BD FACScanto ll白血病免疫分型六色试剂搭配
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四色流式细胞术用于急性白血病免疫分型的中国专家共识(完整版)白血病免疫分型是利用不同单克隆抗体检测白血病细胞胞膜和胞质抗原,通过流式细胞术(FCM)分析其表型,实现对白血病细胞系列来源及其分化程度的诊断。
白血病免疫分型已成为诊断白血病的必要依据,同时也可为微小残留病(MRD)的检测以及白血病的治疗和预后提供重要信息。
白血病免疫分型是细胞形态学分型的重要补充和进一步深化,以荧光标记技术联合FCM检测并判定白血病免疫表型,具有准确、快速、客观、重复性好、特异性强等特点,提高了白血病诊断的准确性[1, 2]。
采用不同数量及组合的荧光标记免疫抗体处理白血病细胞并进行荧光检测及分型是免疫分型的关键环节。
准确诊断需要选择一定数量的抗体,白血病免疫分型涉及多个造血系列的抗原,但目前国内甚至国际上均无规范化的方案可以借鉴;国内不同的医疗单位所用的抗体数量和种类均有较大的异质性,有些单位由于应用的抗体数量较少或抗体选择不当,影响对疾病的诊断、分期和预后的判断。
鉴于国内的实际情况,中国免疫学会血液免疫分会临床流式细胞术学组经过多次讨论,提出以CD45/侧向散射光(SSC)为基础的中国FCM急性白血病免疫分型四色方案,本方案以2组表面抗原作为筛查抗原,试图利用相对少的抗体,达到对各个类型白血病进行较全面的检测,具有快速、客观、准确的特点。
已在国内的多家医疗单位试用,证明此方案能够满足临床的需要[3, 4]。
目前,虽然国际上有八色甚至十色方案[5, 6, 7],但对仪器及操作人员的技术要求较高。
鉴于国内的实际情况,我们首先提出中国FCM急性白血病免疫分型四色方案,供从事急性白血病免疫分型的实验室参考,以期促进我国急性白血病免疫分型诊断的规范化及整体水平的提高。
一、四色方案的基本要求理想的急性白血病免疫分型方案应满足以下几点要求:①识别白血病细胞,能将其与正常细胞或反应性细胞相区别;②鉴别白血病细胞的系列来源;③根据细胞的分化程度对疾病进行亚型分型;④鉴别用于检测MRD 的白血病相关免疫表型(LAIP) ;⑤帮助判断某些特异分子改变,即基因型检测;⑥提供预后相关及治疗靶点的免疫标志检测结果。
急性淋巴白血病L2的治疗方法简介急性淋巴白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)是一种源于淋巴造血细胞的恶性肿瘤。
根据法国-美国-英国(FAB)分型系统,急性淋巴白血病可分为L1、L2和L3三个亚型。
本文将重点介绍急性淋巴白血病L2的治疗方法。
治疗策略急性淋巴白血病L2的治疗策略主要包括化疗、放疗和造血干细胞移植等综合治疗手段。
具体治疗方案应根据患者年龄、病情、分子遗传学和免疫学特征等因素来确定。
1. 化疗化疗是急性淋巴白血病L2的主要治疗方式。
化疗方案一般包括诱导治疗、巩固治疗、延续治疗和中枢神经系统预防治疗。
常用的化疗方案有VDCP(长春新碱、多柔比星、环磷酰胺、泼尼松)和Hyper-CVAD(环磷酰胺、维生素C、长春新碱、泼尼松、阿霉素、达卡巴嗪)等。
1.1 诱导治疗诱导治疗的目的是迅速减少白血病细胞数量,使患者达到完全缓解状态。
常用的药物包括长春新碱、多柔比星、雷公藤碱等。
1.2 巩固治疗巩固治疗旨在巩固诱导治疗的效果,继续减少残留白血病细胞。
常用的化疗方案有高剂量的甲氨蝶呤(MTX)、阿霉素等。
1.3 延续治疗延续治疗是为了避免白血病的复发,保持缓解状态。
常用的药物包括6-MP(巯基嘌呤)、MTX、达卡巴嗪等。
1.4 中枢神经系统预防治疗中枢神经系统预防治疗是为了预防白血病细胞侵犯中枢神经系统。
一般采用局部注射或腰椎穿刺给药,常用药物包括阿霉素。
2. 放疗放疗主要用于中枢神经系统预防和治疗,在化疗过程中或化疗后,采用局部照射或全身照射的方式。
放疗常常与化疗联合应用,以提高治疗效果。
3. 造血干细胞移植对于高危或复发的急性淋巴白血病L2患者,造血干细胞移植是一种有效的治疗手段。
移植来源可以是自体或异体的造血干细胞。
预后评估与监测根据患者的临床特征和治疗反应等因素,可以对急性淋巴白血病L2的预后进行评估。
常用的预后分层方案包括欧洲预后评估系统(EORTC)和德国预后评估系统(GMALL)等。
龙源期刊网 利用BD CANTO II流式细胞仪鉴别反应性和慢性粒细胞白血病肿瘤性粒细胞增多的趋势作者:刘裔军韩蕊来源:《健康必读(上旬刊)》2018年第05期【摘要】目的:探讨利用BD CANTO II流式细胞仪鉴别反应性和慢性粒细胞白血病肿瘤性粒细胞增多的趋势。
方法:选取慢性淋巴细胞白血病患者(病例组)、健康人群(对照组)各20例用于模型建立,采用BD CANTO II流式细胞仪鉴别69例粒细胞增多的非急性白血病的患者反应性和慢性粒细胞白血病肿瘤性粒细胞增多的趋势。
结果:流式细胞仪检测鉴别反应性和慢性粒细胞白血病肿瘤性粒细胞增多的灵敏度、特异性分别为96.00%、95.45%。
结论:BD CANTO II流式细胞仪可有效鉴别反应性和慢性粒细胞白血病肿瘤性粒细胞增多的趋势。
【关键词】流式细胞仪;慢性粒细胞白血病;粒细胞增多【中图分类号】R733 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783(2018)05-0095-02引言流式细胞术是在流动的状态中检测细胞或颗粒的各项特性,特异性强,灵敏度高,速度快,并能实现多参数分析。
流式细胞术已成为生物学和医学中不可缺少的工具,对血液学有重要影响。
迄今为止,急性淋巴细胞白血病(ALL)的诊断和分类依赖于白血病细胞克隆的流式细胞术描述。
本研究旨在探讨BD CANTO II流式细胞仪鉴别反应性和慢性粒细胞白血病肿瘤性粒细胞增多的准确性。
1 资料与方法1.1一般资料本研究选取2018年3月至2018年9月期间我院收治的20例慢性淋巴细胞白血病患者(病例组)以及20例健康人群(对照组)用于模型建立,另选取69例粒细胞增多的非急性白血病的患者(测试组)为研究对象。
1.2研究方法BD CANTO II流式细胞仪分选细胞:即从复杂的细胞群体中得到高纯度的靶细胞。
高速分选的原理:分选时,液流自驱动力的作用下断成高度均一的液滴。
在喷嘴下的几毫米处,液。
BD流式试剂选择及常见问题解答发布日期:2009年6月22日编辑:技术部阅读次数:450一、如何搭配流式抗体荧光标记流式抗体荧光标记搭配主要由3个因素决定的:流式细胞仪能检测多少个通道、需要同时检测检测多少个指标、厂家的抗体有多少种荧光标记。
如果流式细胞仪的通道越多,那么同一份样本能同时做的表面/胞内标志就越多A、如何根据流式细胞仪搭配流式抗体1)BD流式细胞仪(06版目录第614页)流式细胞仪能检测多少个通道是由有多少根激光决定的以及每根激光的功能决定的,所以首先需要注意两点:流式细胞仪有哪些激光。
比如标配的FACSCalibur只有一根488nm的激光,能做FL1、FL2、FL3三个荧光通道/三个颜色,而选配的Calibur (FACSCalibur的简称)配有488nm和635nm两根激光,可以检测FL1-FL4四个通道/4个颜色。
不同型号的流式细胞仪的同样的一个通道检测荧光素的能力是不一样的,比如Calibur的FL3(第3通道)能检测PE-Texas Red, PE-Cy5, PerCP, PerCPCy5.5,PE-Cy7,而Aria的第3通道只能检测PE-Tex asRed, PE-Cy5, PerCP。
Calibur第3通道能检测的PerCP-Cy5.5在FACSAria上是第4通道检测。
Calibur和LSR都能检测4个颜色,但是第4个通道检测荧光素是不一样的搭配荧光素原则搭配流式荧光素有2个原则:每个通道只能选择1种荧光素;各个通道之间的荧光素可以随意搭配,但需注意1、每个通道只能选择1种荧光素。
以Calibur为例说明,Calibur的FL1通道选择了FITC就不能选择A lexaFluro488,或者选择了Alexa Fluro488就不能选FITC Calibur的FL3通道尽管能检测PE-Texa s Red, PE-Cy5, PerCP, PerCP-Cy5.5, PE-Cy7五个荧光素,但是我们我们搭配的时候只能选择其中1个。