将切取的茎尖分生组织接种于制备好的培养基中,放入培养室内进行培养。
4. 培养条件:温度22-25℃,湿度80%-85%,光照强度2000-4000lx,每天光照16小时。
5. 茎尖生长与增殖:30-40天后,茎尖明显增长,此时结合(371)热处理6-8周。
期间经常观察,及时去除污染苗、变褐死亡苗、生长不良的植株。
6. 病毒检测:将剩余的大部分生长正常的苗在继代培养基中再增殖一次,待植株生长到一定大小时进行病毒检测。
病毒检测方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)。
7. 脱毒马铃薯试管苗的获得:根据检测结果,将含有病毒的株系淘汰掉,保留下完全不含病毒的株系,即获得脱毒马铃薯基础材料——马铃薯脱毒试管苗。
四、实验结果与分析1. 不同培养基对茎尖生长和脱毒效果的影响:实验结果表明,MS培养基添加0.1 mg/L NAA、0.1 mg/L 6-BA、0.1 mg/L GA3的培养基条件下,茎尖生长速度较快,脱毒效果较好。