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!专 论 综 述
" &ຫໍສະໝຸດ / 2 以上的优良无性系的选鉴和繁育推广工作"使
$'0 发"$++" ! " # $ $$ ( + & , 庄瑞林"黄爱珠" 董汝湘" 等0 油茶 $+ 个 高 产新 品 种 的选 育 研究 +B ,0 林业科学研究"$++" "* ! & # $&$+( &"/0 + / , 庄瑞林"董汝湘" 黄爱珠" 等0 山茶属植物种质资源的搜集及基因 ,0 林业科学研究"$++$ "% ! " # $$/) ( $)%0 库的建立利用研究+ B + ) , 韩宁林"赵学民0 油茶高产品种栽培 + A, 0 北京$ 中国农业出版社" "##+0 + + , 刘子雷" 杨 水 平" 姚 小 华" 等0 浙江红花油茶果实形态变异研究 +B ,0 林业科学研究""##/ ""# ! " # $"&'( "&&0 + $# , 刘子雷"姚小华"杨水平"等0 浙江红花油茶果实经济性状变异的 研究+ B ,0 西南大学学报$自然科学版""##/0 "+ ! % # $)'( ))0 + $$ , 国家油茶科学中心0 油茶高效实用栽培技术+ A, 0 北京$科学出版 社""#$#0 + $" , 姚小华"王开良"庄瑞林0 图说油茶高效生态栽培+ A, 0 杭州$浙江 科学技术出版社""##+0 + $' , 姚小华"王开良" 罗细 芳" 等0 我国 油茶 产 业 化现 状 及发 展 思路 +B ,0 林业科技开发""##* "$+ ! $ # $'( &0 + $% , 庄瑞林0 油茶低产林改造+ A ,0 北京$北京科学普及出版社"$+++0 + $* , 康志雄"邹达明0 世界山茶研究现状及发展趋势 + B ,0 浙江林业科 %+0 技"$+)) ") ! $ # $%*( + $& , 田朝光0 普通 油 茶 重 要 经 济 性 状 及 脂 肪 酸 组 成 遗 传 变 异 研 究 +B , 0北京$ 中国林业科学研究院""###0 + $/ , 庄瑞林"陈炳章0 中国主要油茶物种的脂肪酸含量 + B ,0 植物生理 ")0 学通讯"$+)* ! " # $"&(
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收稿日期$"#$#( #&( $"!!!!修回日期$"#$#( #+( #/ 基金项目$江苏畜牧兽医职业技术学院青年基金' 第一作者简介$贾书果 ! $+)# ( # "男"助教"主要从事园林植物栽培与 种子生理研究' C D 2 > E F $G E > H 1<4 <I J$&'0 : I 2
林业科技开发!"#$# 年第 "% 卷第 & 期
' 干冻法不需要昂贵的仪器设备" 操作简便" 因
此不失为一种可行的超低温保存方法' ! 0 # "冰箱预处理驯化法 通过低温冰箱预处理"然后再放入液氮中超低温 L H H L = L > < 等在保存咖啡胚性 保存植物材料的方法' @ 悬浮细胞和体细胞胚时首先采用了这种简化方法"材 "#K 冰箱中"% 1" 料经高浓度蔗糖预处理后" 置于 ( 然后直接投入液氮" 冻后存活率为*#6
油茶产量翻番"使油茶良种化程度更上一层楼" 实现 良种高产的水平' 第四" 加强具有高产基础上优质高抗良种选育' 据 $++" )$++% 年对 $*# 个优良无性系脂肪酸组成的 测定中发现有 "# 多个优良无性系的亚油酸含量不 *6 ! 一般为$#6 左右 # ' 因此" 选鉴 同"有的高达$+0 亚油酸含量高和脂肪酸组成配比好的优良无性系"可
!!种子超低温保存即在液氮 ! ( $+&K # 低温条件 下 的 种 子 保 存' 种 子 一 旦 冷 却 到 液 态 氮 温 度 !( $+&K# "其新陈代谢活动基本停止" 处于 % 生机停 顿& 状态 + $, ' 利用液氮保存种子" 不需空调设备及其 他管理措施"所需费用低于低温种质库" 还可免去定 期检测种子生活力和繁殖更新的程序"从而大大地节
责任编辑!葛华忠
种质资源的超低温储藏研究进展
贾书果$ 吴薇" 周霞$ 刘争$
! $0 江苏畜牧兽医职业技术学院园林科技系"江苏 泰州 ""*'## * "0 上海生命科学研究院# 摘!要概括了植物种质资源超低温保存主要方法包括干冻法 冰箱预处理驯化法 冰冻法 玻璃化法 包埋干燥 脱水法及其影响因素同时对材料的选择材料含水量包装材料材料预处理冷冻方式解冻方式冷冻剂的种类 等作了简要综述针对种质资源超低温贮藏中出现的问题和困难作了概括总结并归纳了今后的研究方向 关键词种质超低温资源储藏
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林业科技开发!"#$# 年第 "% 卷第 & 期
专 论 综 述!
绝的状态"保护植物的遗传多样性已经刻不容缓 + /, ' 采用超低温保存方法"将为植物种质资源有用基因的 长期利用和保护提供一条有效途径' 笔者参考国内 外相关文献"对植物种质资源的超低温保存方法( 影 响种质资源活力的因素及预防措施等方面进行了分 析"提出了今后的研究方向" 旨在为植物种质资源的 利用和保护提供理论基础' ! "种子超低温保存方法 ! 0 ! "干冻法 通过控制脱水速度与脱水程度"对植物进行干燥 预处理能增强其抗冻性' 如橡胶树的新鲜切除胚轴 含水量为**6"不经处理存活率为$##6"但不能耐受 液氮冷冻' 经过' 1 干燥处理后"含水量降至$&6" 存 活率降至)/6"但其冻后存活率达到了&/6 + ), ' 干燥 处理还能增强油棕体细胞胚的抗冻性' 石刁柏的腋 芽经硅胶干燥后"投入液氮"冻后存活率为/$6"甜瓜 的体细胞胚脱水后直接投入液氮"得到了&*6的存活 率
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的特点"即首先用慢速冰冻方法从#K 降到一定的预 冷温度"使细胞进行适当的保护性脱水" 再立即浸入 *7 %K 5 2 E ? 降温速度 液氮迅速冰冻' 目前常采用#0 降到 ( %#K"再立即浸入液氮' 逐级冰冻法将植物材 $#K( 料经过冰冻保护剂 #K 预处理后" 逐级通过 ( ( $*K( ( "'K( ( '*K( ( %#K 等" 每 级 温 度 停 留 *2 E ?左右"然后浸入液氮' ! 0 % "玻璃化法 植物材料经高浓度玻璃化保护剂处理后"快速投 入液氮保存"使保护剂和细胞内水分来不及形成冰" 或冰晶没有充分的时间生长"从而进入一种人工的完 全玻璃化状态' 在 % 玻璃态 & 时" 水分子没有发生重 排"不产生结构和体积的变化" 因而不会造成组织和 细胞的伤害"保证化冻后细胞仍有活力' 此状态下没 有冰晶对细胞的损伤"因而植物材料的存活率大大提 > F F 与8 > 1O 首次提出了一种有效的 高了' $+)* 年" N 玻璃化 溶 液 ! P MF # " 其 中 包 含 了 "#0 * 34 5 Q. A MR ( $*0 * 34 5 Q 乙酰胺($# 34 5 Q 丙二醇(& 34 5 Q 聚乙二醇" 这是应用高浓度玻璃化溶液慢速降温实现玻璃化的 首次突破性进展' $+)+ 年" S = > 4 > 2 E 等及 Q > ?4 E H 等首 次用玻璃化法成功地冻存了石刁柏体细胞胚和薄荷 3> E 等提出了玻璃化冰冻 悬浮培养物 + $#, ' $++# 年"M> 剂T P M" 配方$ 基本培养基 A M 附加 '# 34 5 Q 甘油($* 乙二醇($* 34 5 Q. A MR和 #0 * 2 I F 5 Q 蔗糖" 并成 34 5 Q 功冻存了脐橙培养细胞' 玻璃化超低温保存方法具有设备简单(程序简化 和冻存效果好等优点"尤其对常规冷冻方法极其敏感 的植物材料"可用玻璃化冻法来保存器官和组织结构 的完整性' 如石刁柏离体多生芽簇和甜薯茎尖只有 用玻璃化法冻存才能存活' ! 0 & "包埋脱水干燥法 植物材料由褐藻酸盐包埋成珠状物"在含高浓度 蔗糖的液体培养基中预培养几小时或几天"再经无菌 空气或硅胶部分脱水后" 进行慢速或快速冷冻的方 法' . L = L <UU= L 和T F L H H E H 等采用藻酸钠包埋技术将材 料在包埋丸中缓慢脱水至适宜含水量"从而来提高超 低温保存后材料的存活率' . L = L <UU= L 等保存了胡萝 卜体细胞胚' 8 > V= L 和. L = L <UU= L 保存了马铃薯的顶 端分 生 组 织" 冻 后 有 "&6 的 分 生 组 织 发 育 为 植 株' T > <F L ; 等保存了 * 种甘蔗离体植株的顶端分生组织" 它们冻后存活率的范围在')6 7 +$6 + $$, ' $++" 年" W E E ?I 等采用包埋干燥法保存 * 个苹果品种的离体茎 尖得到了较高的存活率 + $", ' 在国内" 此项研究起步
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种质资源的超低温储藏研究进展
贾书果$ 吴薇" 周霞$ 刘争$
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绝的状态"保护植物的遗传多样性已经刻不容缓 + /, ' 采用超低温保存方法"将为植物种质资源有用基因的 长期利用和保护提供一条有效途径' 笔者参考国内 外相关文献"对植物种质资源的超低温保存方法( 影 响种质资源活力的因素及预防措施等方面进行了分 析"提出了今后的研究方向" 旨在为植物种质资源的 利用和保护提供理论基础' ! "种子超低温保存方法 ! 0 ! "干冻法 通过控制脱水速度与脱水程度"对植物进行干燥 预处理能增强其抗冻性' 如橡胶树的新鲜切除胚轴 含水量为**6"不经处理存活率为$##6"但不能耐受 液氮冷冻' 经过' 1 干燥处理后"含水量降至$&6" 存 活率降至)/6"但其冻后存活率达到了&/6 + ), ' 干燥 处理还能增强油棕体细胞胚的抗冻性' 石刁柏的腋 芽经硅胶干燥后"投入液氮"冻后存活率为/$6"甜瓜 的体细胞胚脱水后直接投入液氮"得到了&*6的存活 率
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