液相色谱柱维护保养及仪器冲洗
注意：每个色谱柱使用之前都要阅读一下使用说明书
色谱柱维护保养是很重要的，关系到色谱柱的使用寿命和检测结果的准确性，
所以任何人用过色谱柱之后，一定要对色谱柱进行保养，管理人员和使用者互相 监督。
总的原则是色谱柱要轻拿轻放，避免损坏填料；另外没有使用的情况下，一 定要保证两端的堵头封好。对于具体的色谱柱，下面列出常用色谱柱维护保养的 具体方法和注意事项，以便使用者参考。
C18柱（包括预柱）
对于未启用的新的色谱柱，先用甲醇或乙腈以小流速（0.2ml/min缓慢升高 到0.5ml/min ）不接检测器冲洗色谱柱30分钟后，将色谱柱与检测器连上，流速 调为1.0 ml/min冲洗色谱柱60分钟，然后不断降低有机相的比例（如80%、50%、 10%甲醇或乙腈）各冲洗至少 30分钟。若色谱柱暂时不用，则将色谱柱保存在 高比例有机相中（如80%甲醇或乙腈，或者参考该色谱柱使用说明书中建议的溶 剂中）；色谱柱使用时应用与分析流动相相同比例的有机溶剂（将缓冲盐溶液换 成水）冲洗色谱柱15分钟，然后再换成流动相进行样品分析。
样品分析完后，色谱柱维护与保养方法：
流动相中若含酸、碱、盐类物质，则要先用10%甲醇或乙腈冲洗，1.0ml/min 的流速冲洗至少30min,再用80%甲醇或乙腈冲洗至少30min,柱子保存在80% 甲醇或乙腈里（具体问题具体分析，洗脱程序可以是梯度洗脱程序，注意如果最 后色谱柱保存的是高有机相，第二天用之前一定要用高水相过渡一下，再换成 流动相）。如柱子长时间未用，则柱子保存在 100%的甲醇或乙腈里。
对于含有离子对试剂的流动相如庚烷磺酸钠和十二烷基磺酸钠等， 柱子应采
用梯度洗脱，一般用乙腈-水系统（水：90-10；乙腈：10-90）冲洗时间要稍长些，
然后保存于90%乙腈。
需要特别强调的是，目前所有的C18柱均不能用纯水进行长时间（1小时 以上）冲洗，除非有专门耐水的专用柱，否则，用纯水长时间冲洗色谱柱，会导 致色谱柱的固定相流失和相塌陷，损坏色谱柱。 大多数反相色谱柱的 pH 稳定范围是 2~8，有的 pH 稳定范围会宽，具体 pH 稳定范围参照色谱柱说明书，当分析条件的 pH 值偏小或偏大时，可选择 pH 稳 定范围宽的柱子进行分析，否则，会损坏色谱柱。
常用液相色谱柱的规范化使用与保养标准操作规程完整
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目的：规范液相色谱柱的使用与管理；液相色谱柱标准化老化与再生；剖析液相色谱柱常见问题与解决办法。延长色谱柱使用寿命，降低色谱柱使用成本。提高分析人员液相色谱柱使用与维护水平。
范围：适用于使用高效液相色谱仪的仪器分析操作人员及相关管理人员。
责任：设备员、液相操作人员、质控主管、质量管理部经理、质量受权人。
内容：
1.定义
1.1 液相色谱柱：指用于液相色谱分离的柱形固定相，由柱管、压帽/卡套、筛板（滤片）、填料、接头等组合而成，可用于液相色谱分析与制备。
1.2 色谱柱再生：指色谱柱在非正常情况下，针对异常现象及原因采取的一系列修复补救措施，以提高色谱柱柱效和延长其使用寿命的处理过程。
1.3 运载溶剂：指色谱柱生产厂商在柱出厂测试合格后饱和于色谱柱内的合适溶剂，以利于运输保存，多与保存溶剂相同。
1.4 保存条件：指色谱柱生产厂商根据不同柱类型及其色谱柱填料的制备、键合、装填、高压定型、净化干燥等工艺条件的不同要求而特别制定的色谱柱保存前净化饱和的处理程序与储存条件，包括净化程序、净化溶剂和保存溶剂、保存条件。 1.5 保存溶剂：用于保存色谱柱并指定了溶剂组成与比例的溶液。
1.6 反相色谱柱：以键合非极性基团的载体为填充剂填充而成的色谱柱。常见的载体有硅胶、聚合物复合硅胶和聚合物等。常用的填充剂有十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶和苯基键合硅胶等。
1.7正相色谱柱：用硅胶填充剂，或键合极性基团的硅胶填充而成的色谱柱，常见的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶和氰基键合硅胶等。
1.8氨基柱（-NH2）：可以同时用于正相条件和反相条件，但多用于正相色谱条件。使用时需注意，正相反相交替使用时必需用异丙醇过度，保证柱保存溶剂与流动相互溶。[氨基柱出厂保存溶剂多用正相溶剂，例如：正己烷-乙腈（99：1）]。
2.液相色谱柱的使用及保养
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2.1普通C8及C8反相色谱柱的老化处理与使用保养程序
色谱柱使用注意事项
一、 色谱柱有方向：
柱子标签上箭头指示方向为，流动相溶液流动方向。若方向反，会影响柱效和使用寿命。
二、 新柱子使用：
新柱子使用前，先要活化，具体方法：
1、把柱子接在泵上，检测器一端不接（注意）。废液直接从
柱子另一端流出。
2、用纯甲醇溶液，以1ml/min，流速冲洗20—30分钟，即可。
三、日常保养及维护（柱子连接色谱系统）
要根据不同的情况对色谱柱进行保养：
① 反相色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30min，洗掉色谱柱中的盐，再用色谱甲醇冲洗30min。注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。
② 长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。
储存温度: 室温。
- 1 - 液相色谱的维护保养
液相色谱(LiquidChromatography,简称LC)是一种常用的色谱分析技术，广泛应用于化学、生物、医药等领域。为了保证LC的分析结果准确可靠，必须对仪器进行定期的维护保养。
1. 液相色谱系统的清洁
在使用液相色谱前，必须对系统进行清洁，以避免污染对结果的影响。清洁步骤包括：
- 清洗色谱柱：根据柱子类型选择合适的洗涤溶液，如纯水、乙腈、甲醇等，按照厂家提供的清洗步骤进行操作。
- 清洗进样器：将进样器从系统中拆下来，用洗涤溶液进行清洗，再用纯水冲洗干净。
- 清洗管路：将管路中的溶液排空，并用纯水进行多次冲洗，确保管路干净。
2. 液相色谱系统的保养
液相色谱系统的保养包括：
- 定期更换耗材：如柱子、进样器、滤膜等。
- 定期校准：校准泵的流量、检测器的灵敏度等参数，保证仪器的准确性。
- 定期检查电子元件：如检测器的灯管、电极等，保证其正常工作。
3. 液相色谱系统的存储
如果液相色谱系统长时间不用，必须进行正确的存储，以避免损 - 2 - 坏设备。存储步骤包括：
- 将溶液从系统中排空，清洁干净。
- 拆下柱子和进样器，将其分别用保护塞封住。
- 将检测器的灯管、电极等拆下，放在干燥、通风的地方存放。
以上是液相色谱维护保养的主要内容。只有定期进行维护，才能保证液相色谱系统的精准度和稳定性，获得准确可靠的分析结果。
