细菌的分类(G+和G-)

病原微生物第三章常见病原性细菌的整理笔记球菌：球菌是细菌中的一大类，根据革兰染色可分为G+和G-两类，对人致病的球菌主要有葡萄球菌、链球菌及淋球菌，此类球菌能引起化脓性炎症，所以又称为化脓性球菌。

葡萄球菌：生物学性状：1、形态与染色：典型的葡萄球菌呈球形，直径0、4-1、2Hm，通过染色，在显微镜下可看到葡萄串样的排列。

革兰染色阳性，无鞭毛和芽孢。

2、培养特性：营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37摄氏度，最适ph为7、4左右。

3、分类：金黄色葡萄球菌(产金黄色色素，致病性较强)；表皮葡萄球菌(产生白色或柠檬色色素)。

4、抵抗力：葡萄球菌的抵抗力較强；致病性：金黄色葡萄球菌可通过伤口、裂口以及消化道而感染，其产生的毒素和酶主要有血浆凝固酶、溶血毒素、肠毒素和杀白细胞等，所致疾病有：化脓性感染；食物中毒；假膜性肠炎防治原则：加强卫生宣传教育：注意个人卫生：及时处理伤口，避免感染。

链球菌：化脓性球菌中的另一大类细菌，此类细菌种类多，型别复杂，广布于自然界和人与动物的咽腔、胃肠道等部位。

生物学性状：1、形态与染色：显微镜下观察到呈球型或卵圆形，链状排列；革兰染色阳性。

菌体无芽孢和鞭毛，有的可以形成由透明质酸组成的荚膜；2、培养特性：营养要求较高，需要在含有血清、血液的培养基上生长。

生长温度37摄氏度，最适ph为7、4左右3、分类(根据溶血能力和溶象)分为三类：甲型溶血性链球菌：乙型溶血性链球菌；丙型链球菌：4、抵抗力：抵抗力不强，60 摄氏度30min可杀死，对消毒剂敏感。

致病性：致病性链球菌课通过直接接触、飞沫吸入或皮肤、黏膜等伤口侵入机体，产生多种毒素和侵袭性酶，所致疾病有：化脓性感染：猩红热；链球菌性变态反应疾病。

防治原则：注意环境卫生，对病人和带菌者及早治疗，减少传染源。

淋病奈瑟球菌：简称淋球菌，是我国目前发病人数最多的性传播性疾病(STD, 性病) 淋病的病原体。

简述革兰氏染色机理
革兰氏染色是一种常用的细菌染色方法，通过这种方法可以将细菌分为两大类：革兰氏阳性（G+）和革兰氏阴性（G-）。

以下是革兰氏染色的机理：
1、脱色：革兰氏染色过程中的关键步骤之一是脱色。

在经过结晶紫初染和碘液媒染后，G+菌和G-菌都呈现深紫色。

此时，通过在酒精或其他脱色剂中短暂停留，可以将G-菌的细胞壁中的脂质成分溶解，使得脱色剂更容易进入细胞内部，将其染成无色或浅色。

而G+菌由于其细胞壁结构较为坚韧，不易被脱色剂渗透，因此保持深色。

2、复染：在脱色后，通过施加沙黄或其他染料进行复染，使所有细菌都被染上颜色。

由于G-菌已被脱色至无色或浅色，因此沙黄会使其呈现红色。

而G+菌由于未被脱色或仅被部分脱色，呈现深紫色或蓝黑色。

3、结果观察：通过显微镜观察染色后的细菌，可以看到G+菌呈蓝紫色，而G-菌呈红色。

这一差异是由于革兰氏染色过程中对细胞壁脂质成分的处理和脱色剂的渗透能力不同所致。

革兰氏染色的机理主要基于细菌细胞壁的差异，特别是脂质含量的差异。

G+菌的细胞壁富含肽聚糖，不易被脱色剂渗透，而G-菌的细胞壁中含有较多的脂质，使得脱色剂能够更好地进入细胞内部。

此外，革兰氏染色还涉及到结晶紫和碘液等染料的结合和吸附性质的不同，进一步增强了G+菌和G-菌在染色过程中的颜色差异。

总之，革兰氏染色的机理主要基于细菌细胞壁的结构和化学成分差异，通过脱色和复染等步骤，将细菌分为G+和G-两大类，为后续的细菌鉴定和分类提供重要依据。

微生物的鉴定基础革兰氏染色初步分类一。

非苛养菌鉴定：苛养菌鉴定 真菌的鉴定革兰氏染色[原理]革兰氏染色目前有三种观点：等电点学说、化学学说和渗透学说。

[标本处理]1.有菌部位的标本，如痰液、粪便、各种拭子、创面等可直接涂片。

2.无菌部位的标本，如脑脊液、胸水、腹水、胆汁、尿液、关节液等，应取适量标本（最高可达5-7ml）,经3000rpm 离心10min.，取沉渣涂片染色。

[报告方式]：革兰氏染色：检出G+球菌；G-球菌检出G+杆菌；G-性杆菌革兰氏染色[注意事项]1．标本涂片不能太厚，严格按操作要求进行。

2．玻片通过火焰温度不能太高。

3．若涂片较厚，应延长脱色时间，直至不在出现紫色为止。

[临床意义]通过革兰氏染色，将细菌分初步为革兰氏阳性和革兰氏阴性，便于临床治疗细菌的初步分类1、细菌的分离与纯化：自血平板挑出待检菌株的单菌落进行初步的鉴定。

如果混有杂菌，应该重新转种分纯。

2、染色与镜检：首先通过革兰氏染色确定基本的分类：（1）G+球菌（2）G-球菌（3）G-杆菌（4）G+杆菌。

此外，如果镜下发现革兰氏染色阳性、椭圆形、有芽孢状的较大菌体，可能是真菌。

临床标本中分离出较多的是G-杆菌中的肠杆菌、非发酵菌和G+球菌中的葡萄球菌、链球菌、肠球菌。

G-球菌中的奈瑟氏菌亦常分离出，尤其在泌尿生殖系统标本中常见。

细菌的初步分类1.触酶试验主要用于G+球菌的分类。

葡萄球菌属：触酶（+）链球菌属及肠球菌：触酶（-）2.氧化发酵试验（O-F试验）根据细菌在无氧环境中能否利用碳源将细菌分为非发酵菌（氧化型或产碱型）和发酵菌（兼性厌氧菌）。

G（-）杆菌中的肠杆菌O-F试验阳性，非发酵菌O-F试验阴性3.氧化酶试验主要用于G-杆菌的分类。

肠杆菌的氧化酶（-），非发酵菌多数氧化酶（+），但嗜麦芽窄食单胞菌和不动杆菌的氧化酶（-）。

非苛养菌的鉴定：主要有G+球菌、G+杆菌、G-球菌和G-杆菌这些细菌培养的条件不苛刻，这也是标本分离常见的细菌苛养菌的鉴定也相对比较简单，只要根据初步的分类，遵循其鉴定的途径，就可以做出完整的鉴定结果G+球菌的鉴定途径1.首先根据菌落特点和革兰氏染色判断是否为G+球菌。

革兰氏染色法革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师、细菌学家Christain Gram创立。

细菌先经碱性染料结晶染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌（G+），后者为革兰氏阴性菌（G—）。

为观察方便，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红、稀释复红等进行复染。

阳性菌仍带紫色，阴性菌则被染上红色。

有芽胞的杆菌和绝大多数和球菌，以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应；弧菌，螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。

革兰氏阳性菌对青霉素敏感，革兰氏阴性菌对链霉素敏感。

可根据革兰氏染色法鉴别不同菌种并对症下药。

革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别，染色反应不一样。

现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物，它与碘和结晶紫的复合物结合很牢，不易脱色，阴性菌复合物结合程度底，吸附染料差，易脱色，这是染色反应的主要依据。

另外，阳性菌菌体等电点较阴性菌为低，在相同PH条件下进行染色，阳性菌吸附碱性染料很多，因此不易脱去，阴性菌则相反。

所以染色时的条件要严格控制。

例如，在强碱的条件下进行染色，两类菌吸附碱性染料都多，都可呈正反应；PH很低时，则可都呈负反应。

此外，两类菌的细胞壁等对结晶紫—碘复合物的通透性也不一致，阳性菌透性小，故不易被脱色，阴性菌透性大，易脱色。

所以脱色时间，脱色方法也应严格控制。

革兰氏染色原理：G﹢菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。

呈紫色。

Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：１）涂片固定。

（新编）革兰染色法革兰染色法是一种常用的细菌分类方法，根据细菌的细胞壁成分和结构差异，将细菌分为革兰阳性菌（G+）和革兰阴性菌（G-）两大类。

革兰染色法的原理是利用细菌细胞壁上的特异性染料——革兰染料，将细菌分为两类。

革兰阳性菌的细胞壁主要由肽聚糖和磷壁酸组成，而革兰阴性菌的细胞壁则主要由外膜和脂多糖组成。

革兰染色法包括初染、媒染、脱色和复染四个步骤。

初染时，用结晶紫溶液对细菌进行染色，结晶紫能够与细菌的细胞壁结合，形成紫色的着色层。

媒染时，用碘溶液与结晶紫结合形成复合物，进一步增强着色层的颜色。

脱色时，用酒精或丙酮溶液处理细菌，去除染料和结晶紫，但不同与革兰阳性菌和革兰阴性菌的细胞壁结构和组成不同，酒精或丙酮溶液对革兰阳性菌的细胞壁影响较小，不能将其脱色，而革兰阴性菌的细胞壁则易被脱色。

最后进行复染，用稀释后的番红溶液将未被脱色的革兰阳性菌染成红色，而革兰阴性菌则呈现红色背景。

革兰染色法的具体操作步骤如下：1.初染：用结晶紫溶液滴加到涂片上，染色3-5分钟，然后用自来水冲洗。

结晶紫能够与细菌的细胞壁结合，形成紫色的着色层。

2.媒染：用碘溶液与结晶紫结合形成复合物，加强着色层的颜色。

媒染时需要注意控制媒染时间，时间过短会使着色层颜色过浅，时间过长则会使着色层颜色过深。

3.脱色：用酒精或丙酮溶液处理涂片，去除染料和结晶紫。

革兰阳性菌的细胞壁较厚，酒精或丙酮不易渗透进去将其脱色，因此革兰阳性菌保持紫色，而革兰阴性菌的细胞壁较薄，酒精或丙酮容易渗透进去将其脱色，呈现红色背景。

4.复染：用稀释后的番红溶液将未被脱色的革兰阳性菌染成红色，而革兰阴性菌则呈现红色背景。

复染时需要控制时间，避免出现过度染色或染色不足的情况。

革兰染色法具有较高的准确性和重复性，是细菌分类学中常用的方法之一。

通过革兰染色法可以将细菌分为革兰阳性菌和革兰阴性菌两大类，对于临床治疗、药物选择、食品工业等领域具有重要意义。

例如在医学领域中，医生可以根据感染菌的革兰染色结果来选择合适的抗生素；在食品工业中，革兰染色法可用于检测食品中的细菌种类和数量。

G+菌G-菌为什么要来谈G+菌和G-菌，因为在后面的介绍抗菌药我们会用到，不同的细菌感染所用的抗菌药不同。

例如如，青霉素G（天然青霉素），就主要针对G+菌感染，只对G-菌部分敏感，这主要和细菌细胞壁的结构有关。

抗菌药主要是一些抗生素，抗生素滥用在中国的情况很严重，其导致的问题可能是最后细菌感染将无药可治，比如现在出现的一个名词叫“超级细菌”，其产生原因是因为人们滥用抗生素，导致某些细菌对大部分抗生素都产生耐药性，最后这些细菌感染带来的结果相当可怕。

所以现在国家开始规范抗生素使用，能不用抗生素尽量少用或者不用，对不同的病症患者使用合适的抗生素，做到不滥用，不多用。

由此我们区分不同的细菌感染将显得非常重要。

G+菌和G-菌的是通过革兰氏染色法来划分的，G+菌和G-菌细菌的细胞壁的组分和结构不同（参见我的前篇文章：细菌的细胞壁），所以染色结果不同，这样我们就把其鉴别开来了。

革兰氏染色法我们来看看什么是革兰氏染色法。

革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师、细菌学家Christain Gram创立。

其一般分为四个步骤：初染，媒染，脱色，复染。

染色液结晶紫溶液结晶紫乙醇饱和溶液（取结晶紫约4~8g，溶于95%乙醇100ml 中）20ml，1%草酸铵溶80ml将上述两溶液混合，过滤。

结晶紫不可用龙胆紫代替。

前者是纯品，后者不是单一成分，易出假阳性。

结晶紫溶液放置过久会产生沉淀，不能再用。

助染剂碘 1g 碘化钾 2g 蒸馏水300ml将碘与碘化钾先行混合，加入少许蒸馏水，充分振荡。

待完全溶解后再加入其余的蒸馏水。

当溶液由棕黄色变为淡黄色时应弃去。

为易于储备，可将上列碘与碘化钾溶于30ml蒸馏水中，用前稀释。

脱色剂95%乙醇。

复染剂沙黄0.25g 95%乙醇 10ml 蒸馏水 90ml将沙黄溶于乙醇中，待完全溶解后加入蒸馏水。

染色步骤1、将培养18~24h的培养物涂片，要涂得薄些。

将涂片在火焰上加温固定，待冷却后滴加结晶紫溶液，1min后水洗。