25-羟基维生素D(25-OH-D)测定试剂盒(磁微粒化学发光法)产品技术要求华科

25-羟基维生素D（25-OH-D）测定试剂盒（荧光免疫层析法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清、血浆或全血中25羟基维生素D 的含量。

1.1 包装规格10人份/盒、20人份/盒、50人份/盒。

1.2 主要组成成分每盒含10/20/50人份检测卡(每人份包装中含1袋干燥剂）、1个校准信息卡。

主要组成成分见表1：表12.1物理性能2.1.1 外观检测卡应整洁完整、无毛刺、无破损、无污染；材料附着牢固。

2.1.2 膜条宽度膜条的宽度≥3mm。

2.1.3 移行速度液体移行速度应不低于10 mm/min。

2.2 空白检测限空白检测限应不高于5ng/mL。

2.3 准确度回收率应在85%～115%之间。

2.4 线性在企业线性范围内［5，120］ng/mL，相关系数绝对值（︱r︱）应不低于0.99。

2.5 重复性分别用浓度为（15±1.5） ng/mL、（31±3.1） ng/mL和（100±10）ng/mL的样本各重复检测10次,其变异系数（CV%）应不高于15.0%。

2.6 批间差用3个不同批号的检测卡分别检测浓度为（15±1.5）ng/mL和（31±3.1）ng/mL 的样本, 则批间相对极差（R%）应不高于15.0%。

2.7 特异性表22.8 溯源性根据GB/T 21415-2008的有关规定，校准信息卡溯源至企业工作校准品，并与已上市产品比对赋值。

2.9 稳定性10℃～30℃保存，有效期12个月，效期后2个月内分别检测2.1～2.5、2.7项，其结果应符合各项要求。

1产品型号/规格
规格W1：25 人份/盒；规格W2：50 人份/盒；规格W3：2×50 人份/盒；规格W4：4×50 人份/盒。

规格L1：25 人份/盒；规格L2：50 人份/盒；规格L3：2×50 人份/盒；规格L4：2×100 人份/盒。

2性能指标
2.1外观
外观应符合如下要求：
a)磁珠包被物R1 摇匀后应为棕褐色悬浊液；静止久后，棕褐色磁珠沉降于底部，上清液应为无色液体；酶标记物R2 应为无色液体，无沉淀或絮状物；样本处理液R3，R4 应为无色液体；校准品应为外观均匀，成形完整，呈乳白色的冻干品，复溶后较清亮，无浑浊及沉淀；
b)试剂盒各组分应齐全、完整，液体无渗漏；
c)中文包装标签清晰，无磨损。

2.2准确度
将两个正确度控制品进行检测，测定结果的相对偏差在±10%范围内。

2.3检出限
检出限应≤3.00n g/mL（7.50nmol/L）。

2.4线性
试剂盒在3.00-70.0ng/mL 或者7.50-175nmol/L 区间内，其相关系数（r）的绝对值不低于0.9900。

2.5重复性
变异系数CV≤8.0%。

2.6批间差
变异系数CV≤10.0%。

2.7校准品
2.7.1校准品准确度
测定校准品，测定结果的相对偏差在±10%范围内。

2.7.2校准品瓶内均一性
校准品瓶内均一性≤8.0%。

2.7.3校准品瓶间均一性
校准品瓶间均一性≤5.0%。

25-羟基维生素D测定试剂盒(荧光免疫层析法)适用范围：该产品用于体外定量检测人血清、血浆中的25-羟基维生素D含量。

1.1规格1人份/盒；10人份/盒；25人份/盒；50人份/盒；100人份/盒质控品(选配,2水平) ：0.5mL×2； 1mL×21.2组成试剂盒组成见表1表1 25-羟基维生素D测定试剂盒组成注：质控品具有批特异性，每批次靶值详见标签。

2. 性能指标2.1 外观试剂盒外观应整洁, 文字符号标识清晰，液体无渗漏，测试卡完整无破损，质控品为冻干疏松体，复溶后为无色至淡黄色液体。

2.2 装量不少于标示值。

2.3空白限应不高于1 ng/mL。

2.4线性范围在[3，100] ng/mL内，相关系数R应不小于0.990。

2.5 重复性重复测试（20±4）ng/mL和（80±16）ng/mL的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于15%。

2.6批间差测试（20±4）ng/mL和（80±16）ng/mL的样本，批间相对极差（R）应不大于15%。

2.7准确度回收率为85～115％。

2.8质控品2.8.1质控品赋值有效性试剂盒内的质控品，检测结果均在质控范围内。

2.8.2质控品瓶间差瓶间差CV应不大于15%。

2.8.3质控品复溶稳定性质控品复溶后在2～8℃密封避光保存24h。

检测复溶后的质控品，检测结果均在质控范围内。

2.9 效期稳定性试剂有效期为18个月。

取到效期后3个月内试剂盒进行检测，测定结果应符合2.3、2.4、2.5、2.7、2.8项要求。

2.10溯源性根据GB/T21415-2008的要求，校准曲线溯源至工作校准品，工作校准品与已上市25-羟基维生素D测定试剂盒进行方法学比对赋值。

25—羟基维生素D测定试剂盒产品技术要求万孚25-羟基维生素D (25-OH Vitamin D)是一种重要的维生素D代谢产物，对机体的钙平衡调节、肌肉功能、免疫系统等功能至关重要。

近年来，随着人们对营养的重视以及对维生素D水平检测的需求增加，25-羟基维生素D测定试剂盒应运而生。

本文将从试剂盒的产品技术要求方面进行详细介绍。

1.试剂盒的成分及保存要求：试剂盒主要由预包被的抗体、酶标记的抗体、标准品、底物等组成。

试剂盒要求保存在2-8°C的低温环境中，避免日光直接照射。

2.试剂盒的使用注意事项：试剂盒在使用前应放置于室温下15-30分钟，避免试剂温度过低。

使用前应检查试剂盒的有效期，并对试剂进行观察，如有异常情况应停止使用。

3.试剂盒的操作流程：试剂盒的操作流程一般包括样本处理、试剂加入、孵育、洗涤和发光检测。

在样本处理步骤中，需要进行样本的提取、纯化和预处理等步骤，保证样本中的25-羟基维生素D浓度准确。

4.试剂盒的稳定性和精密度：试剂盒应具有良好的稳定性和高精密度。

稳定性表现为试剂盒在有效期内，试剂的成分和性能保持不变；精密度表现为试剂盒在重复使用过程中，结果的重复性和一致性。

5.试剂盒的检测范围和灵敏度：试剂盒的检测范围应满足临床需求，对不同样本类型和浓度范围的样本都具有较高的准确性和灵敏度。

灵敏度是指试剂盒能够检测到的最低25-羟基维生素D的浓度。

6.试剂盒的专属性：试剂盒应具有较高的专属性，能够准确检测25-羟基维生素D，而不对其他相关物质产生干扰。

专属性可以通过对常见干扰物的检测和抑制来评估。

7.试剂盒的参考值范围和结果解读：试剂盒应为使用者提供参考值范围，并提供对结果的解读。

不同年龄段和性别的参考值范围可能存在差异，因此使用者在解读结果时应根据相关标准进行判定。

8.试剂盒的质控要求：试剂盒需要具备质控功能，能够通过内部和外部质控样本的检测，评估试剂盒的性能稳定性，并对试剂盒的使用结果进行质量控制。

25羟基维生素D测定试剂盒（化学发光法）产品技术要求-性能指标1性能指标1.1外观试剂盒各组分应齐全、完整，液体无渗漏；中文包装标签应清晰，无磨损；磁珠试剂组分为含棕色固体微粒的液体，磁珠无板结，液体无絮状物，无异物；其他试剂组分应为清澈均匀的液体，无沉淀，无絮状物；校准品冻干组分呈疏松体，加入纯化水等复溶剂复溶后，应无沉淀或絮状物。

质控品冻干组分呈疏松体，加入纯化水等复溶剂复溶后，应无沉淀或絮状物。

1.2装量液体试剂的装量应不少于标示值，见1.2表格。

1.3检出限不大于3ng/mL。

1.4准确度用国际约定参考品进行检测，其测量结果的相对偏差应在±10%范围内。

1.5重复性用浓度分别为15ng/mL（±20%）和40ng/mL（±20%）的重复性参考品进行检测，各检测10次，其变异系数（CV）应不大于10%。

1.6批间差使用3个批号试剂检测浓度分别为40ng/mL（±20%）的批间差参考品，3个批号试剂之间的批间变异系数（CV）应不大于15%。

1.7线性用线性参考品进行检测，在[3，70]ng/mL浓度范围内，相关系数r≥0.9900。

1.8校准品1.8.1校准品均一性试剂盒校准品的均一性：CV应不大于10%。

1.8.2校准品准确性试剂盒校准品的准确性：其测量结果的相对偏差应在±10%范围内。

1.9质控品1.9.1质控品均一性试剂盒质控品的均一性：CV应不大于10%。

1.9.2质控品准确性试剂盒质控品的准确性：其测量结果应在参考值范围内。

表1.2试剂盒组份及其装量组分装量1×25人份/盒1×50人份/盒2×50人份/盒试剂瓶1个1个2个组分1（R1）（1腔/瓶） 2.5mL 3.5mL 3.5mL组分2（R2）（1腔/瓶） 3.5mL 6.5mL 6.5mL组分3（R3）（1腔/瓶） 3.5mL 6.5mL 6.5mL组分4（R4）（1腔/瓶） 3.5mL 6.5mL 6.5mL 校准品1（CAL1）1瓶，1.0mL1瓶，1.0mL1瓶，1.0mL 校准品2（CAL2）1瓶，1.0mL1瓶，1.0mL1瓶，1.0mL 校准品3（CAL3）1瓶，1.0mL1瓶，1.0mL1瓶，1.0mL 质控品1（Ctrl1）1瓶，1.0mL1瓶，1.0mL1瓶，1.0mL 质控品2（ctrl2）1瓶，1.0mL1瓶，1.0mL1瓶，1.0mL。

附件525-羟基维生素D检测试剂注册技术审查指导原则本指导原则旨在指导注册申请人对25-羟基维生素D检测试剂注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门对注册申报资料的技术审评提供参考。

本指导原则是对25-羟基维生素D检测试剂的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。

本指导原则是供申请人和审查人员使用的指导文件，不涉及注册审批等行政事项，亦不作为法规强制执行，如有能够满足法规要求的其他方法，也可以采用，但应提供详细的研究资料和验证资料。

应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。

本指导原则是在现行法规、标准体系及当前认知水平下制定的，随着法规、标准体系的不断完善和科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将适时进行调整。

一、适用范围25-羟基维生素D检测试剂用于体外定量测定人血清或血浆样本中25-羟基维生素D（25-hydroxyvitamin D，25-OH-VD）的浓度。

本指导原则适用于以酶标记、（电）化学发光标记等标记方法标记捕获抗体，以微孔板、管、磁颗粒、微珠和塑料珠等载体—1 —包被抗体，用于体外定量检测人血清或血浆中25-羟基维生素D 含量的免疫分析试剂盒。

本指导原则不适用于：1.用胶体金或其他方法标记的定性或半定量测定人25-羟基维生素D的试剂（如试纸条、生物芯片等）；2.拟用于单独销售的25-羟基维生素D校准品和25-羟基维生素D质控品；3.色谱法原理的25-羟基维生素D检测试剂。

根据《体外诊断试剂注册管理办法》（国家食品药品监督管理总局令第5号）和《食品药品监管总局关于印发体外诊断试剂分类子目录的通知》（食药监械管〔2013〕242号），25-羟基维生素D测定试剂管理类别为Ⅱ类，分类编码为6840。

本指导原则适用于进行首次注册申报和相关许可事项变更的产品。

二、注册申报资料要求（一）综述资料维生素D是一种脂溶性类固醇衍生物，是人体必需的脂溶性维生素，经紫外线照射后可转化为维生素D2。

25-羟基维生素D测定试剂盒（胶乳免疫比浊法）适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清或血浆中25-羟基维生素D的含量。

1.1规格液体型试剂1（R1）：8.5mL×1，试剂2（R2）：17mL×1，试剂3（R3）：8.5mL×1，稀释液：17mL×1；试剂1（R1）：17mL×1，试剂2（R2）：17mL×2，试剂3（R3）：17mL×1，稀释液：17mL×2；试剂1（R1）：17mL×1，试剂2（R2）：34mL×1，试剂3（R3）：17mL×1，稀释液：34mL×1。

1.2规格划分说明根据净含量划分规格。

1.3主要组成成分试剂盒由试剂1（R1）液体、试剂2（R2）液体、试剂3（R3）液体和稀释液组成。

1.3.1 试剂1（R1）液体：β-半乳糖苷酶供体肽25-羟基维生素D结合物10mg/mL1.3.2 试剂2（R2）液体：磷酸盐缓冲液38mmol/L1.3.3试剂3（R3）液体：β-半乳糖苷酶受体肽硝基苯-β-半乳糖苷衍生物结合物 1mg/mL1.3.4 稀释液羊抗人维生素D抗体0.1mg/mL2.1 外观试剂盒中各组件的外观应满足：a) 试剂1（R1）应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损；b) 试剂2（R2）应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损；c) 试剂3（R3）应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损；d) 稀释液应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。

2.2 净含量液体试剂净含量应不少于标示值。

2.3 试剂空白吸光度在波长415nm（光径1cm）处，试剂空白吸光度（A）应≤1.8000。

2.4.准确度测定NIST SRM972a，相对偏差应不超过±15%。

2.5分析灵敏度对应于浓度为20ng/mL的25-OH VD所引起的吸光度差值（△A）应≥0.0010。

25-羟基维生素D测定试剂盒(荧光免疫层析法)适用范围：该产品用于体外定量检测人血清、血浆中的25-羟基维生素D含量。

1.1规格1人份/盒；10人份/盒；25人份/盒；50人份/盒；100人份/盒质控品(选配,2水平) ：0.5mL×2； 1mL×21.2组成试剂盒组成见表1表1 25-羟基维生素D测定试剂盒组成注：质控品具有批特异性，每批次靶值详见标签。

2. 性能指标2.1 外观试剂盒外观应整洁, 文字符号标识清晰，液体无渗漏，测试卡完整无破损，质控品为冻干疏松体，复溶后为无色至淡黄色液体。

2.2 装量不少于标示值。

2.3空白限应不高于1 ng/mL。

2.4线性范围在[3，100] ng/mL内，相关系数R应不小于0.990。

2.5 重复性重复测试（20±4）ng/mL和（80±16）ng/mL的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于15%。

2.6批间差测试（20±4）ng/mL和（80±16）ng/mL的样本，批间相对极差（R）应不大于15%。

2.7准确度回收率为85～115％。

2.8质控品2.8.1质控品赋值有效性试剂盒内的质控品，检测结果均在质控范围内。

2.8.2质控品瓶间差瓶间差CV应不大于15%。

2.8.3质控品复溶稳定性质控品复溶后在2～8℃密封避光保存24h。

检测复溶后的质控品，检测结果均在质控范围内。

2.9 效期稳定性试剂有效期为18个月。

取到效期后3个月内试剂盒进行检测，测定结果应符合2.3、2.4、2.5、2.7、2.8项要求。

2.10溯源性根据GB/T21415-2008的要求，校准曲线溯源至工作校准品，工作校准品与已上市25-羟基维生素D测定试剂盒进行方法学比对赋值。

25-羟基维生素D测定试剂盒（酶联免疫吸附法）适用范围：该产品与中性电极共同作用为高频电刀的附件，在外科手术中进行切割和凝血。

用于体外定量测定人血清、血浆或耳指末梢全血中25-羟基维生素D的含量。

1.1产品规格96人份/盒、48人份×2/盒、48人份/盒。

1.2主要组成成分2.1 外观试剂盒外观应整洁，文字符号标识清晰；液体组分应澄清透明，无沉淀、无渗漏；包被的检测板密封完好，不得有破损。

2.2 装量实际装量不得低于标称量，且偏差不大于标称量的3%。

2.3 检测限不高于5μg/L。

2.4 线性在[5，120]μg/L内，线性相关系数（r）应≥0.990。

2.5 准确度与高效液相色谱法做对比试验，用线性回归方法计算两组结果的相关系数（r）及每个浓度点的相对偏差，其线性相关系数（r）≥0.975，且相对偏差≤15%。

2.6 重复性用质控品1、质控品2两个浓度水平的质控品各重复检测10次，变异系数（CV）应≤10%。

2.7 特异性测定浓度为100μg/L的维生素D，交叉反应率应≤10%。

32.8 微量全血处理液的pH值pH：7.4±0.03。

2.9 溯源性根据GB/T 21415-2008及有关规定提供所用校准品的来源赋值过程等内容，溯源至25-羟基维生素D标准品（美国NIST，SRM2972）。

2.10 质控品赋值有效性质控品测值，应在质控范围内。

2.11 批间差用三个批次的试剂盒检测同一份样品，三个批次之间的变异系数（CV）应≤15%。

2.12 效期稳定性2℃～8℃保存，有效期为12个月。

到期后三个月内应符合2.3、2.4、2.5、2.6的要求。